分支杆菌.ppt

第十五章第十五章 分支杆菌及相似属分支杆菌及相似属 分支杆菌属为分支杆菌属为分支杆菌属为分支杆菌属为G+G+G+G+抗酸菌的代表，广泛存在于自然界，许多抗酸菌的代表，广泛存在于自然界，许多抗酸菌的代表，广泛存在于自然界，许多抗酸菌的代表，广泛存在于自然界，许多是人和多种动物的病原菌，对动物有致病性的主要是：是人和多种动物的病原菌，对动物有致病性的主要是：是人和多种动物的病原菌，对动物有致病性的主要是：是人和多种动物的病原菌，对动物有致病性的主要是：n结核分枝杆菌结核分枝杆菌n牛分支杆菌牛分支杆菌n禽分支杆菌禽分支杆菌n副结核分支杆菌副结核分支杆菌 代表种为结核分支杆菌。代表种为结核分支杆菌。n n结核分枝杆菌（结核分枝杆菌（M.tuberculosisM.tuberculosis）是结核病的病原菌，）是结核病的病原菌，俗名结核杆菌，俗名结核杆菌，18821882年由德国细菌学家科赫（年由德国细菌学家科赫（KochKoch）发现。发现。n n传染源：痰中带菌传染源：痰中带菌传染源：痰中带菌传染源：痰中带菌的病人的病人的病人的病人n n传播途径传播途径传播途径传播途径n n呼吸道为主呼吸道为主呼吸道为主呼吸道为主n n消化道消化道消化道消化道n n泌尿生殖系统泌尿生殖系统泌尿生殖系统泌尿生殖系统n n皮肤皮肤皮肤皮肤n n淋巴、血行播散淋巴、血行播散淋巴、血行播散淋巴、血行播散n n易感人群易感人群易感人群易感人群 牛分支杆菌与人的结核分支杆菌以及禽分支杆菌的许牛分支杆菌与人的结核分支杆菌以及禽分支杆菌的许牛分支杆菌与人的结核分支杆菌以及禽分支杆菌的许牛分支杆菌与人的结核分支杆菌以及禽分支杆菌的许多特性相近，本节一并介绍，下面主要介绍一下多特性相近，本节一并介绍，下面主要介绍一下多特性相近，本节一并介绍，下面主要介绍一下多特性相近，本节一并介绍，下面主要介绍一下牛分牛分牛分牛分支杆菌支杆菌支杆菌支杆菌。细长、直或微弯曲，杆菌，大小约细长、直或微弯曲，杆菌，大小约细长、直或微弯曲，杆菌，大小约细长、直或微弯曲，杆菌，大小约1 1 1 14 4 4 40.4um0.4um0.4um0.4um，单在、，单在、，单在、，单在、少数成丛。在该属中，牛结核较短粗。其余则细长，禽少数成丛。在该属中，牛结核较短粗。其余则细长，禽少数成丛。在该属中，牛结核较短粗。其余则细长，禽少数成丛。在该属中，牛结核较短粗。其余则细长，禽分支杆菌呈多形性，在陈旧培养物及干酪性病灶中菌体分支杆菌呈多形性，在陈旧培养物及干酪性病灶中菌体分支杆菌呈多形性，在陈旧培养物及干酪性病灶中菌体分支杆菌呈多形性，在陈旧培养物及干酪性病灶中菌体呈分枝状。呈分枝状。呈分枝状。呈分枝状。一、形态及染色特性一、形态及染色特性n n结核杆菌一般常用萎结核杆菌一般常用萎结核杆菌一般常用萎结核杆菌一般常用萎-钠氏钠氏钠氏钠氏(Ziehl-Neelsen)(Ziehl-Neelsen)(Ziehl-Neelsen)(Ziehl-Neelsen)抗酸性染抗酸性染抗酸性染抗酸性染色法染色，色法染色，色法染色，色法染色，结核杆菌染成红色结核杆菌染成红色结核杆菌染成红色结核杆菌染成红色，其他非抗酸性细菌及，其他非抗酸性细菌及，其他非抗酸性细菌及，其他非抗酸性细菌及细胞浆质等呈蓝色。结核杆菌的抗酸性取决于胞壁内细胞浆质等呈蓝色。结核杆菌的抗酸性取决于胞壁内细胞浆质等呈蓝色。结核杆菌的抗酸性取决于胞壁内细胞浆质等呈蓝色。结核杆菌的抗酸性取决于胞壁内所含分枝菌酸残基和胞壁固有层的完整性有关。所含分枝菌酸残基和胞壁固有层的完整性有关。所含分枝菌酸残基和胞壁固有层的完整性有关。所含分枝菌酸残基和胞壁固有层的完整性有关。