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M食品安全突发事实验室检验及样品采集ppt课件.ppt
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1、食品安全突发事件样品采集及实验室检验(微生物部分)(微生物部分)本溪市疾控中心郭振坤本溪市疾控中心郭振坤1.疾控中心微生物检验室面临的形势l随着突随着突发公共公共卫生事件生事件处理条例的理条例的实施,施,各各级各部各部门对突突发公共公共卫生事件引起了高度生事件引起了高度重重视,特,特别是涉及人数多的,大型活是涉及人数多的,大型活动期期间的,的,发生在托有机构,学校的,社会影响生在托有机构,学校的,社会影响较大的,更受到各大的,更受到各级领导及社会各界的关注,及社会各界的关注,这给我我们疾控中心的疾控中心的检验能力提出了更高的能力提出了更高的要求,也要求,也给我我们微生物微生物实验室增加了室增加
2、了压力力,迫切需要提高食物中毒迫切需要提高食物中毒检验专业技技术水平。水平。2.概述l l食物中毒是指人食物中毒是指人摄人了含有生物性、化学性有人了含有生物性、化学性有毒有害物毒有害物质后或把有毒有害物后或把有毒有害物质当作食物当作食物摄入入后所出后所出现的而非的而非传染性的急性或染性的急性或亚急性疾病,急性疾病,属于食源性疾病的范畴。食物中毒既不包括因属于食源性疾病的范畴。食物中毒既不包括因暴暴饮暴食而引起的急性胃暴食而引起的急性胃肠炎、食源性炎、食源性肠道道传染病染病(如如伤寒寒)和寄生虫病和寄生虫病(如囊虫病如囊虫病),也不包,也不包括因一次大量或者括因一次大量或者长期少量期少量摄入某些
3、有毒有害入某些有毒有害物物质而引起的以慢性毒性而引起的以慢性毒性为主要特征主要特征。3.细菌性食物中毒实验室检验的意义l细菌性食物中毒,有易菌性食物中毒,有易发性和性和发病普遍性病普遍性的特点,它全年皆可的特点,它全年皆可发生,生,对人人类的健康的健康构成危害构成危害l细菌性食物中毒菌性食物中毒实验室室诊断断资料是判定是料是判定是否否为细菌性食物中毒的重要依据。菌性食物中毒的重要依据。实验室室诊断是断是为确定中毒病因,确定中毒病因,查明中毒原因,明中毒原因,控制中毒事件蔓延;控制中毒事件蔓延;对食物中毒事故食物中毒事故责任任人的确定及人的确定及处罚提供提供证据的。据的。4.细菌性食物中毒l l
4、定定定定义义:l l(1)(1)细细菌性食物中毒:指因菌性食物中毒:指因菌性食物中毒:指因菌性食物中毒:指因摄摄人被致病菌或其毒素人被致病菌或其毒素人被致病菌或其毒素人被致病菌或其毒素污污染的食物引起的急性或染的食物引起的急性或染的食物引起的急性或染的食物引起的急性或亚亚急性疾病,是食物中毒中最急性疾病,是食物中毒中最急性疾病,是食物中毒中最急性疾病,是食物中毒中最常常常常见见的一的一的一的一类类。l l(2 2)特点:)特点:)特点:)特点:发发病率病率病率病率较较高而病死率高而病死率高而病死率高而病死率较较低,有明低,有明低,有明低,有明显显的季的季的季的季节节性,不具性,不具性,不具性,
5、不具传传染性。与食物有关,停止食用就不再有染性。与食物有关,停止食用就不再有染性。与食物有关,停止食用就不再有染性。与食物有关,停止食用就不再有病例。血清学:微生物性食物中毒可有双相血清抗体病例。血清学:微生物性食物中毒可有双相血清抗体病例。血清学:微生物性食物中毒可有双相血清抗体病例。血清学:微生物性食物中毒可有双相血清抗体凝集价上升;非微生物性食物中毒血清抗体凝集价不凝集价上升;非微生物性食物中毒血清抗体凝集价不凝集价上升;非微生物性食物中毒血清抗体凝集价不凝集价上升;非微生物性食物中毒血清抗体凝集价不升高。升高。升高。升高。l无论从国内还是从国际的资料都表明,微生物污染食品是最重要的食品
