2018—2022年山东省采集脐带血产妇血液检测结果分析.pdf

157中国卫生标准管理CHSM 1720182022年山东省采集脐带血产妇血液检测结果分析李艳婷1 宋安娜1 宋丽丹1 王忠1，2 雒猛1，2 贾晓鹏1，2 刘心然1作者单位：1 山东省脐带血造血干细胞库实验中心，山东 济南 250102；2 山东省细胞组织库实验中心，山东 济南 250102通信作者：雒猛【摘要】目的 对山东省 2018 年 1 月2022 年 12 月采集脐带血产妇的血液检测结果进行回顾性分析，为本省内采集脐带血的工作提供科学依据，确保脐带血的安全入库，以便更好地服务于临床。方法 选择 2018 年 1 月2022 年 12 月山东省 561 423 名采集脐带血的产妇静脉血为研究对象，采用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）、丙肝抗体（anit hcv hcvab，抗-HCV）、梅毒螺旋体抗体（treponema pallidum antibody，抗-TP）、人类免疫缺陷病毒抗体（human immunodeficiency virus antibody，抗-HIV）、巨细胞病毒抗体（cytomegalovirus antibody，HCMV-IgM），将抗-HIV 筛查有反应性样本送至济南市疾控中心进行抗体确证实验；酶免无反应性的样本采用核酸检测技术（nucleic acid testing，NAT）检测乙肝病毒 DNA（hepatitis b virus DNA，HBV DNA），丙肝病毒 RNA（hepatitis c virus RNA，HCV RNA）和人类免疫缺陷病毒RNA（human immunodeficiency virus RNA，HIV-1 RNA），对检测结果进行统计分析。结果 20182022 年酶免血清 学 检 测 总 不 合 格 率 为 3.052%（17 135/561 423），年度间差异有统计学意义（P 0.001）。HBsAg 阳性率为2.218%（12 451/561 423），年度间差异有统计学意义（P 0.001）。产 妇 HBsAg 阳 性，同 时 脐 血 HBsAg 阳 性 率为 1.791%（223/12 451）,年度间差异有统计学意义（P 0.001）。抗 TP 阳 性 率 为 0.160%（900/561 423），年度间差异有统计学意义（P 0.001）。抗-HIV 筛查阳性率 0.046%（257/561 423），年度间差异有统计学意义（P 0.001）。经济南市疾控中心确认抗-HIV 抗体阳性 1 例；HCMV-IgM 阳性率为 0.573%（3 216/561 423），年度间差异有统计学意义（P 0.001）。抗-HCV 阳性率为 0.055%（311/561 423），年度间差异无统计学意义（P 0.119）。HBV DNA 阳性率为 0.030%（150/495 940），年度间差异无统计学意义（P 0.887）。HCV RNA 和 HIV-1 RNA均为阴性。结论 乙肝病毒和巨细胞病毒是采集脐带血产妇的主要传染病毒，乙肝病毒存在一定比例的母婴传播。对采集脐带血的产妇进行传染病检测。能够降低脐带血的传染风险，提高脐带血应用的安全性。【关键词】脐带血；外周血；产妇；血液检测；ELISA；NAT【中图分类号】R446 【文献标识码】A【文章编号】1674-9316（2023）17-0157-05doi:10.3969/j.issn.1674-9316.2023.17.036Analysis of the Results of Blood Tests in Pregnant Women With Umbilical Cord Blood Collected in Shandong Province From 2018 to 2022LI Yanting1 SONG Anna1 SONG Lidan1 WANG Zhong1,2 LUO Meng1,2 JIA Xiaopeng1,2 LIU Xinran1 1 Lab Center,Shandong Province Cord Blood Hematopoietic Stem Cell Bank,Jinan Shandong 250102,China;2 Lab Center,Shandong Province Cell Tissue Bank,Jinan Shandong 250102,ChinaAbstract Objective To retrospectively analyze the blood test results of pregnant women with umbilical cord blood collected in Shandong Province from 2018 to 2022,so as to provide a scientific basis for the collection of umbilical cord blood in Shandong Province,ensure safe storage for cord blood and better serve clinical practice.Methods From January 2018 to December 2022,the venous blood of 561 423 parturients who collected