妇科感染常见病原菌及检测方法ppt课件.pptx

妇科感染常见病原菌及检测方法妇科感染常见病原菌及检测方法妇科感染常见疾病妇科感染常见疾病阴道病阴道病/阴道炎阴道炎尿道炎尿道炎子宫颈炎子宫颈炎盆腔感染盆腔感染子宫内膜子宫内膜炎炎输卵管输卵管卵巢脓肿卵巢脓肿输卵管炎输卵管炎症症妇科感染实验室检查妇科感染实验室检查的意义的意义很多妇科感染症状、体征有很多妇科感染症状、体征有很多相似之处。很多相似之处。临床诊断本临床诊断本身既不敏感，也不特异身既不敏感，也不特异。实验室诊断可以：实验室诊断可以：明确病原微生物，使治疗更具明确病原微生物，使治疗更具明确病原微生物，使治疗更具明确病原微生物，使治疗更具针对性；针对性；针对性；针对性；提高患者治疗依从性；提高患者治疗依从性；提高患者治疗依从性；提高患者治疗依从性；使患者更有可能遵从性伴侣告使患者更有可能遵从性伴侣告使患者更有可能遵从性伴侣告使患者更有可能遵从性伴侣告知知知知。病例一病例一患者，女性，患者，女性，2424岁，已婚，岁，已婚，孕孕2525周。外阴瘙痒一周来就周。外阴瘙痒一周来就诊。妇检：宫高与妊娠月份诊。妇检：宫高与妊娠月份相符相符,外阴潮红、充血，见外阴潮红、充血，见大量黄色脓性分泌物。大量黄色脓性分泌物。考虑什么病？进一步做什么考虑什么病？进一步做什么检查？检查？阴道炎阴道炎正常情况下阴道内寄居有大正常情况下阴道内寄居有大量需氧菌及厌氧菌，形成量需氧菌及厌氧菌，形成正正常的阴道菌群常的阴道菌群。任何原因将阴道菌群生态平任何原因将阴道菌群生态平衡打破，可形成衡打破，可形成条件致病菌，条件致病菌，引起阴道炎引起阴道炎。阴道粘膜生态阴道粘膜生态系统系统阴道炎阴道炎临床常见有：细菌性阴道病、临床常见有：细菌性阴道病、念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎。炎。吴文湘,廖秦平.阴道炎的诊治进展J.中国实用妇科与产科杂志,2009(12):949-952.阴道炎相关病原实验室阴道炎相关病原实验室检查检查常见病原因子常见病原因子常见病原因子常见病原因子 诊断方法诊断方法诊断方法诊断方法最优标本最优标本最优标本最优标本 转运转运转运转运要求及最佳要求及最佳要求及最佳要求及最佳时时时时间间间间酵母菌酵母菌（pH4.5）盐水湿盐水湿片和片和 10KOH 阴道分泌物拭子阴道分泌物拭子 置于置于 0.5mL 生理盐生理盐水或转运拭子水或转运拭子，室室温温，2h定量革兰染色定量革兰染色 阴道分泌物拭子阴道分泌物拭子 转运拭子送检转运拭子送检，室温室温，12hDNA 杂交探杂交探针针 阴道分泌物拭阴道分泌物拭子子室温，室温，7d毛毛滴虫滴虫（pH4.5）盐水湿片盐水湿片 阴道阴道分泌物拭子分泌物拭子 置于盐水送检置于盐水送检，室室温温，30min30min（最佳最佳最佳最佳）2 2h h快速抗原检查快速抗原检查 阴道上皮阴道上皮/分泌物拭子分泌物拭子 转运拭子或盐水送检，转运拭子或盐水送检，室温，室温，24hDNA 杂交探杂交探针针 阴道分泌物阴道分泌物拭子拭子室温，室温，7d培养培养 阴道分泌物拭子阴道分泌物拭子 直接放入直接放入 InPouch TV 培养系统培养系统送检送检室温，室温，48h核酸扩增实验核酸扩增实验阴道拭子、宫颈拭子、阴道拭子、宫颈拭子、尿液尿液、液、液基细胞学标基细胞学标本、尿道拭子本、尿道拭子、直肠、直肠拭子、咽拭子拭子、咽拭子室温，室温，7d病例病例1患者，女性，患者，女性，2424岁，已婚，孕岁，已婚，孕2525周。