6、卫生问题,细菌性食物中毒无论从发生的起数人数都是占第一位的。我们每年发生的细菌性食物中毒事件约占所有食物中毒事件的3040%,人数约占整个中毒人数的6090%。l在各类食物中毒中,细菌性食物中毒最多见,占食物中毒总数的一半左右。细菌性食物中毒具有明显的季节性,多发生在气候炎热的季节。细菌性食物中毒发病率高,病死率低,其中毒食物多为动物性食品。2001年,卫生部共收到重大食物中毒事件报告185起,15715人中毒,死亡146人,其中第三季度报告的重大食物中毒起数、中毒人数、死亡人数最多。报告的重大食物中毒中,细菌性食物中毒人数最多,化学性食物中毒发生起数最多,且死亡人数最多。按就餐形式分类,集体
7、食堂中毒人数最多,家庭食物中毒死亡人数最多。在餐馆或家庭厨房内常见是细菌性食物中毒。之所以发生细菌性食物中毒,是因为首先是食品被细菌污染;其次是细菌在适宜的条件下,在被污染的食品中大量繁殖或产生毒素;最后是未对食品加热或加热处理不彻底,未能杀死细菌或破坏细菌毒素。5.细菌性食物中毒分类l l1)感染型:是指食入含有大量活菌的食物)感染型:是指食入含有大量活菌的食物导致致的食物中毒。其前提是食物被致病菌的食物中毒。其前提是食物被致病菌污染,并且染,并且有一定的有一定的时间和条件使和条件使细菌在食品中大量繁殖达菌在食品中大量繁殖达到可引起到可引起发病的数量,如沙病的数量,如沙门氏菌属中的某些氏菌属
8、中的某些细菌,蜡菌,蜡样芽胞杆菌等。芽胞杆菌等。l l(2)毒素中毒型:是由于食品受到)毒素中毒型:是由于食品受到细菌菌污染后,染后,在食品中繁殖并在适宜的条件下在食品中繁殖并在适宜的条件下产生大量的外毒生大量的外毒素所引起的中毒。常素所引起的中毒。常见的有葡萄球菌的有葡萄球菌肠毒素,肉毒素,肉毒梭菌素毒引起的食物中毒毒梭菌素毒引起的食物中毒。6.世界公认的8种细菌性食物中毒病原菌 l沙沙门氏菌属、金黄色葡萄球氏菌属、金黄色葡萄球菌、蜡菌、蜡样芽芽孢杆菌、付溶血杆菌、付溶血性孤菌、性孤菌、产气气荚膜梭菌,肉膜梭菌,肉毒梭菌、致病性大毒梭菌、致病性大肠菌等,菌等,椰毒假椰毒假单胞菌。胞菌。7.我
9、国常见食物中毒病原菌l l除以上除以上8种外,种外,还有有变形杆菌,小形杆菌,小肠结肠炎耶炎耶尔森氏菌,空森氏菌,空肠弯曲菌,弯曲菌,溶血性溶血性链球菌,球菌,粪链球菌,志球菌,志贺氏氏菌,气菌,气单胞菌,胞菌,类志志贺氏氏邻单胞菌,胞菌,溶藻弧菌,麦氏弧菌,不凝集弧菌。溶藻弧菌,麦氏弧菌,不凝集弧菌。8.我市近年来引起食物中毒细菌l变形杆菌,蜡形杆菌,蜡样芽芽孢杆菌,杆菌,沙沙门氏菌,致泻大氏菌,致泻大肠埃希氏埃希氏菌,副溶血性弧,志菌,副溶血性弧,志贺氏菌,氏菌,弗尼斯杆菌。弗尼斯杆菌。9.我市食物中毒情况我市食物中毒情况l我市20022010年共实验室诊断检测食物l中毒26起,中毒人数4
10、54人。引起食物中l毒常见原因是食品受到细菌污染,共发生l细菌性食物中毒18起,中毒人数299人。10.食物中毒病原食物中毒病原检验情况情况11.12.l2009西湖区慧海幼儿园20蜡样芽孢13.标本采集 l l样品品质量量对微生物微生物检验有非常重要的作用,有非常重要的作用,样品的采集品的采集应在在边调查边分析的基分析的基础上确定,上确定,这样可采集到典型的可采集到典型的样品。同品。同时在在调查分析分析时,检验人人员与流与流调人人员的密切配合可确定更合理的密切配合可确定更合理的的检验样品和品和检验方法。方法。14.样品采集的关品采集的关键因素(因素(1)l l样品采集的数量与品采集的数量与质
