尿液化学检验专家讲座.pptx

尿液化学检验尿液化学检验Chemical examination of urine尿液化学检验专家讲座第1页2.pH2.pH试纸法试纸法:1.1.试带法试带法:模块有模块有甲基红甲基红(pH4.6-6.2),(pH4.6-6.2),溴麝香草酚蓝溴麝香草酚蓝(pH6.0-7.6).(pH6.0-7.6).变色范围：黄变色范围：黄5.0-5.0-绿绿7.0-7.0-蓝蓝9.09.0，仪器或肉，仪器或肉眼判读眼判读各种混合指示剂各种混合指示剂(棕红色棕红色-深黑色深黑色),),与标准色板比较。与标准色板比较。（一）测定原理（一）测定原理一、一、尿酸碱度测定尿酸碱度测定（urine acidity）尿液化学检验专家讲座第2页3.3.指示剂法指示剂法:5.pH5.pH计法计法:4.4.滴定法滴定法:0.4g/L0.4g/L溴麝香草酚蓝溴麝香草酚蓝滴于尿液滴于尿液黄黄-酸酸性性,绿绿-中性中性,蓝蓝-碱性碱性.受黄疸尿及血尿影响受黄疸尿及血尿影响.pHpH电极电极.准确度较高准确度较高,需仪器需仪器,烦琐烦琐,少用少用.标准标准NaOHNaOH滴定滴定,测总酸度测总酸度.复杂复杂,少用少用（一）测定原理（一）测定原理一、一、尿酸碱度测定尿酸碱度测定（urine acidity）尿液化学检验专家讲座第3页（二）（二）尿酸度测定方法学评价尿酸度测定方法学评价方方 法法评评 价价试带试带法法配套应用于尿液分析仪，是当前满足临床对尿pH检验需要最广泛应用一个筛检方法pHpH试纸试纸法法操作简便，采取pH精密试纸可提升检测灵敏度，但试纸易吸潮而失效指示指示剂剂法法 溴麝香草酚溴麝香草酚蓝变蓝变色范色范围为围为pH 6.0pH 6.07.67.6，当尿，当尿pHpH偏离此偏离此范范围时围时，检测结检测结果不准确；黄疸尿、血尿将直接影响果不准确；黄疸尿、血尿将直接影响结结果判果判读读滴定法滴定法可可测测定尿酸度定尿酸度总总量。量。临临床上用于尿酸度床上用于尿酸度动态监测动态监测，但操，但操作复作复杂杂pHpH计计 结果准确可靠,需特殊仪器，操作繁琐。可用于肾小管性酸中毒定位诊疗、分型、判别诊疗时尿pH准确测定尿液化学检验专家讲座第4页标本新鲜标本新鲜;操作规范操作规范;试带保留试带保留;试剂配制标准试剂配制标准;pHpH计校准计校准.（三）质量确保（三）质量确保一、一、尿酸碱度测定尿酸碱度测定（urine acidity）尿液化学检验专家讲座第5页正常饮食正常饮食晨尿晨尿pHpH：5.55.56.56.5，平均，平均6.0;6.0;随机尿随机尿pHpH：4.6 4.68.08.0；可滴定酸度：可滴定酸度：20 2040mmol/24h40mmol/24h尿尿（四）参考值（四）参考值一、一、尿酸碱度测定尿酸碱度测定（urine acidity）尿液化学检验专家讲座第6页(1)(1)生理改变生理改变:食物影响：食物影响：蛋白类蛋白类酸性酸性;果蔬类果蔬类碱性碱性.碱潮碱潮:餐后胃酸餐后胃酸,肾泌肾泌H H+,Cl,Cl-重吸收重吸收 尿尿pHpH一过性一过性.生理活动：生理活动：运动运动,饥饿饥饿,出汗出汗,应急应急,夜间入睡呼吸夜间入睡呼吸 变慢变慢体内酸性代谢产物体内酸性代谢产物pH.pH.（五）临床意义（五）临床意义一、一、尿酸碱度测定尿酸碱度测定（urine acidity）尿液化学检验专家讲座第7页(2)(2)病理改变病理改变:酸性尿：酸中毒酸性尿：酸中毒,高热高热,慢性肾炎慢性肾炎,白血病白血病,糖尿病酮症酸中毒糖尿病酮症酸中毒,低钾血症低钾血症,痛风痛风碱性尿：碱中毒碱性尿：碱中毒,呕吐呕吐,尿路感染尿路感染,型肾型肾 小管性酸中毒小管性酸中毒,原发性醛固酮增多症原发性醛固酮增多症 一、一、尿酸碱度测定尿酸碱度测定（urine acidity）（五）临床意义（五）临床意义尿液化学检验专家讲座第8页（3 3）药品影响：）药品影响：NaHCONaHCO3 3,K,K2 2COCO3 3,枸橼酸钠枸橼酸钠碱化尿液碱化尿液预防酸性结预防酸性结晶晶(尿酸及胱氨酸尿酸及胱氨酸)形成形成;促进酸性药品排泄促进酸性药品排泄.