n n抗酸染色方法：首先在已经固定好的抹片上滴加较多抗酸染色方法：首先在已经固定好的抹片上滴加较多抗酸染色方法：首先在已经固定好的抹片上滴加较多抗酸染色方法：首先在已经固定好的抹片上滴加较多的石碳酸复红染色液，加温染色（维持产生蒸汽）的石碳酸复红染色液，加温染色（维持产生蒸汽）的石碳酸复红染色液，加温染色（维持产生蒸汽）的石碳酸复红染色液，加温染色（维持产生蒸汽）3-3-3-3-5min5min5min5min，水洗，然后用，水洗，然后用，水洗，然后用，水洗，然后用3%3%3%3%盐酸酒精脱色，至标本无颜色盐酸酒精脱色，至标本无颜色盐酸酒精脱色，至标本无颜色盐酸酒精脱色，至标本无颜色脱出为止，充分水洗，再用碱性美兰染色脱出为止，充分水洗，再用碱性美兰染色脱出为止，充分水洗，再用碱性美兰染色脱出为止，充分水洗，再用碱性美兰染色1min1min1min1min，水洗。，水洗。，水洗。，水洗。干燥镜检。干燥镜检。干燥镜检。干燥镜检。一、形态及染色特性一、形态及染色特性n n细胞壁组成：细胞壁组成：G+G+，但其细胞壁除含，但其细胞壁除含G+G+细细胞壁的肽聚糖成分外，还含特殊的糖酯，胞壁的肽聚糖成分外，还含特殊的糖酯，使革兰氏染色不易着色，而抗酸染色为使革兰氏染色不易着色，而抗酸染色为红色。糖酯具有刺激哺乳动物免疫系统红色。糖酯具有刺激哺乳动物免疫系统的作用。因此结核分支杆菌可做免疫增的作用。因此结核分支杆菌可做免疫增强剂或免疫佐剂。强剂或免疫佐剂。n n专性需氧，专性需氧，专性需氧，专性需氧，6.4-7.06.4-7.06.4-7.06.4-7.0，37-37.537-37.537-37.537-37.5最适。对最适。对最适。对最适。对营养要求高。营养要求高。营养要求高。营养要求高。n n培养基常用的有：罗杰二氏，改良罗杰二氏，培养基常用的有：罗杰二氏，改良罗杰二氏，培养基常用的有：罗杰二氏，改良罗杰二氏，培养基常用的有：罗杰二氏，改良罗杰二氏，丙酮酸、小川培养基，（内含蛋黄、甘油、马丙酮酸、小川培养基，（内含蛋黄、甘油、马丙酮酸、小川培养基，（内含蛋黄、甘油、马丙酮酸、小川培养基，（内含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐、孔雀绿等）铃薯、无机盐、孔雀绿等）铃薯、无机盐、孔雀绿等）铃薯、无机盐、孔雀绿等）n n结核杆菌在上述培养基中结核杆菌在上述培养基中结核杆菌在上述培养基中结核杆菌在上述培养基中14-15h14-15h14-15h14-15h分裂一次，分裂一次，分裂一次，分裂一次，5%5%5%5%甘油或甘油或甘油或甘油或5-10%CO25-10%CO25-10%CO25-10%CO2可促进（除牛结核外）的结可促进（除牛结核外）的结可促进（除牛结核外）的结可促进（除牛结核外）的结核杆菌生长。核杆菌生长。核杆菌生长。核杆菌生长。二、培养特性二、培养特性 在适宜的培养基在适宜的培养基在适宜的培养基在适宜的培养基生长缓慢生长缓慢生长缓慢生长缓慢，10-3010-3010-3010-30天才形成菌落，菌落粗天才形成菌落，菌落粗天才形成菌落，菌落粗天才形成菌落，菌落粗糙隆起，不透明，边缘不整齐，呈颗粒、结节或菜花状，糙隆起，不透明，边缘不整齐，呈颗粒、结节或菜花状，糙隆起，不透明，边缘不整齐，呈颗粒、结节或菜花状，糙隆起，不透明，边缘不整齐，呈颗粒、结节或菜花状，乳白或米黄色（类似于在组织中形成的病变形态）。乳白或米黄色（类似于在组织中形成的病变形态）。乳白或米黄色（类似于在组织中形成的病变形态）。乳白或米黄色（类似于在组织中形成的病变形态）。