常用染色液的配制.doc

常用染色液的配制
1. 番红水液
番红0.1g溶入蒸馏水,定溶至100ml。
2. 番红酒液
番红0.5g或1g溶入50%酒精,定溶至100ml
3. 固绿染液
固绿0.1g溶入95%酒精，定溶至100ml。
4. 碘-碘化钾染液
碘化钾溶入100ml蒸馏水，再加入1g碘，溶解后即可使用。
5. 苏丹Ⅲ（或Ⅳ）染液
将0.1g苏丹Ⅲ或Ⅳ溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。
6.改良苯酚品红染液
原液A：将3g碱性品红溶入100ml 70%酒精，此液可长期保存。
原液B：将10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。
原液C：将55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。
染色液：取C液20ml，加45%冰醋酸80ml，充分混匀，再加入1g山梨醇，放置14天后使用，可保存3年。
7. 间苯三酚染液
将5g间苯三酚溶入100ml 95%酒精（若溶液呈黄色，即为失效）。
8. 中性红染液
将0.1g中性红溶入100ml蒸馏水，用时稀释10倍。
9. 钌红染液
将5~10mg钌红溶入25~50ml蒸馏水，现用现配。
10.龙胆紫染液
将0.2g龙胆紫溶入100ml蒸馏水。现常用结晶紫代替。必要时可将医用紫药水稀释5倍后代用。
11.铁醋酸洋红染液
先将100ml 45%醋酸水溶液置入200ml的锥形瓶中煮沸，移去火苗，然后慢慢地分多次加入1g洋红粉末（切记不可一次倒入）。待全部倒入后，再煮沸1~2min，并悬入一生锈的小铁钉于染液中，过1min后取出，使染色剂略含铁质，以增加染色性能。静置12h后过滤于棕色瓶中备用（置于避光处）。
12.苏木精染液
苏木精的配方很多，常用的有如下3种：
配方Ⅰ：苏木精水溶液
0.5g苏木精溶入100ml煮沸的蒸馏水中，静置24h后可使用。
配方Ⅱ：代氏苏木精（Delarfield’s haematoxylin）
甲液：苏木精1g + 无水酒精6ml
乙液：硫酸铝铵（铵矾）10g + 蒸馏水100ml
丙液：甘油25ml + 甲醇25ml
分别配制甲、乙两液，将甲液一滴滴地加入乙液中，充分搅拌后，放入广口瓶中用纱布蒙住瓶口，置于温暖和光线充足处7~10天，再加入丙液，混匀后静置1~2月，至颜色变为深紫色后，过滤备用，可长期保存。
配方Ⅲ：爱氏苏木精（Ehrlich’s haematoxylin）
苏木精1g + 无水或95%酒精50ml + 蒸馏水50ml + 甘油50ml + 冰醋酸5ml + 硫酸铝钾（钾矾）3~5g。配制时，先将苏木精溶于酒精中，然后依次加入蒸馏水、甘油和冰醋酸，最后加入研细的钾矾，边加边搅拌，直到瓶底出现钾矾结晶为止。混合后溶液颜色呈淡红色，放入广口瓶中，用纱布封口，自然氧化1~2月，至颜色变为深红色时即可过滤备用，可长期保存。
13.席夫试剂（Schiff’s regent）
将0.5g碱性品红溶入煮沸的蒸馏水，搅拌使其充分溶解。冷却至50℃时，过滤于棕色细口瓶中，加入10ml1mol/L盐酸。冷却至25℃左右，加入1g偏亚硫酸钾或钠（Na2S2O5或K2S2O5），振荡使其溶解，密封瓶口，置于黑暗低温处过夜。次日检查，若染色液透明无色或呈淡茶色，即可使用。若染色较深，可加入少量优质活性炭（0.5~2g），振荡1min，置于4℃冰箱中过夜，过滤使用。此液配好后，应塞紧瓶塞，外包黑纸，贮藏于冰箱中。
14.硫堇染液
将0.25g硫堇粉末，溶于100ml蒸馏水中，即可使用。使用此液时。需用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片，能产生多色反应。
15.亚甲基蓝染液
0.1g亚甲基蓝溶入100ml蒸馏水即可。
16.詹纳斯绿B（Janus green B）染液
5.18g詹纳斯绿溶入100ml蒸馏水，配成饱和水溶液。用时需稀释，稀释倍数应视材料而异。
17.苏木精-曙红(HE)染液
曙红（Eosin），酸性染料，为最优良的动物细胞染料，与苏木精配合使用（复染）对动物组织进行对比染色。
苏木精的染液的配方同上。曙红有以下配制方法：
配方Ⅰ：曙红0.5g + 95%酒精100ml
配方Ⅱ：曙红0.5g + 蒸馏水100ml
配方Ⅲ：曙红0.5g + 95%酒精25ml +蒸馏水75ml