氯化钙氯化钙(铵、钾铵、钾)、稀盐酸、稀盐酸酸化尿液酸化尿液预防碱性预防碱性结晶结晶(磷磷/碳碳/草酸钙草酸钙)形成形成;促进碱性药品排泄促进碱性药品排泄;预防预防细菌生长细菌生长.溶血时口服溶血时口服NaHCONaHCO3 3碱化尿液碱化尿液促进溶解及排泄促进溶解及排泄Hb.Hb.一、一、尿酸碱度测定尿酸碱度测定（urine acidity）（五）临床意义（五）临床意义尿液化学检验专家讲座第9页二、二、尿液蛋白质检验尿液蛋白质检验 健康人尿液中蛋白含量极少，定性为阴性。健康人尿液中蛋白含量极少，定性为阴性。尿液中蛋白质含量尿液中蛋白质含量150mg/24h150mg/24h或尿中蛋白质浓度或尿中蛋白质浓度100mg/L100mg/L蛋白定性为阳性，即蛋白定性为阳性，即 proteinuria.1.1.蛋白尿蛋白尿 (proteinuria,PRO)(一一)概述概述尿液化学检验专家讲座第12页二、二、尿液蛋白质检验尿液蛋白质检验2.2.蛋白尿形成原因蛋白尿形成原因(1)(1)肾小球滤过膜破坏或电荷屏障改变肾小球滤过膜破坏或电荷屏障改变(2)(2)肾小管重吸收障碍肾小管重吸收障碍(3)(3)溢出性溢出性(4)(4)肾组织性肾组织性(一一)概述概述尿液化学检验专家讲座第13页【原理】【原理】指示剂蛋白质误差原理指示剂蛋白质误差原理 溴酚蓝溴酚蓝阴离子阴离子(1)(1)干化学试带法干化学试带法【评价评价】肉眼和仪器肉眼和仪器；对清蛋白灵敏对清蛋白灵敏(70-100mg/L)(70-100mg/L)，与与Hb/Mb/BJPHb/Mb/BJP基本不反应；基本不反应；简便快速，易标准化，简便快速，易标准化，应用普遍应用普遍。健康普查、肾病筛查健康普查、肾病筛查。pH3.2pro+复合物复合物(淡黄淡黄绿色绿色兰色兰色)(二二)尿蛋白定性检验尿蛋白定性检验1.1.测定原理与评价测定原理与评价尿液化学检验专家讲座第14页表表5-7 5-7 试带法检测干扰原因及评价试带法检测干扰原因及评价干扰原因评评 价价标本原因尿尿pHpH9 9，可假阳性；尿，可假阳性；尿pHpH3 3，可假阴性。最适尿，可假阴性。最适尿pH 5pH 56 6，故必要，故必要时时可先可先调标调标本本pHpH值值。尿液新。尿液新鲜鲜。食物原因尿酸碱度与摄入食物有系，检验前1天应防止单一摄入过多肉类或蔬菜、水果，进食应均衡药品原因假阳性：服奎宁、奎宁丁、假阳性：服奎宁、奎宁丁、嘧啶嘧啶等或尿中含聚乙等或尿中含聚乙烯烯、吡咯吡咯酮酮、洗必泰、磷酸、洗必泰、磷酸盐盐、季胺、季胺盐盐消毒消毒剂剂 等，尿呈等，尿呈强强碱（碱（pH9.0pH9.0）。）。假阴性：大假阴性：大剂剂量滴注青霉素或用量滴注青霉素或用庆庆大霉素、磺胺、大霉素、磺胺、含碘造影含碘造影剂剂操作操作过过程程 假阳性：假阳性：试带试带浸浸渍时间过长渍时间过长，反，反应颜应颜色色变变深。深。假阴性：假阴性：试带试带浸浸渍时间过渍时间过短反短反应应不完全或浸不完全或浸渍时间过渍时间过 长长膜膜块块中中试剂试剂流失流失(二二)尿蛋白定性检验尿蛋白定性检验尿液化学检验专家讲座第15页【评价评价】(2)(2)磺基水杨酸法磺基水杨酸法【原理】【原理】pro pro+磺基水杨酸根磺基水杨酸根-不溶性蛋白沉淀不溶性蛋白沉淀简便快速，简便快速，灵敏度高灵敏度高0.05-0.1g/L0.05-0.1g/L；与清与清/球球/本周蛋白反应本周蛋白反应；假阳性。假阳性。干化学法参考方法，干化学法参考方法，NCCLSNCCLS推荐推荐 确证试验。确证试验。H+(二二)尿蛋白定性检验尿蛋白定性检验1.1.