γ-干扰素释放试验在结核病诊断中的价值.pdf

结核与肺部疾病杂志2 0 2 3年8 月第4卷第4期JTubercLungDis，A u g u s t2 0 2 3，V o l.4，No.4.313论著-干扰素释放试验在结核病诊断中的价值宋翌琰马丽玲陈慧杭茵陈苏芳徐俊驰吴敏娟胥萍【摘要】目的：探讨-干扰素释放试验（interferon-release assays，IG RA）在结核病诊断中的应用价值。方法：采用回顾性研究方法，选取2 0 2 2 年7 一10 月苏州市第五人民医院结核病门诊就诊的具有结核病相关症状和(或)体征的疑似结核病患者作为研究对象，共331例。所有研究对象均行IGRA检测和痰涂片检测。以临床综合诊断结果为参照，评价IGRA和痰涂片对结核病的诊断效能。结果：331例研究对象中，199例（6 0.12%）确诊为结核病，其中，IGRA阳性检出率为8 3.92%（16 7/199），明显高于痰涂片的阳性检出率2 1.6 1%（43/199),差异有统计学意义（x=155.000,P0.01);陈旧性肺结核患者IGRA检测阳性率为6 6.6 7%（10/15)，明显高于痰涂片阳性检出率6.6 7%(1/15)，差异有统计学意义（x=11.630,P0.01)；活动性肺结核患者IGRA阳性检出率为83.83%（140/16 7)，明显高于痰涂片的阳性检出率2 4.55%（41/16 7)，差异有统计学意义（x=118.200,P0.01）。I G RA 检测其他呼吸道疾病患者的阳性检出率为31.8 2%（42/132），明显低于检测结核病患者的阳性检出率，差异有统计学意义（x=92.570,P0.01)。以临床综合诊断结果为参考，IGRA检测结核病的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为8 3.92%（16 7/199）、6 8.18%（90/132）、7 9.90%（16 7/2 0 9）、7 3.7 7%（90/12 2)和7 7.6 4%（2 57/339)；IGRA和痰涂片联合检测结核病的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为8 7.44%（17 4/199）、6 0.6 1%（8 0/132）、7 6.99%（17 4/2 2 6）、7 6.19%（8 0/10 5）和7 6.7 4%（2 54/339）。结论：IGRA对结核病具有较好的辅助诊断价值。【关键词】干扰素类；结核；诊断，鉴别；回顾性研究【中图分类号】R52；R8 2 5.2Value of interferon-release assays in the diagnosis of tuberculosis Song Yiyan,Ma Liling,Chen Hui,Hang Yin,Chen Sufang,Xu Junchi,Wu Minjuan,Xu Ping.Department of Clinical Laboratory,Infectious Disease HospitalAffiliated to Soochow University/The Fifth Peoples Hospital of Suzhou,Jiangsu Province,Suzhou 215131,ChinaCorresponding author:Xu Ping,Email:Abstract)Objective:To explore the application value of interferon-release assays(IGRA)in the diagnosisof tuberculosis.Methods:A retrospective study was conducted in 331 suspected tuberculosis patients withtuberculosis related symptoms and(or)signs from the tuberculosis clinic of the Fifth Peoples Hospital of Suzhoufrom July to October 2022.All the subjects underwent IGRA testing and sputum smear testing.The diagnosticefficacy of IGRA and sputum smear for tuberculosis was evaluated by referring to the results of clinicalcomprehensive diagnosis.Results:Of the 331 subjects,199(60.12%)were diagnosed as tuberculosis,of which,the positive