外阴瘙痒一周来就诊。周。外阴瘙痒一周来就诊。妇检：宫高与妊娠月份相符妇检：宫高与妊娠月份相符,外外阴潮红、充血，见大量黄色脓阴潮红、充血，见大量黄色脓性分泌物。性分泌物。医生：医生：根据病史及临床表现可初根据病史及临床表现可初步诊断为步诊断为阴道炎阴道炎阴道炎阴道炎。取阴道分泌取阴道分泌取阴道分泌取阴道分泌物拭子，嘱病人立即送检物拭子，嘱病人立即送检物拭子，嘱病人立即送检物拭子，嘱病人立即送检，以，以明确病原学诊断。明确病原学诊断。念珠菌性阴道炎念珠菌性阴道炎主要病原菌为：主要病原菌为：白色假丝酵母菌白色假丝酵母菌 约占约占80%-90%光滑假丝酵母菌光滑假丝酵母菌 热带假丝酵母菌热带假丝酵母菌 近平滑假丝酵母菌近平滑假丝酵母菌约占约占10%-20%念珠菌性阴道炎的实验念珠菌性阴道炎的实验室诊断室诊断1.pH 4.51.pH 4.51.pH 4.51.pH 4.51.pH 4.51.pH 4.51.pH 4.52.2.盐水湿片盐水湿片+10%KOH+10%KOH3.3.定量革兰染色定量革兰染色Nugent评分评分4.DNA4.DNA杂交探针杂交探针线索细线索细胞胞KOH氢氧化钾氢氧化钾盐水湿片盐水湿片线索细胞线索细胞是诊断是诊断BVBV的最敏感的最敏感特异的指标特异的指标。胺试验胺试验将一滴阴道分泌物滴于玻片上，将一滴阴道分泌物滴于玻片上，再加一滴再加一滴10KOH，可闻到氨，可闻到氨味或鱼腥样气味，即胺试验阳味或鱼腥样气味，即胺试验阳性。性。10%KOH氢氧化钾氢氧化钾定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评分评分定量革兰染色是定量革兰染色是BV 诊断最诊断最特异的检查。特异的检查。形态类别形态类别每个油镜视野菌体数每个油镜视野菌体数/分值分值得得分分011-55-3030加德纳菌加德纳菌/普雷普雷沃菌沃菌(革兰染色不定、革兰染色不定、球杆菌球杆菌)01234动弯杆菌动弯杆菌01234乳酸杆菌乳酸杆菌43210定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评分评分乳酸杆菌革兰染色乳酸杆菌革兰染色定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评分评分阴道加德纳菌革兰染色阴道加德纳菌革兰染色定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评分评分动弯杆菌革兰染色动弯杆菌革兰染色定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评分评分线索细胞革兰染色线索细胞革兰染色定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评分评分分数解释标准：分数解释标准：0-3 0-3 分分 正常正常 4-7 4-7 分分 中介中介 7-10 7-10 分分 细菌性阴道炎细菌性阴道炎定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评分评分乳酸杆菌乳酸杆菌0 0分，上皮细胞周围非常分，上皮细胞周围非常清楚。