SN∕T 3064.11-2011 国境口岸蝇类、蜚蠊携带重要病原体检测方法 第11部分：寄生虫（包囊）(出入境检验检疫).pdf

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 国境口岸蝇类、 蜚蠊携带重要病原体检测方法第 部分： 寄生虫卵（ 包囊）犇 犲 狋 犲 犮 狋 犻 狅 狀 狊狅 犳 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 狋狆 犪 狋 犺 狅 犵 犲 狀 狊 犻 狀犳 犾 犻 犲 狊犪 狀 犱犮 狅 犮 犽 狉 狅 犪 犮 犺 狊犪 狋 犳 狉 狅 狀 狋 犻 犲 狉狆 狅 狉 狋犘 犪 狉 狋 ：犘 犪 狉 犪 狊 犻 狋 犲犲 犵 犵（犮 狔 狊 狋） 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言 国境口岸蝇类、 蜚蠊携带重要病原体检测方法 分为 部分： 第部分： 通用要求； 第部分： 沙门氏菌； 第部分： 志贺氏菌； 第部分： 致泻性大肠杆菌； 第部分： 普通变形杆菌和奇异变形杆菌； 笫部分： 霍乱弧菌； 第部分： 副溶血性弧菌； 第部分： 金黄色葡萄球菌； 第部分： 蜡样芽孢杆菌； 第 部分： 甲型肝炎病毒； 第 部分： 寄生虫卵（ 包囊） 。本部分为 的第 部分。本部分按照 给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位： 中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、 中华人民共和国天津出入境检验检疫局。本部分主要起草人： 宋锋林、 高玉峰、 关淳、 高旗利、 何晨光、 王乃福、 苏毅。犛 犖犜 国境口岸蝇类、 蜚蠊携带重要病原体检测方法第 部分： 寄生虫卵（ 包囊）范围 的本部分规定了国境口岸蝇类和蜚蠊携带常见寄生虫卵（ 包囊） 的检测方法、 结果判断、 结果复查及上报。本部分适用于检验检疫机构对蝇类和蜚蠊携带常见寄生虫卵（ 包囊） 的检测和报告。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件， 其最新版本（ 包括所有的修改单） 适用于本文件。 实验室生物安全通用要求 国境口岸蜚蠊监测规程 国境口岸蝇类监测规程 入出境航空器医学媒介生物监测规程 入出境船舶医学媒介生物监测规程 入出境车辆医学媒介生物监测规程术语和定义下列术语和定义适用于本文件。 寄生虫卵（ 包囊）狆 犪 狉 犪 狊 犻 狋 犲 犲 犵 犵（犮 狔 狊 狋）蝇类、 蜚蠊携带的常见寄生虫卵（ 包囊） 。