测定原理与评价测定原理与评价1尿尿2-3ml+试剂试剂0.1ml，马，马上混匀，上混匀，1min内观察结果内观察结果.尿液化学检验专家讲座第16页(2)(2)磺基水杨酸法磺基水杨酸法【干扰原因】【干扰原因】(二二)尿蛋白定性检验尿蛋白定性检验1.1.测定原理与评价测定原理与评价 干干 扰扰 因因 素素假阳性假阳性高高浓浓度尿酸、尿酸度尿酸、尿酸盐盐、草酸、草酸盐盐碘造影碘造影剂剂、大、大剂剂量青霉素量青霉素混入生殖系混入生殖系统统分泌物分泌物假阴性假阴性pH pH 9 9或或 9 9或或 3.5g/24h;4+;3.5g/24h;肾病综合症肾病综合症.MWMW9 9万万,Ig(G,A,M),C,Ig(G,A,M),C3 3；Alb,T-H.Alb,T-H.1+1+4+;0.54+;0.53.0g/24h.3.0g/24h.连续连续肾衰；原肾衰；原/继发肾小球疾病继发肾小球疾病.(三三)尿蛋白定量检验尿蛋白定量检验尿液化学检验专家讲座第30页肾小球性肾小球性：肾小球肾炎：肾小球肾炎+，极少，极少+；肾小管性肾小管性：+，极少，极少+.+.混合性性混合性性：肾病综合征：肾病综合征+.+.组织性组织性：+，极少，极少+.+.(三三)尿蛋白定量检验尿蛋白定量检验尿液化学检验专家讲座第31页三、尿液葡萄糖检验三、尿液葡萄糖检验正常人尿内含糖量极少，正常人尿内含糖量极少，0.560.565.05.0mmol/24hmmol/24h，定性试验阴性，定性试验阴性。糖尿糖尿(glucosuria,GLU)血糖血糖8.88mmol/L8.88mmol/L，肾糖阈值，或近端肾小管，肾糖阈值，或近端肾小管重吸收功效障碍时尿糖重吸收功效障碍时尿糖，定性试验阳性尿液，定性试验阳性尿液.尿液化学检验专家讲座第32页(1)(1)试带法试带法【原理原理】葡萄糖葡萄糖+H H2 2O O 葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶 葡萄糖酸内酯葡萄糖酸内酯+H H2 2O O2 2 H H2 2O O2 2+色素原色素原 过氧化物酶过氧化物酶 有色物质有色物质+H H2 2O O（glucose oxidase-peroxidase method）【评价评价】特异性强特异性强,灵敏度高灵敏度高(1.67(1.672.78mmol/L 2.78mmol/L 弱阳性弱阳性),),简便简便快速快速,自动分析自动分析.1.1.测定方法与评价测定方法与评价(一一)尿糖尿糖定性定性检验检验尿液化学检验专家讲座第33页(1)(1)干化学试带法干化学试带法【干扰原因干扰原因】葡萄糖氧化酶试带法葡萄糖氧化酶试带法1.1.测定方法与评价测定方法与评价(一一)尿糖尿糖定性定性检验检验标本原因假阳性：容器残留假阳性：容器残留强强氧化氧化剂剂.假阴性：假阴性：标标本放置本放置过过久久,高高SGSG尿尿,尿尿酮酮体体0.4g/L.0.4g/L.药品原因假阴性：假阴性：VitCVitC、左旋多巴、左旋多巴.尿液化学检验专家讲座第34页(2)(2)班氏法班氏法(Benedict(Benedict法法)【原理】【原理】CuCu2+2+-CuCu+兰色兰色 黄色黄色至砖红色至砖红色.【评价评价】缺乏特异性缺乏特异性,灵敏度低灵敏度低(8.33mmol/L(8.33mmol/L弱阳性弱阳性)-CHO,OH1.1.测定方法与评价测定方法与评价班氏试剂班氏试剂1ml,1ml,煮沸不变色煮沸不变色+尿尿2 2滴滴煮沸煮沸1-2min 1-2min 冷冷却后观察却后观察.(一一)尿糖定性检验尿糖定性检验尿液化学检验专家讲座第35页(2)(2)班氏法班氏法(Benedict(Benedict法法)【干扰原因干扰原因】1.1.