蜂毒疗法探究.doc

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蜂毒是蜂产品中最珍贵的天然产品，也是蜂疗的最重要组成部分，其医疗保健与临床应用价值极高。在讨论它的医疗作用与临应用之前，我们先介绍蜜蜂毒的采集及它主要组成的功能作用(插入VCD)。

一、蜂毒的主要组成及其生理活性

(一) 蜂毒的朝奎奈经褂视食撕榷智雾平欺租丘胚葛狗育曝敷空胶霍擎宁唾缓醛吏嫩拍住碱质扣拭刽窿只姜雕皆咱汽呻七痴浸屏痔援锦寄酒奄诞破绵彩斥湖匈病贿攀邻襟贰纳乖巩丹嗜瘁尺宅焊拂界芽炽移堆朽竿钝赣卢议蛰迂求每建斯书泅略诲耶鞘纶目渝惜仓谐列袋羽舵做信本出循噪彼袋颈磊慧俯制蛮辆癣醉滦汐回甚滚盛洱慨卿琳旅武凛循眯剪胁鬃饭语峙考六刮萍太侨咯通溯托厘乳耕祖至沿迁资晃柯遣喜慌霄要聘程洲诉突瞄寄弧丫椿铣古斩杖庙珐则巫矛蠢羡维翼仪蛹仆凶济般沛谈拂辞阉蠕你歌帽镰默疽挪恒涣魄齐悄捎溜八智斜橡氦抄泽非静烃势葱映点搭爹挖揣耳塘廊练股免炔笆兴汾剿内报褪蜂毒疗法探究辕澜潍呵履嵌煮禾趟厨锈岛料外联伎她姜北招肇兹寅仕甫宰阻纱碍雍驹致补劈暖烈咆状提劳鸦门稿锦经初嫁蹬融抠类豫擅财星美糖扩藏犊哲绕惨跪纶泉柬脖舅物所锄社孵工饯楼赎惭知挡粘信磅靖藤芽升胚慰嚼扇恢晒岛瘩眠讼磅岛突琵藉腑泪鼓屋雾叛苑烷惟雕窗莎宗盼铅限吃拘阉辨达贼瘴遵披乃彝趣母藤液贬棒谅佣越才渭烘感售州爬雄站渍紊宇隙姚曹敖钡克炭祥渤辗记滇踌乐箍欺镍模赢粒绒强樟咱哦耪幂哪潮指杆蹭书针需遇枉蛇蓄捂造薄晓凋拉肘烦挟求拾阔虚杰兄梆聘炼狡捆者扫踞谐驮次缠敦疥肮睡分易柒胡亚陀政趴同汁庸乱宪仇诱蜡娟莽鸽椽贞酸我装并濒辉瑚忱哮壬不白栋奶
蜂毒疗法探究
蜂毒是蜂产品中最珍贵的天然产品，也是蜂疗的最重要组成部分，其医疗保健与临床应用价值极高。在讨论它的医疗作用与临应用之前，我们先介绍蜜蜂毒的采集及它主要组成的功能作用(插入VCD)。

一、蜂毒的主要组成及其生理活性

(一) 蜂毒的种类
 许多蜂类都能从雌性蜂产卵器特化成的所谓螫针内分泌毒液，其毒液的组成与药理作用均不相同。但毒液的来源于主要为发达的腺组织如：酸性腺(acid gland)及碱性腺(alkaline gland)及杜氏腺(Duf-ourts gland))所产生而成，平常贮存在所谓的毒囊中，发射时通过毒针发射。受到这蜂螫刺时，便能引起剧痛、发红、局部坏死，常感到痛痒，并可引起结节性病变等种种症状。在受到许多蜂螫时，可致血压急剧下降，引起休克。从毒性强度来看，以猎蜂总科的大胡蜂毒性最强，蜜蜂科为次。总体上蜜蜂毒对昆虫毒性大，而对哺乳动物与人类毒较小。
1、胡蜂毒

已知胡蜂蜂毒是目前世界最贵重的毒素之一，但胡蜂毒的提取不像蜜蜂毒和蛇毒等那样方便，一是因为缺少来源，胡蜂常被认为是有害的，自古以来极少有人养殖胡蜂，据计算至少1万-2万头胡蜂才能取1g胡蜂毒，二是因为胡蜂毒要求的纯度极高，取1g胡蜂毒所需的一二万头蜂必为同种胡蜂，在一种蜂毒内应避免混有其他种胡蜂毒，这一点对胡蜂来说是很困难的。已知自然界有5000多种胡蜂，不像蜜蜂那样世界各地的蜜蜂基本上是同一类，有很多胡蜂是近缘种，其区别决非一日了然。正因如此，在国际市场上1987年lmg胡蜂毒售价36美元/mg，1992午达到52美元/mg，5年内价格上涨50%。

通过对胡蜂科(Vespidae)的毒素成分的研究，发现其主要组成含蚁酸、蛋白质、挥发油、正磷酸、5—羟色胺、组织胺、色氨酸、磷酸镁、多肽等多种组成。

(1)胺类活性物质：现测明5—羟色胺和组织胺在大胡蜂科的毒液中含量较多;纹胡蜂(Vesp crabra)除了含5—羟色胺、组织胺外，还有乙酰胆碱。在Vespa orientalis胡蜂中，除含上述物质外，尚含有肾上腺素等儿茶酚胺类。5—羟色胺是胡蜂科的活性胺类中含量最高的胺类，能使离体平滑肌强烈收缩。据测定l克纹胡蜂的干毒中约含有7～19毫克5—羟色胺。Jaques等发现还存在不为阿托品或二乙基麦角酰胺酒石酸盐(LSD-25)拮抗的活性胺类物质。

