两种HPV检测方法在新疆地区宫颈癌筛查中的应用效果对比.pdf

论论著著两种 HPV 检测方法在新疆地区宫颈癌筛查中的应用效果对比*昆阿依木叶尔江1,王摇 豆1,热米拉热扎克2,曾贝贝1,奴尔米拉布尔拜3,王摇 岩2*(1.新疆医科大学公共卫生学院,乌鲁木齐摇 830000;2.新疆医科大学附属肿瘤医院,乌鲁木齐摇 830000;3.新疆塔城地区托里县妇幼保健院,塔城摇 834500)摇 摇 揖摘要铱摇 目的:分析并对比基于体外核酸杂交捕获原理的 HPV 检测技术(careHPV)和实时荧光 PCR HPV 检测技术(PCR HPV)在新疆地区适龄妇女宫颈癌初级筛查中的应用效果。方法:纳入 2018 年新疆塔城地区 1943 例 25 64 岁有性生活史的女性,收集宫颈脱落细胞标本行 HPV 检测(包括 careHPV 和 PCR HPV),任一阳性者转阴道镜行病理学诊断。比较两种 HPV 检测技术的一致率,分析检测结果不一致 HPV 阳性者的 HPV 型别分布。以病理确诊的子宫颈上皮内瘤变 2 级及以上(CIN2+)病变为金标准,比较 care鄄HPV、PCR HPV(14 种)和 PCR HPV(18 种)3 种初筛方法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值。结果:针对14 种高危 HPV 型别,careHPV 和 PCR HPV 的一致率为95.16%,Kappa 值为 0.715。careHPV 和 PCR HPV 检测 14 种高危型别均阳性妇女共 126 例,其中HPV 16 型感染率最高,占 18.25%(23 例);其次是 HPV 51 型,占 12.70%(16 例);绝大多数是单一型别感染。在 careHPV 检测中,医生采样和自行采样组的高危型 HPV 阳性率分别为 8.90%和 9.83%,差异有统计学意义(P=0.006),而 PCR HPV 检测 14 种高危型别阳性率在两组间差异无统计学意义(P=0.144)。PCR HPV 检测的灵敏度最高,为88.89(95%CI 为 74.37 100),其次为 careHPV,其灵敏度为 83.33(95%CI 为 66.12 100);careHPV 检测的特异度和阳性预测值最高,分别为 91.79%和 8.67%,PCR HPV 检测的阴性预测值较高。结论:careHPV 检测与 PCR HPV 检测一致率较高,在宫颈癌初级筛查方面,两种 HPV 检测方法均得到了很好的效果,且两种检测方法有其不同的优势,应根据不同地区的卫生资源,适当选择检测方法,运用于筛查及临床诊断中。摇 摇 揖关键词铱摇 careHPV;PCR HPV;子宫颈癌;新疆;筛查摇 摇 中图分类号:R714.2摇 文献标志码:A摇 文章编号:1004-7379(2023)09-0641-04摇 摇 DOI:10.13283/ki.xdfckjz.2023.09.030Comparative study on the application effect of two HPV detection methods in cervicalcancer screening of women in Xinjiang.Kunayimu Yeerjiang1,Wang Dou1,Remila Rezhake2,et al.1.School of Public Health,Xinjiang Medical University,Urumqi摇 830000;2.Af鄄filiated Cancer Hospital of Xinjiang Medical University,Urumqi摇 830000摇 摇 揖Abstract铱摇 Objective:To analyze and compare the application effect of HPV detectiontechnology(careHPV)based on in vitro nucleic acid hybridization capture principle and real鄄time fluorescent PCR HPV detection technology(PCR HPV)in primary screening of neutroncervical cancer in women of appropriate age in Xinjiang.Methods:In 2018,a total of 1943 sex鄄ually active women aged 25 64 years were enrolled in Tacheng District,Xinjiang Province.Thewomen were instructed to collect cervical cell samples by themselves or gynecologists for HPV146现代妇产科进展 2023 年 9 月第 32 卷第 9 期摇 Prog Obstet Gynecol,Sep.2023,Vol郾 32,No郾 9*基金资助:新疆维吾尔自治区自然科学基金(No:2021D01C379);新疆维吾尔自治区天山青年计划(No:2017Q056);摇 摇 摇 新疆维吾尔自治区科技援疆计划(No:2022E02054)通信作者摇 Email:detection(including careHPV and PCR HPV),and