二、培养特性二、培养特性 结核杆菌在结核杆菌在罗杰二氏培养基上的罗杰二氏培养基上的菌落特征（菌落特征（4 4星期）星期）牛胸膜结核呈现的珍珠状结节二、培养特性二、培养特性 在液体培养基中由于其壁有糖酯，具疏水性，形在液体培养基中由于其壁有糖酯，具疏水性，形在液体培养基中由于其壁有糖酯，具疏水性，形在液体培养基中由于其壁有糖酯，具疏水性，形成浮于液面的皱褶菌膜。成浮于液面的皱褶菌膜。成浮于液面的皱褶菌膜。成浮于液面的皱褶菌膜。n n结核杆菌对某些理化因子的抵抗力较强。在干痰结核杆菌对某些理化因子的抵抗力较强。在干痰结核杆菌对某些理化因子的抵抗力较强。在干痰结核杆菌对某些理化因子的抵抗力较强。在干痰中存活中存活中存活中存活6 6 6 68 8 8 8个月，若粘附于尘埃上，保持传染性个月，若粘附于尘埃上，保持传染性个月，若粘附于尘埃上，保持传染性个月，若粘附于尘埃上，保持传染性8 8 8 810101010天。天。天。天。n n在在在在3%HCl3%HCl3%HCl3%HCl或或或或NaOHNaOHNaOHNaOH溶液中能耐受溶液中能耐受溶液中能耐受溶液中能耐受30303030分钟，因而常以分钟，因而常以分钟，因而常以分钟，因而常以酸碱中和处理严重污染的检材，杀死杂菌和消化酸碱中和处理严重污染的检材，杀死杂菌和消化酸碱中和处理严重污染的检材，杀死杂菌和消化酸碱中和处理严重污染的检材，杀死杂菌和消化粘稠物质，提高检出率。粘稠物质，提高检出率。粘稠物质，提高检出率。粘稠物质，提高检出率。n n但对湿热、紫外线、酒精的抵抗力弱。在液体中但对湿热、紫外线、酒精的抵抗力弱。在液体中但对湿热、紫外线、酒精的抵抗力弱。在液体中但对湿热、紫外线、酒精的抵抗力弱。在液体中加热加热加热加热626262626315631563156315分钟，直射日光下分钟，直射日光下分钟，直射日光下分钟，直射日光下2 2 2 23 3 3 3小时，小时，小时，小时，75%75%75%75%酒精内数分钟即死亡。酒精内数分钟即死亡。酒精内数分钟即死亡。酒精内数分钟即死亡。三、抵抗力三、抵抗力n n致病性：可引起多种动物的结核病。致病性：可引起多种动物的结核病。致病性：可引起多种动物的结核病。致病性：可引起多种动物的结核病。n n本菌为细胞内寄生菌，病变为局灶性病变，当细菌由呼本菌为细胞内寄生菌，病变为局灶性病变，当细菌由呼本菌为细胞内寄生菌，病变为局灶性病变，当细菌由呼本菌为细胞内寄生菌，病变为局灶性病变，当细菌由呼吸道吸入时，进入肺泡时，被肺内的巨噬细胞（尘细胞）吸道吸入时，进入肺泡时，被肺内的巨噬细胞（尘细胞）吸道吸入时，进入肺泡时，被肺内的巨噬细胞（尘细胞）吸道吸入时，进入肺泡时，被肺内的巨噬细胞（尘细胞）吞噬，但不能被其消化降解，而是在其内增殖形成病灶，吞噬，但不能被其消化降解，而是在其内增殖形成病灶，吞噬，但不能被其消化降解，而是在其内增殖形成病灶，吞噬，但不能被其消化降解，而是在其内增殖形成病灶，产生干酪样坏死。坏死灶被各种吞噬细胞，产生干酪样坏死。坏死灶被各种吞噬细胞，产生干酪样坏死。坏死灶被各种吞噬细胞，产生干酪样坏死。坏死灶被各种吞噬细胞，T T T T、B B B B细胞包细胞包细胞包细胞包围着病灶形成结核结节。免疫低下者这种局部病灶可以围着病灶形成结核结节。免疫低下者这种局部病灶可以围着病灶形成结核结节。免疫低下者这种局部病灶可以围着病灶形成结核结节。