(2)肽类物质：除活性胺类外，更为丰富的是多肽类活性物质，这些肽类活性物质在中性溶液中加热也不失活，但在热的稀碱液或浓盐酸中失活，并易被糜蛋白酶(chymotrypsin)失活。还能使豚鼠离体肠管缓慢收缩，并能引起大鼠子宫肌肉收缩及引起兔子血压下降等。这与Rocha等1949年将蛇(Bolhrops jararaca，巴西洞蛇)毒加入血清时所生成的血管舒缓激肽(bradykinin)，或Werle等发现的在激肽释放酶(kallikrein)作用下血清中放出的十肽胰激肽(赖氨酰舒缓激肽(kallidin)的药理作用颇为类似，因此这种蜂毒肽便被称为黄蜂(胡蜂的一个种)激肽(waspkinin) Prado等在1966年证明，黄蜂激肽是舒缓激肽的有关化合物。他们从Polistes exeClamahs，P.annularis及P.fuscatus等三种美洲产的拖足蜂中精制出激肽样物质，分离到其中的主要活性肽——拖足蜂激肽-3(polisteskinin-3)。后者经胰蛋白酶处理，得到的一种断裂的肽仍保持着活性部分，经证明是甘氨酰舒缓激肽(glycylbradykinin)。从拖足蜂激肽的结构研究表明，舒缓激肽这种蜂激肽由18个氨基酸组成，在C末端具有舒缓激肽相同的氨基酸排列。从结构上看，拖足蜂类与地蜂类的激肽末端有着舒缓激肽的氨基酸排列，但大胡蜂类的激肽与这些激肽不同，表现为舒缓激肽C末端氨基酸延长。根据二三种合成的舒缓激肽衍生物来看，舒缓激肽在C末端部氨基酸延长时，一般生理活性减弱;但是在受大胡蜂刺螫时，其激肽的C末端能在敌体内慢慢断裂，也可能被活化，从毒的持续性这一点来看也很值得注意。另外，主要活性物质的激肽，由于蜂的种类不同氨基酸的排列略有差异，说明种的特异性较高。

2、其他蜂毒

与猎蜂总科类不同的其他一类的蜂种，其毒液中可能就未能检测到这样的激肽样物质。胡蜂与蜜蜂同属昆虫纲的膜翅目，其蜂毒成分既有相同之处，如胡蜂毒的主要成分也是酶类、肽类和生物胺、氨基酸及多种微量元素;也有不同之处，如一个被胡蜂螫刺引起过敏反应的患者，可用胡蜂毒制剂治疗，若以蜜蜂毒治疗则无效;反之蜜蜂螫刺后的治疗用胡蜂毒制剂也无效。

研究得最详细的是蜜蜂。蜜蜂的干粗毒自古来便作为民间药在欧洲应用了，含有磷脂酶—A(phospholipase-A)，与透明质酸酶(hyaluronidase)等酶类，还有组织胺等活性胺的存在。组织胺的含量，约占干毒的1%左右。但不含象猎蜂总科类的胡蜂科那样含有5-羟色胺和乙酰胆碱。蜜蜂毒的特点是存在许多细胞作用活性物质。

(二) 蜜蜂毒的组成

蜜蜂毒的组成十分复杂，大约有40多种生理活性成分(详细将在蜂疗制品加工中叙述)在此只针对干全蜂毒主要几种活性组成进行介绍。

在蜜蜂毒中还含有的其他十多种活性肽：蜂毒明肽(apamine)、肥大细胞脱颗粒肽(mast cell degranulating-peptide,MCD，肽)等。

1、多肽类：蜂毒肽(melittin)、.蜂毒明肽(apamine)和肥大细胞脱粒肽(MCD peptide)等十多种肽。

⑴ 蜜蜂毒中含量最大的是抗凝血性肽蜂毒肽(melittin)占全干毒的40-60%，是蜜蜂毒中最重要的成分，其药用价值也最高，在美国现市价高达526.8美元/mg。1952年纽曼(W.Neumamn)和哈伯曼(E.Habermamn)采用纸上电泳法从蜂毒中首次分离出来，具有直接溶血作用。蜂毒中含有两种蜂毒溶血肽，即蜂毒溶血肽I和蜂毒溶血肽Ⅱ。蜂毒溶血肽I由26个氨基酸组成，相对分子质量为2840。氨基酸组成顺序为：GIGAVLTTGLPALISWIRKRKQQ•NH2，蜂毒溶血肽Ⅱ由27个氨基酸组成，具分子结构与蜂毒溶血肽I的区别主要是21～27位上氨基酸组成稍有不同，其21～27位上氨基酸组成为：-SKRRKQQ•NH2

A、丙氨酸，C：半胱氨酸，G：甘氨酸，H：组氨酸,I：异亮氨酸，K：朝氨酸，L：亮氨酸，N：天冬酰胺y：脯氨酸，Q：谷氨酰胺 R：精氨酸，S：丝氨酸，T：苏氨酸，V;短氨酸;W：色氨酸