包括下列常见寄生虫卵（ 包囊） ：）似蚓蛔线虫（ 蛔虫） 卵（ 犃 狊 犮 犪 狉 犻 狊犔 狌 犿 犫 狉 犻 犮 狅 犻 犱 犲 狊） ；） 十二指肠钩口线虫和美洲板口线虫（ 钩虫） 卵（ 犃 狀 犮 狔 犾 狅 狊 狋 狅 犿 犪犱 狌 狅 犱 犲 狀 犪 犾 犲 犖 犲 犮 犪 狋 狅 狉犪 犿 犲 狉 犻 犮 犪 狀 狌 狊） ；） 蠕形住肠线虫（ 蛲虫） 卵（ 犈 狀 狋 犲 狉 狅 犫 犻 狌 狊 狏 犲 狉 犿 犻 犮 狌 犾 犪 狉 犻 狊） ；） 毛首鞭形线虫（ 鞭虫） 卵（ 犜 狉 犻 犮 犺 狌 狉 犻 狊 狋 狉 犻 犮 犺 犻 狌 狉 犪） ；） 华支睾吸虫（ 肝吸虫） 卵（ 犆 犾 狅 狀 狅 狉 犮 犺 犻 狊 狊 犻 狀 犲 狀 狊 犻 狊） ；） 布氏姜片吸虫（ 姜片虫） 卵（ 犉 犪 狊 犮 犻 狅 犾 狅 狆 狊 犻 狊 犫 狌 狊 犽 犻） ；） 卫氏并殖吸虫（ 肺吸虫） 卵（ 犘 犪 狉 犪 犵 狅 狀 犻 犿 狌 狊狑 犲 狊 狋 犲 狉 犿 犪 狀 犻） ；） 日本血吸虫卵（ 犛 犮 犺 犻 狊 狋 狅 狊 狅 犿 犪 犼 犪 狆 狅 狀 犻 犮 狌 犿） ；）埃及血吸虫卵（ 犛 犮 犺 犻 狊 狋 狅 狊 狅 犿 犪犺 犪 犲 犿 犪 狋 狅 犫 犻 狌 犿） ；）曼氏血吸虫卵（ 犛 犮 犺 犻 狊 狋 狅 狊 狅 犿 犪犿 犪 狀 狊 狅 狀 犻） ；） 链状带绦虫（ 猪肉绦虫） 卵（ 犜 犪 犲 狀 犻 犪 狊 狅 犾 犻 狌 犿） ；犛 犖犜 ）肥胖带绦虫（ 牛肉绦虫） 卵（ 犜 犪 犲 狀 犻 犪 狊 犪 犵 犻 狀 犪 狋 犪） ；） 溶组织内阿米巴包囊（ 犈 狀 狋 犪 犿 狅 犲 犫 犪犺 犻 狊 狋 狅 犾 狔 狋 犻 犮 犪） ；） 蓝氏贾第鞭毛虫（ 贾第虫） 包囊（ 犌 犻 犪 狉 犱 犻 犪 犾 犪 犿 犫 犾 犻 犪） 。样品的检测 器材及试剂 器材： 金属网（ 目吋 目吋） 、 纱布、 研磨器、 离心机、 离心管、 载玻片、 盖玻片、 显微镜、 浮聚瓶、 金属环等。 试剂： 氯化钠、 硫酸锌、 碘化钾、 碘等（ 参见附录 ） 检测方法 离心沉淀法将待检样品放入研磨器， 加入适量的蒸馏水， 研磨成匀浆。将匀浆液用纱布（层层） 或金属网（ 目 吋 目 吋） 过滤， 去除大的组织碎片或其他杂质。将过滤液转入离心管， 离心 （ ） 。弃上清液， 取沉渣涂片镜检。本方法对多数蠕虫卵的检测效果较好， 但对比重较小的钩虫卵和原虫包囊则效果较差。 醛醚沉淀法待检样品放入研磨器， 加入适量的蒸馏水， 研磨成匀浆。将匀浆液用纱布（层层） 或金属网（ 目吋 目吋） 过滤， 去除大的组织碎片或其他杂质。将过滤液转入离 心 管， 离 心 （ ） 。弃上清液， 加入 的甲醛 。 后加入乙醚 。充分混合， 离心 （ ） 。管内自上而下分为层， 弃上层， 取管底沉渣涂片镜检。本方法对多数蠕虫卵和部分原虫包囊的检测效果较好， 但对蓝氏贾第鞭毛虫包囊的检测效果较差。 饱和盐水浮聚法将待检样品放入研磨器， 加入适量的饱和盐水， 研磨成匀浆。将匀浆液置于浮聚瓶内（ 浮聚瓶为圆筒状， 高 ， 直径约 ） ， 用滴管滴加饱和盐水至略高出杯口而不外溢为宜。在瓶口覆盖一载玻片， 使其与液面完全接触但无气泡产生， 静置 。平提载玻片并迅速翻转， 置显微镜下观察。该法对钩虫卵的检测效果较好， 也适合对其他线虫卵的检测， 但不适合检测吸虫卵和原虫包囊。 