umbilical cord blood in Shandong Province was selected as the research object,hepatitis B surface antigen(HBsAg),anit hcv hcvab(anti-HCV),treponema pallidum antibodyan(anti-TP),human immunodeficiency virus antibody(anti-HIV),cytomegalovirus antibody(HCMV-IgM)were detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).The positive samples of anti-HIV screening were sent to Jinan CDC for antibody confirmation test.Samples with no reactivity during enzymolinked immunoassay were tested by the nucleic acid assay(NAT)for hepatitis b virus DNA(HBV DNA),hepatitis c virus RNA(HCV RNA),human immunodeficiency virus RNA(HIV-1 RNA),and the test results were statistically analyzed.Results From 2018 to 2022,the total unqualified rate of ELISA serological test was 3.052%(17 135/561 423),and there was significant difference between years(P 0.001).The positive rate of HBsAg was 2.218%(12 451/561 423),and there was significant difference between years(P 0.001).Maternal HBsAg was positive,and the positive rate of HBsAg in correlative umbilical cord blood was 1.791%(223/12 451),with significant difference between years(P 0.001).The positive rate of anti-TP was 0.160%(900/561 423)with a significant difference between years(P 0.001).The positive HIV test rate was 0.046%(257/561 423),and there was a large difference between years(P 0.001).One case confirmed positive by the CDC of Jinan.The positive rate of HCMV-IgM was 0.573%(3 216/561 423),and there was a large variance between years(P 0.001).The positive anti-CHV rate was 0.055%(311/561 423)and there was no statistical difference between years(P=0.119).The positive HBV DNA was 0.030%(150/495 940)and there was no statistical difference in years(P=0.887).HCV RNA and HIV-1 RNA tested negative.Conclusion Hepatitis B virus and 血液标准前研究158CHINA HEALTH STANDARD MANAGEMENT,Vol.14,No.17cytomegalovirus are the major infectious viruses among pregnant women who collect umbilical cord blood.There is a certain percentage of transmission between mother and child of hepatitis B virus.Testing for infectious diseases in pregnant women who collect cord blood can reduce the risk of transmission of cord blood and improve the safety of the cord blood application.Keywords umbilical cord blood;peripheral blood;maternal;blood test;enzyme linked immunosorbent assay;nucleic acid testing脐带血干细胞的移植或辅助治疗是一种重要的治疗方法，近年来应用的案例越来越多，为临床提供无传染源的脐带血是脐带血库的重要工作1。