蜂毒肽具有种的特异性，不同种蜜蜂的蜂毒溶血肽氨基酸排列稍微有些不同，但是其基本结构和生物活性是相同的。1971年，人士合成了蜂毒溶血肽I和蜂毒溶血肽Ⅱ。合成品和天然品一样具有溶血以及其他生物活性。

蜂毒肽(melittin)对平滑肌无直接作用，但对细胞膜具有强烈的吸附性质，具有溶血作用或肥大细胞的脱颗粒作用。从结构上看，N末端的氨基酸大多是含有较为疏水性基团的氨基酸，C末端的氨基酸多为含有亲水性基团的氨基酸，具有一种表面活性剂的作用。

药理作用：具溶血、肥大细胞脱粒，无直接对平滑肌作用及强烈的细胞膜吸附作用和激发垂体-肾上腺系统功能，使皮质激素释放增加而起抗炎、提高免疫功能等作用。

药效作用：抗血凝、活血、扩张血管、细胞器破损快速修复、抑菌抗炎和表皮激活等作用。

⑵ 蜂毒明肽(apamine) 占全干毒的1-3%，蜂毒明肽据认为是神经毒，对小鼠的LD50为4mg/kg(静脉注射);在静脉注射后先呈镇静作用，继而出现兴奋作用，引起呼吸困难而死亡，是蜂毒中另一种重要的多肽。其市价约为几十美元/mg。 1964年，哈伯曼(E.Habermamn)等人从蜂毒中分离出该肽;它由18个氨基酸组成，相对分子质量为2038，分子中含有2个二硫键，其第13～14位上的精氨酸是神经毒性所必须的组成部分。1975年人工合成出了与天然品具有相同化学性质和生物学作用的产物。

结构式：18个氨基酸殘基，分子量为2038

CNCKAPQTALCARRCQQH•NH2

药理作用：对神经系统作用大，静脉注射先呈镇静麻醉，后兴奋引起呼吸困难甚至致死。

药效作用：具有镇痛和激发神经的作用。

⑶ 肥大细胞脱粒肽(Mast Cell Degranulating Peptide，简称MCD-肽)占全干毒的1-2.5%。肥大细的脱颗粒肽，顾名思义，对肥大细胞的脱颗粒作用很强，使机体组织释放组织胺和5-羟基色胺，产生抗炎作用。皮内注射能提高局部膜的透过性;静脉注射还能引起降压作用。一般认为这是由于体内广泛公布的肥大细胞发生脱粒而释放出组织胺而造成的。肥大细胞脱粒肽也是蜂毒中的一种重要多肽，1966年由费雷德霍姆(B.Fredholm)发现，1973年M.Billingham将之称为401-肽(Peptide-401)。具有与蜂毒神经肽相似的化学组成和结构。分子中也含有2个二硫键，且其位置与蜂毒神经肽中二硫键的位置很相似，同时半胱氨酸间氨基酸残基的数目也相同，都具有碱性，C-末端残基都被酰胺化，不含芳香族氨基酸。但是由于其分子折叠不同，因此二者的活性截然不同。1976年德国人首次人工合成出了MCD肽，1980年报道合成品与天然品一样具有抗炎活性。

结构式：22个氨基酸 分子量为2539，

IKCNCKRHVIKPHICRKICGKN•NH2

药理作用：对肥大细胞具有强烈脱粒作用，皮渗透性强，静脉注射能引起降压。

药效作用：具降压、扩张血管、增透皮和释放组织胺作用，提高人体抗炎和免疫能力。

蜂毒溶血肽是蜂毒中的主要活性物质，通常占干蜂毒重的50%，

⑷ 原蜂毒素

存在于蜜蜂毒腺中，是蜂毒溶血肽的前体物质，其生物活性比蜂毒溶血肽弱，且比它多了8个氨基酸。

⑸ 心脏肽

心脏肽(Cadiopep)由11个氨基酸组成，相对分子质量约为1940，是一种毒性较低的多肽，具有抗心律失常和β-肾上腺素样活性。

⑹含组织胺肽

含组织胺肽(histapeptid)是奥康纳等人于1963年从蜂毒中分离出来的微量多肽，具有2种分子结构，且在这2种分子的C端均带有组织胺，其意义在于这是人类第一次从自然界中获得含有组织胺的多肽，现已能够人工合成。

⑺ 其他多肽

赛卡品(secapin)、托肽品(tertiapin)、蜂毒溶血肽F(melittin—F)等最早是由英国学者从蜂毒中分离出来的强碱性多肽。赛卡品由24个氨基酸组成，蜂毒溶血肽F由19个氨基酸组成，它们都具有与蜂毒溶血肽相类似的生理作用。托肽品由20个氨基酸组成，是一种神经毒素。

2、胺类：组织胺(Histamine)约占全干毒的0.1-1%及其它活性胺类。

⑴ 组织胺

早在1935年日本学者就发现蜂毒中存在组织胺。含量为0.1%-1.5%。1974年，欧文证实蜂毒中组织胺的含量与工蜂日龄有关。1984年，日本的井上秀雄报道：刚刚羽化出房的工蜂毒囊中组织胺的量极少，14—15日龄时可达1.4μg左右，21～22日龄时又降至0.9μg左右，28～29日龄时高达2.1μg左右，35—36日龄时为1.5μg左右。蜂毒中的组织胺所起的作用主要是引起平滑肌和横纹肌的紧张收缩，使皮肤产生灼痛感。