测定方法与评价测定方法与评价(一一)尿糖定性检验尿糖定性检验标本原因假阳性：假阳性：还还原性糖原性糖假阴性：假阴性：大量大量铵盐铵盐，预预先加碱煮沸去氨后再先加碱煮沸去氨后再检验检验；PRO PRO0.5g/L,0.5g/L,加加热热乙酸法去蛋白取乙酸法去蛋白取滤滤液液检验检验;药品原因假阳性：假阳性：VitC,VitC,青青/链链霉素霉素,头孢头孢菌素菌素,异烟异烟肼肼,水水杨杨酸酸 盐盐,氨氨苄苄西林西林尿液化学检验专家讲座第36页(3)(3)薄层层析法薄层层析法(thin-layer chromatography,TLC)【评价评价】判别、判别、确证尿糖种类确证尿糖种类特异、灵敏方特异、灵敏方法；操作烦琐，极少应用。法；操作烦琐，极少应用。(一一)尿糖定性检验尿糖定性检验1.1.测定方法与评价测定方法与评价【原理】【原理】吸附剂作固定相；有机溶剂作流动相；吸附剂作固定相；有机溶剂作流动相；两相间作相对移动。两相间作相对移动。各组分各组分流动相流动相固定相固定相重复吸附重复吸附-解析解析-亲和作用亲和作用展开展开分离。分离。比移值（比移值（RfRf）=斑点距离斑点距离/溶剂距离溶剂距离尿液化学检验专家讲座第37页(1)(1)检验前：检验前：(2)(2)检测中：检测中：容器清洁，不含氧化性物质；一次性尿杯容器清洁，不含氧化性物质；一次性尿杯.消除消除VitCVitC干扰：尿液煮沸几分钟干扰：尿液煮沸几分钟.(3)(3)检测后：检测后：汇报审核汇报审核,结果不符查找原因结果不符查找原因;与临床沟通与临床沟通.2.2.质量控制质量控制(一一)尿糖定性检验尿糖定性检验室内质控室内质控.试带法注意反应时间和温度试带法注意反应时间和温度;阴凉干燥阴凉干燥,保质期保质期.班式法恪守操作规程班式法恪守操作规程,注意判读时间注意判读时间.定性：阴性定性：阴性3.3.参考值参考值尿液化学检验专家讲座第39页【测定方法】【测定方法】葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法,己糖激酶法己糖激酶法(二二)尿糖尿糖定量定量检验检验【评价评价】测血糖方法。药品和尿液中自然物质对测血糖方法。药品和尿液中自然物质对己糖激酶法几乎无干扰；对葡萄糖氧化己糖激酶法几乎无干扰；对葡萄糖氧化酶法有不一样程度干扰。酶法有不一样程度干扰。2.2.参考值：参考值：0.560.565.0 mmol/L5.0 mmol/L1.1.测定方法与评价测定方法与评价尿液化学检验专家讲座第41页非葡萄糖尿非葡萄糖尿葡萄糖尿葡萄糖尿血糖增高性糖尿血糖增高性糖尿血糖正常性糖尿血糖正常性糖尿-肾性肾性糖尿病糖尿病-代谢性代谢性内分泌性糖尿内分泌性糖尿饮食性糖尿饮食性糖尿应激性糖尿应激性糖尿饥饿饥饿-糖耐量糖尿糖耐量糖尿糖尿糖尿乳糖尿：乳糖尿：半乳糖尿半乳糖尿果糖尿果糖尿肝功障碍肝功障碍哺乳期哺乳期(三三)临床意义临床意义暂时性暂时性尿液化学检验专家讲座第42页(胰岛素分泌不足胰岛素分泌不足)饥饿饥饿-糖耐量糖尿：见于晚期食道肿瘤、低营养状态和妊娠剧吐者糖耐量糖尿：见于晚期食道肿瘤、低营养状态和妊娠剧吐者 做糖耐量试验。做糖耐量试验。尿液化学检验专家讲座第43页表表5-10 5-10 内分泌性糖尿常见原因及检验结果内分泌性糖尿常见原因及检验结果疾疾 病病原原 因因检验结果甲状腺功效亢进甲状腺素甲状腺素分泌分泌过过多，食欲亢多，食欲亢进进、肠肠壁血流加速，葡萄糖壁血流加速，葡萄糖吸收率增加吸收率增加餐后血糖增高，餐餐后血糖增高，餐后尿糖阳性后尿糖阳性空腹血糖、餐后空腹血糖、餐后2h2h血糖正常血糖正常垂体前叶功效亢进生长激素分泌过多,反抗胰岛素作用血糖增高血糖增高,尿糖阳性尿糖阳性嗜嗜铬细铬细胞瘤胞瘤肾肾上腺素、去甲上腺素、去甲肾肾上腺素上腺素大大量分泌，肝糖原降解量分泌，肝糖原降解为为葡萄葡萄糖加速糖加速血糖增高血糖增高,尿糖阳性尿糖阳性CushingCushing综综合征合征糖皮质激素大量分泌,糖原异生作用旺盛,葡萄糖磷酸激酶和反抗胰岛素作用受抑制血糖增高血糖增高,尿糖阳性尿糖阳性尿液化学检验专家讲座第44页表表5-11 5-11 血糖正常性糖尿常见原因及检验结果血糖正常性糖尿常见原因及检验结果疾疾 病病原原 因因检验结果家族性家族性糖尿糖尿先天性近曲小管对糖重吸收功效缺损（2g/L,2g/L,亚硝酸盐亚硝酸盐0.05g/L0.05g/L灵敏度灵敏度尿液化学检验专家讲座第66页(1)(1)检测前：标本新鲜检测前：标本新鲜,避光保留；避光保留；口服口服NaHCONaHCO3 3碱化尿液碱化尿液,午餐后午餐后2-4h2-4h尿标本。