硫酸锌浮聚法待检样品放入研磨器， 加入适量的蒸馏水， 研磨成匀浆。将匀浆液用纱布（层层） 或金属网（ 目吋 目吋） 过滤， 去除大的组织碎片或其他杂质。将过滤液转入离 心 管， 离 心 （ ） 。弃上清液， 加入适量的 硫酸锌溶液， 充分混匀后再加 硫酸锌溶液至距管口 处， 离心 （ ） 。用金属环吊取浮面上的液体次次， 将吊取物置于载玻片上镜检。如检测原虫包囊， 加碘液染色并覆以盖玻片。本方法适合于检查原虫包囊和多数蠕虫卵（ 主要为线虫卵） 。结果判断将涂片置于光学显微镜下， 选择合适的倍数进行镜检， 并根据寄生虫卵（ 包囊） 的形态学特征进行种犛 犖犜 类鉴定（ 参见附录、 附录、 附录 和附录） 。结果报告镜检结果判断为阴性， 报告该批样本中未检出寄生虫卵（ 包囊） ； 镜检结果判断为阳性， 根据形态学特征报告检出具体种类寄生虫卵（ 包囊） 。阳性结果处置判断为阳性结果的涂片应由有资质的相关实验室确认， 阳性结果确认后应及时上报主管部门。犛 犖犜 附录犃（ 资料性附录）寄生虫卵（ 包囊） 检测常用溶液的配制方法犃 饱和盐水的配制将食盐慢慢加入盛有沸水的烧杯中并不时搅动， 直至食盐不再溶解为止， 冷却后上清液即为饱和盐水。 沸水约需加食盐 。犃 卢戈碘液的配制碘化钾 ， 溶于 蒸馏水中， 加结晶碘， 溶解后储存在棕色瓶中。犛 犖犜 附录犅（ 资料性附录）常见寄生虫卵（ 包囊） 形态学特征犅 似蚓蛔线虫卵受精卵为椭圆形。大小为（ ）（ ） 。卵壳厚而透明， 壳的表面有一层凹凸不平的蛋白质膜， 呈棕黄色。卵内含大而圆的卵细胞， 卵细胞两端与卵壳之间有新月形的空隙。未受精卵形状不规则， 一般为长椭圆形。大小为（ ）（ ） 。壳质层与蛋白质膜较受精蛔虫卵薄， 卵壳内含有许多折光性很强的屈光颗粒。犅 十二指肠钩口线虫和美洲板口线虫卵椭圆形， 壳薄， 无色透明。大小为（ ）（ ） 。虫卵内常含个个卵细胞， 以个最为常见。卵壳与卵细胞间有明显的间隙。两种钩虫卵形态学很相似， 不易区分。犅 蠕形住肠线虫卵无色透明， 大小为（ ）（ ） 。在光学显微镜下常见两侧不对称， 一侧较平， 一侧稍凸。在扫描电镜下， 较凸的一侧有条纵横的嵴， 立体构型为不完全对称的长椭球形。卵壳较厚， 无色透明， 分层， 最内为脂层， 中间为壳质层， 最外层为光滑的蛋白质膜。刚排除的虫卵， 内含一胚蚴。犅 毛首鞭形线虫卵似腰鼓形， 大小为（ ）（ ） ， 黄褐色。卵壳较厚， 内有脂层， 中为壳质层， 外为卵黄膜。虫卵两端各具一透明塞状突起， 称为盖塞。盖塞分为层， 但其壳质层因含蛋白质成分较卵壳少而呈透明状。犅 华支睾吸虫卵大小与形状似芝麻粒， 黄褐色， 大小为（ ）（ ） ， 是人体寄生虫卵（ 包囊） 中较小的一种虫卵。该虫卵前端略窄， 有一小盖。盖与卵壳相接处， 卵壳增厚形成肩峰。卵后端钝圆， 有一不明显的小突起。犅 布氏姜片吸虫卵长椭圆形， 淡黄色， 大小约为（ ）（ ） 。是人体内寄生虫卵中较大的一种虫卵。卵壳薄， 卵的一端有一个不明显的小盖， 卵内含有个卵细胞和多个卵黄球。犛 犖犜 犅 卫氏并殖吸虫卵呈宽椭圆形， 金黄色， 大小为（ ）（ ） 。