免疫低下者这种局部病灶可以破溃，菌体通过气管随痰排出体外或病灶液化，扩散进破溃，菌体通过气管随痰排出体外或病灶液化，扩散进破溃，菌体通过气管随痰排出体外或病灶液化，扩散进破溃，菌体通过气管随痰排出体外或病灶液化，扩散进入血流及其他器官，使机体死亡；免疫正常者局限性病入血流及其他器官，使机体死亡；免疫正常者局限性病入血流及其他器官，使机体死亡；免疫正常者局限性病入血流及其他器官，使机体死亡；免疫正常者局限性病灶在活化巨噬细胞作用下，使细胞内的细菌停止生长，灶在活化巨噬细胞作用下，使细胞内的细菌停止生长，灶在活化巨噬细胞作用下，使细胞内的细菌停止生长，灶在活化巨噬细胞作用下，使细胞内的细菌停止生长，病灶钙化而痊愈。病灶钙化而痊愈。病灶钙化而痊愈。病灶钙化而痊愈。四、致病机理及致病性四、致病机理及致病性释放多种水解酶T.B.入侵巨噬细胞TC趋化因子巨噬细胞激活因子巨噬细胞移动抑制因子 吞噬结核结节结核结节 病病变变局局限限 再次入侵淋巴素炎症因子病病变变扩扩散散五、变异性五、变异性n n L L L L型变异：型变异：型变异：型变异：即细胞壁消失，呈多形性。（即细胞壁消失，呈多形性。（即细胞壁消失，呈多形性。（即细胞壁消失，呈多形性。（L L L L型对异烟肼耐药）。型对异烟肼耐药）。型对异烟肼耐药）。型对异烟肼耐药）。异烟肼俗称雷米封，为治疗结核的首选药物。异烟肼俗称雷米封，为治疗结核的首选药物。异烟肼俗称雷米封，为治疗结核的首选药物。异烟肼俗称雷米封，为治疗结核的首选药物。n n RSRSRSRS变异：变异：变异：变异：导致毒力减弱。导致毒力减弱。导致毒力减弱。导致毒力减弱。n n强毒强毒强毒强毒弱毒的毒力减弱变异：弱毒的毒力减弱变异：弱毒的毒力减弱变异：弱毒的毒力减弱变异：制成卡介苗。卡介苗是经制成卡介苗。卡介苗是经制成卡介苗。卡介苗是经制成卡介苗。卡介苗是经230230230230次传代后而得的弱毒次传代后而得的弱毒次传代后而得的弱毒次传代后而得的弱毒株。株。株。株。n n1.1.1.1.免疫性：免疫性：免疫性：免疫性：1977 1977 1977 1977年发现结核病的年发现结核病的年发现结核病的年发现结核病的细胞免疫和体液免疫存在细胞免疫和体液免疫存在细胞免疫和体液免疫存在细胞免疫和体液免疫存在分离现象分离现象分离现象分离现象，在病情加重时细胞免疫功能减弱，在病情加重时细胞免疫功能减弱，在病情加重时细胞免疫功能减弱，在病情加重时细胞免疫功能减弱，而体液免疫增强；但恢复期的动物（已经康复而体液免疫增强；但恢复期的动物（已经康复而体液免疫增强；但恢复期的动物（已经康复而体液免疫增强；但恢复期的动物（已经康复或病情得到控制的动物）其细胞免疫功能增强，或病情得到控制的动物）其细胞免疫功能增强，或病情得到控制的动物）其细胞免疫功能增强，或病情得到控制的动物）其细胞免疫功能增强，而体液免疫水平较低；重症动物的细胞免疫反而体液免疫水平较低；重症动物的细胞免疫反而体液免疫水平较低；重症动物的细胞免疫反而体液免疫水平较低；重症动物的细胞免疫反应低下，甚至消失，而抗体显著增加。应低下，甚至消失，而抗体显著增加。应低下，甚至消失，而抗体显著增加。应低下，甚至消失，而抗体显著增加。六、免疫性与变态反应六、免疫性与变态反应n n2.2.2.2.变态反应：变态反应：变态反应：变态反应：n n结核杆菌在刺激机体产生免疫应答的同时，也刺激机体产生变结核杆菌在刺激机体产生免疫应答的同时，也刺激机体产生变结核杆菌在刺激机体产生免疫应答的同时，也刺激机体产生变结核杆菌在刺激机体产生免疫应答的同时，也刺激机体产生变态反应，二者均有态反应，二者均有态反应，二者均有态反应，二者均有T T T T细胞介导产生。细胞介导产生。细胞介导产生。细胞介导产生。