DB41T2546-2023猪伪狂犬病净化技术规范.docx

ICS65.020.30CCSB 4341 河南省地方标准DB41/T 25462023猪伪狂犬病净化技术规范2023 - 10 - 31 发布2024 - 01 - 29 实施河南省市场监督管理局发 布前言本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由河南省农业农村厅提出并归口。 本文件起草单位：安阳市动物疫病预防控制中心、河南省动物疫病预防控制中心、林州市动物疫病预防控制中心。 本文件主要起草人：张保平、纪新花、刘光辉、赵胜杰、程俊贞、石永杰、张燕、石凯文、孙玉新、王英华、张艳兵、冯现明、刘院莉、申振华、王瑞红、李敏、段振华、魏晓瑞、安晓馀、王永强、李卫华、马会普。 猪伪狂犬病净化技术规范1 范围本文件规定了种猪场和规模猪场猪伪狂犬病净化、效果维持、生物安全及档案管理等的操作规范。本文件适用于使用猪伪狂犬病基因缺失疫苗免疫预防的种猪场和规模猪场猪伪狂犬病的净化。 2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 17823 集约化猪场防疫基本要求GB/T 17824.1 规模猪场建设 GB/T 17824.2 规模猪场生产技术规程GB/T 18596 畜禽养殖业污染物排放标准GB/T 18641 伪狂犬病诊断方法 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范NY/T 678 猪伪狂犬病免疫酶试验方法 DB41/T 1753 标准化商品猪场建设 DB41/T 2064 养猪场防控非洲猪瘟生物安全技术规范DB41/T 2065 非洲猪瘟消毒技术规范 中华人民共和国农业部第67号令.畜禽标识和养殖档案管理办法.2006年 农业部.农医发201725号.病死及病害动物无害化处理技术规范.2017年 3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。 动物疫病净化有计划地在特定区域或场所对特定动物疫病，通过监测、检验检疫、隔离、扑杀、销毁等一系列技术和管理措施，最终达到在该范围内动物个体不发病和无感染状态的根除消灭疫病病原的过程，目的是清除可传染的病原因子，从而达到并维持动物个体和群体健康。 猪伪狂犬病基因缺失疫苗利用基因工程技术敲除猪伪狂犬病毒基因组中负责毒力的基因中的某一片段（gE、gI、gK、TK）， 使其成为基因缺失缺损病毒株，利用病毒基因缺失缺损株所制成的一系列单（gE）/双（gE和gI）/三基因（gE、gI和TK）或多基因（gE、gI、gK和TK）缺失的疫苗。 猪伪狂犬病 gE 抗体猪伪狂犬病野毒感染宿主产生的识别gE蛋白的特异性抗体，简称gE抗体。 猪伪狂犬病 gB 抗体猪伪狂犬病毒疫苗免疫或野毒感染宿主产生的识别gB蛋白的特异性抗体，简称gB抗体。 免疫净化场是指在实施猪伪狂犬病疫苗免疫的养殖场或一定区域内，通过定期检测，猪群gE抗体全部阴性，gB 抗体阳性率90%，且2年之内无临床病例发生。 非免疫净化场是指在某一限定地区或养殖场内，未进行猪伪狂犬病疫苗免疫，而是根据该病的流行病学调查和疫病监测结果，及时发现并淘汰各种形式的感染动物，使该区域或猪群中无猪伪狂犬病发生和感染的状态。 假定非免疫净化猪群对猪伪狂犬病未免疫的猪场，通过随机抽样，猪伪狂犬病原和gE抗体全部为阴性的猪群。 