黄芩、苍术对湿阻中焦证大鼠燥湿作用的性效关系.pdf

Doi:10.12054942.2023.02.007Jun.2023JournalofHainalormaScience2023年6 月Vol.36 No.2第36 卷第2 期海南师范日然科学版）黄芩、苍术对湿阻中焦大鼠燥湿作用的性效关系胡小勤1.2 3，陶美霖，曾雪霞，付蓉，蒙丹1，曾学文1,3*（1.广西中医药大学药学院，广西南宁530022;2.广西中药药效研究重点实验室，广西商南宁530022;3.金华高等研究院中医康复研究所，浙江金华321013)摘要：为了观察黄芩和苍术对湿阻中焦证证候模型燥湿功效的差异，阐明黄苓和苍术燥湿作用与药性组合的关联性，将6 4只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、黄苓高剂量组、黄苓中剂量组、黄苓低剂量组、苍术高剂量组、苍术中剂量组和苍术低剂量组。正常组常规喂养，其余各组通过饱时内服油脂、饥时灌胃冰水和外部寒湿环境作用2 0 d复制湿阻中焦证模型。采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠胃和结肠组织的病理学变化,采用胃液游离酸度测定方法检测胃液酸度,采用胃蛋白酶活性测定方法测定胃蛋白酶活力，使用蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测大鼠结肠组织水通道蛋白3（AQP3)表达情况。结果表明，与正常组比较，模型组大鼠宏观表征显示具有湿阻中焦证的表现，胃、结肠组织有炎症反应，胃液游离酸度降低（P0.05），胃蛋白酶活力减弱（P0.05)；结肠组织中AQP3蛋白表达量有所下降。与模型组比较，给药组大鼠宏观表征得到改善，黄苓和苍术对模型大鼠胃和结肠组织炎症都有一定的改善作用，苍术各剂量组均可升高模型大鼠胃液游离酸度（P0.05)和增强模型大鼠胃蛋白酶活力（P0.05），黄芩各剂量组也可升高模型大鼠胃液游离酸度和增强模型大鼠胃蛋白酶活力，但差异无统计学意义，黄苓中、低剂量组和苍术高、中、低剂量组均能显著降低结肠组织AQP3蛋白表达，研究证明黄苓和苍术对湿阻中焦证大鼠的燥湿作用与其药性组合具有一定的关联性，即其燥湿功效的强弱与其寒热药性有关，苦温的苍术比苦寒的黄苓作用效果更好。关键词：黄苓；苍术；湿阻中焦证；性效关系中图分类号：R285.5文献标志码：A文章编号：16 7 4-4942(2 0 2 3)0 2-0 150-0 8The Nature-effect Relationship of Scutellaria baicalensis and RhizomaAtractylodis on Dryness-dampness in Rats with Middle Jiao SyndromeHU Xiaoqin1.2.3,TAO Meilin,ZENG Xuexia,FU Rong,MENG Dan,ZENG Xuewent.3(1.College of Medicine,Guangxi University of Chinese Medicine,Nanning 530022,China;2.Guangxi Key Laboratory of Pharmacodynamics of Traditional Chinese Medicine,Nanning 530022,China;3.Institute of Traditional Chinese Medicine Rehabilitation,Jinhua Advanced Research Institute,Jinhua 321013,China)收稿日期:2 0 2 2-10-11基金项目：广西中医药大学2 0 18 年广西一流学科建设项目重点课题(2 0 18 XK041)；广西中药药效研究重点实验室系统性研究课题(17-2 59-2 0-A7)第一作者：胡小勤（197 5一），安徽怀宁人，教授，研究方向为中药药性和药效关系。E-mail:*通信作者：曾学文（197 5一），江西赣州人，副教授，研究方向为统计学。