n n结核杆菌的结核菌素和细胞壁成分，可激活体内产生巨噬细胞结核杆菌的结核菌素和细胞壁成分，可激活体内产生巨噬细胞结核杆菌的结核菌素和细胞壁成分，可激活体内产生巨噬细胞结核杆菌的结核菌素和细胞壁成分，可激活体内产生巨噬细胞移动抑制因子的移动抑制因子的移动抑制因子的移动抑制因子的T T T T细胞，导致变态反应性炎症的发生；而结核杆细胞，导致变态反应性炎症的发生；而结核杆细胞，导致变态反应性炎症的发生；而结核杆细胞，导致变态反应性炎症的发生；而结核杆菌的核蛋白体菌的核蛋白体菌的核蛋白体菌的核蛋白体RNARNARNARNA可激活产生结核杆菌生长抑制因子的可激活产生结核杆菌生长抑制因子的可激活产生结核杆菌生长抑制因子的可激活产生结核杆菌生长抑制因子的T T T T细胞，细胞，细胞，细胞，使机体产生免疫反应。使机体产生免疫反应。使机体产生免疫反应。使机体产生免疫反应。n n完整的结核杆菌可刺激完整的结核杆菌可刺激完整的结核杆菌可刺激完整的结核杆菌可刺激MIF(MIF(MIF(MIF(巨噬细胞移动抑制因子巨噬细胞移动抑制因子巨噬细胞移动抑制因子巨噬细胞移动抑制因子)、MycoIFMycoIFMycoIFMycoIF（细菌生长抑制因子）的（细菌生长抑制因子）的（细菌生长抑制因子）的（细菌生长抑制因子）的T T T T细胞同时产生，因此检测机体对结核细胞同时产生，因此检测机体对结核细胞同时产生，因此检测机体对结核细胞同时产生，因此检测机体对结核杆菌是否发生变态反应，即可判定是否有免疫力，结核菌素试杆菌是否发生变态反应，即可判定是否有免疫力，结核菌素试杆菌是否发生变态反应，即可判定是否有免疫力，结核菌素试杆菌是否发生变态反应，即可判定是否有免疫力，结核菌素试验正是根据这一原理设计的最常用的免疫学检测手段。验正是根据这一原理设计的最常用的免疫学检测手段。验正是根据这一原理设计的最常用的免疫学检测手段。验正是根据这一原理设计的最常用的免疫学检测手段。六、免疫性与变态反应六、免疫性与变态反应 结核菌素是结核杆菌的蛋白质组分之一，用其进行结核菌素是结核杆菌的蛋白质组分之一，用其进行结核菌素是结核杆菌的蛋白质组分之一，用其进行结核菌素是结核杆菌的蛋白质组分之一，用其进行皮内注射皮内注射皮内注射皮内注射或或或或滴入眼结膜囊滴入眼结膜囊滴入眼结膜囊滴入眼结膜囊，可判定机体对结核杆菌，可判定机体对结核杆菌，可判定机体对结核杆菌，可判定机体对结核杆菌是否引致变态反应。常用的有两种：是否引致变态反应。常用的有两种：是否引致变态反应。常用的有两种：是否引致变态反应。常用的有两种：1.1.1.1.一种是一种是一种是一种是OTOTOTOT（旧结核菌素）（旧结核菌素）（旧结核菌素）（旧结核菌素）2.2.2.2.另一种是另一种是另一种是另一种是PPDPPDPPDPPD （OTOTOTOT经三氯醋酸沉淀后的纯化物）经三氯醋酸沉淀后的纯化物）经三氯醋酸沉淀后的纯化物）经三氯醋酸沉淀后的纯化物）六、免疫性与变态反应六、免疫性与变态反应n n1.1.1.1.病料采集：病料采集：病料采集：病料采集：取患病器官的组织结节及取患病器官的组织结节及取患病器官的组织结节及取患病器官的组织结节及病变与非病变交界处病变与非病变交界处病变与非病变交界处病变与非病变交界处组织组织组织组织 。n n2.2.2.2.涂片镜检涂片镜检涂片镜检涂片镜检 病料涂片，抗酸染色后镜检，若发现红色成丛杆菌，可做初步诊断病料涂片，抗酸染色后镜检，若发现红色成丛杆菌，可做初步诊断病料涂片，抗酸染色后镜检，若发现红色成丛杆菌，可做初步诊断病料涂片，抗酸染色后镜检，若发现红色成丛杆菌，可做初步诊断 七、微生物学诊断七、微生物学诊断n n3.3.3.3.分离培养分离培养分离培养分离培养 常用罗杰二氏培养基。常用罗杰二氏培养基。常用罗杰二氏培养基。常用罗杰二氏培养基。