假定净化猪群猪伪狂犬病野毒感染低风险场，监测发现gE抗体为阳性的种猪群，全部淘汰后建立的净化猪群。 低风险场猪伪狂犬病野毒感染率1%的猪场。 中风险场猪伪狂犬病野毒感染率介于1%10%的猪场。 高风险场猪伪狂犬病野毒感染率10%的猪场。 4 净 化免疫净化程序4.1.1 猪群基本条件4.1.1.1 自繁自养，未免疫或连续 3 年使用猪伪狂犬病基因缺失疫苗免疫的猪群。 4.1.1.2 新建规模化猪场，直接从猪伪狂犬病净化场引进种猪，按照 GB/T 17824.2 规定进行为期 30 d以上的隔离，并且全部检测，猪伪狂犬病病原和 gE 抗体检测全部为阴性。 4.1.2 本底调查4.1.2.1 采样比例种群采样比例详见附录A。样品采集、保存方法按NY/T 541的规定执行。 4.1.2.2 抗体检测猪伪狂犬病毒gB抗体检测采用ELISA方法，按GB/T 18641的规定执行。猪伪狂犬病毒gE抗体检测采用gE-ELISA方法，按NY/T 678的规定执行。根据本底调查的检测结果综合评定，分别划分为猪伪狂犬病低风险场、中风险场和高风险场。 4.1.3 猪群免疫4.1.3.1 免疫程序选择有农业农村部核发兽药产品批准文号的猪伪狂犬病基因缺失疫苗。猪群免疫程序详见附录B。 4.1.3.2 免疫评价中风险场和高风险场每季度1次，低风险场每半年1次的频次进行检测。血清学检测gE和gB抗体。病原学检测按GB/T 18641规定，检测猪伪狂犬病毒核酸。采样比例详见附录A。 4.1.4 阳性猪处置4.1.4.1 低风险场gE抗体阳性猪全部淘汰后，建立假定净化猪群。4.1.4.2 中风险场和高风险场非免疫净化程序4.2.1 条件要求4.2.1.1 已达免疫净化标准的猪场，连续 2 年无临床病例，gB 抗体合格率90%，猪伪狂犬病原或 gE抗体检测结果连续 2 年阴性。 4.2.1.2 正常运营且未免疫猪场，无临床病例，同时连续随机抽样，猪伪狂犬病原和 gE 抗体检测均为阴性。 4.2.1.3 从猪伪狂犬病净化场引进种猪，按 GB/T 17824.2 规定进行为期 30 d 以上的隔离并全部检测， 病原学和 gE 抗体检测均为阴性。 4.2.2 猪群监测4.2.2.1 采样比例详见附录C。 4.2.2.2 检测频次种公猪每半年检测1次；种母猪每季度检测1次，后备种猪混群前检测1次，引进种猪隔离期和混群前各检测1次；后代猪每月检测1次。 4.2.2.3 检测方法按照本文件4.1.3.2执行。 4.2.3 阳性猪处置gE抗体阳性的种公猪和后备种猪，全部淘汰；gE抗体阳性的种母猪或生产母猪，逐步淘汰，采取“免疫-检测-淘汰”34轮循环，当达到低风险场标准时，按4.1.4.1执行。 4.2.3.1 种猪 gE 抗体阳性或猪伪狂犬病毒核酸阳性者，做淘汰处理。 4.2.3.2 后代猪 gE 抗体阳性或猪伪狂犬病毒核酸阳性者，做淘汰处理，并追溯对应的亲本母猪、公猪进行复检，检测阳性者扑杀。 5 效果维持 持续免疫免疫净化场按4.1.3.1的规定执行，持续做好猪伪狂犬病的免疫预防。 持续监测5.2.1 假定净化猪群建立后，持续监测中发现猪感染或临床发病，应重新对种猪群开展净化，按附录C 执行。 5.2.2 假定非免疫净化猪群建立后，持续监测过程中，一旦出现阳性猪，立即采样复检。如复检结果仍为阳性，则立即进行扑杀。