rate of IGRA was 83.92%(167/199),significantly higher than that of sputum smear(21.61%(43/199),x=155.000,P0.01);the positive rate of IGRA detection in patients with prior pulmonarytuberculosis was 66.67%(10/15),which was significantly higher than that of sputum smear(6.67%(1/15),x=11.630,P0.01);the positive detection rate of IGRA in active pulmonary tuberculosis patients was 83.83%(140/167),which was significantly higher than that of sputum smear(24.55%(41/167),x=118.200,P0.01).The positive detection rate of IGRA in patients with other respiratory diseases was 31.82%(42/132),which was significantly lower than that in patients with tuberculosis(x?=92.570,P0.01).Taking the clinicalcomprehensive diagnosis results as reference,the sensitivity,specificity,positive predictive value,negativepredictive value and accuracy of IGRA in detecting tuberculosis were 83.92%（16 7/199),6 8.18%(90/132),开放科学（资源服务）标识码（OSID)的开放科学计划以二维码为入口，提供丰富的线上扩展功能，包括作者对论文背景的语音介绍、该研究的附加说明、与读者的交互问答、拓展学术圈等。读者“扫一扫”此二维码即可获得上述增值服务。doi:10.19983/j.issn.2096-8493.20230044基金项目：苏州市重点学科检验医学（SZXK201814)；苏州市不明病原体感染性疾病诊疗重点实验室（szs2020311)；苏州市科技计划项目（SYS2020191，K JXW 2 0 2 0 0 49,SK JY2 0 2 1138,SLJ2 0 2 10 17)作者单位：苏州市第五人民医院/苏州大学附属传染病医院检验中心，苏州2 15131通信作者：背萍，Email：57 331148 5 q q.c o m结果.31479.90%(167/209),73.77%（90/12 2)a n d 7 7.6 4%（2 57/339)r e s p e c t i v e l y;t h e s e n s i t i v i t y,s p e c i f i c i t y,p o s i t i v epredictive value,negative predictive value and accuracy of IGRA and sputum smear in parallel detection oftuberculosis were 87.44%(174/199),60.61%（8 0/132),7 6.99%(17 4/2 2 6),7 6.19%（8 0/10 5)a n d 7 6.7 4%(254/339),respectively.Conclusion:IGRA has good auxiliary diagnostic value for tuberculosis.Key words Interferons;Tuberculosis;Diagnosis,differential;Retrospective studiesFund program Key Discipline of Suzhou-Laboratory Medicine(SZXK201814);Suzhou Key Laboratoryof Diagnosis and Treatment of Infectious Diseases with Unknown Pathogens(szs2020311);Suzhou Science andTechnologyProject(SYS2020191,KJXW2020049,SKJY2021138,SLJ2021017)临床诊断结核病上，抗酸杆菌染色镜检和培养是重要指标。但是，抗酸杆菌染色镜检的阴性率高达50%以上，敏感度较低；分枝杆菌培养则需要花费至少2 周时间才能得到结果。