清楚。评分：评分：0 0分分定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评分评分乳酸杆菌乳酸杆菌0 0分，少量杂菌，见白细分，少量杂菌，见白细胞和菌丝。胞和菌丝。评分：评分：1 1分分 诊断：诊断：BVBV阴性，但诊阴性，但诊断为断为VVCVVC定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评分评分乳酸杆菌乳酸杆菌2 2分，加德纳菌分，加德纳菌/普雷普雷沃菌等沃菌等 3 3分，动弯杆菌分，动弯杆菌 1 1分。分。评分：评分：6 6分分 诊断：诊断：BVBV中间型中间型定量革兰染色定量革兰染色 Nugent评分评分乳酸杆菌乳酸杆菌3 3分，加德纳菌分，加德纳菌/普雷沃菌普雷沃菌等等 3 3分，动弯杆菌分，动弯杆菌 4 4分。分。评分：评分：1010分分 诊断：诊断：BVBV阴道毛滴虫阴道毛滴虫 阴道的致病性厌氧寄生原虫，虫体为阴道的致病性厌氧寄生原虫，虫体为 8-45m，呈梨形或椭圆形，无色透明，大小为，呈梨形或椭圆形，无色透明，大小为白细胞的白细胞的2-3倍。倍。毛滴虫性阴道炎的实验毛滴虫性阴道炎的实验室诊断室诊断1.pH 4.51.pH 4.51.pH 4.51.pH 4.52.2.盐水湿片盐水湿片3.3.快速抗原检查快速抗原检查4.DNA4.DNA杂交探针杂交探针5.5.培养培养6.6.核酸扩增实验核酸扩增实验盐水湿片盐水湿片革兰染色革兰染色快速抗原检查快速抗原检查检测阴道毛滴虫特定的抗原检测阴道毛滴虫特定的抗原已有商品化试剂已有商品化试剂最优试验条件并不需要活的微最优试验条件并不需要活的微生物生物培养培养核酸扩增试验核酸扩增试验APTIMA Trichomonas vaginalis(ATV)test（Gen-Probe,Inc.San Diego,CA）是近期是近期FDA 批准的检查，既可批准的检查，既可用于女性用于女性TV 的筛检，也可用于的筛检，也可用于诊断。诊断。可以使用多种标本类型。可以使用多种标本类型。一些实验室也可通过比对，验一些实验室也可通过比对，验证自己的证自己的PCR方法。方法。病例二病例二患者，女性，患者，女性，4040岁，已婚，岁，已婚，阴道分泌物增多，伴腰酸，阴道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血偶有性生活后出血2 2年。检年。检查外阴正常，宫颈肥大，查外阴正常，宫颈肥大，度糜烂，接触性出血。度糜烂，接触性出血。考虑什么病？进一步做什么考虑什么病？进一步做什么检查？检查？子宫颈炎子宫颈炎子宫颈可因各种致病因素的侵袭子宫颈可因各种致病因素的侵袭而发生炎症，有急性和慢性两种。而发生炎症，有急性和慢性两种。疾病疾病疾病疾病致病菌致病菌致病菌致病菌急性宫颈炎急性宫颈炎沙眼衣原体、淋病奈沙眼衣原体、淋病奈瑟菌瑟菌慢性宫颈炎慢性宫颈炎性传播病原体性传播病原体：沙眼：沙眼衣原体、淋病奈瑟菌、衣原体、淋病奈瑟菌、单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒内源性病原体内源性病原体：葡萄：葡萄球菌、链球菌、大肠球菌、链球菌、大肠杆菌等；杆菌等；部分与引起阴道炎的部分与引起阴道炎的病原菌相同病原菌相同尿道炎尿道炎是指尿道黏膜的炎症是指尿道黏膜的炎症。