脐带血库作为特殊血站，除应遵循血站系统的相关法律法规、技术规范外，还需要遵守脐带血库自己的法律法规和技术规范；考虑传染病存在母婴传播的风险及婴儿抗体抗原表达不全造成检测假阴性的可行性，脐带血库需对脐带血相应的母血进行相关传染病的检测。本研究对山东省 2018 年 1 月2022 年 12 月采集脐带血产妇的血液检测结果进行回顾性分析，为本省内采集脐带血的工作提供科学依据，确保脐带血的安全入库，以便更好地服务于临床；同时本文的研究结果为国家后续修订脐带血造血干细胞技术操作规程中脐带血及母亲外周血的检测项目或质量标准提供一定的参考。1 资料与方法1.1 一般资料选取 2018 年 1 月2022 年 12 月于山东省脐带血造血干细胞库签订脐带血采集协议的 561 423 例产妇为研究对象，产妇年龄均在规范允许的 18 45 岁。采集脐带血的产妇均符合健康征询的要求，在脐带血采集的前后 7 d 内2，采集每位产妇的 2 支静脉血，1 支为 8 mL 的血清学检测，1 支为带有分离胶的 5 mL 核酸检测。血清学检测项目包括乙肝表面抗原（hepatitis b surface antigen，HBsAg）、丙肝抗体（anit hcv hcvab，抗-HCV）、梅毒螺旋体抗体（treponema pallidum antibody，抗-TP）、人类免疫缺陷病毒抗体（human immunodeficiency virus antibody，抗-HIV）、巨细胞病毒抗体（cytomegalovirus antibody，HCMV-IgM）。核 酸 检 测 项目包括乙肝病毒 DNA（hepatitis B virus DNA，HBV DNA），丙肝病毒 RNA（hepatitis c virus RNA，HCV RNA）和人类免 疫 缺 陷 病 毒 RNA（human immunodeficiency virus RNA，HIV-1 RNA）。1.2 仪器与试剂全自动加样仪（瑞士，Hamilton Micro lab star），全自动酶免分析仪（瑞士，Hamilton Micro lab Fame 24/20），核酸检测设备（上海浩源，湖南圣湘）。HBsAg 检测试剂盒（2019.12.31 前采用珠海丽珠，上海科华，2020.01.01 起采用英科新创，北京万泰），抗-HCV检测试剂盒（珠海丽珠，北京万泰），抗-TP 检测试剂盒（2019.12.31 前采用珠海丽珠，上海科华，2020.01.01 起采用英科新创，北京万泰），抗-HIV 检测试剂盒（2021.12.31 前英科新创三代，2022.01.01 起采用英科新创四代，珠海丽珠），HCMV-IgM 检测试剂盒（2018.12.31 前采用北京高达，2019.01.01 起采用珠海丽珠，2022.01.01 后采用北京贝尔、潍坊康华）。核酸检测试剂为上海浩源或湖南圣湘配套的试剂。1.3 方法1.3.1 血清学检测所有检测均严格按照说明书要求进行操作，初检筛查出有反应性样本，采用双孔双试剂复检。复检样本的 4 孔中，全部为无反应性，则判为样本该项目无反应性，只要有 1 孔及以上有反应性，则判为检测样本该项目有反应性。同时针对复检 HBsAg 有反应性的产妇对应的脐带血进行相应项目的血清学检测。抗-HIV 筛查复检有反应性的样本，由专人专车送至济南市疾控中心实验室进行抗体确证实验。1.3.2 核酸检测血清学检测结果无反应性的产妇，进行 8 人份（上海浩源）或 6 人份（湖南圣湘）的核酸混检，混检有反应性的样本进行单人份拆分检测。1.4 统计学方法采用 SPSS 26.0 统计学软件进行数据分析。计数资料用n（%）表示，行2 检验。P 0.05 为差异有统计学意义。2 结果2.1 血清学检测结果20182022 年 酶 免 血 清 学 检 测 总 不 合 格 率 为159中国卫生标准管理CHSM 173.052%（17 135/561 423），且总不合格率逐年降低，年度间差异有统计学意义（P 0.001）；HBsAg 阳性率为 2.218%（12 451/561 423），且总不合格率逐年降低，年度间差异有统计学意义（P 0.001）；产妇 HBsAg 阳性，同时脐血 HBsAg 阳性率为 1.791%（223/12 451），年度间 差 异 有 统 计 学 意 义（P 0.001）；抗-TP 阳 性率为 0.160%（900/561 423），年度间差异有统计学意义（P 0.001）；抗-HIV 筛查阳性率为 0.046%（257/561 423），年度间差异有统计学意义（P 0.001），经济南市疾控中心确认抗-HIV 抗体阳性 1 例；HCMV-IgM 阳性率为 0.573%（3 216/561 423），年度间差异有统计学意义（P 0.001）；抗-HCV 阳性率为 0.055%（311/561 423），年度间差异无统计学意义（P 0.119），见表 1。2.2 核酸检测结果HBV DNA 阳性率为 0.030%（150/495940），年度间差异无统计学意义（P 0.887）；HCV RNA 和 HIV-1 RNA均为阴性，见表 2。