SN∕T 3064.11-2011 国境口岸蝇类、蜚蠊携带重要病原体检测方法 第11部分:寄生虫(包囊)(出入境检验检疫).pdf
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1、书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 国境口岸蝇类、 蜚蠊携带重要病原体检测方法第 部分: 寄生虫卵( 包囊)犇 犲 狋 犲 犮 狋 犻 狅 狀 狊狅 犳 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 狋狆 犪 狋 犺 狅 犵 犲 狀 狊 犻 狀犳 犾 犻 犲 狊犪 狀 犱犮 狅 犮 犽 狉 狅 犪 犮 犺 狊犪 狋 犳 狉 狅 狀 狋 犻 犲 狉狆 狅 狉 狋犘 犪 狉 狋 :犘 犪 狉 犪 狊 犻 狋 犲犲 犵 犵(犮 狔 狊 狋) 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言 国境口岸蝇类、 蜚蠊携带重要病原体检测方法 分为 部分: 第部分: 通用要求; 第部分: 沙
2、门氏菌; 第部分: 志贺氏菌; 第部分: 致泻性大肠杆菌; 第部分: 普通变形杆菌和奇异变形杆菌; 笫部分: 霍乱弧菌; 第部分: 副溶血性弧菌; 第部分: 金黄色葡萄球菌; 第部分: 蜡样芽孢杆菌; 第 部分: 甲型肝炎病毒; 第 部分: 寄生虫卵( 包囊) 。本部分为 的第 部分。本部分按照 给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分起草单位: 中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、 中华人民共和国天津出入境检验检疫局。本部分主要起草人: 宋锋林、 高玉峰、 关淳、 高旗利、 何晨光、 王乃福、 苏毅。犛 犖犜 国境口岸蝇类、 蜚蠊携带重要病原体检测方法第 部分:
3、寄生虫卵( 包囊)范围 的本部分规定了国境口岸蝇类和蜚蠊携带常见寄生虫卵( 包囊) 的检测方法、 结果判断、 结果复查及上报。本部分适用于检验检疫机构对蝇类和蜚蠊携带常见寄生虫卵( 包囊) 的检测和报告。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件, 仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件, 其最新版本( 包括所有的修改单) 适用于本文件。 实验室生物安全通用要求 国境口岸蜚蠊监测规程 国境口岸蝇类监测规程 入出境航空器医学媒介生物监测规程 入出境船舶医学媒介生物监测规程 入出境车辆医学媒介生物监测规程术语和定义下列术语和定义适用于本文件。 寄生虫卵(
4、包囊)狆 犪 狉 犪 狊 犻 狋 犲 犲 犵 犵(犮 狔 狊 狋)蝇类、 蜚蠊携带的常见寄生虫卵( 包囊) 。包括下列常见寄生虫卵( 包囊) :)似蚓蛔线虫( 蛔虫) 卵( 犃 狊 犮 犪 狉 犻 狊犔 狌 犿 犫 狉 犻 犮 狅 犻 犱 犲 狊) ;) 十二指肠钩口线虫和美洲板口线虫( 钩虫) 卵( 犃 狀 犮 狔 犾 狅 狊 狋 狅 犿 犪犱 狌 狅 犱 犲 狀 犪 犾 犲 犖 犲 犮 犪 狋 狅 狉犪 犿 犲 狉 犻 犮 犪 狀 狌 狊) ;) 蠕形住肠线虫( 蛲虫) 卵( 犈 狀 狋 犲 狉 狅 犫 犻 狌 狊 狏 犲 狉 犿 犻 犮 狌 犾 犪 狉 犻 狊) ;) 毛首鞭形线虫( 鞭
5、虫) 卵( 犜 狉 犻 犮 犺 狌 狉 犻 狊 狋 狉 犻 犮 犺 犻 狌 狉 犪) ;) 华支睾吸虫( 肝吸虫) 卵( 犆 犾 狅 狀 狅 狉 犮 犺 犻 狊 狊 犻 狀 犲 狀 狊 犻 狊) ;) 布氏姜片吸虫( 姜片虫) 卵( 犉 犪 狊 犮 犻 狅 犾 狅 狆 狊 犻 狊 犫 狌 狊 犽 犻) ;) 卫氏并殖吸虫( 肺吸虫) 卵( 犘 犪 狉 犪 犵 狅 狀 犻 犿 狌 狊狑 犲 狊 狋 犲 狉 犿 犪 狀 犻) ;) 日本血吸虫卵( 犛 犮 犺 犻 狊 狋 狅 狊 狅 犿 犪 犼 犪 狆 狅 狀 犻 犮 狌 犿) ;)埃及血吸虫卵( 犛 犮 犺 犻 狊 狋 狅 狊 狅 犿 犪犺 犪