any positive women were transferred to neg鄄ative endoscopy for pathological diagnosis.The consistency rate of two HPV detection techniqueswas compared,and the distribution of HPV types in the HPV鄄positive patients with inconsistenttest results was analyzed.The sensitivity,specificity,positive predictive value and negative pre鄄dictive value of careHPV,PCR HPV(14 kinds)and PCR HPV(18 kinds)were comparedwith the pathological diagnosis of grade 2 and above cervical intraepithelial neoplasia(CIN2+)as the gold standard.Results:For 14 high鄄risk HPV types,the agreement rate between careHPVand PCR HPV was 95.16%,and Kappa value was 0.715.A total of 126 women were testedpositive for 14 high鄄risk types of careHPV and PCR HPV,among which type 16 infection ratewas the highest,accounting for 18.25%(23 cases).Type 51 infection followed,accounting for12.70%(16 cases).The vast majority were monotypic infections.In careHPV test,the positiverates of high鄄risk HPV were 8.90%and 9.83%,respectively,between the two groups sampledby doctors and self鄄sampled(P=0.006),while the positive rates of 14 types of high鄄risk HPVdetected by PCR were not statistically significant between the two groups(P=0.144).The sen鄄sitivity of PCR HPV was the highest,88.89(95%CI:74.37 100),followed by careHPV,83.33(95%CI:66.12 100).Conclusion:The consistency rate between careHPV test and PCRHPV test is high.In terms of primary screening of cervical cancer,the two HPV test methodshave obtained good results,and the two test methods have their different advantages.The testmethods should be selected appropriately according to the health resources in different regions,and used in screening and clinical diagnosis.摇 摇 揖Key words铱摇 careHPV;PCR HPV;Cervical cancer;Xinjiang;Screening摇 摇 宫颈癌是发展中国家常见且重要的公共卫生问题1。据世界卫生组织/国际癌症研究署(WHO/IARC)2020 年数据显示,宫颈癌为女性第四大恶性肿瘤,估计 2020 年全球新发子宫颈癌病例约 60 万,死亡 34 万2。2018 年,中国估计有 11.1 万例新发病例和 3.4 万例死亡,占全球新增子宫颈癌病例和死亡病例的 19.5%和 10.9%3。据估计,如中国大陆城乡地区不实施干预措施,2010 年至 2050 年每年新增子宫颈癌病例数增加约 40%50%4。因此,宫颈癌仍是威胁妇女健康的一个关键问题。子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)是与子宫颈浸润癌密切相关的一组子宫颈病变,WHO(2014)将女性生殖器肿瘤用 CIN 级划分为CIN1、CIN2 以及 CIN35-6;子宫颈上皮内瘤变的发生与发展与高危型人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)持续感染密切相关7-9。国际癌症研究机构已将 14 种 HPV 基因型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66 和 68)归类为对人类致癌(第 1 组)、可能对人类致癌(第 2A 组)或可能对人类致癌(第 2B 组)10。