尿液培养标准指引【可编辑的PPT文档】.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,临床微生物学尿培养操作规范,中华医学会检验医学分会,临床微生物学尿培养操作规范,尿路感染,尿液标本采集和运送,标本验收,实验室检查,结果观察和报告,尿路感染,概念：综合症,分类：上尿路感染（如肾盂肾炎）,下尿路感染（如膀胱炎）,男性还可出现前列腺感染，不同部位同,时感染也很常见,感染人群：各个年龄段，好发于女性，男：女之比为,1:10,。,尿路感染,症状：发热、尿频、尿急、尿痛、排尿困难和耻骨上压痛，临床表现可因患者的年龄和健康状况不同而异。,诊断方法：细菌学检查，主要致病菌可因尿路感染的原因不同而有所不同（表,1,）,表,1,尿路感染的原因及常见病原菌,感染原因,主要致病菌,感染特点,上行感染,泌尿系统解剖结构和生,理功能改变引起的感染,血行感染,直接感染,大肠埃希菌、克雷伯菌、变形,杆菌、淋病奈瑟菌,大肠埃希菌、克雷伯菌、变形杆,菌、肠杆菌、普罗威登菌、沙雷,菌、不动杆菌、假单胞菌、葡萄,球菌、肠球菌,葡萄球菌、结核分枝杆菌、沙门菌,大肠埃希菌、葡萄球菌、链球,菌、肠杆菌,主要为肠道菌群或会阴部细菌逆行感染，,多见于女性，多为单一细菌感染，以大肠,埃希菌感染最常见,多见于留置导尿管、肾盂造瘘术、尿路结,石、尿路重建、前列腺肥大、膀胱排空能,力受损的患者，容易发生多种微生物的混,合感染，易被误认为标本污染,发生于菌血症的患者，血液中的细菌通过,血流进入肾脏引起感染，比较少见,外伤或肾周围器官发生感染时，细菌直接,侵入肾脏引起感染，非常少见,一、尿液标本采集和运送,1.,采集指征,：（,1,）有典型的尿路感染症状；,（,2,）肉眼脓尿或血尿；,（,3,）尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性；,（,4,）不明原因的发热，无其他局部症状；,（,5,）留置导尿管的患者出现发热；,（,6,）膀胱排空功能受损；,（,7,）泌尿系统疾病手术前。,一、尿液标本采集和运送,2.,采集方法,：未使用抗生素之前，注意避免污染,（,1,）,清洁中段尿,：晨尿最好，睡前少饮水，起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围；开始排尿，将前段尿排去，中段尿约,10,20 ml,直接排入专用的无菌容器中，立即送检，,2 h,内接种。,简单、易行，最常用,很容易污染，应嘱咐患者正确留取。,一、尿液标本采集和运送,2.,采集方法,：,（,2,）,耻骨上膀胱穿刺,：使用无菌注射器直接从耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液,是评估膀胱内细菌感染的“金标准”,有一定的痛苦，患者难以接受,主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集,一、尿液标本采集和运送,2.,采集方法,：,（,3,）,直接导尿,：按常规方法对会阴局部进行消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液,可减少尿液标本污染，准确反映膀胱感染情况。,但有可能将下尿道细菌引入膀胱，导致继发感染,不提倡使用,一、尿液标本采集和运送,2.,采集方法,：,（,4,）,小儿收集包,：无自控能力的小儿,很难避免会阴部菌群污染产生假阳性,所以只有在检验结果为阴性时才有意义。,如果检验结果为阳性，应结合临床进行分析,必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取尿液进行复检。,一、尿液标本采集和运送,2.,采集方法,：,（,5,）,留置导尿管,:,先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液,防止混入消毒剂,注意不能从尿液收集袋中采集尿液。,一、尿液标本采集和运送,3.,采集容器,：,（,1,）应由惰性材料制成；,（,2,）洁净、无菌、加盖、封闭、防渗漏；,（,3,）不含防腐剂和抑菌剂；,（,4,）广口、具有较宽的底部、容积应,50 ml,（,5,）盒盖易于开启。,一、尿液标本采集和运送,4.,标本运送,：及时送检、及时接种，,室温下保存时间不得超过,2 h,（夏季保存时间应适当缩短或冷藏保存），,4,冷藏保存时间不得超过,8 h,，但应注意,冷藏保存的标本不能用于淋病奈瑟菌培养,。,二、标本验收,1.,申请单验收,：要求除患者的基本信息以外还应包括标本收集时间、收集方式、是否已使用抗生素等，申请单是否填写完整。,2.,标本验收,：,（,1,）标本标识是否与申请单相符；,（,2,）标本容器有无溢漏、渗出，是否加盖；,（,3,）送检时间是否超过规定的标本保存时间。