3 讨论脐带血为与孕妇和新生儿血容量和血循环无关的，由新生儿脐带扎断后远端所采集的胎盘血，在过去是当表 2 20182022 年核酸检测结果 例（%）年份检测总数阳性总数HBV DNAHCV RNAHIV-1 RNA2018 年72 82126（0.036）26（0.036）002019 年128 90939（0.030）39（0.030）002020 年104 58429（0.028）29（0.028）002021 年103 20230（0.029）30（0.029）002022 年86 42426（0.030）26（0.030）00合计495 940150（0.030）150（0.030）002值 -1.1461.146-P值 -0.8870.887-表 1 20182022 年血清学检测结果 例（%）年份检测总数阳性总数HBsAg脐血 HBsAg抗-HCV抗-TP抗-HIVHCMV-IgM2018 年115 3384 221（3.660）2 899（2.513）53（1.828）65（0.056）264（0.229）49（0.042）944（0.818）2019 年133 5644 279（3.204）2 998（2.245）57（1.901）80（0.060）313（0.234）57（0.043）831（0.622）2020 年109 3343 287（3.006）2 435（2.227）48（1.971）68（0.062）148（0.135）72（0.066）564（0.516）2021 年111 1393 151（2.835）2 324（2.091）34（1.463）43（0.039）92（0.083）66（0.059）626（0.563）2022 年92 0482 197（2.387）1 795（1.950）31（1.727）55（0.060）83（0.090）13（0.014）251（0.273）合计561 42317 135（3.052）12 451（2.218）223（1.791）311（0.055）900（0.160）257（0.046）3 216（0.573）2值 -310.4185.642100.5577.338153.92134.840279.902P值 -0.001 0.001 0.0010.119 0.001 0.001 0.001医疗废物进行处理。随着科学技术的发展，脐带血干细胞的应用已从当初的单纯移植向多种疾病的治疗发展，包括白血病、地中海贫血、再生障碍性贫血等血液疾病，以及脑瘫、孤独症、免疫缺陷、糖尿病等非血液疾病1。脐带血库是指以人体造血干细胞移植为目的，具有采集、处理、保存和提供造血干细胞的能力，并具有相当研究实力的特殊血站。作为特殊的血站，既要遵守血站系统的法律法规技术规范，同时也要遵照脐带血库相关的法律法规技术规范；为确保脐带血库提供给临床无传染病的脐带血，入库前要对产妇的血液进行乙肝病毒、丙肝病毒、艾滋病病毒、梅毒螺旋体和巨细胞病毒的相关标志物进行检测2-4。乙肝病毒是我国目前流行最为广泛且危害比较严重的一种传染病，献血者感染该病毒，有可能造成乙肝病毒的传播。孕妇感染乙肝病毒，危害相当大。有研究报道与孕前未感染乙肝病毒女性相比，既往感染过乙肝病毒的女性，其子代发生先心病的风险可升高23%；与夫妻双方孕前均未感染乙肝病毒的家庭相比，单纯父方既往感染乙肝病毒也会增加子代罹患先心病的风险5。160CHINA HEALTH STANDARD MANAGEMENT,Vol.14,No.17关于产妇的 HBsAg 阳性感染，国内也有报道。王爱兰等6报道南方医科大学南海医学检验科 17 722 例产妇的HBsAg 阳性率为 5.46%。张洁7报道盐城市第三人民医院检验科产妇的 HBsAg 阳性率为 5.81%。杜亚琴8报道武汉市某基层医院孕妇的 HBsAg 阳性率为 6.70%。本研究发现山东地区采集脐带血产妇HBsAg感染率也有相当高的比率，20182022 年 HBsAg 感染率分别为 2.513%（2 899/115 338）、2.245%（2 998/133 564）、2.227%（2 435/109 334）、2.091%（2 324/111 139）、1.950%（1 795/92 048），5 年内 HBsAg 总感染率为 2.218%（12 451/561 423），这与国内报道的产妇 HBsAg 阳性率较低。推测原因为采集脐带血前要对产妇进行健康调查，如果产妇感染了乙肝，不允许捐献脐带血。母婴垂直传播是乙肝病毒的重要传播途径。感染乙肝的孕妇，在怀孕期间进行母婴阻断，能够达到 90%以上的阻断效果9-10。本研究发现 20182022 年 HBsAg 母婴垂直传播率为 1.828%（53/2 899）、1.901%（57/2 998）、1.971%（48/2 435）、1.463%（34/2 324）、1.727%（31/1 795），5 年内 HBsAg 母婴垂直传播率为 1.791%（223/12 451），远远低于报道的水平。推测可能的原因为 HBsAg 阳性的孕妇，在怀孕期间进行了很好地阻断，或者脐带血为新生儿出生时采集，也有可能存在乙肝病毒已发生母婴垂直传播，但婴儿体内 HBsAg 的量低于现有检测方法的下限，而造成检测结果的假阴性。关于对 HBsAg 阳性的孕妇阻断母婴垂直传播的时机或阻断失败后新生儿 HBsAg 阳性出现的时间，是笔者后续调研的关注点。丙肝主要通过血液暴露、性传播、母婴传播等方式传播的感染性疾病。全国一般人群丙肝阳性率约为 0.60%；儿童抗-HCV 阳性率为 0.09%0.26%；孕产妇抗-HCV 阳性率为 0.08%0.50%6-8，11。