2020 年,在全球市场上有425 种不同的 HPV 检测方法,其中,82%的检测缺乏已发表的分析和(或)临床评估,超过 90%的测试未按确保在临床环境中安全使用的共识要求进行评估11。本研究将 careHPV 和 PCR HPV 两种高危型HPV 检测技术用于新疆地区妇女宫颈癌初级筛查,探究两种检测技术的筛检效能。1摇 资料与方法1.1摇 资料来源摇 2018 年6 月至9 月在新疆塔城地区托里县妇幼保健院招募了 2000 例 25 64 岁、3 年内无子宫颈筛查史、无子宫切除史、未怀孕的哈萨克族妇女。参与者均获得知情同意。本研究经新疆医科大学附属肿瘤医院伦理委员会批准(编号:K鄄201806)。每位妇女回答一份与宫颈病变有关的社会人口学、生殖和其他风险因素数据的问卷,研究人员指导妇女自行或妇科医生根据她们的组别分类获取宫颈样本。1.2摇 careHPV 测试摇careHPV 检测是结合信号扩增的体外核酸杂交检测,使用微孔板化学发光定性检测宫颈标本中14 种 HR鄄HPV(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66和 68)。careHPV 检测有单克隆抗体包被磁珠,对 RNA鄄DNA杂交具有高亲和力。如达到或超过 1.0RLU/CO 的阈值(大约等于 1.0pg DNA/mL),则判定为阳性。1.3摇 PCR HPV 检测摇使用 BOHUIGenPlex HPV 基因分型(GenPlex,BOHUI,China,Beijing)对所有女性的残余 HPV 标本进行 HPV 基因分型检测。本检测采用聚合酶链反应(pol鄄ymerase chain reaction,PCR)扩增 HPV DNA,低密度芯片对扩增的 DNA 进行靶向特异性杂交检测。该技术检测 24 种HPV 类型,包括 18 种致癌分型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、53、73、82 和 83)和 6 种低风险分型(6、11、42、43、44 和 81)。1.4摇 阴道镜检查及组织病理学诊断摇 任一检测结果呈阳性的妇女均接受阴道镜检查。阴道镜检查由有经验的妇科医生进行,并根据研究方案进行活检:(1)直接从可疑区域进行活检;(2)如看不到鳞状柱连接,则行宫颈刮宫术(ECC);(3)如有证据表明 HPV16/18 阳性,从 6 点和 12 点位置进行有针对性的活检。所有活检标本均由新疆医科大学附属肿瘤医院和中国医学科学院肿瘤医院的资深病理学家按标准进行解读11。组织学诊断分为:阴性、宫颈上皮内瘤变 1 级246现代妇产科进展 2023 年 9 月第 32 卷第 9 期摇 Prog Obstet Gynecol,Sep.2023,Vol郾 32,No郾 9(CIN1)、宫颈上皮内瘤变 2 级(CIN2)、宫颈上皮内瘤变 3 级(CIN3)、鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)、原位腺癌(adenocarcinoma in situ,AIS)或 腺 癌(adenocarcinoma,ADC)。CIN2 及以上的定义为病理学阳性病变,否则为阴性。排除 57 例因未进行阴道镜检查而失访的女性,最终纳入 1943 例女性。1.5摇 统计学处理摇采用 SPSS 25.0 软件,两组间率的比较采用 McNemar 卡方检验,P0.05 为差异有统计学意义;一致性用 Kappa 值来比较,不同检测方法的诊断效能用灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值进行比较,并计算 95%置信区间。2摇 结摇 果2.1摇 PCR HPV 与 careHPV 检测一致性分析摇 1943例妇女中,careHPV 检测阳性率为 8.90%(173/1943);PCR HPV 检测 14 种高危型别 HPV 阳性率为 9.83%(191/1943)。针对 14 种高危 HPV 型别,careHPV 和 PCR HPV 的一致率为 95.16%,Kappa值为 0.715,经卡方检验比较,差异有统计学意义(字2=996.667,P0.001)。PCR HPV 检测 18 种高危型别 HPV 阳性率为 11.32%(220/1943)。PCRHPV(18 种)与 careHPV 比较,一致性为 94.60%,Kappa 值为 0.655,经卡方检验比较,差异有统计学意义(字2=841.460,P0.001)。见表 1。表 1摇 PCR HPV 与 careHPV 比较检测类型careHPV阳性阴性合计字2PPCR HPV(14 种)996.6670.001摇 阳性13556191摇 阴性3817141752摇 合计17317701943PCR HPV(18 种)841.4600.05)。PCR HPV 检测的灵敏度最高,为 88.89%(95%CI 为 74.37 100),其次是 careHPV 检测,为 83.33(95%CI 为66.12 100);careHPV 检 测 的 特 异 度 最 高,为91.79%(95%CI 为 90.57 93.02)。careHPV 的阳性预测值最高,其次是 PCR HPV 检测。PCR HPV检测的阴性预测值最高,为 99.89%(95%CI 为346现代妇产科进展 2023 年 9 月第 32 卷第 9 期摇 Prog Obstet Gynecol,Sep.2023,Vol郾 32,No郾 999.73 100)。