,二、标本验收,3.,不合格标本处理,：,（,1,）对申请单信息不全者应设法与临床医师取得联系；,（,2,）对标识不符、送检容器不合格、送检时间超过规定时间的标本应注明原因，退回，要求重新留取标本，并做记录。,三、实验室检查,1.,直接涂片检查,：无需常规进行涂片检查。,对于临床怀疑淋病奈瑟菌、假丝酵母菌或结核分枝杆菌感染的标本：,可用无菌吸管吸取尿液,5,10 ml,置无菌试管中，,3 000,4 000 r/min,离心,30 min,，倾去上清液，取沉渣涂片，行革兰染色或抗酸染色后镜检。,三、实验室检查,2.,细菌培养,：,（,1,）,普通培养,：将收集标本的容器轻轻旋转混匀，用定量接种环分别取尿液,1 l,涂抹接种血平板和麦康凯平板（或中国蓝平板），,35,37,培养,18,24 h,，观察结果。对导尿、耻骨上膀胱穿刺和已使用抗生素治疗的患者标本应增加一个,10 l,接种量。,（,2,）,特殊培养,：对怀疑有苛养菌感染者应采用耻骨上膀胱穿刺法或导尿法采集样本，加种一块巧克力平板，置,5%CO2,环境中培养,48 h,。检查淋病奈瑟菌、结核分枝杆菌感染时无需做定量培养，可将标本离心后取尿沉渣进行培养，以提高阳性率。,三、实验室检查,2.,细菌培养,（,3,）普通培养,18,24 h,无菌生长时，应将所有培养基继续培养,24 h,。,四、结果观察和报告,1.,结果观察和评价：,（,1,）,菌落计数,：计数平板上的菌落数，采用,1 l,接种量者，将菌落数乘以,10,3,；采用,10 l,接种量者，将平板菌落数乘以,10,2,，即为每,ml,尿液中所含有的细菌数（,CFU/ml,）。如菌落生长过多无法精确计数时，则报告,10,5,CFU/ml,。,四、结果观察和报告,1.,结果观察和评价：,（,2,）,结果评价,：正常情况下从肾脏排泌至膀胱的尿液是无菌的，但膀胱中的尿液经尿道排出体外时可受到下尿道中正常菌群的污染，而出现细菌。因此对不同方法获取的尿液标本培养结果需正确评价，才能有效指导临床合理治疗。一般，清洁中段尿标本中单种细菌菌落数,10,5,CFU/ml,可能为感染,;510,4,CFU/ml,可能为污染，在两者之间需要根据具体情况进行评估。,表,2,不同方法采集的尿标本培养结果评价,标本来源,菌落数,CFU/ml,结果评价,清洁中段尿,导尿,耻骨上膀胱穿刺,5 10,5,10,3,任意数目,无意义，仅报告菌落数及革兰染色特征，并注明是纯培养或是混合菌生长,纯培养有意义，报告菌落计数和细菌鉴定、药敏试验结,果；混合菌生长无意义，仅做革兰染色镜检，并报告镜检,结果,纯培养或混合菌生长，其中某种菌落数,105,者有意义，,需进行细菌鉴定和药敏试验；,4,种及以上细菌生长无意,义，报告标本污染,3,种以内细菌生长都有意义，对,2,种主要生长菌需进行细,菌鉴定和药敏试验；,4,种及以上细菌生长无意义，报告标,本污染,都有意义，所有细菌均需做细菌鉴定和药敏试验,四、结果观察和报告,2.,阴性培养结果报告：培养,48 h,无菌落生长，即为阴性。,接种,1 l,尿量者，应报告“培养,48 h,，菌落计数,10,3,CFU/ml”,；,接种,10 l,尿量者，应报告“培养,48 h,，菌落计数,10,5,CFU/ml,只是诊断尿路感染的一般标准。对一个实验室而言，过松，滥用与浪费，过严，漏诊。,与临床医师密切合作，根据不同的情况制定不同的解释标准：尿培养菌落计数可受多种因素的影响，在一些患者即使菌落数较少，也有明显的临床意义，所以对菌落数,5 104 CFU/ml,，“规范”中认为无意义的阳性结果，不应随意丢弃，必要时应根据患者的具体情况或与临床医师联系后，,附录：,决定是否需要做细菌鉴定和药敏试验。判断结果时应予以注意：,（,1,）使用抗生素治疗，细菌生长受到抑制；,（,2,）尿液稀释，尿比重,1.003,，营养成分减少，细菌生长迟缓；,（,3,）尿,pH 8.5,，细菌生长受阻；,（,4,）尿频时，膀胱内细菌停留时间短，菌落数减少；,（,5,）尿道口消毒液混入标本中，影响细菌繁殖，菌落数少；,（,6,）不同种类的细菌生长速度不同、营养要求不同，菌落计数有所不同，有文献推荐：革兰阴性菌以菌落计数,10,5,CFU/ml,，而革兰阳性菌以菌落计数,10,4,CFU/ml,为诊断尿路感染的标准。,附录：,4.,尿培养检验中常见的错误：,（,1,）将尿液标本接种于增菌液中；,（,2,）将中段尿标本离心后取沉渣进行一般细菌培养；,（,3,）标本保存时间超时，细菌大量繁殖；,（,4,）直接用导尿管头划线培养；,（,5,）使用中段尿标本做厌氧菌培养。,临床微生物学检验操作规范,编写组成员,顾问：王金良,组长：童明庆,副组长：倪安平 刘建栋,成员（按姓氏笔画为序）：马筱玲 王树琴,徐英春 倪语星 孙自镛 李桂琴 任健康 邹伟民 谷海瀛 张远春 桂炳东,