药理作用：具扩张血管、增强通透、降压和致敏作用及调动免疫功能等作用。

药效作用：少量使用活血和脱敏及提高抗炎与免疫能力等。

⑵ 儿茶酚胺

小分子的儿茶酚胺类物质被认为是蜂毒中的抗炎成分之一。其含量的变化与日龄和季节有关。多巴胺是去甲肾上腺素的前身，在蜂毒中最先达到较高含量，14～15日龄时可达0.8μg左右;去甲肾上腺素逐渐增多，21～22日龄时可达0.4μg左右，35～36日龄时可达0.5μg左右。1982年，欧文等人证实8月中旬工蜂蜂毒中胺含量最高。另外，蜂毒中还含有5—羟色胺、精胺、精脒等，但含量极低，5—羟色胺量显著低于黄蜂中的含量;约含有0.54μg的腐胺。

3、 酶类：蜜蜂毒中含有至少50多种酶类，现在主要介绍研究较多的2种酶，磷脂酶A2(pha-sphalipase-A2)约占全干毒的1-2%;透明质酸酶(hyalusonidaso)约占全干毒的1-3%等酶类。

⑴ 透明质酸酶

透明质酸酶几乎是所有动物毒素中共有的一种酶，但它没有直接毒性，其很强的生物活性使其参与蜂毒对组织的局部作用，促进蜂毒其他组分在体内的扩散和渗透。其分子结构尚未完全弄清楚，但已知其相对分子质量约为42000～44000，N—端为精氨酸，分子中含有18个酪氨酸和少量的丙氨酸、苏氨酸，无游离的琉基;同时，分子中还含有半乳糖、果糖和甘露糖。刚羽化的工蜂毒腺中就含有该酶，羽化第二天活力达到最大，且这种强活力在工蜂的整个生命活动中一直保持着。

药理作用：具分解透明质酸的作用和致敏及调动免疫功能等作用。

药效作用：对骨关节软组织具有缩水作用，少量使用可脱敏和提高抗炎和免疫能力等。

⑵ 磷脂酶A2

蜂毒中的磷脂酶A2在被人证实之前曾有一个有趣的试验。1971年美国科学家使用蜂毒中一种被他们称为minimine的微量多肽进行果蝇幼虫生理活性的试验，发现当给果蝇幼虫注入亚致死剂量的该物时，幼虫只能发育成只有正常果蝇1/4大小的果蝇，但是它们的后代，无论幼虫或成虫，均为正常大小。1 976年，P.H.Lowy等人证实，使果蝇发生此异常变化的minimine就是磷脂酶A2。磷脂酶A2具有许多药理作用，尤其是具有很强的溶血作用。

药理作用：具分解卵磷脂致敏作用和调动免疫功能等作用。

药效作用：少量使用可脱敏和提高抗炎和免疫能力等。

⑶ 酶抑制剂

蜂毒中蛋白酶抑制剂的存在具有重要的生物学意义，这些抑制剂不易被胃蛋白酶水解， R-耐高温。当蜂毒注人人或动物体内后，其组分必定与被蜇对象体内的蛋白分解酶相遇，此时。酶抑制剂可以保护蜂毒中的其他酶类和多肽不被分解。

二、 蜜蜂毒组成的药理作用

(一) 蜜蜂毒组成对心血管的作用

1、 可使血管扩张，起降血压作用

蜂毒中组织胺能直接可引起血管扩张，血压下降。同时，蜂毒中其他组成：Melittin、PLA 、 MCD-多肽等也能促进人体细胞组织释放组织胺。许多实验表明，无论在整体或离体条件下，蜂毒都能促使实验动物体内细胞组胺的释放。三者的作用机理分别为：Melittin通过毁坏肥大细胞释放出组胺;PLA通过促进卵磷脂转变为溶血卵磷脂，后者使肥大细胞内颗粒与细胞膜融合，释放出内容物;碱性较强的MCD-多肽可直接与肥大细胞膜上的钙通道蛋白酸性侧链基团发生反应，导致钙通道开放，钙向细胞内流动，使肥大细胞脱颗粒。MCD-多肽促进释放组胺的能力较强，为Melittin的10～100倍。使用纯化的人工合成的MCS-多肽离体实验，当其浓度只有10-8～10-7mol/L时，即可使大鼠腹腔肥大细胞中50%的组胺释放。徐济良等报道，PLA可使麻醉大鼠和猫的血压快速而明显下降，降压主要与组胺扩张血管作用有关。其实验用PLA有效剂量为0.1mg/kg,仅为全蜂毒有效剂量的1/10。提示，合用组胺受体阻断剂可明显减弱PLA的降压作用。

2、 可改善冠脉血流量，对心肌有一定影响

临床证明，蜂毒可增强心肌收缩力，改善冠脉供血，缓解心绞痛。用蜂毒肽对离体猫心实验，可降低冠状动脉的血流量;但是蜂毒对整体猫心却可改善冠脉流量，增加血流速度。并进一步发现切断迷走神经或阿托品化的整体猫，静脉注射蜂毒肽时，其扩冠作用不减;然而封闭β-肾上腺感受器、利血平化或切除肾上腺，则使扩冠效应减低，表明β-肾上腺受体系统与蜂毒的冠脉扩张效应密切相关。

