高效液相色谱的基本参数讲义.pptx
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1、1 (2)保留体积保留体积 V VR R(ml)=t(ml)=tr r(min)*F(min)*Fc c(ml/min)(ml/min)V VR R=V=Vm m+KV+KVs s K-平衡分配系数,Vs-固定相体积,Vm=流动相所占体积 溶质在固定相中的浓度溶质在固定相中的浓度(n ns/Vs)s/Vs)n ns s Vm Vm K=-=-*-K=-=-*-溶质在流动相中的浓度溶质在流动相中的浓度(n nm/Vm)m/Vm)n nm Vsm Vs ns,n nm 溶质在固定相和流动相中的量2(4)容量因子(k)固定相中容质的量固定相中容质的量(n ns)s)k=-k=-流动相中容质的量流动相
2、中容质的量(n nm)m)K=k(Vm/Vs)K=k(Vm/Vs)V VR R=Vm+KVs=Vm+k(Vm/Vs)Vs=Vm+kVm=Vm+KVs=Vm+k(Vm/Vs)Vs=Vm+kVm =Vm(1+k)=Vm(1+k)tr=to(1+k)k=t r/to -1 tr=to(1+k)k=t r/to -1 kk与固定相与固定相,流动相性质及柱温有关流动相性质及柱温有关;与流速与流速,柱尺寸无关柱尺寸无关.(3)调整保留时间 tr=tr-to V=VR-Vm3(5)死体积(Vm)和死时间(to)1)采用比流动相溶剂少一个-CH2-基团的同系物(己烷戊烷)2)甲醇/水-甲醇3)正相-四氯乙烯,
3、反相-苯甲酸或硝酸4)计算法空柱管体积(空柱管体积(Vc)*总孔隙度(总孔隙度(T)流动相体积流速(流动相体积流速(F c)t o=/4*dc*L*T/Fc计算孔隙度计算孔隙度42 选择性指标()和相对保留值()=t r(2)/tr(1)=(1+k(2)/(1+k(1)=t r(2)/tr(1)=k(2)/k(1)作为选择性指标比 直观 与柱温固定相种类流动相组成有关 53-1 流动相线速(u)流动相线速u:通常指平均线速度 u=L/t。u=Fc /A*T T A:柱截面积 L 和 u 一定时,t。一定63-2 柱总孔隙率(T)柱总孔隙率:柱横截面上流动相所占的分数,主要取决柱总孔隙率:柱横截
4、面上流动相所占的分数,主要取决 于柱填料类型。于柱填料类型。T=Fc to/Vc 薄壳填料薄壳填料0.420.42 多孔硅胶多孔硅胶0.840.847渗透性(Kf f)渗透性定义为:Kf=uLT/p 式中:式中:K K0 0为渗透性常数(为渗透性常数(cm2cm2),为流动相粘度(为流动相粘度(P Pas/cm2),P,P为柱压降(为柱压降(PaPa)FcFc为冲洗剂流速(为冲洗剂流速(ml/sml/s),L,L为柱长(为柱长(cmcm),dc,dc为柱内径(为柱内径(cmcm)Vc-空柱体积空柱体积Kf=K0 T =uLT/pT=Fc.to/VcKf=uL Fc p Vc Kf=dp/100
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