病料用病料用病料用病料用6%H2SO46%H2SO46%H2SO46%H2SO4或或或或4%NaOH4%NaOH4%NaOH4%NaOH液处理液处理液处理液处理15min15min15min15min，经中和，经中和，经中和，经中和离心，取少许沉淀物接种于培养基斜面，管口封严，离心，取少许沉淀物接种于培养基斜面，管口封严，离心，取少许沉淀物接种于培养基斜面，管口封严，离心，取少许沉淀物接种于培养基斜面，管口封严，37373737培养培养培养培养8 8 8 8周，培养阳性者，进行生化试验及培养周，培养阳性者，进行生化试验及培养周，培养阳性者，进行生化试验及培养周，培养阳性者，进行生化试验及培养特性鉴定。特性鉴定。特性鉴定。特性鉴定。n n4.4.4.4.动物接种动物接种动物接种动物接种 选用鸡、兔、豚鼠接种，选用鸡、兔、豚鼠接种，选用鸡、兔、豚鼠接种，选用鸡、兔、豚鼠接种，3-43-43-43-4周出现病变（皮下或周出现病变（皮下或周出现病变（皮下或周出现病变（皮下或腹腔注射）。腹腔注射）。腹腔注射）。腹腔注射）。六、微生物学诊断六、微生物学诊断n n5.5.5.5.变态反应变态反应变态反应变态反应 采用采用采用采用PPDPPDPPDPPD皮内注射法。皮内注射法。皮内注射法。皮内注射法。牛颈部皮内注射结核菌素牛颈部皮内注射结核菌素牛颈部皮内注射结核菌素牛颈部皮内注射结核菌素PPD 0.1mlPPD 0.1mlPPD 0.1mlPPD 0.1ml（10101010万万万万IU/mlIU/mlIU/mlIU/ml），），），），72h72h72h72h后观察：后观察：后观察：后观察：局部炎症反应明显：皮肿胀厚度差局部炎症反应明显：皮肿胀厚度差局部炎症反应明显：皮肿胀厚度差局部炎症反应明显：皮肿胀厚度差4mm4mm4mm4mm为阳性为阳性为阳性为阳性。局部炎症不反应明显：皮肿胀厚度差在局部炎症不反应明显：皮肿胀厚度差在局部炎症不反应明显：皮肿胀厚度差在局部炎症不反应明显：皮肿胀厚度差在2-4mm2-4mm2-4mm2-4mm之间之间之间之间，为可疑。，为可疑。，为可疑。，为可疑。局部无炎症反应：皮肿胀厚度差在局部无炎症反应：皮肿胀厚度差在局部无炎症反应：皮肿胀厚度差在局部无炎症反应：皮肿胀厚度差在2mm2mm2mm2mm以下以下以下以下，为阴性。，为阴性。，为阴性。，为阴性。凡判为疑似反应牛，凡判为疑似反应牛，凡判为疑似反应牛，凡判为疑似反应牛，30d30d30d30d后需复检一次，如仍为可疑，经后需复检一次，如仍为可疑，经后需复检一次，如仍为可疑，经后需复检一次，如仍为可疑，经30-45d30-45d30-45d30-45d后再次复检，若仍为可疑，判为阳性。后再次复检，若仍为可疑，判为阳性。后再次复检，若仍为可疑，判为阳性。后再次复检，若仍为可疑，判为阳性。n n6.6.6.6.血清学试验血清学试验血清学试验血清学试验 六、微生物学诊断六、微生物学诊断n n人类广泛采用卡介苗免疫接种。人类广泛采用卡介苗免疫接种。人类广泛采用卡介苗免疫接种。人类广泛采用卡介苗免疫接种。n n牛则只检疫，淘汰阳性牛。牛则只检疫，淘汰阳性牛。牛则只检疫，淘汰阳性牛。牛则只检疫，淘汰阳性牛。原因：原因：原因：原因：接种疫苗的牛，一年后仍维持变态反应阳性，接种疫苗的牛，一年后仍维持变态反应阳性，接种疫苗的牛，一年后仍维持变态反应阳性，接种疫苗的牛，一年后仍维持变态反应阳性，在用结核菌素检疫时，无法与自然感染牛区分，因此在用结核菌素检疫时，无法与自然感染牛区分，因此在用结核菌素检疫时，无法与自然感染牛区分，因此在用结核菌素检疫时，无法与自然感染牛区分，因此不宜推广。不宜推广。不宜推广。不宜推广。