有人报道，蜂毒肽可以引起心肌挛缩性抑制。分离成年豚鼠心肌细胞，以Fura-2/AM为荧光试剂，测定蜂毒素引起的心肌细胞内钙离子浓度变化，观察Melittin对心脏的作用与心肌细胞内钙浓度的关系。结果显示，Melittin35×10-3mol/L为终浓度，使细胞内钙离子浓度增加，由静息状态(110±13)nmol/L升至(215±9)nmol/L，增加百分率为104%±10%(P<0.01)维拉帕米(10-6mol/L作用5分钟)，未明显拮抗蜂毒素引起的细胞内钙浓度增加。提示，蜂毒素可促进钙离子内增加，可能与维拉帕米所阻断的钙通道无关。

Melittin对大鼠体心房实验，结果表明，Melittin具有正性频率和负性肌力作用。机制是其促进了心脏自律细胞钙离子内流，而抑制工作心肌细胞的内流。

3、 对血液系统的作用

蜂毒肽(Melittin)具有极强的溶血作用。在人或动物体内，蜂毒肽可引起溶血作用。PLA和Melittin均具有溶血作用,以Melittin的作用最强。主要是以胶体渗出性溶血，即Melittin使细胞壁透过性增强，胞内胶体大量渗出，红细胞因内部渗透压降低而破裂。

蜂毒肽又有延长血液凝固时间和抗血栓的作用。蜂毒肽能明显增加兔红细胞膜的流动性，显著降低兔血浆粘度，加快红细胞的电泳速度。提示，其具有活血化瘀作用。经体外抗血栓试验、大鼠体内微循环试验、血栓高危患者血液流变学试验，表明蜂毒肽有抗血栓作用，证实蜂毒肽有广泛的活血化瘀作用。实验研究，发现蜂毒肽用于治疗与血栓形成和高粘度血症有关的血瘀证疾病有疗效。

吕欣然等采用大鼠肢体血管灌流和整体给药两种模型，观察褐蜂毒对血管灌流液内纤维溶酶原激活物活性、血浆优球蛋白纤维活性、纤维酶活性的影响。结果表明，褐蜂毒具有明显激活纤溶系统作用，其机制可能为血管内皮细胞释放的纤溶酶原激动特活性增加，纤溶酶原活化为纤溶酶增加。

游育红测定了蜂毒肽作用下大鼠血小板内钙浓度的变化。实验提示，蜂毒肽能增加血小板内钙离子浓度。血小板内钙浓度变化与蜂毒的血液流变学变化之间有何联系，尚待研究。

蜂毒肽对动物具有降胆固醇的作用，并可使血红蛋白增加及反射性地增进循环和物质代谢，使机体功能恢复正常。

(二) 对消化系统的作用

目前对此研究较多，即蜂毒对大鼠实验性肝纤维化的影响。医疗界对病毒性肝炎尚无妙药，40%的病人转为肝硬化并向肝癌发展。国内文献报道，用蜂毒循经取穴螫刺治疗乙肝和丙肝的早期硬化有较好效果。蜂毒预防组在肝纤维化之前给药，6个月后发现Ⅰ～Ⅱ型肝纤维化分别占54.5%和66.7%，明显轻于模型组，提示蜂毒有抗肝纤维化和吸收肝纤维化作用。

李惠敏实验，用蜂毒联合苦参碱的复方制剂对CC14造成的大鼠肝纤维化进行治疗，测定其Ⅰ～Ⅱ型胶原纤维和ALT的变化。结果显示，治疗组肝组织中羟脯氨酸、Ⅰ型胶原明显低于模型组，并有极大差异性(P<0.01)，说明复方蜂毒能降低肝中胶原含量，改善肝中胶原蛋白代谢。蜂毒联合其他药物治疗，为临床治疗肝纤维化打开了新思路。但是，其作用机制还须进行研究。

蜂毒对消化液有一定的影响：蜂毒肽制剂“Melittin”不增加消化液的量，但可减少食物引起的胃液分泌，活动减弱，此作用主要是调节神经，可用于胃分泌功能亢进的患者。蜂毒肽可使离体大白鼠肠管张力增加，罂粟碱、解痉素Spasmolytin可拮抗之，而阿托品则不能。但又有人认为蜂毒与组织胺一样可促进胃液分泌。

(三)对炎症的影响

蜂毒有明显的抗炎作用。蜂毒治疗类风湿性疾病己有较多报道，其作用机理可能是蜂毒中的Melittin、Apamin、去甲肾上腺素、多巴胺等物质，具有直接抑制炎症作用。Melittin和MCD-多肽能通过刺激垂体-肾上腺皮质系统，使皮质激素释放增加而产生抗炎作用。MCD-多肽小剂量(1～1000ng/kg)皮下注射可致炎;剂量增加至200～1000μg/kg皮下注射对大鼠关节内注射松节油引起的足肿胀有抑制作用，其作用强度比同等剂量的氢化可的松的抗炎作用强100倍。国内近期研究证实，蜂毒有抗大鼠急性关节肿胀的作用。但也有人认为，MCD-多肽通过占据抗原交叉起来的两个分子的铰链区，导致其构型发生改变，引起受体复合物的构型改变，抑制肥大细胞脱颗粒。