多为致。多为致病菌逆行侵入尿道引起。病菌逆行侵入尿道引起。疾病疾病疾病疾病致病菌致病菌致病菌致病菌淋病性尿道炎淋病性尿道炎 淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌非淋病性尿道炎非淋病性尿道炎 沙眼衣原体、解脲支沙眼衣原体、解脲支原体、阴道毛滴虫、原体、阴道毛滴虫、嗜血短杆菌、单纯疱嗜血短杆菌、单纯疱疹病毒最常见疹病毒最常见非特异性尿道炎非特异性尿道炎大肠埃希杆菌、链球大肠埃希杆菌、链球菌属及葡萄球菌属菌属及葡萄球菌属尿道炎尿道炎/宫颈炎相关病原实宫颈炎相关病原实验室检查验室检查常见病原常见病原常见病原常见病原因子因子因子因子 诊断方法诊断方法诊断方法诊断方法 最优标本最优标本最优标本最优标本 转运要求及最佳转运要求及最佳转运要求及最佳转运要求及最佳时间时间时间时间沙眼衣原沙眼衣原体体 核酸扩增实验核酸扩增实验尿尿液、宫颈液、宫颈内、阴道内、阴道和和/或尿道拭子（直肠、或尿道拭子（直肠、咽部咽部、结膜、结膜、液基细、液基细胞学标本）胞学标本）实验室提供转运装实验室提供转运装置，置，室温，室温，2d 杂交探针杂交探针 宫颈内或尿道拭子宫颈内或尿道拭子 实验室提供转运装实验室提供转运装置，置，室温，室温，2d 培养培养宫颈内、尿道、结膜、宫颈内、尿道、结膜、NP、咽、直肠拭子、咽、直肠拭子 实验室提供转运装实验室提供转运装置，置，4冷藏；冷藏；2h 直接免疫荧光直接免疫荧光染色染色结膜拭子结膜拭子 转运培养基，室温，转运培养基，室温，2h淋病奈瑟淋病奈瑟菌菌 革兰染色革兰染色 尿道分泌物尿道分泌物 直接涂片或将拭子直接涂片或将拭子置于转运培养基，置于转运培养基，室温，立即室温，立即核酸扩增实验核酸扩增实验尿尿液、宫颈液、宫颈内、阴道内、阴道和和/或尿道拭或尿道拭子（直肠、子（直肠、咽部、结膜、液基细咽部、结膜、液基细胞学标本）胞学标本）实验室提供转运装实验室提供转运装置，置，室温，室温，2d 杂交探针杂交探针 宫颈内或尿道拭子宫颈内或尿道拭子 实验室提供转运装实验室提供转运装置，置，室温，室温，2d 培养培养 宫颈内、尿道、结膜、宫颈内、尿道、结膜、NP、咽、直肠拭子、咽、直肠拭子 转运培养基，转运培养基，室温，室温，1h，不要冷藏，不要冷藏 标标本本尿道炎尿道炎/宫颈炎相关病原实宫颈炎相关病原实验室检查验室检查常见病原因常见病原因常见病原因常见病原因子子子子 诊断实验诊断实验诊断实验诊断实验 最优标本最优标本最优标本最优标本 转运要求及最佳转运要求及最佳转运要求及最佳转运要求及最佳时间时间时间时间阴道毛滴虫阴道毛滴虫 盐水湿片盐水湿片 宫颈内或尿道拭子宫颈内或尿道拭子 置于置于0.5mL盐水，盐水，30min-2h 快速抗原快速抗原检查检查宫颈内拭子宫颈内拭子 实验室提供转运装实验室提供转运装置，置，室温，室温，24h 杂交杂交探针探针宫颈内或阴道拭子宫颈内或阴道拭子 实验室提供转运装实验室提供转运装置，置，室温，室温，7d 培养培养宫颈内或尿道拭子宫颈内或尿道拭子 直接接种在直接接种在InPouch TV培养系培养系统，统，2-5d核酸扩增实验核酸扩增实验阴道、宫颈内拭子，尿，阴道、宫颈内拭子，尿，液基细胞学标本液基细胞学标本，尿道，尿道、直肠、咽部拭子直肠、咽部拭子实验室提供转运装实验室提供转运装置，置，室温，室温，2d