七、免疫治疗七、免疫治疗本章小结本章小结n n分枝杆菌属是革兰氏阳性菌中抗酸菌的代表，其细胞分枝杆菌属是革兰氏阳性菌中抗酸菌的代表，其细胞分枝杆菌属是革兰氏阳性菌中抗酸菌的代表，其细胞分枝杆菌属是革兰氏阳性菌中抗酸菌的代表，其细胞壁的特殊组成影响染色的特性，并作为经典的免疫佐壁的特殊组成影响染色的特性，并作为经典的免疫佐壁的特殊组成影响染色的特性，并作为经典的免疫佐壁的特殊组成影响染色的特性，并作为经典的免疫佐剂广泛使用。剂广泛使用。剂广泛使用。剂广泛使用。n n牛分枝杆菌等培养困难，生长慢，感染人和动物，致牛分枝杆菌等培养困难，生长慢，感染人和动物，致牛分枝杆菌等培养困难，生长慢，感染人和动物，致牛分枝杆菌等培养困难，生长慢，感染人和动物，致结核病等，其细胞免疫和体液免疫存在分离现象。机结核病等，其细胞免疫和体液免疫存在分离现象。机结核病等，其细胞免疫和体液免疫存在分离现象。机结核病等，其细胞免疫和体液免疫存在分离现象。机体在感染本病时，体内免疫反应和变态反应同时存在。体在感染本病时，体内免疫反应和变态反应同时存在。体在感染本病时，体内免疫反应和变态反应同时存在。体在感染本病时，体内免疫反应和变态反应同时存在。迟发性变态反应被用于本病的检测。迟发性变态反应被用于本病的检测。迟发性变态反应被用于本病的检测。迟发性变态反应被用于本病的检测。本章参考复习题本章参考复习题n n1.1.1.1.试述分枝杆菌的染色特性与细胞壁的结构的关系。试述分枝杆菌的染色特性与细胞壁的结构的关系。试述分枝杆菌的染色特性与细胞壁的结构的关系。试述分枝杆菌的染色特性与细胞壁的结构的关系。n n2.2.2.2.结核杆菌的免疫有何特点？结核杆菌的免疫有何特点？结核杆菌的免疫有何特点？结核杆菌的免疫有何特点？n n3.3.3.3.如何检测牛是否感染分支杆菌？如何检测牛是否感染分支杆菌？如何检测牛是否感染分支杆菌？如何检测牛是否感染分支杆菌？n n螺旋体是一类菌体细长、柔软、弯曲呈螺旋状、螺旋体是一类菌体细长、柔软、弯曲呈螺旋状、螺旋体是一类菌体细长、柔软、弯曲呈螺旋状、螺旋体是一类菌体细长、柔软、弯曲呈螺旋状、能活泼运动能活泼运动能活泼运动能活泼运动的原核单细胞微生物，介于细菌和的原核单细胞微生物，介于细菌和的原核单细胞微生物，介于细菌和的原核单细胞微生物，介于细菌和原虫之间。原虫之间。原虫之间。原虫之间。第十六章第十六章 螺旋体螺旋体n n螺旋体呈螺旋状或波浪状圆柱形，具有个以上完整的螺旋，大小螺旋体呈螺旋状或波浪状圆柱形，具有个以上完整的螺旋，大小螺旋体呈螺旋状或波浪状圆柱形，具有个以上完整的螺旋，大小螺旋体呈螺旋状或波浪状圆柱形，具有个以上完整的螺旋，大小悬殊，长悬殊，长悬殊，长悬殊，长5-250m5-250m5-250m5-250m，宽，宽，宽，宽0.1-3m0.1-3m0.1-3m0.1-3m。可以通过细菌滤器，各种螺旋体。可以通过细菌滤器，各种螺旋体。可以通过细菌滤器，各种螺旋体。可以通过细菌滤器，各种螺旋体的螺旋数目不同、螺间距不同、回旋角度也不同，具有种的特征，的螺旋数目不同、螺间距不同、回旋角度也不同，具有种的特征，的螺旋数目不同、螺间距不同、回旋角度也不同，具有种的特征，的螺旋数目不同、螺间距不同、回旋角度也不同，具有种的特征，在分类上可作为一重要指标。在分类上可作为一重要指标。在分类上可作为一重要指标。在分类上可作为一重要指标。一、形态结构一、形态结构一、形态结构一、形态结构n n有螺旋体的结构与细菌相似，只是在螺旋体的原生质有螺旋体的结构与细菌相似，只是在螺旋体的原生质有螺旋体的结构与细菌相似，只是在螺旋体的原生质有螺旋体的结构与细菌相似，只是在螺旋体的原生质柱外有柱外有柱外有柱外有2-1002-1002-1002-100根轴丝缠绕。根轴丝缠绕。