同时对全群猪进行采样检测，病原检测与 gE 抗体检测均为阴性的猪群， 继续执行非免疫净化路线，按附录 C 执行。 净化评价5.3.1 通过 2 年的持续监测，种猪群 gB 抗体合格率90%，gE 抗体阴性；规模猪场各类种群 gB 抗体合格率80%，gE 抗体阴性；且两年以上无临床病例发生，即达到免疫净化状态。 5.3.2 未免疫或已达免疫净化标准的猪场，种猪群抗体阴性，规模猪场各类种群抗体阴性，且停止免疫两年以上，无临床病例，即达到非免疫净化状态。 5.3.3 种猪场评估检测方法与抽样数量详见附录 D；规模场详见附录 E。 6 生物安全 日常消毒6.1.1 人员消毒按 GB/T 17823 的相关规定执行。 6.1.2 设立一二级洗消中心，并对内部、外部车辆全面清洗消毒。 6.1.3 所有物品经消毒通道严格消毒后方可进入场区。 生物防控6.2.1 猪场结构布局应按GB/T 17824.1 执行。 6.2.2 猪场场址选择、建设规模和内容、建筑与结构应按 DB41/T 1753 执行。严禁边生产边建设。 6.2.3 建立科学严格的引种和留种管理制度，引种按照 GB/T 17824.2 规定执行。 6.2.4 宜建设全封闭性猪舍，配备防鸟防鼠防野生动物进入的设施设备，严禁饲养犬猫等动物。 6.2.5 定期驱虫，搞好灭鼠、灭蚊蝇和灭吸血昆虫工作。 无害化处理6.3.1 病死猪及母猪所生产的弱仔猪、死胎、流产胎儿、胎衣和病猪污染的垫料、饲料等按病死及病害动物无害化处理技术规范进行无害化处理。由专人处理，并做好记录。 6.3.2 盛放尸体、胎衣的器具应坚实、防渗漏，符合生物安全要求。 6.3.3 禁止未经处理的粪污直接进入农田。场内的污水排放应符合 GB/T 18596 相关规定。 其它疫病防控6.4.1 按国家动物疫病强制免疫计划要求，做好其它疫病免疫预防工作，抗体合格率达到国家规定要求。 6.4.2 按照 DB41/T 2064 和 DB41/T 2065 认真做好非洲猪瘟防控工作。 7 档案管理按照畜禽标识和养殖档案管理办法规定执行，档案管理包括但不限于引种、生产、兽药使用、诊疗、免疫、检测、消毒、无害化处理等记录管理。 档案管理规范，应保存 3 年以上。 AA 附 录 A（资料性）免疫净化阶段猪伪狂犬病监测计划表推荐免疫净化阶段猪伪狂犬病监测计划表见表A.1。 表A.1 免疫净化阶段猪伪狂犬病监测计划表 种群 采样比例 监测频率 监测内容 备注 生产母猪 25% 1 次/季度 gB 抗体gE 抗体 确保一年内，假定阴性群生产母猪普检完毕。有条件的养殖场，可一次性 100%检测，缩短净化周期 引进种猪 100% 混群前 1 次；混群后纳入生产母猪/种公猪监测范畴 gE 抗体gB 抗体 gE 抗体阴性，gB 抗体合格方可混群饲养。如外购精液，则应确保供体 gE 抗体阴性或精液伪狂犬病病原学阴性 后备猪群 100% 混群前 1 次；混群后纳入生产母猪/种公猪监测范畴 gE 抗体 gB 抗体 gE 抗体阴性，gB 抗体合格方可混群饲养 种公猪 100% 1 次/半年 gE 抗体gB 抗体 gE 抗体阴性，gB 抗体合格方可继续留用 育肥猪 25% 与生产母猪监测（采样）同步 gE 抗体 gB 抗体 10 周龄以上育肥猪，了解育肥猪群免疫抗体水平，及时调整免疫程序；了解是否存在伪狂犬病野毒循环 BB 附 录 B（资料性）猪伪狂犬病疫苗免疫程序推荐猪伪狂犬病疫苗免疫程序见表B.1。 