本研究发现，山东省采集脐带血产妇的抗-HCV 的阳性率 20182022 年处于较低的水平，分别为 0.056%（65/115 338）、0.060%（80/133 564）、0.062%（68/109 334）、0.039%（43/111 139）、0.060%（55/92 048），5 年 内 抗-HCV 总 感 染 率 为 0.055%（311/561 423），鉴于丙肝母婴传播的危害，且目前对于丙肝的预防、治疗及阻断尚无有效的方法，所以抗-HCV 阳性的产妇不建议储存脐带血，以减少未知的因脐带血的应用导致的HCV 的感染。梅毒是系统性、慢性传染性疾病，且存在潜伏期，如果孕妇感染梅毒，则可能导致流产、早产，甚至会导致死胎，是危害性较大的传染病7。针对孕妇的抗-TP的阳性率，国内报道的数据为 1.00%1.35%6-8。本研究数据发现山东地区采集脐带血产妇抗-TP 阳性率 20182022 年分别为0.229%（264/115 338）、0.234%（313/133 564）、0.135%（148/109 334）、0.083%（92/111 139）、0.090%（83/92 048），5 年内抗-TP 总感染率为 0.160%（900/561 423），抗-TP 阳性率低于其他报道，分析原因为其代表了采集脐带血的产妇，而非整个山东地区的产妇，在采集脐带血前的健康征询时，感染梅毒螺旋体的产妇是不允许采集脐带血；另外，存在产妇感染梅毒后早治疗的情况12。抗-HIV 筛查阳性率处于较低的水平，连续 5 年分别为0.042%（49/115 338）、0.043%（57/133 564）、0.066%（72/109 334）、0.059%（66/111 139）、0.014%（13/92 048），5 年内抗-HIV总感染率为 0.046%（257/561 423），与国内的有关报道基本一致6，8。2022 年抗-HIV 阳性率明显低于其他年份，主要是 2022 年前采用的艾滋三代试剂，只检测 HIV 抗体，2022 年更换为四代试剂，是抗体/抗原联检试剂，由此推测，四代试剂筛查阳性率低于三代。本研究 5 年内抗-HIV 确证阳性 1 例，处于极低的水平，推测为受检者本身、试剂的原因以及试验操作的原因等容易产生假阳性结果13。产妇作为特殊的人群，其体内的激素水平有别于常人，至于产妇抗-HIV 筛查阳性而确证阴性，有待于后续跟踪分析产生假阳性的原因。HCMV 是人类病毒性疾病的常见病原体之一，人类对HCMV 普遍易感，我国超 90%的育龄女性血清 HCMV-IgG 阳性14。HCMV 存在一定程度的母婴垂直传播，为确保脐带血的安全性，脐带血技术规范要求，采集脐带血前需对产妇进行 HCMV 病毒抗体的筛查3。近 5 年山东地区采集脐带血产妇的 HCMV-IgM 阳性率分别为 0.818%（944/115 338）、0.622%（831/133 564）、0.516%（564/109 334）、0.563%161中国卫生标准管理CHSM 17（626/111 139）、0.273%（251/92 048），5 年 内 HCMV-IgM总感染率为 0.573%（3 216/561 423），处于较高的水平。通过 HCMA 的筛查可以保证脐带血安全，告知产妇，能够降低因母乳喂养带来的母婴传播风险。核酸检测在缩短窗口期方面有优势，只进行ELISA检测仍存在输血残余风险，但核酸检测又不能完全取代ELISA检测。这是因为核酸检测是反映机体病毒复制状况，而 ELISA 则反映病毒感染后引起机体免疫应答的状况，二者对献血者的筛查缺一不可，均在降低输血相关病毒感染风险方面发挥重要的互补作用15。脐带血库作为特殊血站，为确保储存的脐带血安全，本单位自 2018 年 5 月份正式实施酶免阴性的样本，进行核酸检测的策略，20182022 年 HBV DNA 阳性率分别为 0.036%（26/72 821）、0.030%（39/128 909）、0.028%（29/104 584）、0.029%（30/103 202）、0.030%（26/86 424），5 年 内 HBV DNA 总 阳 性 率 为 0.030%（150/495 940），未出现 HCV RNA 和 HIV-1 RNA 阳性的样本敏感性筛查结果来看，酶免阴性的血液仍能筛查出一定比例的阳性。由于乙型肝炎窗口期较长，隐匿性 HBV感染或 HBV 变异株的存在导致 ELISA 检测存在较高的漏检率，核酸检测可以直接检测病毒的遗传物质，缩短病毒检测窗口期，敏感性和特异性高，有效弥补了血清学检测的不足16。鉴于脐带血移植大多在受者免疫力弱或相当低于的情况下应用，比一般人群更能感染病毒，采用酶免和核酸两种检测方法，能够大大提高脐带血应用的安全性。综上所述，山东地区采集脐带血产妇的传染病阳性率处于较低的水平，能够保证临床用脐带血的安全。鉴于目前全国只有 7 家合法的脐带血库，检测的样本量远远低于全国的血液系统；因此定期参加血液系统的质评活动与会议交流，采用先进的检测方法、先进的设备、敏感性高的检测试剂，保证脐带血的安全，才能让脐带血更好地造福于需要的患者。参考文献1 范维，周海洋.脐带血临床应用研究进展 J.临床输血与检验，2020，22（6）：664-669.2 NetCord-FACT International Standards for CORD BLOOD Collection，Banking，and Release for Administration.SEVENTH EDITION，2019.10.15.3 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