见表 4。表 4摇 不同检测方法的诊断效能比较病理结果careHPV阳性阴性PCR HPV(14 种)阳性阴性PCR HPV(18 种)阳性阴性逸CIN2153162162CIN1158176718817372041721灵敏度83.33(66.12 100)88.89(74.37 100)88.89(74.37 100)特异度91.79(90.57 93.02)90.23(88.91 91.56)89.40(88.03 90.78)阳性预测值8.67(4.48 12.86)7.84(4.15 11.53)7.27(3.84 10.70)阴性预测值99.83(99.64 100)99.89(99.73 100)99.88(99.72 100)AUC0.876(0.860 0.890)0.879(0.865 0.894)0.883(0.868 0.897)3摇 讨摇 论检测 HPV 型别对于检测高级别宫颈鳞状上皮内病变(high鄄grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)或瘤样病变(CIN)具有重要的预后价值12。careHPV 检测技术通过国家食品药品监督管理总局(China Food and Drug Administration,SFDA)认证,该技术经多项研究证实适用于资源匮乏地区使用,目前 WHO 在全球发展中国家进行该技术的推广。careHPV 与第二代杂交捕获技术(hybrid capture 2,HC2)的检测原理相似,是基于 HC2 的原理上引用磁珠捕获的 DNA 与混合探针中的 RNA 杂交,通过信号放大及化学发光方法进行检测。careHPV 检测与 PCR HPV 检测比较,阳性率相近,一致性非常高,kappa 值较高,这与以往研究相适应13。careHPV阴性但是 PCR HPV 阳性的妇女中,绝大多数为单一感染,其中 HPV51 型感染率最高。三种方法的阳性预测值较差,但灵敏度和特异度极高,这与先前研究一致14。careHPV 检测的灵敏度为 83.33(95%CI为 66.12 100),PCR HPV 检测的灵敏度为 88.89(95%CI 为 74.37 100)。不同采样方法进行 care鄄HPV 检测得到的结果,差异无统计学意义,这与有些研究结果相近15-17。careHPV 检测与 PCR HPV 检测得出了相当一致的结果,在新疆地区除了阴道镜转诊指标的HPV16 型和 18 型阳性这一转诊指标外,还应注意HPV51 型和 52 型阳性的妇女。在取样方式上,自取样的结果相较于医生取样,检出率更高,若考虑自取样方式作为宫颈癌筛查的手段,可减轻妇女的心理负担。在检测 CIN2+病变时,两种方法均可适用,但 PCR HPV 灵敏度更高一些,并且 PCR HPV 检测较为经济的,适用于资源有限的地区,但需更全面的研究完善结果。参摇 考摇 文摇 献1摇 Bray F,Ferlay J,Soerjomataram I,et al.Global cancer sta鄄tistics 2018:GLOBOCAN estimates of incidence and mor鄄tality worldwide for 36 cancers in 185 countriesJ.CACancer J Clin,2018,68(6):394鄄4242摇 Sung H,Ferlay J,Siegel RL,et al.Global cancer statistics2020:GLOBOCAN estimates of incidence and mortalityworldwide for 36 cancers in 185 countriesJ.CA CancerJ Clin,2021,71(3):209鄄2493摇郑荣寿,孙可欣,张思维,等.2015 年中国恶性肿瘤流行情况分析J.中华肿瘤杂志,2019,41(1):19鄄284摇Shi JF,Canfell K,Lew JB,et al.The burden of cervicalcancer in China:synthesis of the evidence J.Int JCancer,2012,130(3):641鄄6525摇 卢朝辉,陈杰.WHO 女性生殖器官肿瘤学分类(第 4版)解读J.中华病理学杂志,2014,43(10):649鄄6506摇McCredie MR,Sharples KJ,Paul C,et al.Natural historyofcervical neoplasia and risk of invasive cancer in womenwithcervical intraepithelial neoplasia 3:a retrospective co鄄hort study.J.Lancet 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2023鄄02鄄29)第一作者简介:昆阿依木叶尔江(1995鄄),女,新疆医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学专业在读硕士。主要研究方向:肿瘤流行病学。446现代妇产科进展 2023 年 9 月第 32 卷第 9 期摇 Prog Obstet Gynecol,Sep.2023,Vol郾 32,No郾 9