因此，应寻找更加快速和高效的结核病诊断方法。-干扰素释放试验(interferon-release assays,IGRA)可快速定量检测外周血中单核细胞在结核特异性抗原刺激下释放干扰素的水平17。笔者回顾性分析了2 0 2 2 年7 一10月于苏州市第五人民医院结核病门诊就诊的331例行IGRA检测的疑似结核病患者的资料,以临床综合诊断结果为参照,探究 IGRA检测对结核病的临床诊断价值。对象和方法一、研究对象采用回顾性研究方法，选取2 0 2 2 年7 一10 月苏州市第五人民医院结核病门诊就诊的具有结核病相关症状和(或)体征的疑似结核病患者作为研究对象，共331例，其中，男性2 16 例（6 5.2 6%），女性115例（34.7 4%）；年龄范围为17 8 7 岁。所有患者均行IGRA检测和痰涂片检测。二、检测方法1.IGRA检测：采用郑州安图生物工程股份有限公司生产的结核分枝杆菌特异性细胞免疫反应检测试剂盒（磁微粒化学发光法）。将10 0 l阴性对照培养液(N)、阳性对照培养液（P)和测试培养液（T)加至细胞培养板相应孔内。应用无菌肝素锂抗凝真空采血管收集至少4ml全血样本,轻柔颠倒采血管35次后，加入到细胞培养板相应孔内，1.0 ml/孔，盖上培养板盖子，37 培养16 2 4h，静置1min，吸取每个细胞培养板孔中的上清，进行-干扰素(interferon-,IFN-)检测。2.痰涂片：采用姜-尼染色液，参照痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册中的标准化操作程序结核与肺部疾病杂志2 0 2 3年8 月第4卷第4期JTubercLungDis，A u g u s t2 0 2 3，V o l.4，No.43.临床综合诊断：依据WS196一2 0 17 结核病分类,活动性肺结核指具有结核病相关的临床症状和体征,结核分枝杆菌病原学、病理学、影像学等检查有活动性结核病的证据，且病变发生在肺、气管、支气管和胸膜等部位；肺外结核指结核病变发生在肺以外的器官和部位，如淋巴结(除外胸内淋巴结)、骨、关节、泌尿生殖系统、消化道系统、中枢神经系统等部位，肺外结核按照病变器官及部位命名；陈旧性肺结核指无活动性结核病相关临床症状和体征，细菌学检查阴性，影像学检查符合钙化病灶（孤立性或多发性）、索条状病灶（边缘清晰）、硬结性病灶、净化空洞、胸膜增厚、粘连或伴钙化中的一项或多项表现，并排除其他原因所致的肺部影像改变。三、统计学处理采用Graphpad Prism 5软件对数据进行统计分析。计数资料以“百分率（%)”描述，组间差异的比较采用检验，以P0.05为差异有统计学意义。以临床综合诊断结果为参考，分析IGRA和痰涂片检测结核病的效能，各指标计算公式：敏感度=真阳性数/（真阳性数十假阴性数)X100%，特异度=真阴性数/（真阴性数十假阳性数)X100%，阳性预测值=真阳性数/（真阳性数十假阳性数）10 0%，阴性预测值=真阴性数/（真阴性数十假阴性数）10 0%，准确度=（真阳性数十真阴性数）/总例数10 0%。一、IGRA检测结果331例研究对象中，199例（6 0.12%）确诊为结核病,其中,IGRA检测阳性16 7 例，阳性检出率为83.92%132例（39.8 8%）为其他呼吸道疾病患者，包括非结核分枝杆菌病、肺脓肿、肺炎、急性上呼吸道感染、支气管扩张伴感染、支气管炎、支气管炎合并肺炎、除结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌以外病进行检测。结核与肺部疾病杂志2 0 2 3年8 月第4卷第4期JTubercLungDis，A u g u s t 2 0 2 3，V o l.4，No.4原菌引起的肺部感染、肺部影像学存在阴影，其中，IGRA检测阳性42 例，阳性检出率为31.8 2%。IGRA对结核病的阳性检出率明显高于其对其他呼吸道疾病的阳性检出率，差异有统计学意义（=92.570,P0.01)。19 9 例结核病患者中，陈旧性肺结核患者IGRA阳性检出率为6 6.6 7%（10/15)，明显高于IGRA检测其他呼吸道疾病的阳性检出率，差异有统计学意义（=7.155,P=0.008)；活动性肺结核患者IGRA阳性检出率为8 3.8 3%（140/16 7)，明显高于IGRA检测其他呼吸道疾病的阳性检出率，差异有统计学意义（x=83.740,P0.01)。具体见表1。二、痰涂片检测结果199例结核病患者中，痰涂片阳性检出率为21.61%（43/199），明显低于IGRA阳性检出率，差异有统计学意义（x=155.000,P0.01)；陈旧性肺结核患者中，痰涂片阳性检出率为6.6 7%（1/15）,明显低于IGRA阳性检出率，差异有统计学意义（=11.630,P0.01)；活动性肺结核患者中，痰涂片阳性检出率为2 4.55%（41/16 7)，明显低于IGRA 阳性检出率，差异有统计学意义（x=118.200,P0.01);肺外结核患者IGRA阳性检出率明显高于痰涂片阳性检出率，差异有统计学意义(x=16.000,P0.01)。