前端稍宽处有一大而明显的卵盖。卵壳厚薄不均匀， 一般近盖端壳较薄， 而无盖端壳增厚。内含个卵细胞和十余个卵黄球。犅 日本血吸虫卵成熟虫卵大小平均为 ， 淡黄色， 椭圆形， 卵壳厚薄均匀， 无小盖， 卵壳一侧有一小棘，表面常附有许多宿主组织残留物。卵壳内侧有一薄层的胚膜， 内含一成熟的毛蚴， 毛蚴和卵壳间常可见到大小不等圆形或椭圆形的油滴状毛蚴分泌物。犅 埃及血吸虫卵呈纺锤形， 一端有小棘。大小为（ ）（ ） 。犅 曼氏血吸虫卵呈长卵圆形， 侧棘长而粗。大小为（ ）（ ） 。犅 链状带绦虫卵呈圆球形或近似球形， 棕黄色， 直径 。卵壳很薄， 内为胚膜。虫卵自孕节散出后， 卵壳多已脱落， 成为不完整虫卵。胚膜较厚， 由许多棱柱体组成， 在光镜下呈放射状的条纹， 胚膜内含球形的六钩蚴， 直径约 ， 有对小钩。犅 肥胖带绦虫卵肥胖带绦虫卵与链状带绦虫卵在形态学上很相似， 不易区分。犅 溶组织内阿米巴包囊圆形， 直径 ， 通常为 。细胞核个个， 成熟包囊含有个核， 未成熟包囊含有个个核。后者常含有糖原块和棒状的拟染色体， 但随着包囊的成熟而逐渐消失。溶组织内阿米巴包囊在未染色和不同染色片中表现的特征不同。犅 蓝氏贾第鞭毛虫包囊椭圆形， 一端比另一端更圆， 大小为（ ）（ ） 。未染色新鲜标本透明有折光， 在碘液染色中呈淡黄色或蓝色。细胞质常在囊壁部位收缩， 形成双层壁， 使得囊壁与细胞质之间有明显的不均匀空隙。包囊含个个至个 个核， 多偏于一端。囊壁内虫体的游离鞭毛消失， 其他结构虽与滋养体相同， 但轴柱及部分鞭毛均呈有折光的纤丝状物，条条聚成一丛， 折叠或为状排列， 位于包囊的中央， 观察时需调节显微镜焦距。包囊偶含糖原。犛 犖犜 附录犆（ 资料性附录）常见寄生虫卵（ 包囊） 图片图 犆 受精蛔虫卵（ 犿 犿） 犃 狊 犮 犪 狉 犻 狊犔 狌 犿 犫 狉 犻 犮 狅 犻 犱 犲 狊图 犆 未受精蛔虫卵（ 犿 犿） 犃 狊 犮 犪 狉 犻 狊犔 狌 犿 犫 狉 犻 犮 狅 犻 犱 犲 狊图 犆 钩虫卵 幼虫； 卵壳。图 犆 蠕形住肠线虫卵 犈 狀 狋 犲 狉 狅 犫 犻 狌 狊 狏 犲 狉 犿 犻 犮 狌 犾 犪 狉 犻 狊犛 犖犜 图 犆 毛首鞭形线虫卵（ 犿 犿） 犜 狉 犻 犮 犺 狌 狉 犻 狊 狋 狉 犻 犮 犺 犻 狌 狉 犪 毛蚴； 卵盖。图 犆 华支睾吸虫卵 犆 犾 狅 狀 狅 狉 犮 犺 犻 狊 狊 犻 狀 犲 狀 狊 犻 狊图 犆 布氏姜片吸虫卵 犉 犪 狊 犮 犻 狅 犾 狅 狆 狊 犻 狊 犫 狌 狊 犽 犻图 犆 卫氏并殖吸虫卵 犘 犪 狉 犪 犵 狅 狀 犻 犿 狌 狊狑 犲 狊 狋 犲 狉 犿 犪 狀 犻 毛蚴； 棘。图犆 日本血吸虫卵 犛 犮 犺 犻 狊 狋 狅 狊 狅 犿 犪 犼 犪 狆 狅 狀 犻 犮 狌 犿 毛蚴； 棘。图犆 埃及血吸虫卵 犛 犮 犺 犻 狊 狋 狅 狊 狅 犿 犪犺 犪 犲 犿 犪 狋 狅 犫 犻 狌 犿犛 犖犜 毛蚴； 棘。 钩蚴； 胚膜； 小钩。