尿标本。(2)(2)检测中检测中:口服口服NaHCONaHCO3 3碱化尿液碱化尿液,先用乙酸调整先用乙酸调整 为弱酸性为弱酸性.试带法试带法:规范规范,高低室内质控高低室内质控,定检定检.阴凉干燥阴凉干燥,密闭避光密闭避光,使用期使用期.4.4.质量控制质量控制六、尿胆原和尿胆素定性检验六、尿胆原和尿胆素定性检验(3)(3)检测后：正确评价尿三胆检测后：正确评价尿三胆;尿胆原阴性可疑尿胆原阴性可疑尿胆素定性验证尿胆素定性验证.尿液化学检验专家讲座第67页尿胆原：阴性或弱阳性；尿胆原：阴性或弱阳性；1:201:20稀释阴性稀释阴性.尿胆素：阴性尿胆素：阴性(1)(1)判别黄疸种类判别黄疸种类.尿二胆尿二胆正常正常溶血性黄疸溶血性黄疸肝细胞性黄疸肝细胞性黄疸阻塞性黄疸阻塞性黄疸尿胆红素尿胆红素+尿胆原尿胆原少许(+)(+)(+)(+)(-)(-)(2)(2)反应肝细胞损伤敏感指标反应肝细胞损伤敏感指标.(3)(3)长久便秘易使尿胆原阳性程度增加长久便秘易使尿胆原阳性程度增加.六、尿胆原和尿胆素定性检验六、尿胆原和尿胆素定性检验5.5.参考值参考值6.6.临床意义临床意义尿液化学检验专家讲座第68页表表5-15 5-15 不一样类型黄疸判别诊疗不一样类型黄疸判别诊疗标本标本指指 标标正常人正常人溶血性黄溶血性黄疸疸肝细胞性肝细胞性黄疸黄疸梗阻性黄梗阻性黄疸疸血清血清 总胆红素总胆红素正常正常增高增高增高增高增高增高未结合胆红素未结合胆红素正常正常增高增高增高增高正常正常/增高增高结合胆红素结合胆红素正常正常增高增高/正常正常 增高增高增高增高尿液尿液 颜色颜色浅黄浅黄深黄深黄深黄深黄深黄深黄尿胆原尿胆原1:201:20阴性阴性强阳性强阳性阳性阳性阴性阴性尿胆素尿胆素阴性阴性阳性阳性阳性阳性阴性阴性胆红素胆红素阴性阴性阴性阴性阳性阳性阳性阳性粪便粪便 颜色颜色黄褐黄褐深色深色黄褐黄褐/变浅变浅变浅变浅/白陶土色白陶土色粪胆素粪胆素正常正常增高增高减低减低/正常正常减低减低/消失消失尿液化学检验专家讲座第69页尿液中尿液中HbHb起源：起源：血管内溶血血管内溶血 尿路出血尿路出血七、尿血红蛋白定性检验七、尿血红蛋白定性检验正常人血浆中游离正常人血浆中游离HbHb微量微量(50mg/L),(50mg/L),与结合与结合珠蛋白形成珠蛋白形成Hb-HpHb-Hp复合物，在单核复合物，在单核-巨噬细胞巨噬细胞系统代谢，故尿中系统代谢，故尿中HbHb极微。定性：阴性极微。定性：阴性验证尿液潜在出血试验验证尿液潜在出血试验:隐血试验隐血试验(occult blood test)1.1.概述概述尿液化学检验专家讲座第70页(1)(1)试带法试带法(2)(2)湿化学法湿化学法(3)(3)免疫法：单克隆抗体法免疫法：单克隆抗体法利用胶体金标识抗人利用胶体金标识抗人HbHb单克隆抗体检测。单克隆抗体检测。2.2.测定方法测定方法原理相同原理相同七、尿血红蛋白定性检验七、尿血红蛋白定性检验H H2 2O O2 2 亚铁血红素亚铁血红素O邻甲苯胺邻甲苯胺邻甲苯胺邻甲苯胺邻甲偶氮苯邻甲偶氮苯邻甲偶氮苯邻甲偶氮苯(蓝色蓝色蓝色蓝色)尿液化学检验专家讲座第71页(1)(1)试带法：试带法：(2)(2)湿化学法：湿化学法：(3)(3)免疫法：免疫法：试剂稳定性差试剂稳定性差,特异性较低特异性较低,假阳性多假阳性多.0.3-0.6mg/L.0.3-0.6mg/L简便快速简便快速,灵敏度高灵敏度高(0.15-0.3mg/L),(0.15-0.3mg/L),影响多影响多,筛检筛检.