HSVHSV直接免疫荧光直接免疫荧光染色染色病变基底部刮取病变基底部刮取 床边制片，室温，床边制片，室温，24h培养培养 病变基底部刮取病变基底部刮取 置于置于VTM/UTM，室温或置于冰上，室温或置于冰上，2h核酸扩增实验核酸扩增实验病变基底部刮取或分泌病变基底部刮取或分泌物拭子物拭子 实验室提供转运装实验室提供转运装置置病例二病例二患者，女性，患者，女性，4040岁，已婚，岁，已婚，阴道分泌物增多，伴腰酸，阴道分泌物增多，伴腰酸，偶有性生活后出血偶有性生活后出血2 2年。检年。检查外阴正常，宫颈肥大，查外阴正常，宫颈肥大，度糜烂，接触性出血。度糜烂，接触性出血。医生：医生：根据临床表现初步诊根据临床表现初步诊断为断为宫颈炎宫颈炎宫颈炎宫颈炎。取。取宫颈内拭子宫颈内拭子宫颈内拭子宫颈内拭子，嘱病人嘱病人立即立即立即立即送检（注意保温）送检（注意保温），以明确感染病原体。，以明确感染病原体。淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌革兰染色革兰染色 为革兰阴性双球菌，似肾形为革兰阴性双球菌，似肾形或咖啡豆状，常成双排列，凹或咖啡豆状，常成双排列，凹面相对。面相对。急性淋病患者的淋球菌常急性淋病患者的淋球菌常被吞噬于中性粒细胞内；慢性被吞噬于中性粒细胞内；慢性淋病患者的淋球菌多分布在细淋病患者的淋球菌多分布在细胞外。胞外。简便、快速，可做出初步简便、快速，可做出初步诊断。诊断。仅对男性患者进行涂片仅对男性患者进行涂片革兰染色革兰染色。淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌细胞内革兰阴性双细胞内革兰阴性双球菌球菌对对GC 特异性特异性达达95细胞外革兰阴性双球细胞外革兰阴性双球菌菌对对GC 特异性达特异性达10-29培养培养诊断淋病的重要手段诊断淋病的重要手段接种到接种到选择培养基选择培养基，置于，置于36、含含5-10%CO2 2，湿润湿润环境中培养。环境中培养。如果床边直接接种标本到选择培如果床边直接接种标本到选择培养基，加养基，加CO2 2 药片形成气体环境，药片形成气体环境，培养敏感性会更好。培养敏感性会更好。培养培养初代培养生长缓慢，初代培养生长缓慢，24小时后可形成灰色小时后可形成灰色/湿湿润、半透明的小菌落（直径润、半透明的小菌落（直径0.5-1mm）。）。氧化酶阳性、触酶阳性、葡萄糖产酸试验阳性氧化酶阳性、触酶阳性、葡萄糖产酸试验阳性且仅分解利用葡萄糖。且仅分解利用葡萄糖。图片图片by陈陈东科东科核酸扩增试验核酸扩增试验已有商品化试剂盒。已有商品化试剂盒。优点是快速、准确，缺点是试验设备要求优点是快速、准确，缺点是试验设备要求高。高。淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌DNA 在感染成功治疗后，在标在感染成功治疗后，在标本中仍可保留本中仍可保留3周之久，所以不能作为治疗周之久，所以不能作为治疗评估指标。评估指标。杂交探针杂交探针目前目前FDA 已有批准的已有批准的GC的杂的杂交试验试剂盒。交试验试剂盒。不可针对尿标本。不可针对尿标本。病例三病例三病人，女，病人，女，24岁，主诉为持续岁，主诉为持续3天的轻度排天的轻度排尿困难，化脓性阴道分泌物，发热，并伴尿困难，化脓性阴道分泌物，发热，并伴有中度的双侧下腹痛。查体：子宫和附件有中度的双侧下腹痛。