E-mail：1590 7 8 137 18 16 3.c o m151第2 期胡小勤，等：黄芩、苍术对湿阻中焦证大鼠燥湿作用的性效关系Abstract:To observe the diference of dryness-dampness effect of Scutellaria baicalensis and Rhizoma Atractylodis onthe model of syndrome of dampness hampering middle jiao,and to clarify the relationship between the dryness-dampnesseffect of them and the combination of medicinal properties.Sixty-four male SD rats were randomly classified into the nor-mal group,model group,Scutellaria baicalensis high-,medium-,and low-dose groups,as well as Rhizoma Atractylodishigh-,medium-,and low-dose groups.The normal group was fed routinely,and the other groups were fed with fat duringsatiety,ice water during hunger and external cold and humid environment for 20 days to replicate the model of syndrome ofdampness hampering middle jiao.The macroscopic characterization of rats was observed,the pathological changes of stom-ach and colon were observed by hematoxylin-eosin(HE)staining,the acidity of gastric juice was measured by free acidityof gastric juice,the activity of pepsin was determined by pepsin activity assay,and the expression of aquaporin 3(AQP3)inrat colon was detected by Western blotting(Western blot).The results showed that compared with the normal group,themacroscopic characterization of the model group showed that the rats in the model group had the syndrome of dampnesshampering middle jiao.There were inflammatory reactions in stomach and colon,the concentration of free acidity in gastricjuice decreased,the activity of pepsin decreased,and the expression of AQP3 protein in colon decreased.Compared withthe model group,the macroscopic characterization of rats in the treated group was improved,and Scutellaria baicalensis andRhizoma Atractylodis could improve the inflammation of stomach and colon tissue of model rats to a certain extent.Atracty-lodes macrocephala could increase the concentration of free acidity of gastric juice(P0.05)and enhance the activity of pepsinin model rats(P0.05).All dose groups of Scutellaria baicalensis could also increase the concentration of free acidity of gastricjuice and enhance