简便简便,灵敏度高灵敏度高(0.2mg/L),(0.2mg/L),特异性强，特异性强，验证验证3.3.方法学评价方法学评价七、尿血红蛋白定性检验七、尿血红蛋白定性检验尿液化学检验专家讲座第73页3.3.方法学评价方法学评价七、尿血红蛋白定性检验七、尿血红蛋白定性检验方法方法干扰原因试带试带法法 假阳性：假阳性：热热不不稳稳定定酶酶、氧化、氧化剂污剂污染、尿路感染染、尿路感染假阴性假阴性：大量大量VitCVitC、甲、甲醛醛、亚亚硝酸硝酸盐盐，还还原原剂剂化学法化学法假阳性：假阳性：热热不不稳稳定定酶酶及及过过氧化物氧化物酶酶，铁剂铁剂、硝酸、硝酸、铜锌铜锌、碘化物碘化物免疫法免疫法 不受不受鸡鸡牛猪羊兔牛猪羊兔Hb(500ug/ml)Hb(500ug/ml)、辣根、辣根过过氧化物氧化物酶酶(200ug/ml)(200ug/ml)干干扰扰.【干扰原因干扰原因】尿液化学检验专家讲座第74页阴性阴性(1)(1)检测前：标本新鲜检测前：标本新鲜,煮沸煮沸2 2分分破坏破坏WBCWBC过氧化物酶过氧化物酶 和其它对热不稳定酶和其它对热不稳定酶.(2)(2)检测中：高低室内质控，阳性对照；检测中：高低室内质控，阳性对照；3%H3%H2 2O O2 2或试或试 带验证所用试剂使用期和可靠性。带验证所用试剂使用期和可靠性。4.4.质量控制质量控制5.5.参考值参考值七、尿血红蛋白定性检验七、尿血红蛋白定性检验(3)(3)检测后：审核，沟通，验证。检测后：审核，沟通，验证。尿液化学检验专家讲座第75页(2)(2)辅助诊疗泌尿系统疾病辅助诊疗泌尿系统疾病.(1)(1)辅助诊疗肾前性溶血性疾病辅助诊疗肾前性溶血性疾病.各种血管内溶血性疾病各种血管内溶血性疾病:PNH,:PNH,血型不合输血血型不合输血,AIHA,AIHA,行军性行军性HbHb尿尿;各种病毒感染、疟疾各种病毒感染、疟疾;大面积大面积烧伤、体外循环、术后所致烧伤、体外循环、术后所致RBCRBC大量破坏大量破坏.隐匿性肾炎隐匿性肾炎尿中少许尿中少许RBC破坏破坏隐血试验隐血试验(););镜检时镜检时RBCRBC少少.6.6.临床意义临床意义七、尿血红蛋白定性检验七、尿血红蛋白定性检验尿液化学检验专家讲座第76页八、亚硝酸盐八、亚硝酸盐(NIT)(NIT)硝酸盐硝酸盐亚硝酸盐亚硝酸盐(nitrate)(nitrite)硝酸盐还原酶硝酸盐还原酶G杆菌杆菌对氨基苯磺对氨基苯磺(砷砷)酸酸重氮盐重氮盐a-a-萘胺萘胺偶氮化合物偶氮化合物 (红色红色)1.1.检测原理：亚硝酸盐还原法检测原理：亚硝酸盐还原法尿液化学检验专家讲座第77页(1)(1)亚硝酸盐检出率亚硝酸盐检出率3 3个影响原因：个影响原因：尿中尿中G G-杆菌要有硝酸盐还原酶杆菌要有硝酸盐还原酶;尿尿潴留时间潴留时间4h;4h;尿中有尿中有硝酸盐硝酸盐.八、亚硝酸盐八、亚硝酸盐(NIT)(NIT)2.2.方法学评价方法学评价(2)(2)灵敏度：灵敏度：0.3-0.6mg/L0.3-0.6mg/L(3)(3)干扰原因干扰原因尿液化学检验专家讲座第78页表表5-16 5-16 亚硝酸盐检测干扰原因及评价亚硝酸盐检测干扰原因及评价因因 素素评评 价价标标 本本高比重尿使高比重尿使试验试验灵敏度降低；灵敏度降低；假阳性：假阳性：陈陈旧尿、偶氮旧尿、偶氮剂污剂污染尿染尿食食 物物尿中硝酸盐主要起源于正常饮食、体内蛋白质代谢、或由氨内源性合成。不能正常饮食患者，体内缺乏硝酸盐，即使有细菌感染，也可出现阴性致病菌致病菌 常常见见致病菌：大致病菌：大肠肠杆菌属（致病率最高）、杆菌属（致病率最高）、KlebsKlebs杆菌属、杆菌属、变变形杆菌属、葡萄球菌属、假形杆菌属、葡萄球菌属、假单单胞菌属等。