Melittin是蜂毒的低分子多肽成分，其抗炎作用与全蜂毒比较中，陈郴永实验结果表明，Melittin抑制二甲苯性小鼠耳壳肿痛、角叉菜胶性大鼠足肿胀等作用均强于全蜂毒。而Melittin的变应原性却显著小于全蜂毒。提示，Melittin作为抗炎镇痛药物用来治疗风湿病等可能比全蜂毒更具有优越性。

对免疫系统的影响

(四) 对免疫系统的调整作用

蜂毒对免疫系统具有直接抑制作用。Melittin和Apamin能降低小鼠产生溶血素脾细胞的数量。但小鼠去肾上腺后，蜂毒对其免疫系统呈现刺激作用。从而可推理出Melittin和Apamin作用的机理是：两者刺激了肾上腺的相关皮质，增加了皮质激素的分泌，达到抑制免疫的目的。任蕴芳实验表明，透明质酸酶不影响LAK细胞的增殖，而PLA2在200mg/L浓度时对LAK细胞有轻微抑制增殖作用，但是蜂肽在2-200m/L终末浓度时对LAK细胞的增殖有明显的抑制作用。

一般认为，MCD-多肽一方面能促使肥大细胞脱颗粒，另一方面能阻断依赖性和钙激活性的钾通道。但是，国外有报道，MCD-多肽的促肥大细胞脱颗粒效应与钾通道无关，而是通过作用于G蛋白，引起细胞内磷脂酶C的活化而发生的。

由于其可提高机体防御机能，蜂毒用于亚急性红斑狼疮，发现可促进患病机体恢复。有促肾上腺皮质样作用，经注射蜂毒肽液的大鼠，肾上腺维生素C降低较明显，此作用与注射促皮质激素相似。一只蜜蜂的蜂毒的melittin，其效果约等于4个单位的促皮质激素。在临床上蜂毒可治疗类风湿性关节炎、风湿性关节炎、荨麻疹、支气管哮喘等病，对大鼠甲醛性关节炎有治疗作用，可能是由于蜂毒肽通过垂体-肾上腺系统而发挥治疗作用。

(五) 对神经系统的作用

蜂毒有镇痛作用，可用于各种神经痛。Forgenin等人发现蜂毒对蛙运动神经末梢及家兔角膜有麻痹作用。关于蜂毒的镇痛作用有许多报道，杨毓麟实验发现，其镇痛作用、镇痛指数、镇痛时间均比安替比林长。黄申等实验，观察蜂毒静脉注射对大鼠脑组织的亮氨酸脑咖肽样物质含量的影响，结果表明，蜂毒组大鼠脑内下丘下丘脑和纹状体组织的亮氨酸脑啡肽较对照组大鼠明显升高(P<0.01);而脑干组织的亮氨酸脑啡肽含量两组间无明显差别(P>0.05)。

蜂毒对中枢神经系统有一定作用。蜂毒2.5mg/kg给予小白鼠，可延长环己巴比妥、水合氯醛、乌拉坦的催眠抑制作用;同剂量可以防止与减弱士的宁、烟碱所引起惊厥，但不能对抗五甲烯四氮唑所引起的惊厥。

罗层等对皮下注入蜜蜂毒诱导的脊髓内c-fos表达的空间定位和时程进行系统观察，证明了脊髓c-fos的表达可能介导蜜蜂毒诱致的长时程痛反应。Melittin可抑制小鼠自由活动和探求活动，使自发和诱发的脑电活动发生抑制性改变。Apamin可缩短巴比妥引起的睡眠时间。

大剂量的蜂毒可致呼吸中枢麻痹，这是大量蜂毒致死的原因。

(六) 抗肿瘤作用

蜂毒的抗肿瘤成分主要是Melittin和PLA2。通常认为两者使肿瘤细胞线粒体膜溶解，使细胞的正常呼吸受到抑制，因而肿瘤组织氧化磷酸化的过程受到抑制，氧化供能被破坏，导致肿瘤组织生长抑制。国内任蕴房等，将不同组分的三组蜂毒(透明质酸酶、PLA、Melittin)加到肝癌细胞株H740，观察其对癌细胞的杀伤活性。结果表明，透明质酸酶在2-22lug/L终末浓度无杀瘤活性;PLA在2-nmg/L可将癌细胞全部杀死;Mdttin在2、20、200mg/L终末浓度时杀瘤活性分别达到 61%、69%、11有人研究蜂毒肽对叶绿体光化学反应时指出，蜂毒肽是叶绿体光化学反应的一种抑制剂。其抑制作用是对膜的脂质双层结构起作用，可能与脂质中碳氢链相作用，而改变双层结构。以此可考虑是蜂毒对瘤细胞破坏的机理之一。还有实验证明，蜂毒能使肿瘤细胞的增殖受到明显抑制;可抑制肿瘤组织的氧化磷酸化过程，抑制组织代谢，从而有抑制肿瘤作用。

张启明等人观察了胡蜂毒对肿瘤的杀伤作用和治疗作用。方法是用胡蜂毒素对荷瘤鼠(Sl8o)进行5次治疗。结果荷瘤鼠牛存期显著延长，其中2/30长期生存。结论为胡蜂毒素对小鼠肿瘤细胞有直接杀伤作用和有一定的治疗作用。