the activity of pepsin in model rats,but the difference was not statistically significant.Scutellaria baicalen-sis medium and low dose groups and all dose groups of Rhizoma Atractylodis could significantly reduce the expression of AQP3protein in colon tissue of model group.Research showed that the dryness-dampness effect of Scutellaria baicalensis and Rhi-zoma Atractylodis macrocephala on rats with syndrome of dampness hampering middle jiao was related to their combination ofmedicinal properties.Specifically,the efficacy of dryness-dampness was related to their cold/heat property,and the resultingoutcome of bitter-warm Rhizoma Atractylodis was better than that of bitter-cold Scutellariae baicalensis.Keywords:Scutellaria baicalensis;Rhizoma Atractylodis;syndrome of dampness hampering middle jiao;nature-effectrelationship湿阻中焦证又称湿困脾胃证、湿困脾阳证，现代研究发现湿阻中焦是典型的中医证候，泛指湿邪困阻脾胃、阻遏气机所表现的证候。中医认为湿为阴邪，脾为阴土，喜燥恶湿，湿困脾胃，脾胃纳运失职，常表现为全身困重倦怠，胸闷,皖痞腹胀，食少纳呆,大便不爽，口黏苔腻等2 。黄芩,性寒,味苦,主要药效成分为黄酮类化合物，如黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素等3,具有安胎、止血、泻火解毒、清热燥湿的功效，常用于治疗暑湿、湿温、湿热痞满、胸闷呕恶等症。苍术，性温，味辛、苦，主要药用成分为苍术素、苍术苷A、-桉叶醇、白术内酯I、白术内酯和白术内酯等4,具有明目、散寒祛风、健脾燥湿的功效，常用于治疗湿困脾胃、倦怠嗜卧、食欲不振、皖腹胀满、水肿等证。黄芩和苍术均具有燥湿的功效，但二者药性不同，它们在作用效果上也是不同的。本文通过观察比较苦-寒药性组合和苦-温药性组合分别作用于湿阻中焦证大鼠的疗效差异,探讨黄芩和苍术药性、证候、药效之间的内在联系,进一步阐释药性组合与药效的关联性，为药性与药效的研究奠定基础。1材料与仪器1.1 动物64只健康雄性SD大鼠，SPF级，体质量（2 0 0+2 0）g，由湖南斯莱克景实验动物有限公司提供，合格证号：SCXK(湘)2 0 16-0 0 0 21.2药物黄芩、苍术均购自南宁同仁堂大药房，经广西中医药大学中药鉴定教研室的滕建北教授鉴定，符合2 0 15年版中华人民共和国药典5规定色3011522023年海南师范大学学报（自然科学版）1.3试剂水合氯醛，成都市科隆化学品有限公司，批号2 0 18 0 416 0 1;4%多聚甲醛，上海Biosharp生物科技公司，批号18 0 92 0 9；苏木素，Bioswamp公司，批号为PAB180015；伊红试剂，Bioswamp公司，批号为PAB180016；氰基丙烯酸正丁酯（BCA）蛋白浓度测定试剂盒，碧云天生物技术研究所，批号P0009。1.4仪器PAC3000型电泳仪，美国Bio-Rad公司；MoticBA400型正置显微镜，德国徕卡显微系统有限公司；TFOB型人工恒温恒湿气候箱，上海程造仪器设备有限公司。2方法2.1药液制备取黄芩饮片，首次煎煮2 h（加12 倍量的水），第2 次煎煮1h（加8 倍量的水），把2 次药液合并后过滤，滤液水浴浓缩成含生药量为1g/mL的药液，备用。取苍术饮片，加8 倍量的水浸泡12 h后，首次煎煮2 h（加12 倍量的水），第2 次煎煮2 h（加8 倍量的水），把2 次药液合并后过滤，滤液水浴浓缩成含生药量为1g/mL的药液，备用。