胞菌属等。阳性阳性：大大肠肠埃希菌感染埃希菌感染符合率符合率约为约为80%80%。阴性：阴性：肠肠球菌属、球菌属、粪链粪链球菌属感染球菌属感染药药 物物假阳性：非那吡假阳性：非那吡啶啶假阴性假阴性：利尿：利尿剂剂、硝基硝基呋呋喃喃、大量大量维维生素生素C C；尿停留尿停留膀胱内膀胱内时间时间晨尿标本很好，尿在膀胱内停留时间长，细菌有充分作用时间，不然，试验呈假阴性尿液化学检验专家讲座第79页(1)(1)检测前：晨尿，尽快检测。检测前：晨尿，尽快检测。八、亚硝酸盐八、亚硝酸盐(NIT)(NIT)3.3.质量控制质量控制(2)(2)检测中：高低室内质控检测中：高低室内质控,定时阳性标本验证定时阳性标本验证;试带干燥避光，使用期。试带干燥避光，使用期。(3)(3)检测后：审核检测后：审核,结合结合LEULEU、镜检分析。、镜检分析。阴性阴性4.4.参考值参考值尿液化学检验专家讲座第80页快速筛检尿路感染快速筛检尿路感染NITNIT阳性阳性:泌尿系统有细菌感染泌尿系统有细菌感染.(.(排除假阳性排除假阳性)NITNIT阴性阴性:不能排除泌尿系统有细菌感染不能排除泌尿系统有细菌感染.八、亚硝酸盐八、亚硝酸盐(NIT)(NIT)5.5.临床意义临床意义NITNIT试带试带LEULEU镜检镜检准确诊疗准确诊疗.确证试验：尿细菌培养阳性确证试验：尿细菌培养阳性尿液化学检验专家讲座第81页九、白细胞九、白细胞(WBC,LEU)(leukocyte)(WBC,LEU)(leukocyte)1.1.检测原理：酯酶检测原理：酯酶(esterase)(esterase)法法吲哚酚酯吲哚酚酯 吲哚酚吲哚酚+有机酸有机酸粒细胞酯酶粒细胞酯酶 +重氮盐重氮盐 重氮色素重氮色素（紫红色紫红色缩合物）缩合物）尿液化学检验专家讲座第82页九、白细胞九、白细胞(WBC,LEU)(WBC,LEU)2.2.方法学评价方法学评价(1)(1)灵敏度灵敏度10102525个个/ul/ul或或5 51515个个/HPF./HPF.特异性强：特异性强：中性粒细胞中性粒细胞.(2)(2)【干扰原因干扰原因】假阳性假阳性污染阴道分泌物、甲醛；污染阴道分泌物、甲醛；高浓度高浓度BILBIL、非那吡啶、呋喃坦啶、非那吡啶、呋喃坦啶.假阴性假阴性WBC10WBC1025/l,PRO25/l,PRO5g/L,GLU30g/L;5g/L,GLU30g/L;大量青霉素、先锋霉素大量青霉素、先锋霉素、庆大霉素；、庆大霉素；VitC?VitC?尿尿pH4.4pH4.0pH4.0时内源性酚、巯基化合物、半胱时内源性酚、巯基化合物、半胱氨酸、硫代硫酸钠氨酸、硫代硫酸钠.假阴性假阴性碱性尿（碱性尿（VitCVitC易氧化分解破坏）易氧化分解破坏）尿液化学检验专家讲座第87页3.3.质量控制质量控制(1)(1)检测前：检测前：随机尿随机尿。(2)(2)检测中：检测中：规范规范操作和试带操作和试带质控质控。(3)(3)检测后：审核检测后：审核,分析对分析对OB/HbOB/Hb、BILBIL、GLUGLU、NIT NIT、LEULEU是否产生影响。是否产生影响。阴性阴性4.4.参考值参考值5.5.临床意义临床意义判断试带法判断试带法OB/HbOB/Hb、BILBIL、GLUGLU、NITNIT、LEULEU等等结果是否可靠。结果是否可靠。尿液化学检验专家讲座第88页十一、尿液分析仪原理十一、尿液分析仪原理十一、尿液分析仪原理十一、尿液分析仪原理尿液分析仪测试原理主要有以下三个方面尿液分析仪试剂带原理尿液分析仪测量原理尿液分析仪计算原理尿液化学检验专家讲座第89页1 1 1 1、试剂带原理、试剂带原理、试剂带原理、试剂带原理多联试剂带是将各种项目标试剂块集成在一个试剂带，使用多联试剂带，浸入一次使用多联试剂带，浸入一次尿液可同时测定多个项目尿液可同时测定多个项目。