图 犆 曼氏血吸虫卵 犛 犮 犺 犻 狊 狋 狅 狊 狅 犿 犪犿 犪 狀 狊 狅 狀 犻图 犆 带绦虫虫卵 犪）铁苏木素染色下的未成熟包囊 犫）碘液染色下的包囊与红细胞 图 犆 不同染色条件下的溶组织内阿米巴包囊 犈 狀 狋 犪 犿 狅 犲 犫 犪犺 犻 狊 狋 狅 犾 狔 狋 犻 犮 犪 图 犆 碘液染色下的蓝氏贾第鞭毛虫包囊 犌 犻 犪 狉 犱 犻 犪 犾 犪 犿 犫 犾 犻 犪 犛 犖犜 附录犇（ 资料性附录）常见寄生虫卵鉴别要点表 犇 常见寄生虫卵鉴别要点虫卵名称大小形状颜色卵壳卵盖内容物受精蛔虫卵（ ）（ ）宽椭圆棕黄厚， 外有一层凹凸不平的蛋白膜一个卵细胞未受精蛔虫卵（ ）（ ）长椭圆棕黄较厚， 蛋白膜较薄大小不等的屈光颗粒钩虫卵（ ）（ ）椭圆无色很薄， 卵壳与卵细胞间有明显距离分裂的卵细胞蛲虫卵（ ）（ ）椭圆无色厚， 一侧较平，一侧体稍凸幼虫鞭虫卵（ ）（ ）橄榄形黄褐厚， 两端有透明栓卵细胞肝吸虫卵（ ）（ ）芝麻状淡黄褐较厚， 盖的两侧有肩峰， 后端有小突起明显毛蚴姜片虫卵（ ）（ ）椭圆淡黄薄小而不明显卵细胞个和卵黄细胞 个 个肺吸虫卵（ ）（ ）椭圆金黄厚薄不均， 近盖端略薄， 无卵盖端增厚大而明显常略倾斜卵细胞个和卵黄细胞 多个日本血吸虫卵（ ）（ ）椭圆淡黄薄， 卵壳一侧有小突起， 壳外有附着物毛蚴带绦虫卵直径 圆黄褐薄， 易破裂六钩蚴犛 犖犜 附录犈（ 资料性附录）常见寄生虫卵（ 包囊） 的密度表 犈 常见寄生虫卵（ 包囊） 的密度虫卵或包囊密度未受精似蚓蛔线虫（ 犃 狊 犮 犪 狉 犻 狊犔 狌 犿 犫 狉 犻 犮 狅 犻 犱 犲 狊） 受精似蚓蛔线虫（ 犃 狊 犮 犪 狉 犻 狊犔 狌 犿 犫 狉 犻 犮 狅 犻 犱 犲 狊） 十二指肠钩口线虫和美洲板口线虫卵（ 犃 狀 犮 狔 犾 狅 狊 狋 狅 犿 犪犱 狌 狅 犱 犲 狀 犪 犾 犲 犖 犲 犮 犪 狋 狅 狉 犪 犿 犲 狉 犻 犮 犪 狀 狌 狊） 蠕形住肠线虫卵（ 犈 狀 狋 犲 狉 狅 犫 犻 狌 狊 狏 犲 狉 犿 犻 犮 狌 犾 犪 狉 犻 狊） 毛首鞭形线虫卵（ 犜 狉 犻 犮 犺 狌 狉 犻 狊 狋 狉 犻 犮 犺 犻 狌 狉 犪） 华支睾吸虫卵（ 犆 犾 狅 狀 狅 狉 犮 犺 犻 狊 狊 犻 狀 犲 狀 狊 犻 狊） 布氏姜片吸虫卵（ 犉 犪 狊 犮 犻 狅 犾 狅 狆 狊 犻 狊 犫 狌 狊 犽 犻） 日本血吸虫卵（ 犛 犮 犺 犻 狊 狋 狅 狊 狅 犿 犪 犼 犪 狆 狅 狀 犻 犮 狌 犿） 溶组织内阿米巴包囊（ 犈 狀 狋 犪 犿 狅 犲 犫 犪犺 犻 狊 狋 狅 犾 狔 狋 犻 犮 犪） 蓝氏贾第鞭毛虫包囊（ 犌 犻 犪 狉 犱 犻 犪 犾 犪 犿 犫 犾 犻 犪） 犛 犖犜 书书书犜犖犛中华人民共和国出入境检验检疫行业标准国境口岸蝇类、 蜚蠊携带重要病原体检测方法第 部分： 寄生虫卵（ 包囊） 中 国 标 准 出 版 社 出 版北京复兴门外三里河北街 号邮政编码： 网址 电话： 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本 印张 字数 千字 年月第一版 年月第一次印刷印数 书号： 定价 元