2.2动物分组、造模与给药雄性SD大鼠6 4只，随机分为8 组，每组8 只，即正常组、模型组、黄芩高剂量组、黄芩中剂量组、黄芩低剂量组、苍术高剂量组、苍术中剂量组、苍术低剂量组。参照文献进行造模6-9,正常组常规喂养，其余各组每日控制大鼠睡眠时间8 h即向大鼠笼内加人4cm深的水，将其置于温度2 5、湿度95%的人工恒温恒湿气候箱内饲养，单日禁食且每只大鼠灌胃2 mL的4冰水，双日给予充足饲料且每只大鼠灌胃4mL的猪油，连续造模2 0 d。此后7 d，模型组和给药组大鼠于常温常湿度环境下饲养，黄芩高、中、低剂量组分别给予2.10、1.05、0.53g/k g 黄芩药液灌胃，苍术高、中、低剂量组分别给予1.8 9、0.95、0.47 g/kg苍术药液灌胃，正常组和模型组灌胃等体积蒸馏水，给药容积为1mL/100g。给药剂量按照人与大鼠体表面积进行换算，其中，中剂量以成人临床常用的1d用量计算，低剂量和高剂量分别为中剂量的0.5倍和2 倍。2.3取材末次给药后，禁食不禁水12 h，麻醉，打开腹腔，在贯门和幽门处结扎，摘取全胃，清洗表面血污，并用滤纸干燥水分。在培养皿内，先用针管吸取胃液转入5mL试管中并观测其体积，再沿胃小弯处展开，用1mL蒸馏水浸洗胃壁，将浸洗液吸人同一试管内，最后用蒸馏水补足5mL，-2 0 冷冻储存；取距盲肠端6 至14cm的结肠段，用4生理盐水洗净后用滤纸吸干，平铺，纵向截取部分结肠。2.4指标测定2.4.1大鼠的宏观表征观察并记录大鼠的皮毛色泽、大小便性状、精神状态及活动度等。分别于造模前、造模第10 天、造模第20天及给药结束后测定大鼠体重。2.4.2HE染色用4%多聚甲醛固定胃体和结肠，经过梯度酒精脱水、石蜡包埋，按厚度为4um切片，苏木素-伊红染光镜下观察胃组织和结肠组织的形态和病理改变2.4.3胃液游离酸度测定取每只大鼠稀释胃液各1ml，以酚酞为指示剂，用0.0 1mol/L的NaOH溶液滴定（溶液变为红色且2 s内不褪色即为滴定终点），记录消耗的NaOH体积（)并计算胃液游离酸度=x0.01/0.0510。2.4.4胃蛋白酶活性测定取每只大鼠稀释胃液2 0 0 uL置于EP管中，严格按照胃蛋白酶试剂盒步骤操作，在6 6 0 nm处测定吸光度，计算每毫升胃液在37 每分钟分解蛋白生成1ug氨基酸的酶量，即1个酶活力单位。胃蛋白酶活力计算公式：标准品浓度（50 g/mL）（测定OD值-对照OD值）-（标准OD值-空白OD值）反应液总体积(0.64mL）-取样量（0.0 4mL）-反应时间（10 min）。153胡小勤，等：黄芩、苍术对湿阻中焦证大鼠燥湿作用的性效关系第2 期2.4.5蛋白免疫印迹法(Westernblot)检测大鼠结肠组织中AQP3蛋白的表达取结肠组织匀浆后，按照试剂盒说明提取结肠蛋白，取上清液，用BCA试剂盒测定蛋白浓度。上样后进行电泳、转膜，封闭1.5h，加入AQP3一抗（1:10 0 0），4孵育过夜，TBST洗膜，加人相应的二抗（1:40 0 0 0），37摇床孵育1.5h。洗膜3次后使用ECL法显色，用ImageJ软件分析条带的灰度值，以GAPDH为内参，以目的蛋白条带灰度值与GAPDH条带灰度值比作为最终结果。2.5统计学处理采用SPSS22.0进行统计处理，所有数据采用均数+标准差(xs)表示。采用单因素方差分析组间差异，两两比较采用LSD法检验。以P0.05表示有统计学差异3结果3.1大鼠宏观表征的变化正常组的大鼠体重逐日递增，涨势前期明显，后期逐渐趋于平缓，活动正常，食欲良好，背毛光泽，大便正常，反应灵活，小便淡黄；模型组的大鼠造模第10 天体重显著下降，造模后期体重稍有增长但仍比造模前低；造模期间，大鼠倦怠懒动，喜蜷缩成堆，毛发晦暗无光泽，出现阴囊松驰下垂，饮食饮水量减少，大便稀，小便清；黄芩组与苍术组大鼠造模期间,症状和体征变化同模型组相似，给药第7 天，体重缓慢上升，饮食饮水量增加，精神状态有所好转3.2大鼠造模及给药后体质量的变化与正常组比较，造模前期各组大鼠体重差异不大，造模中后期正常组体重保持上升。由于造模期间对模型组和给药组采取相同的干预措施,所以与正常组比较,造模10 d和2 0 d后,模型组和给药组大鼠的体重均明显下降(P0.01)。给药7 d后,与空白组比较,模型组体重下降；与模型组比较,黄芩高、中、低剂量组和苍术高、中、低剂量组大鼠的体重均明显升高（P0.01）。表明湿阻中焦证大鼠体重下降趋势明显，黄芩和苍术均能有效改善大鼠食欲不振导致的体重下降的情况，见表1。