11、量直接关系到治病物量直接关系到治病物质的的判定,要判定,要查明食物中毒的治病子,必明食物中毒的治病子,必须采集与采集与中毒相关的所有中毒相关的所有样品,并根据病人的品,并根据病人的临床症状,床症状,结合流行病学合流行病学调查资料,有重点,有目的地采料,有重点,有目的地采集。集。这些些样品包括剩余食物,患者便品包括剩余食物,患者便样,从,从业人人员便便样,血液,呕吐物,工具容器涂抹物。,血液,呕吐物,工具容器涂抹物。特特别是剩余食物,便是剩余食物,便样,血液(初期,恢复期),血液(初期,恢复期)15.样品采集的关品采集的关键因素(因素(2)l l采采样的及的及时准确是准确是查明食物中毒致病物明食
12、物中毒致病物质的重的重要要环节。不同采。不同采样时间与食物中毒的确与食物中毒的确证率有率有很大关系,由于采很大关系,由于采样不及不及时,导致可疑食物被致可疑食物被处理,中毒理,中毒现场被打被打扫干干净,即使采到剩余食,即使采到剩余食物,物,检出致病菌,也可能与来至病人的出致病菌,也可能与来至病人的样品不品不符合,因此,及符合,因此,及时准确采准确采样致关重要。致关重要。16.食物中毒现场采样常备用品 l注注射射器器 止止血血带 消消毒毒棉棉签 75%酒酒精精棉球棉球 碘酒棉球碘酒棉球 l灭菌菌空空试管管 酒酒精精灯灯 火火柴柴 消消毒毒纱布布 调匙匙 l勺勺子子 夹子子 镊子子 剪剪刀刀 记号
13、号笔笔 记录 无无菌菌广广口口瓶瓶 灭菌菌玻玻璃璃试管管 灭菌菌粪便便盒盒 无无菌菌塑塑料料袋袋 肛肛拭拭棉棉棒棒 工工作作衣衣 口口罩罩 帽帽子子 手手套套 灭菌菌生生理理盐水水 无无菌菌平平皿皿 胶胶布布 胶胶水水 无无菌菌干干棉棉球球 其其他他根根据需要培养基。据需要培养基。17.细菌性食物中毒病原菌检验方法选择l食物中毒是突发事件,在食物中毒事件过程中检验时间要求,所以实验室为了尽快出具报告,要根据具体情况,选择正确的检验方法。引起食物中毒的细菌种类繁多,临床症状和潜伏期各不相同,检验人员要了解各种食物中毒的机理,了解食物中毒的治病环节进行分析寻找食物中毒的污染来源和可能感染途径。以确
14、定原因食品,判定检验方向,当临床症状不明显,原因食品不明确时,有针对性的选择会顾此失彼而漏检,而且目前发生的食物中毒,已由单一的菌转为两种或两种以上共同引起,在开始检测时,就要多选几个项目。18.几种常用方法l经典方法:常典方法:常规标准的准的检验方法,包括形方法,包括形态观察,培察,培养特征,生化特性,血清学养特征,生化特性,血清学试验,噬菌体,噬菌体应用,抗体用,抗体测定,毒力定,毒力试验。l新的快速新的快速检验方法:自方法:自动鉴定定仪器,手工器,手工API方法,方法,一些特殊一些特殊显色培养基,色培养基,纸片法。片法。经典方法准确性高,典方法准确性高,稳定性也定性也较好,但好,但时间较
15、长:快速方法:快速方法时间短,但准短,但准确性差,食物中毒确性差,食物中毒检验中,中,应采用多种方法,快速方采用多种方法,快速方法灵敏性高,可以用于初法灵敏性高,可以用于初筛,用其他方法同,用其他方法同时验证,进行确行确认。19.食物中毒检验的物资准备l(1)合成培养基:一些)合成培养基:一些选择性培养性培养 基。基。新新鲜羊血,一些涉及到的抗菌素。羊血,一些涉及到的抗菌素。l(2)光)光电两用双目两用双目显微微镜。l(3)诊断用品:血清。断用品:血清。l(4)消耗性材料。)消耗性材料。l(5)根据情况)根据情况储备一些新的快速一些新的快速检验材材 料。料。20.常见中毒细菌在食品中的分布沙沙