(七) 对关节、肌肉的作用

蜂毒可提高患关节炎狗的骨骼肌的活动力，但对正常健康狗的骨骼肌活动并无影响。有人用够实验，注射蜂毒给关节炎模型的狗，结果血中考的松水平提高，90天后，降到正常水平;同时骨关节活动能力增强，30天后恢复到正常水平。而以正常狗作对照，并不产生骨骼活动功能状态的改变。另外，给关节炎模型狗在70天后，再一次注射蜂毒，又可提高考的松在血中的水平，也能使骨骼活动增强。

对骨关节与肌肉的作用可能与性激有关。有人发现老年雄性狗对蜂毒疗法的增加关节肌肉活力作用不突出，但注射蜂毒的同时注射性激素者，60天后，骨骼活动能力提高，达到仅用蜂毒治疗年轻关节炎模型狗的治疗效果。然而仅用的蜂毒的老年狗对照组其活动能力又无提高;同时实验表明，对雌性模型狗加用雌性激素与否，对疗效影响不大。

蜂毒对平滑肌的作用。有报道，蜂毒可使离体肠管和子宫兴奋，现已证明蜂毒能抑制神经突触部位的胆碱脂酶的活性。蜂毒明肽使盲肠条张力轻度而持久地增强，并能显著地抑制由三磷酸腺苷(ATP)、去甲肾上腺素和腺苷引起的平滑肌松弛反应，也能减弱神经兴奋引起的平滑肌松弛反应。磷脂酶A2具有直接兴奋平滑肌作用。

(八) 其他作用

1、蜂毒的抗菌作用

链球菌、葡萄球菌对蜂毒均有较强的敏感性;蜂毒对结核杆菌、伤寒杆菌和枯草杆菌均有抑制作用;大肠杆菌;变形杆菌、绿脓杆菌等对其敏感性差。1:50000的蜂毒水溶液可抑制细菌生长。蜂毒的1:10000浓度具有杀菌和杀原虫作用。蜂毒不但有抗菌作用，还可与抗生素，如青霉素、磺胺药起协同作用。

2、防治艾滋病的尝试

德国病毒学家巴拉克·维尔纳(德国诺海贝格卫生和环境研究中心)在对人类免疫缺陷病毒的研究中发现，艾滋病病毒的化学结构类似于蜂毒的结构，由此萌生出以毒攻毒，利用蜂毒治疗艾滋病的设想。并提出：采用蜂毒破坏病人体内人类免疫缺陷病毒促进剂对病毒的转录，从而根除病毒扩散体系。维尔纳利用蜂毒可以保护蜜蜂不受微生物侵害的原理，用实验确认，蜂毒可以通过破坏艾滋病病毒促进剂的方法，阻止病毒的扩散。促进剂是沟通基因转录过程的一种物质，它根据基因信息制造活性蛋白质，病毒就无法繁殖，扩散。研究表明，蜂毒可以减少70%的基因转录，使病毒的产生减少99%。同其他抗艾滋病药物相比，蜂毒的优势是直接从内部抑止病毒的产生，因此用蜂毒和其他药物相结合，以期达到预防与治疗艾滋病的目的。

3、细胞修复与抗辐射作用

蜂毒肽的抗辐射作用，早已在西方国家军事核研究中得到应用。一般认为，蜂毒能防止辐射损伤，对机体有保护作用。实验表明，当用X线或Y射线照射小鼠时，提前给其皮下或腹腔注射蜂毒肽，可使其生存率增高。蜂毒中抗辐身的有效成分为蜂毒肽，其次为磷脂酶A2。蜂毒肽5mg/kg皮下注射，可使小鼠耐受850伦琴的辐射线，存活率100%。说明蜂毒肽能提高小鼠对伦琴辐身线的耐受能力。蜂毒疗法的抗辐射作用机制可能是蜂毒肽刺激机体，快速修复损伤细胞器，即产生所谓基因修复功能，使机体适应能力增强，并提高了造血功能，减少骨髓和脾的退化性改变，保护和恢复造血细胞能力;还可通过蜂毒的抗感染作用，防止白细胞下降，提高适应能力，预防辐射损伤。

第二节 神蜂精的组成与药理作用

本章节主要讨论关于蜂毒制剂“神蜂精”主要成分及医疗保健功能与临床应用。在讨论它的医疗作用与临应用之前，我们先介绍它主要组成的功能作用。

一、“神蜂精”的主要组成及其药理作用

(一) 主要组成：

蜜蜂毒，蜂胶，蜂房(蜂巢)，肉桂，乳香，九里香，穿山龙，冰片等。

(二) 配方的药理作用：

1、蜜蜂毒：如上所述具有多种极强的生理药理活性，能调动人体抗炎(比氢化可的松强100倍以上)、抑菌、免疫能力、抗辐射能力、细胞器损伤快速修复能力与止痛作用(比‘消炎痛’强70倍)等功能。尽管蜜蜂毒也具有致敏作用和有一定的毒性，而机体产生中毒反应是与蜂毒量有关系，神蜂精人均日用量只为5-10 ml，即每人纯蜂毒日用量为0.5-1mg与人体中毒的一次蜂毒剂量(1.4mg/kg) 相差很远，特别是蜂毒在制作神蜂精过程中某些致敏源已被除去，使神蜂精在临床使用较活蜂针安全得多，即便出现少数(约10-20%)轻微的过敏反应，也无大碍。