132 例其他呼吸道疾病患者中，痰涂片阳性检出率为10.6 1%（14/132），明显低于IGRA阳性检出率，差异有统计学意义（x=17.770,P0.01)。具体见表2。三、检测效能以临床综合诊断结果为参考,IGRA 检测结核病的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为8 3.92%（16 7/199）、6 8.18%（90/132）、79.90%（16 7/2 0 9)、7 3.7 7%（90/12 2)和7 7.6 4%（2 57/339)；痰涂片检测结核病的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为2 1.6 1%（43/199）、8 9.39%（118/132）、7 5.44%（43/57）、43.07%(118/274)和48.6 4%（16 1/339)。将2 种方法联合检测获得的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和准确度分别为8 7.44%（17 4/199）、60.61%（8 0/132）、7 6.99%（17 4/2 2 6）、7 6.19%（8 0/10 5)和7 6.7 4%（2 54/339）。具体见表3。315表1331例研究对象干扰素释放试验检测情况阳性阳性检出患者类型例数例数率(%)结核病199陈旧性肺结核15活动性肺结核167肺外结核8脊柱结核2胸椎结核1泌尿系统结核1颈部淋巴结结核1右腋下淋巴结结核1腹腔结核1结核性脑脊髓炎1肺结核合并肺外结核9合并骨结核1合并支气管和纵隔淋巴结结核3合并泌尿系统结核1合并纵隔淋巴结结核1合并脊柱结核1合并喉结核1合并阴茎结核1其他呼吸道疾病132非结核分枝杆菌病39肺部感染57肺部阴影5肺肿1肺炎11急性上呼吸道感染5支气管扩张伴感染2支气管炎11支气管炎合并肺炎1表2 331例研究对象痰涂片检测情况阳性阳性检出患者类型例数例数率(%)结核病199陈旧性肺结核15活动性肺结核167肺外结核81671014082111111913111114282510410214321.6116.674124.5500.0083.9266.6783.838/82/21/11/11/11/11/11/19/91/13/31/11/11/11/11/131.8220.5143.861/50.0036.361/50.0018.181/1.316肺结核合并肺外结核合并骨结核合并支气管和纵隔淋巴结结核合并泌尿系统结核合并纵隔淋巴结结核合并脊柱结核合并喉结核合并阴茎结核其他呼吸道疾病非结核分枝杆菌病肺部感染肺部阴影肺脓肿肺炎急性上呼吸道感染支气管扩张伴感染支气管炎支气管炎合并肺炎IGRA采用酶联免疫吸附或酶联免疫斑点方法检测方法其他呼吸道疾病干扰素释放试验阳性阴性痰涂片阳性阴性联合检测阳性（至少1种方法阳性）阴性（2 种方法均阴性）注a：包括肺结核和肺外结核。敏感度=真阳性数/真阳性数十假阴性数）10 0%，特异度一真阴性数/（真阴性数十假阳性数）X100%，阳性预测值真阳性数/（真阳性数十假阳性数）X100%，阴性预测值=真阴性数/（真阴性数十假阴性数）10 0%，准确度=（真阳性数十真阴性数)/总例数10 0%结核与肺部疾病杂志2 0 2 3年8 月第4 卷第4 期JTubercLungDis，A u g u s t2 0 2 3，V o l.4，No.4续表2定量检测全血或外周血单核细胞在结核分枝杆菌特阳性阳性检出患者类型例数例数率(%)91103011101010101321439125725010110502011010讨 论表3干扰素释放试验和痰涂片对结核病的检测效能临床综合诊断（例）结核病167324315617425异性抗原刺激下释放 IFN-的水平,用于结核病的辅助诊断2 。刘书邑和黄美颖3 研究发现,IGRA1/9在儿童结核病诊断中敏感度、特异度和准确度都较0.00高，且受卡介苗接种影响较小。谢绍斌等4 研究发0.00现,IGRA联合结核抗体检测对结核病检测具有敏1/1感度高、阳性预测值高、特异度高、阴性预测值高、准0.00确率高的优点，可提高疾病检出率，值得临床推广。其他结核病实验室诊断方法中的分子检测技术包括0.00TB-DNA PCR、T B-RNA PC R 和 GeneXpert MTB/0.00RIF检测等，与传统痰分枝杆菌培养法比较，这些分0.00子检测技术不仅缩短了诊断时间，而且在敏感度和10.61特异度上均有优势5。血浆结核分枝杆菌游离30.77DNA检测对结核病的诊断也有重要意义6 。此外，3.51分子检测技术中的交叉引物扩增法和恒温核酸扩增0.00荧光检测法检测痰标本快速、简便，且在特异度和敏0.00感度上与GeneXpertMTB/RIF相似,更适用于基0.00层实验室对肺结核的检测7。