16、门氏菌。氏菌。动物和人的物和人的肠脏。蛋、奶蛋、奶类及及奶奶类制成品、制成品、肉肉类及肉及肉类制成品,特制成品,特别是家禽是家禽类食品食品 金黄葡萄球金黄葡萄球菌。菌。咽喉、鼻腔、咽喉、鼻腔、皮肤、皮肤、头发和和伤口。口。糕点、雪糕、糕点、雪糕、奶及奶奶及奶类制制成品、蛋制成品、蛋制品品 副溶血性弧副溶血性弧菌。菌。海洋和海海洋和海产品海品海产品和品和腌制食品腌制食品(例如海蜇、(例如海蜇、墨墨鱼、咸菜、咸菜、熏蹄等)。熏蹄等)。腊腊样芽芽孢杆杆菌菌米米饭,乳制,乳制品,蔬菜,品,蔬菜,点心。点心。空气,土壤,空气,土壤,尘埃,植物。埃,植物。21.食物中毒的食物中毒的诊断断标准准l食物中毒食
17、物中毒诊断断标准及技准及技术处理理总则l中华人民共和国卫生行业标准l1.沙门氏菌食物中毒诊断标准及处理原则ws/T13一1996l2.变形杆菌食物中毒诊断标准及处理原则ws/T9一1996l3.蜡样芽孢杆菌食物中毒诊断标准及处理原则ws/T82一1996l4.副溶血性弧菌食物中毒诊断标准及处理原则ws/T81一1996l5.葡萄球菌食物中毒诊断标准及处理原则ws/T80一1996l6病原性大肠埃希氏食物中毒诊断标准及处理原则ws/T8一1996l7肉毒梭菌食物中毒诊断标准及处理原则ws/T83一1996l8产气荚膜梭菌食物中毒诊断标准及处理原则ws/T7一1996l9椰毒假单胞酵米面亚种食物中
18、毒诊断标准及处理原则ws/T12一199622.中华人民共和国国家标准食物中毒诊断标准及技术处理总则(GB1493894)l4.2细菌性和真菌性食物中毒诊断标准总则l食入细菌性或真菌性中毒食品引起的食物中毒,即为细菌性食物中毒或真菌性食物中毒,其诊断标准总则主要依据包括;l4.2.1流行病学调查资料;l4.2.2病人的潜伏期和特有的中毒表现;l4.2.3实验室诊断资料,对中毒食品或与中毒食品有关的物品或病人的标本进行检验的资料。23.4诊断标准总则41食物中毒诊断标准总则食物中毒诊断标准主要以流行病学调查资料及病人的潜伏期和中毒的特有表现为依据,实验室诊断是为了确定中毒的病因而进行的。4。11
19、中毒病人在相近的时间内均食用过某种共同的中毒食品,未食用者不中毒。停止食用中毒食品后,发病很快停止。412潜伏期较短,发病急剧,病程亦较短413所有中毒病人的临床表现基本相似。414一般无人与人之间的直接传染。415食物中毒的确定应尽可能有实验室诊断资料,由于采样不及时或已用药或其他技术、学术上的原因而未能取得实验室诊断资料时,可判定为原因不明食物中毒,必要时可由三名副主任医师以上的食品卫生专家进行评定24.。42细菌性和真菌性食物中毒诊断标准总则食入细菌性或真菌性中毒食品引起的食物中毒,即为细菌性食物中毒或真菌性食物中毒,其诊断标准总则主要依据包括:42。1流行病学调查资料;422病人的潜伏
20、期和特有的中毒表现:423实验室诊断资料,对中毒食品或与中毒食品有关的物品或病人的标本进行检验的资料。25.几种常几种常见食物中毒的食物中毒的检验程序程序26.副溶血性弧菌食物中毒诊断标准及处理原则WS/T811996l1主题内容与适用范围本标准规定了副溶血性弧菌食物中毒的诊断标准、判定原则和处理原则。本标准适用于副溶血性弧菌食物中毒。2引用标准GB4789.794食品卫生微生物学检验副溶血性弧菌检验GB1493894食物中毒诊断标准及技术处理总则3诊断标准3.1流行病学特点3.1.1主要引起中毒的食品为海产品(鱼、虾、蟹、贝类等及其制品)和直接或间接被本菌污染的其他食品。3.1.2本菌引起食