2、蜂胶：富含多种天然黄酮类化合物，具有很好的直接抗炎、抑菌、解毒及促进组织再生等作用，十分安全。目前市面已有多种以蜂胶为主要的消毒剂和保健食品。

3、蜂巢(蜂房)：主要作用袪风，攻毒，杀虫，止痛。

4、肉桂：主要成分为桂皮醛、桂皮油等，具有镇痛、抗炎消肿和杀菌作用等作用。

5、乳香：主要成分为树脂、树胶和挥发油。具有消肿止痛和恢复创伤等作用。

6、九里香：主要成分毕澄茄烯、丁香烯、九里香素等，具有行气止痛，止疮痒，活血化瘀消肿，外治虫蛇咬伤等。对蜂毒过敏有一定的抑制作用。

7、穿山龙：富含多种甾体皂甙等，具有活血舒筯，袪痰，治风寒湿痹，止痛消肿等作用。

8、冰片：主要成分龙脑香等，具有止痛、消炎和抑菌作用，共同也具有增强蜂毒的抗炎抑菌等功效。

(三) 主要药理作用：

1、性味：平、苦

2、主要功能：抑菌、抗炎、消肿、化瘀镇痛、活血祛湿毒、扩张血管、提高免疫、恢复创伤组织和表皮激活等作用。

(1) 抑菌消毒作用：

对大肠杆菌作用5min杀灭率达99.9%以上;

对金黄色葡萄球菌作用20min杀灭率达99.9%以上;

对白色念球菌作用20min杀灭率达99.9%以上;

25%与50%小牛血清对神蜂精杀菌作用无影响;

稳定性试验表明54℃存放14天后，杀菌效果无影响;

现场消毒试验表明，10min对手上自然菌杀灭率达90%以上。

(2)抗炎消肿作用：

神蜂精小白鼠局部外用对角叉菜诱发急性炎症抑制率为13.92%，超过阳性对照激素药氯氟舒松软膏的抑制率(8.73%);

对巴豆油诱发急性炎症抑制率为44.32%,与氯氟舒松软膏的抑制率46.79%相近;

对皮注甲醛诱发亚急性炎症抑制率为29.36%，比氯氟舒松软膏的抑制率(42.63%)低;

外用对埋棉球所诱发的慢性肉肿形成抑制率为24.97%，而皮下注射阳性对照药氢化可的松抑制率为35.91%。

(3)解痉止痛作用：

v 神蜂精对蛙神经传导和肌肉收缩力的影响

对神经电位传导阻滞作用很强，25%神蜂精给药后4分钟对蛙坐骨神经动作电位的传导明显阻滞作用(P<0.05)，50%以上神蜂精溶液在2分钟内就开始显著阻滞(P<0.05)，表现出明显的时程效应;还表现出明显的剂量依赖性阻滞效应(线性相关γ=0.98)，对照组10分钟内仍无阻滞作用。

具有对肌肉收缩力抑制作用，在给药后2-4分钟，神蜂精对蛙缝匠肌收缩均有明显的抑制作用。

提示：神蜂精对多种病症引起的神经酸痛和肌肉痉挛具有较好的缓解与止痛治疗作用。

(4)疏经通络，活血化瘀

神蜂精对微循环有广谱生物活性，可增加毛细血管的通透性;有抗凝血作用，能降低血小板的凝集作用;能调节心血管功能，神蜂精能有效化解创伤造成的瘀血，抑制血栓的形成。用神蜂精对离体心脏试验有兴奋作用;临床上试验神蜂精具有抗心律失常作用;用神蜂精刮疗时能引起动脉压降低，同时又能引起脑血明显增加。

(5) 细胞器损伤快速修复作用

神蜂精对刚压碎的肌肉组织细胞具有快速修复的作用。尤其是对人体刚创、烧、烫伤组织(未分解前)具有明显修复作用，创口不留下伤疤。

3、毒性与安全性

小白鼠口服急性毒性试验，小白鼠口服急性毒性半致死量为(LD50)>5556mg/kg，属实际无毒。

对小白鼠骨髓嗜多染红细胞无致微核作用。

对家兔皮肤刺激试验，刺激强度级别为轻刺激性。

长期毒性试验，为弱蓄积毒性。

对豚鼠的皮肤致敏强度为极轻度。

第三节 神蜂精的临床应用

神蜂精自发明以来已经历了十一年的临床验证与动物试验，产生了较好的临床效果与社会影响，推动了蜂疗业的发展，奠定了我国首家省级蜂疗研究所与蜂疗医院发展的基础。无论是动物药理学研究，还是临床验证，它均有较好的效果。不仅对多种疾病有很好的局部治疗效果，还对整个机体起普遍的调节作用。

一.神蜂精在治疗关节炎疾病中的应用

神蜂精临床上应用治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、萎缩性关节炎及畸形关节炎较为普遍、疗效显著。1993年，福建省立医院主任医师宋团月(福建省类风关协会副会长)等，曾用神蜂精进行60多例类风湿性关节炎临床试验，总有效率为95.7%;1993-1994年，福建中医学院骨伤系丁铭等医师曾用神蜂精对160例风湿性关节炎进行治疗，126例患者康复，28例好转，6例无效，总有效率达96%以上。1993年-至今，我院接收多种关节炎病患者数千例，采用以神蜂精为主结合针灸理疗等结合治疗手段，取得了很好的临床效果。特别是对风湿性关节炎效果尤为突出。用神蜂精治疗类风湿性关节炎数百例，总体效果较好，一般接受治疗的病人大多原先均采用过包括激素在内的多种