6、犲 犿 犪 狋 狅 犫 犻 狌 犿) ;)曼氏血吸虫卵( 犛 犮 犺 犻 狊 狋 狅 狊 狅 犿 犪犿 犪 狀 狊 狅 狀 犻) ;) 链状带绦虫( 猪肉绦虫) 卵( 犜 犪 犲 狀 犻 犪 狊 狅 犾 犻 狌 犿) ;犛 犖犜 )肥胖带绦虫( 牛肉绦虫) 卵( 犜 犪 犲 狀 犻 犪 狊 犪 犵 犻 狀 犪 狋 犪) ;) 溶组织内阿米巴包囊( 犈 狀 狋 犪 犿 狅 犲 犫 犪犺 犻 狊 狋 狅 犾 狔 狋 犻 犮 犪) ;) 蓝氏贾第鞭毛虫( 贾第虫) 包囊( 犌 犻 犪 狉 犱 犻 犪 犾 犪 犿 犫 犾 犻 犪) 。样品的检测 器材及试剂 器材: 金属网( 目吋 目吋) 、 纱布、
7、研磨器、 离心机、 离心管、 载玻片、 盖玻片、 显微镜、 浮聚瓶、 金属环等。 试剂: 氯化钠、 硫酸锌、 碘化钾、 碘等( 参见附录 ) 检测方法 离心沉淀法将待检样品放入研磨器, 加入适量的蒸馏水, 研磨成匀浆。将匀浆液用纱布(层层) 或金属网( 目 吋 目 吋) 过滤, 去除大的组织碎片或其他杂质。将过滤液转入离心管, 离心 ( ) 。弃上清液, 取沉渣涂片镜检。本方法对多数蠕虫卵的检测效果较好, 但对比重较小的钩虫卵和原虫包囊则效果较差。 醛醚沉淀法待检样品放入研磨器, 加入适量的蒸馏水, 研磨成匀浆。将匀浆液用纱布(层层) 或金属网( 目吋 目吋) 过滤, 去除大的组织碎片或其他杂
8、质。将过滤液转入离 心 管, 离 心 ( ) 。弃上清液, 加入 的甲醛 。 后加入乙醚 。充分混合, 离心 ( ) 。管内自上而下分为层, 弃上层, 取管底沉渣涂片镜检。本方法对多数蠕虫卵和部分原虫包囊的检测效果较好, 但对蓝氏贾第鞭毛虫包囊的检测效果较差。 饱和盐水浮聚法将待检样品放入研磨器, 加入适量的饱和盐水, 研磨成匀浆。将匀浆液置于浮聚瓶内( 浮聚瓶为圆筒状, 高 , 直径约 ) , 用滴管滴加饱和盐水至略高出杯口而不外溢为宜。在瓶口覆盖一载玻片, 使其与液面完全接触但无气泡产生, 静置 。平提载玻片并迅速翻转, 置显微镜下观察。该法对钩虫卵的检测效果较好, 也适合对其他线虫卵的检
9、测, 但不适合检测吸虫卵和原虫包囊。 硫酸锌浮聚法待检样品放入研磨器, 加入适量的蒸馏水, 研磨成匀浆。将匀浆液用纱布(层层) 或金属网( 目吋 目吋) 过滤, 去除大的组织碎片或其他杂质。将过滤液转入离 心 管, 离 心 ( ) 。弃上清液, 加入适量的 硫酸锌溶液, 充分混匀后再加 硫酸锌溶液至距管口 处, 离心 ( ) 。用金属环吊取浮面上的液体次次, 将吊取物置于载玻片上镜检。如检测原虫包囊, 加碘液染色并覆以盖玻片。本方法适合于检查原虫包囊和多数蠕虫卵( 主要为线虫卵) 。结果判断将涂片置于光学显微镜下, 选择合适的倍数进行镜检, 并根据寄生虫卵( 包囊) 的形态学特征进行种犛 犖犜
10、 类鉴定( 参见附录、 附录、 附录 和附录) 。结果报告镜检结果判断为阴性, 报告该批样本中未检出寄生虫卵( 包囊) ; 镜检结果判断为阳性, 根据形态学特征报告检出具体种类寄生虫卵( 包囊) 。阳性结果处置判断为阳性结果的涂片应由有资质的相关实验室确认, 阳性结果确认后应及时上报主管部门。犛 犖犜 附录犃( 资料性附录)寄生虫卵( 包囊) 检测常用溶液的配制方法犃 饱和盐水的配制将食盐慢慢加入盛有沸水的烧杯中并不时搅动, 直至食盐不再溶解为止, 冷却后上清液即为饱和盐水。 沸水约需加食盐 。犃 卢戈碘液的配制碘化钾 , 溶于 蒸馏水中, 加结晶碘, 溶解后储存在棕色瓶中。犛 犖犜 附录犅(
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