表1大鼠体质量变化(S,n=8)Table 1Changes in body mass of rats(s,n=8)组别造模前造模第10 天造模第2 0 天给药第7 天正常组253.45 4.63332.32 26.84346.43 51.17331.45 50.07模型组258.28 17.21221.55 24.81*223.35 29.19*242.45 35.20黄苓高剂量组257.80 17.58219.15 19.77*227.72 18.49*310.57 19.79#黄苓中剂量组255.62 14.17216.72 16.57*224.90 23.44*310.07 24.57#黄芩低剂量组251.77 10.91216.88 6.00*235.78 7.95*318.55 10.34#苍术高剂量组251.05 10.52218.70 12.66*224.17 20.52*314.03 19.25#苍术中剂量组249.92 12.11213.18 12.73*229.42 12.59*324.48 16.05#苍术低剂量组252.75 12.13226.00 24.09*223.43 16.38*302.37 19.18#注：与正常组比较，*表示P0.05，*表示P0.01；与模型组比较，表示P0.05，表示P0.01。3.3大鼠病理改变3.3.1对大鼠胃黏膜病理学分析镜下可见正常组大鼠的胃黏膜结构层次清楚，无损伤，上皮细胞结构完整，腺腔整洁，黏膜层没有炎细胞浸润，黏膜腺体排列整齐，胃组织中未见明显病理形态学改变；模型组的黏膜固有层可见有较多的炎细胞浸润，无黏膜脱落、缺损、糜烂；黄芩低、中、高剂量组的黏膜固有层均有散在性微小炎症灶，无黏膜脱落、缺损、糜烂；苍术低、中、高剂量组的黏膜固有层均偶见微小炎症灶，无黏膜缺损、脱落、糜烂。HE染色结果表明：湿阻中焦证大鼠胃组织有炎症反应，黄芩和苍术均可减少炎症反应，见图1。1542023年海南师范大学学报（自然科学版）正常组模型组黄苓高剂量组黄芩中剂量组黄苓低剂量组苍术高剂量组苍术中剂量组苍术低剂量组图1湿阻中焦证大鼠胃组织病理切片（HEx100）Figure1Gastric histopathological sections of rats with focal syndrome of wet obstruction(HEx100)3.3.2对大鼠结肠黏膜病理学分析光镜下可见正常组大鼠的结肠黏膜极向明显，结构清晰，间质无充血水肿，肠腺规则；模型组的大鼠结肠黏膜有炎细胞浸润，无糜烂、溃疡；黄芩高剂量组的大鼠结肠黏膜见炎细胞浸润，而黄芩低、中剂量组的大鼠结肠黏膜均有少量炎细胞浸润；苍术低、高剂量组的大鼠结肠黏膜各层结构清晰，肠腺规则，极向明显，间质未见充血水肿，苍术中剂量组的大鼠结肠黏膜有少许散在炎细胞。HE染色结果表明：湿阻中焦证大鼠结肠组织有炎症反应，黄芩和苍术均可减少炎症反应，见图2。正常组模型组黄苓高剂量组黄芩中剂量组黄苓低剂量组苍术高剂量组苍术中剂量组苍术低剂量组图2湿阻中焦证大鼠结肠组织病理切片（HEx100）Figure 2Pathological sections of colonic tissues of rats with focal syndrome in wet resistance(HEx100)3.3.3胃液游离酸度测定与正常组比较,模型组胃液游离酸度降低(P0.05);苍术高、中、低剂量组胃液游离酸度均升高,差异有统计学意义(P0.05）。表明湿阻中焦证大鼠胃液中游离酸度降低，有炎症反应，黄芩和苍术均可升高胃液游离酸度，修复炎症，且苦温的苍术作用效果较苦寒的黄芩好，见表2。3.3.4胃蛋白酶活性测定与空白组比较,模型组胃蛋白酶活力减弱(P0.05）；苍术高、中、低剂量组胃蛋白酶活力均增强，差异有统计学意义（P0.05);黄芩中、低剂量组和苍术高、中、低剂量组均能显著降低结肠组织AQP3蛋白表达，差异有统计学意义（P0.01）。表明黄芩和苍术各剂量均能降低结肠AQP3蛋白表达，从而减少水的重吸收，体现了黄芩和苍术燥湿利水的功效，且苦温的苍术比苦寒的黄芩燥湿利水作用更强，提示药性效应和燥湿存在相关性，见表2、图3。