21、物中毒多发生在夏、秋季节(69月)。27.l3.2临床表现3.2.1发病急,潜伏期短。3.2.2主要症状为腹痛、腹泻(大部为水样便,重者为粘液便和粘血便)、恶心、呕吐、发烧,其次尚有头痛、发汗、口渴等症状。3.3实验室诊断3.3.1由中毒食品、食品工具、患者腹泻便或呕吐物中检出生物学特性(见GB4789.7)或血清型别一致的副溶血性弧菌。3.3.2动物(小鼠)试验具有毒性或与患者血清有抗体反应。3.3.3按GB4789.7进行检验。28.l4判定原则4.1符合本菌的流行病学与临床表现。l4.2实验室检验各项指标的检定结果符合l3.3.1的要求。有条件时做3.3.2。29.沙沙门氏菌食物中毒氏菌
22、食物中毒诊断断标准及准及处理原理原则WS/T 131996 l1 主主题内容与适用范内容与适用范围本标准规定了沙门氏菌食物中毒的诊断标准、判定原则和处理原则。本标准适用于沙门氏菌引起的食物中毒。l2 引用引用标准准GB4789.4食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂GB14938食物中毒诊断标准及技术处理总则l3 诊断断标准准3.1流行病学特点3.1.1中毒食品多为动物性食品。3.1.2中毒患者均食用过某些可疑原因食品。出现的临床症状基本相同,潜伏期多为448h。3.2临床表现主要症状有:恶心、头晕、头痛、寒战、冷汗、全身无力、饮食不振,呕
23、吐、腹泻、腹胀、腹痛、发烧,重者可引起痉挛、脱水、休克等。急性腹泻以黄色或黄绿色水样便为主,有恶臭。以上症状可因病情轻重而反应不同。3.3实验室诊断30.l3.3.1由可疑食品、病人呕吐物或腹泻便中检出血清学型别相同的沙门氏菌。如无可疑食品,从几个病人呕吐物或腹泻便中检出血清学型别相同的沙门氏菌也可。3.3.2有必要时可观察分离出的沙门氏菌与病人血清的凝集效价,恢复期应比初期有所升高(一般约升高4倍)。3.3.3沙门氏菌检验方法按GB4789.4进行。l4 判定原判定原则4.1符合本菌的流行病学特点与临床表现。4.2实验室检验结果应符合3.3.1或3.3.2的要求(如均未检出相同的细菌时,可用
24、食品中检出的沙门氏菌与病人血清作凝集试验进一步证实)。4.3符合4.1,不符合4.2条则按GB14938执行。31.蜡蜡样芽胞杆菌食物中毒芽胞杆菌食物中毒诊断断标准及准及处理原理原则l1主题内容与适用范围l本标准规定了蜡样芽胞杆菌引起食物中毒的诊断标准、判定原则及处理原则。l本标准适用于蜡样芽胞杆菌引起的食物中毒。l2引用标准lGB4789.1494食品卫生微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验lGB1493894食物中毒诊断标准及技术处理总则。l3诊断标准l3.1流行病学特点l3.1.1引起中毒的食品多为剩米饭、米粉、甜酒酿、剩菜、甜点心及乳、肉类食品。l3.1.2引起中毒食品常因食前保存温度较高(2
25、0以上)和放置时间较长,使食品中的蜡样芽胞杆菌得到繁殖。l3.2临床表现l3.2.1呕吐型:以恶心、呕吐为主,并有头晕、四肢无力、潜伏期较短(一般为0.55h)。l3.2.2腹泻型:以腹痛、腹泻为主,潜伏期较长(一般为816h)。32.l3.3实验室诊断l3.3.1中毒食品中蜡样芽胞杆菌菌数测定(按GB4789.14)i每克食品中一般均。l3.3.2中毒病人呕吐物或粪便中检出的蜡样芽胞样杆菌与中毒食品检出的菌株,其生化状或血清型须相同。l4判定原则l4.1符合本标准的流行病学特点和临床表现。l4.2实验室诊断必须符合3.3.1或3.3.8方可判定。l5处理原则l按GB14938执行。l33.变
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