图为德国宝灵曼企业COMBUR TEST试剂带。它采取了多层模结构多层模结构尼龙膜尼龙膜：预防大分子物质对反应污染；尿液化学检验专家讲座第90页绒制层绒制层：包含碘酸盐层和试剂层：碘酸盐层碘酸盐层：能够破坏维生素C等干扰物质，试剂层试剂层：含有试剂成份，主要与尿液中测定物质发生化学反应，产生颜色改变；吸水层吸水层：可使尿液均匀快速浸入，并能抑制尿液流到相邻反应区；塑料底层塑料底层：作支持体。1 1、试剂带原理、试剂带原理、试剂带原理、试剂带原理尿液化学检验专家讲座第91页多联试剂带结构图多联试剂带结构图多联试剂带结构图多联试剂带结构图尿液化学检验专家讲座第92页u试剂带中还有另一个垫“赔偿区”，作为尿液本底颜色，以对有色尿及仪器改变等产生误差进行赔偿。试剂带按一定次序排列，各个厂家不一样，尿液中各种成份被各测定块吸收，引发化学反应及酶反应，使试剂块颜色依据尿液中各成份百分比而改变。1 1、试剂带原理、试剂带原理、试剂带原理、试剂带原理尿液化学检验专家讲座第93页这类仪器普通用微电脑控制，将浸有尿液试剂带放在仪器比色槽内，试带上已产生化学反应各种试剂垫被光源照射，其反射光被球球面积分仪面积分仪接收，将试剂块反射光量值与空白块反射光量值进行比较，经过计算机求出反射率，换算成浓度值，便可由分析仪打印出半定量数值。2 2、测、测、测、测 量量量量 原原原原 理理理理尿液化学检验专家讲座第94页尿液分析仪尿液分析仪原理图原理图尿液化学检验专家讲座第95页1 1 1 1、8 8 8 8项尿液分析仪项尿液分析仪项尿液分析仪项尿液分析仪代表仪器代表仪器有日本或国产MA4210型检测项目检测项目：尿蛋白、尿糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿隐血、尿亚硝酸盐。尿液化学检验专家讲座第96页2 2 2 2、9 9 9 9项尿液分析仪项尿液分析仪项尿液分析仪项尿液分析仪代表仪器代表仪器有德国产RL9型检测项目检测项目：尿蛋白、尿糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、尿尿白细胞白细胞。尿液化学检验专家讲座第97页3 3 3 3、10101010项尿液分析仪项尿液分析仪项尿液分析仪项尿液分析仪代表仪器代表仪器有德国MIDITRON型或美国CLINITEK200型检测项目检测项目：蛋白、糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿红细胞、白细胞、白细胞、尿比密尿比密 尿液化学检验专家讲座第98页4 4 4 4、11111111项尿分析仪项尿分析仪项尿分析仪项尿分析仪代表仪器代表仪器有美国CLINITEK500型、长春迪瑞、韩国盈东、unitest检测项目检测项目：蛋白、糖、PH、酮体、尿胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、白细白细胞、比密、维生素胞、比密、维生素C C；尿液化学检验专家讲座第99页尿液化学检验专家讲座第100页尿干化学试带检测原理尿干化学试带检测原理项目 英文缩写 反应原理 参考结果 pH pH 酸碱指示剂法 随机尿：pH 4.58.0 比重 SG 多聚电解质离子解离法 1.0151.025 蛋白质 PRO pH指示剂蛋白质误差法 阴性 葡萄糖 GLU 葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法 阴性 胆红素 BIL 偶氮反应法 阴性 尿胆原 URO 醛反应、重氮反应法 阴性或弱阳性 酮体 KET 亚硝基铁氰化钠法 阴性 亚硝酸盐 NIT 亚硝酸盐还原法 阴性 隐血或红细胞 BLD 血红蛋白类过氧化酶法 阴性 白细胞 LEU 酯酶法 阴性 尿液化学检验专家讲座第101页THANKS 尿液化学检验专家讲座第102页