表2黄芩、苍术对湿阻中焦证大鼠的胃液游离酸度、胃蛋白酶活力及结肠组织AQP3蛋白表达的影响(xS)Table2Effects of Scutellaria baicalensis and Rhizoma Atractylodis on gastric juice free acidity,middle Jiao syn-drome pepsin activity and AQP3 protein expression in colon tissue of rats with dampness obstructing(xs)组别胃液游离酸度（mmol/L,n=8)胃蛋白酶活力（U/mL，n=8）AQP3/GAPDH(n=3)正常组5.00 1.10233.99 1.130.87 0.14模型组3.30 0.70*158.95 2.60*0.83 0.08黄芩高剂量组3.90 1.00191.26 0.520.82 0.07黄芩中剂量组3.80 0.70187.61 1.290.39 0.03*#.2)黄苓低剂量组3.78 1.10184.47 1.610.35 0.14#.2)苍术高剂量组4.90 1.00#238.87 1.56#0.42 0.08#,2)苍术中剂量组4.70 1.10#222.68 0.80#0.43 0.13#,2)苍术低剂量组4.60 1.00#214.19 1.90#0.30 0.07#.2)注：与正常组比较，*表示P0.05；与模型组比较，表示P0.05，表示P0.01;与黄苓高剂量组比较，2 表示P0.01。ala2a3b1b2b3c1c2c340kD-GAPDH30kD-40kD-AQP330 kD-d1d2d3e1e2e3f1f2f340 kD-GAPDH30kD-40kD-AQP330kD-g1g2g3h1h2h340kD-GAPDH30kD-40kD-AQP330kD-a空白组;b模型组;c黄芩高剂量组;d黄芩中剂量组;e黄芩低剂量组;f苍术高剂量组；g苍术中剂量组;h苍术低剂量组图3各组大鼠结肠组织AQP3蛋白表达电泳图Figure3Electrophoresis of AQP3 protein expression in colon tissues of rats in each group4讨论中医认为外湿和内湿相结合是湿阻中焦证的致病原因。外湿主要是因为久居潮湿环境，或喜冷贪?，或汗出时受?风，或涉水淋雨等，体液排泄异常，湿困体表，不得宣发。内湿主要是因为喜食生冷、油腻肥厚之物，或情志不畅、愁苦忧思、伤及脾胃，或素体有虚、易受外感湿邪而诱发基础疾病，导致脾胃功能失常，水液运行阻滞12-13 等。三焦为全身水液代谢的通道，水道不利，水湿停聚而致湿阻。湿阻中焦证的病机复杂，主要病位在脾胃，但“中焦”还包括肝、心、肺、肾等内脏，且上、中、下三焦的病变相互关联。湿邪既是致病因素，同时也是病理产物，湿致气机郁滞，升降出人功能发生障碍，导致水道通调不畅，津液积聚而成湿4。湿1562023年海南师范大学学报（自然科学版）阻中焦证以全身困重倦怠、腹胀纳呆、胸闷皖痞、口黏苔腻为主要表现15。目前，湿阻中焦证模型的造模方法较为成熟，多采用内外因共同致“湿”的方法，内致湿热、寒湿体质，外部人工气候箱致湿热、寒湿环境，但是没有建立一个统一的评价标准。王琦越等将大鼠置于温度18 2 5、湿度90%的造模箱内，单日禁食并灌胃4冰水，双日投喂足够的饲料并给予猪油，连续2 0 d，发现大鼠出现大便黄、进食少、体重减轻等症状，符合湿阻中焦证的临床症状16 。徐雯等将大鼠置于深2 5cm、温度2 7 30的水中游泳15min，然后放置于高湿度的环境中单日灌胃猪油，双日灌胃蜂蜜，连续12 d,建立湿阻中焦证大鼠模型，发现大鼠胃以及十二指肠出现溃烂，胃黏膜损伤，大鼠进食少，活动力降低等症状，表明造模成功17 。本课题亦采用相似的造模方法，即通过饱时内服油脂、饥时灌胃冰水和外部寒湿环境作用2 0 d制备湿阻中焦证模型,且制备的湿阻中焦证模型主要偏重于寒和湿。而苦味具有 能燥、能泄、能坚 的作用,其中苦泄包括降泄、通泄、清泄3个方面，具有燥湿坚阴、泄降气逆、泻火存阴等作用；寒性中药多具有清热泻火、?肝息风、?血解毒、?血滋阴、泻热通便等功效,且多是针对热证所用；温性中药多具有祛风胜湿、燥湿健脾、发散风寒、温经通络、温中止痛的功效18 。本研究结果表明,大鼠出现与湿阻中焦证临床表现相似的症状,用黄芩、苍术治疗，可使湿阻中焦证大鼠的有关症状得到改善，且苦温的苍术比苦寒的黄芩作用效果更好，提示药性组合与药效具有一定的关联性。在现代医学上，尚没有明确的病症对应中医学上的湿阻中焦证,但研究发现慢性胃炎与湿阻中焦证的相关性最大。因此,在实验中参考了慢性胃炎的相关研究方法进行观察。徐雯等对湿阻中焦证大鼠胃肠形态观察发现胃肠黏膜均有炎细胞浸润，胃黏膜出现轻微水肿,结肠黏膜未见明显充血、水肿、溃疡及糜烂等组织病理学改变,对胃液酸度和胃蛋白酶进行测定,数据显示胃液酸度降低和胃蛋白酶活力减弱,存在胃动力不足的现象17 。