表B.1 猪伪狂犬病疫苗免疫程序种群 疫苗种类 免疫途径 免疫日龄 商品猪或种仔猪 猪伪狂犬病基因缺失活疫苗 滴鼻 2 肌肉注射 45 后备种猪 猪伪狂犬病基因缺失活疫苗 肌肉注射 130、160 基础母猪 猪伪狂犬病基因缺失活疫苗 肌肉注射 产前 4 周；或每年普免 3 次 CC 附 录 C（资料性）净化维持性阶段猪伪狂犬病监测计划表推荐净化维持性阶段猪伪狂犬病监测计划表C.1。 表C.1 净化维持性阶段猪伪狂犬病监测计划表种群 采样比例 监测频率 监测内容 备注 生产母猪 30 头以上 1 次/季度 gE 抗体 30 头以上 1 次/季度 gB 抗体 了解生产母猪群免疫抗体水平，及时调整免疫程序 引进种猪 100% 混群前 1 次；混群后纳入生产母猪/种公猪监测范畴 gE 抗体gB 抗体 gE 抗体阴性，gB 抗体合格方可混群饲养。如外购精液，则应确保供体 gE 抗体阴性或精液伪狂犬病病原学阴性 后备猪群 100% 混群前 1 次；混群后纳入生产母猪/种公猪监测范畴 gE 抗体gB 抗体 gE 抗体阴性，gB 抗体合格方可混群饲养 种公猪 100% 1 次/半年 gE 抗体gB 抗体 gE 抗体阴性，gB 抗体合格方可继续留用 育肥猪 30 头以上 与生产母猪监测（采样）同步gE 抗体gB 抗体 10 周龄以上育肥猪，了解育肥猪群免疫抗体水平，及时调整免疫程序；了解是否存在伪狂犬病野毒循环 DD 附 录 D（资料性）种猪场猪伪狂犬病净化评估抽样检测方法推荐种猪场猪伪狂犬病净化评估抽样检测方法见表D.1和D.2。 表D.1 免疫净化评估实验室检测方法检测项目检测方法抽样种群抽样数量样本类型抗体检测 gE-ELISA 种公猪 生产公猪存栏 50 头以下，100%采样； 生产公猪存栏 50 头以上，按照证明无疫公式计算（CL=95%，P=3%猪血清 生产母猪后备种猪 按照证明无疫公式计算（CL=95%， P=3%）；随机抽样，覆盖不同猪群 猪血清 抗体检测 gB-ELISA 生产母猪 按照预估期望值公式计算 (CL=95%，P=90%，e=10%)猪血清 后备种猪 按照预估期望值公式计算 (CL=95%，P=90%，e=10%)猪血清 表D.2 非免疫净化评估实验室检测方法检测项目检测方法抽样种群抽样数量样本类型抗体检测 gE-ELISA 种公猪 生产公猪存栏 50 头以下，100%采样； 生产公猪存栏 50 头以上，按照证明无疫公式计算（CL=95%，P=3%） 猪血清 生产母猪 后备种猪 按照证明无疫公式计算（CL=95%， P=3%）；随机抽样，覆盖不同猪群 猪血清 注：CL是置信水平；P是最小预期流行率 EE 附 录 E（资料性）规模场净化评估抽样检测方法推荐规模场净化评估抽样检测方法见表E.1和 E.2。 表E.1 免疫净化评估实验室检测方法检测项目检测方法抽样种群抽样数量样本类型抗体检测 gE-ELISA 各类种群 按照证明无疫公式计算（CL=95%，P=3%）；随机抽样，覆盖不同猪群 猪血清 抗体检测 gB-ELISA 各类种群 按照预估期望值公式计算(CL=95%，P=80%，e=10%)；随机抽样，覆盖不同猪群 猪血清 表E.2 非免疫净化评估实验室检测方法检测项目 检测方法 抽样种群 抽样数量 样本类型 抗体检测 gE-ELISA 各类种群 按照证明无疫公式计算（CL=95%，P=3%）；随机抽样，覆盖不同猪群 猪血清 注：CL是置信水平；P是最小预期流行率