查体：子宫和附件压痛，化脓性宫颈分泌物。压痛，化脓性宫颈分泌物。考虑什么病？进一步做什么检查？考虑什么病？进一步做什么检查？盆腔炎盆腔炎盆腔炎症性疾病是女性上生殖道一系列疾盆腔炎症性疾病是女性上生殖道一系列疾病的总称。病的总称。包括：包括：子宫内膜炎子宫内膜炎 输卵管卵巢脓肿输卵管卵巢脓肿 输卵管炎症输卵管炎症 盆腔腹膜炎盆腔腹膜炎盆腔炎致病菌盆腔炎致病菌盆盆腔腔炎炎外源性病原外源性病原体体内源性病原内源性病原体体主要为性传播主要为性传播疾病病原体：疾病病原体：淋病奈瑟菌、淋病奈瑟菌、沙眼衣原体、沙眼衣原体、支原体等支原体等来自于原寄生来自于原寄生于阴道的正常于阴道的正常菌群，包括：菌群，包括：需氧菌和厌氧需氧菌和厌氧菌菌内源性病原体内源性病原体需氧菌及兼性厌氧菌需氧菌及兼性厌氧菌：金黄色葡萄球菌、链球菌、大金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌、肠埃希菌、阴道加德纳菌等阴道加德纳菌等厌氧菌：厌氧菌：脆弱拟杆菌、消化链球菌、普脆弱拟杆菌、消化链球菌、普雷沃菌、真杆菌等雷沃菌、真杆菌等 感染特点：容易形成盆腔脓肿、感染特点：容易形成盆腔脓肿、感染性血栓静脉炎，脓液有粪臭感染性血栓静脉炎，脓液有粪臭并有气泡并有气泡盆腔炎相关病原实验室检查盆腔炎相关病原实验室检查常见病原常见病原常见病原常见病原因子因子因子因子 诊断方法诊断方法诊断方法诊断方法最优标本最优标本最优标本最优标本 转运转运转运转运要求及最要求及最要求及最要求及最佳佳佳佳时间时间时间时间混合厌氧混合厌氧菌菌阴道菌从阴道菌从肠杆菌科、肠杆菌科、链球菌、链球菌、支原体支原体血培养和血培养和AST来评来评估少见病原估少见病原血，血，20mL注入注入2瓶瓶，静脉穿刺，静脉穿刺采集采集床边注入血培床边注入血培养瓶，室温，养瓶，室温，1h革兰染色革兰染色需氧和厌氧培养需氧和厌氧培养子宫内膜，输子宫内膜，输卵管卵管-卵巢脓肿卵巢脓肿和和/或输卵管内或输卵管内容物容物置入或注入无置入或注入无菌厌氧容器，菌厌氧容器，室温，室温，30min子宫内膜炎组织学子宫内膜炎组织学证据证据子宫内膜活检子宫内膜活检无菌容器，室无菌容器，室温，温，30min福尔马林容器，福尔马林容器，室温，室温，30min-4h淋病奈瑟淋病奈瑟菌菌沙眼衣原沙眼衣原体体阴道毛滴阴道毛滴虫虫核酸扩增试验核酸扩增试验尿液，宫颈内尿液，宫颈内拭子拭子实验室提供转实验室提供转运装置，室温，运装置，室温，2dHIVHIV EIA抗体抗体血清血清促凝管，室温，促凝管，室温，2h病例三病例三病人，女，病人，女，24岁，主诉为持岁，主诉为持续续3天的轻度排尿困难，化天的轻度排尿困难，化脓性阴道分泌物，发热，并脓性阴道分泌物，发热，并伴有中度的双侧下腹痛。查伴有中度的双侧下腹痛。查体：子宫和附件压痛，化脓体：子宫和附件压痛，化脓性宫颈分泌物。性宫颈分泌物。医生：医生：根据临床表现初步诊根据临床表现初步诊断为断为急性盆腔炎急性盆腔炎急性盆腔炎急性盆腔炎。进一步送检。进一步送检至少一套血培养，抽取脓肿置至少一套血培养，抽取脓肿置于厌氧容器尽快送检，并取宫于厌氧容器尽快送检，并取宫颈内拭子送检，必要时取子宫颈内拭子送检，必要时取子宫内膜活检，以明确感染病原体。内膜活检，以明确感染病原体。