因为在食物消化吸收过程中，通过胃肠运动可以运送、研磨食物，充分混合食物与消化液，从而转化为消化管壁易吸收的形式。胃肠运动的快慢对食物的消化吸收作用至关重要，其功能异常可能会直接导致模型动物出现摄食减少、体重下降等症状。因此，本实验通过制备湿阻中焦证模型后，,将胃肠功能作为一项重要检测指标,观察胃组织和结肠组织的形态和病理改变,并对胃液游离酸度和胃蛋白酶活力进行检测。实验结果表明，模型组大鼠的胃肠黏膜有较多的炎细胞浸润,无黏膜脱落、缺损、糜烂,黄芩和苍术均可减少炎症反应；模型组胃液游离酸度降低，胃蛋白酶活力减弱,黄芩和苍术均可升高胃液游离酸度,增强胃蛋白酶活力,且苍术的治疗效果较黄芩好,反证了苍术有除湿强脾、升阳益胃的作用，可兴奋胃肠平滑肌,增强胃肠蠕动。水液代谢影响着胃肠道的功能。近代研究表明,水通道蛋白AQPs与水代谢紊乱所致的临床症状密切相关19。近年来,水通道蛋白已被发现与人类的呼吸、消化、尿路和中枢神经系统的功能密切相关2 0 。现代研究认为，水通道蛋白（AQP)是一种特异性介导水转运的整合蛋白质,存在于多种器官和组织的细胞膜上，是水通过生物膜的主要方式2 1。目前已从哺乳动物中鉴定出13种AQP,即AQP012,统称水通道蛋白家族2-2 。水通道蛋白亚型在消化系统中高度表达2 4。目前已证实AQP1、A Q P2、A Q P3、A Q P4和AQP8在结肠中均有表达,其中AQP3主要分布于人类结肠和小肠的上皮细胞中,是结肠中表达量最大的AQPs,其参与自由水快速被动地跨生物膜转运是水分进出细胞的主要途径2 5。同时研究也进一步证实了肠道水吸收与结肠基底膜表面内皮细胞中AQP3表达有关，AQP3高表达可引起结肠黏膜水分再吸收增加，导致便秘，低表达可导致结肠黏膜重新吸收水分减少,导致腹泻或稀便2 6 。一些研究发现,AQP3阳性慢性浅表胃炎脾胃湿热症患者湿的表达显著高于阴性患者，这被认为与AQP3的水代谢密切相关，提示AQP3的异常表达可能是湿邪发生的机制之一2 7-2 8 。本实验研究中发现,与模型组比较,黄苓和苍术各剂量组均能降低结肠组织AQP3蛋白表达，说明AQP3可能是调节湿阻中焦证水液代谢的关键蛋白，有望成为临床治疗的相关靶点，有可能阐明燥湿药、化湿药、利水渗湿药等理湿类中药的药理作用；与黄芩高剂量组比较，黄芩中、低剂量组和苍术各剂量组均能显著降低结肠组织AQP3蛋白表达,差异显著(P0.01),说明苦温的苍术比苦寒的黄芩在湿阻中焦证模型中燥湿的效果更好，进一步说明药性组合与药效具有相关性。综上，以四气理论为指导，以具有燥湿功效的中药为切入点，通过观察苦寒燥湿的代表药黄芩和苦温燥湿的代表药苍术对湿阻中焦证的治疗作用的差异，结果发现苦温燥湿药苍术药效更好，说明中药在治疗某一证候的时候,其药效不仅与功效有关，也与药性有关。药效是最终的整体效应,功效是中药学的专有名157第2 期胡小勤，等：黄芩、苍术对湿阻中焦证大鼠燥湿作用的性效关系词，指某方面的作用。这里燥湿是功效，而治疗湿阻中焦证的作用，如对宏观表征、水通道蛋白表达的影响，是药效。黄芩和苍术燥湿功效的强弱还与其寒热药性有关，也就是说寒者热之，热者寒之,苦寒燥湿的药适合用于治疗湿热，苦温燥湿的药适合用于治疗湿阻中焦，因此苦温的苍术比苦寒的黄芩对湿阻中焦证的作用效果更好，与本实验结果一致。参考文献：1张旭彤，李生财，任彦彦，等.李生财论治湿阻中焦型慢性胃炎经验J.中国民间疗法,2 0 2 1,2 9(2):38-39,42.2张凯文，黄秀深，陈芳，等.平胃散对湿阻中焦证大鼠血糖水平的调控及对葡萄糖无氧酵解的影响J.时珍国医国药,2 0 18，29(12):2821-2824.3宋丹，魏文峰，张婕，等.黄苓有效成分抗支原体作用及机制的研究进展J.中华中医药学刊，2 0 2 3,41(0 4)：2 2 6-2 2 9.4张崇佩，罗雪晴，龚鹏飞，等.米油水漂苍术炮制前后入血成分的UPLC-Q-TOF-MS/MS分析J.中华中医药杂志，2 0 2 0,35(8):3854-3857.5国家药典委员会.中华人民共和国药典M.中国医药科技出版社,2 0 15.6杨旭，王琦越，黄秀深，等.基于水协同转运蛋白KCC1、K CC3、K CC4、NK CC1含量及Na+-K+-ATP酶活性变化研究湿阻中焦证的水液代谢机制J.辽宁中医杂志,2 0 18,45(3):6 2 7-6 30,6 7 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