非结核分枝杆菌肺病诊断中，研究显示PCR-限制性片段长度多态性分析0.00法检测 hsp65 和groES效果较好8 。结核病的诊断0.00技术正朝着高敏感度、高特异度，以及更加经济、快0.00捷的方向不断发展。0.00本研究中,IGRA在结核病患者中的阳性检出率为8 3.9 2%,特别是对肺外结核和肺外结核合并肺结核的阳性检出率均为10 0.0 0%，该结果与Ji等9 和Lv等10 1的研究结果一致;痰涂片的阳性检敏感度特异度(%）(%)83.9268.184290141185280阳性预测值阴性预测值准确度(%）(%)79.9073.7721.6189.3987.4460.61(%)77.6475.4443.0776.9976.1948.6476.74结核与肺部疾病杂志2 0 2 3年8 月第4 卷第4 期JTubercLungDis，A u g u s t2 0 2 3，V o l.4，No.4出率为2 1.6 1%，对肺外结核和肺外结核合并肺结核的检测阳性率分别为0 和11.11%,提示IGRA有利于肺结核和肺外结核的及时诊断。但是，本研究入组的肺外结核患者较少，后期需要进一步增加样本量进行更深入研究。此外，IGRA在检测敏感度、阳性预测值、阴性预测值和准确度上均高于痰涂片，且当将两种方法联合检测时，敏感度和阴性预测值进一步提高。综上，外周血IGRA对结核病检测具有敏感度高、特异度高和检测快速等优点，能满足临床快速诊断的需要，在临床诊断结核病中具有较好的推广价值。利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突作者贡献宋翌琰：数据整理、统计学分析、论文撰写；马丽玲、陈慧、杭茵和陈苏芳：实验检测、数据整理；徐俊驰和吴敏娟：研究指导；胥萍：研究指导、论文修改1尹美玲，李明，崔花芹，等结核干扰素释放试验在结核病诊断中的价值.临床输血与检验，2 0 19，2 1（6）：58 9-59 1.doi：10.3969/j.issn.1671-2587.2019.06.009.2 王华，甄拴平，高涛。结核感染T细胞干扰素释放试验(TB-IGRA)在结核病诊断中的应用临床医学研究与实践，.317.2018,3(25):97-98.doi:10.19347/ki.2096-1413.201825047.3刘书邑，黄美颖干扰素释放试验在儿童结核病诊断中的价值黔南民族医专学报，2 0 2 0，332）：12 2-12 4.4 谢绍斌，陈建仁，吴修宇结核T细胞干扰素释放试验联合结核抗体检测用于结核病诊断的临床价值。实用医技杂志，2022，2 9（6):6 30-6 33.d o i:10.19 52 2/j.c n k i.16 7 1-50 9 8.2022.06.021.5彭远远，王庆，徐东芳3种分子检测技术在结核病实验室诊断中的应用评价中国社区医师，2 0 18，34（31)：9 7，9 9.doi：10.3969/j.issn.1007-614x.2018.31.060.6 韩冰血浆结核分枝杆菌游离DNA检测对结核病诊断价值的研究广州：南方医科大学，2 0 2 07 王少华，郑丹薇，朱岩坤，等两种恒温扩增分子检测法与实时荧光定量核酸扩增法对肺结核诊断价值的比较中华结核和呼吸杂志，2 0 18，4 1（2）：10 5-110.doi:10.3760/cma.j.issn.1001-0939.2018.02.007.8 章洁，郭秋萍.PRA法检测hsp65和groES在非结核分枝杆菌肺病诊断中的价值国际检验医学杂志，2 0 19，4 0（17）：2112-2115,2119.doi:10.3969/j.issn.1673-4130.2019.17.015.9 Ji L,Lou YL,Wu ZX,et al.Usefulness of interferon-release assay for the diagnosis of sputum smear-negativepulmonary and extra-pulmonary TB in Zhejiang Province,China.Infect Dis Poverty,2017,6(1):121.doi:10.1186/$40249-017-0331-1.1o Lv D,Liu Y,Guo F,et al.Combining interferon-release参考文献assays with lymphocyte enumeration for diagnosis of Mycobac-terium tuberculosis infection.J Int Med Res,2020,48(6):300060520925660.doi:10.1177/0300060520925660.（收稿日期：2 0 2 3-0 3-15；网络出版日期：2 0 2 3-0 7-13）(本文编辑：李敬文）