盆腔炎相关厌氧菌培养流程 分离培养分离培养挑取菌落挑取菌落需氧培养需氧培养厌氧培养厌氧培养厌氧培养厌氧培养生长生长不生长不生长生长生长专性厌氧菌：专性厌氧菌：做第二次耐氧做第二次耐氧试验试验形态染色形态染色 菌落特征菌落特征 生化反应生化反应 药敏鉴定药敏鉴定 气相色谱气相色谱厌氧厌氧（+）需氧（需氧（-）兼性厌氧菌兼性厌氧菌标标本本肉眼观肉眼观察察染色镜染色镜检检直接涂片染色镜检直接涂片染色镜检 在接种时做涂片，革兰染色并镜检：在接种时做涂片，革兰染色并镜检：观察脓细胞的有无及特殊情况，细菌与细胞之间观察脓细胞的有无及特殊情况，细菌与细胞之间观察脓细胞的有无及特殊情况，细菌与细胞之间观察脓细胞的有无及特殊情况，细菌与细胞之间的相关性。的相关性。的相关性。的相关性。观察有无细菌，微生物的类型和大概的数量以及观察有无细菌，微生物的类型和大概的数量以及观察有无细菌，微生物的类型和大概的数量以及观察有无细菌，微生物的类型和大概的数量以及有无芽孢、形状和位置、着色及菌体特征。有无芽孢、形状和位置、着色及菌体特征。有无芽孢、形状和位置、着色及菌体特征。有无芽孢、形状和位置、着色及菌体特征。大致推断微生物的种类，如梭菌、放线菌、拟杆大致推断微生物的种类，如梭菌、放线菌、拟杆大致推断微生物的种类，如梭菌、放线菌、拟杆大致推断微生物的种类，如梭菌、放线菌、拟杆菌、消化球菌和消化链球菌等。菌、消化球菌和消化链球菌等。菌、消化球菌和消化链球菌等。菌、消化球菌和消化链球菌等。常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征拟杆菌、普雷沃菌属产气荚膜梭菌，破伤风梭菌双歧杆菌属，真杆菌属乳酸杆菌属，放线菌属消化链球菌属，消化球菌属常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征革兰阴性杆菌，两端钝圆着色深，中间着革兰阴性杆菌，两端钝圆着色深，中间着色浅不均匀，且有空泡，长短不一色浅不均匀，且有空泡，长短不一拟拟杆菌杆菌常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征革兰阳性粗短两端钝圆杆菌，无芽孢，中革兰阳性粗短两端钝圆杆菌，无芽孢，中性粒细胞也很少且变形破碎，标本来自战性粒细胞也很少且变形破碎，标本来自战伤或肢体严重肿胀者伤或肢体严重肿胀者产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌常见盆腔炎相关厌氧菌形态特征革兰阳性杆菌，菌体有分枝，呈棒状或栅革兰阳性杆菌，菌体有分枝，呈棒状或栅状排列状排列放线菌放线菌革兰阴性厌氧菌鉴定（革兰阴性厌氧菌鉴定（CLSI M35-A2）革兰阳性厌氧菌鉴定（革兰阳性厌氧菌鉴定（CLSI M35-A2）商品化的鉴定试剂商品化的鉴定试剂我们使用的是商品化的厌氧菌鉴定卡API 20A和ANC病例三病例三该患者脓液涂片见革兰阴性杆菌，染色不该患者脓液涂片见革兰阴性杆菌，染色不均，两端圆而深染，中间不着色或染色较均，两端圆而深染，中间不着色或染色较浅，似为空泡。浅，似为空泡。病例三脓液培养：在厌氧血平板上生长良好，形脓液培养：在厌氧血平板上生长良好，形成圆形、微凸、光滑、边缘整齐、半透明、成圆形、微凸、光滑、边缘整齐、半透明、灰白色，不溶血的菌落。需养平板上不生灰白色，不溶血的菌落。需养平板上不生长。长。病例三API鉴定卡鉴定为鉴定卡鉴定为脆弱拟杆脆弱拟杆菌菌