根轴丝缠绕。根轴丝缠绕。原生质柱具有细胞膜和膜外原生质柱具有细胞膜和膜外原生质柱具有细胞膜和膜外原生质柱具有细胞膜和膜外由细胞壁和粘液层构成的外鞘。轴丝加在细胞膜与外由细胞壁和粘液层构成的外鞘。轴丝加在细胞膜与外由细胞壁和粘液层构成的外鞘。轴丝加在细胞膜与外由细胞壁和粘液层构成的外鞘。轴丝加在细胞膜与外鞘之间。鞘之间。鞘之间。鞘之间。n n螺旋体可以运动，但螺旋体可以运动，但螺旋体可以运动，但螺旋体可以运动，但无鞭毛无鞭毛无鞭毛无鞭毛，轴丝的收缩和舒张使其，轴丝的收缩和舒张使其，轴丝的收缩和舒张使其，轴丝的收缩和舒张使其运动。运动。运动。运动。二、运动方式二、运动方式 螺旋体的运动有螺旋体的运动有螺旋体的运动有螺旋体的运动有3 3 3 3种方式：种方式：种方式：种方式：n n沿长轴旋转，快速前进；沿长轴旋转，快速前进；沿长轴旋转，快速前进；沿长轴旋转，快速前进；n n细胞屈曲伸缩前进（类似蚯蚓）细胞屈曲伸缩前进（类似蚯蚓）细胞屈曲伸缩前进（类似蚯蚓）细胞屈曲伸缩前进（类似蚯蚓）n n螺旋状或蛇状前进螺旋状或蛇状前进螺旋状或蛇状前进螺旋状或蛇状前进 n n目前螺旋体分为目前螺旋体分为 6个属，与畜禽致病性个属，与畜禽致病性有关的：疏、密、蛇形、细螺旋体属。有关的：疏、密、蛇形、细螺旋体属。三、分类三、分类n n本属成员细胞呈螺旋状，每个菌体有本属成员细胞呈螺旋状，每个菌体有本属成员细胞呈螺旋状，每个菌体有本属成员细胞呈螺旋状，每个菌体有3-103-103-103-10个不规则的疏松螺个不规则的疏松螺个不规则的疏松螺个不规则的疏松螺旋，每端有旋，每端有旋，每端有旋，每端有15-2015-2015-2015-20根轴丝缠绕原生质柱，并在细胞中部重叠。根轴丝缠绕原生质柱，并在细胞中部重叠。根轴丝缠绕原生质柱，并在细胞中部重叠。根轴丝缠绕原生质柱，并在细胞中部重叠。n n以螺旋状方式运动。以螺旋状方式运动。以螺旋状方式运动。以螺旋状方式运动。n n高度适应蜱、虱传播。高度适应蜱、虱传播。高度适应蜱、虱传播。高度适应蜱、虱传播。n n对人和动物致病的主要为对人和动物致病的主要为对人和动物致病的主要为对人和动物致病的主要为伯氏伯氏伯氏伯氏疏螺旋体、疏螺旋体、疏螺旋体、疏螺旋体、回归热回归热回归热回归热螺旋体等。螺旋体等。螺旋体等。螺旋体等。第一节第一节 疏螺旋体属疏螺旋体属n n为莱姆病的病原，硬蜱为其传播媒介。为莱姆病的病原，硬蜱为其传播媒介。为莱姆病的病原，硬蜱为其传播媒介。为莱姆病的病原，硬蜱为其传播媒介。n n主要感染人和犬，马、牛亦可感染，引起关节炎等多种主要感染人和犬，马、牛亦可感染，引起关节炎等多种主要感染人和犬，马、牛亦可感染，引起关节炎等多种主要感染人和犬，马、牛亦可感染，引起关节炎等多种疾病。病人被叮咬后出现圆环状疹块。疾病。病人被叮咬后出现圆环状疹块。疾病。病人被叮咬后出现圆环状疹块。疾病。病人被叮咬后出现圆环状疹块。伯氏螺旋体伯氏螺旋体The presentation of erythema migrans in Stage 1(莱姆病莱姆病)n n菌体细长，有菌体细长，有菌体细长，有菌体细长，有4-204-204-204-20个大而疏松的螺旋。个大而疏松的螺旋。个大而疏松的螺旋。个大而疏松的螺旋。一、形态特征一、形态特征二、微生物学检查二、微生物学检查n n1.1.病原学检查病原学检查 用暗视野显微镜或吉姆萨染色后观察。用暗视野显微镜或吉姆萨染色后观察。用暗视野显微镜或吉姆萨染色后观察。用暗视野显微镜或吉姆萨染色后观察。n n2.2.血清学检查血清学检查 ELISAELISAELISAELISA最为常用。最为常用。最为常用。最为常用。本章小结本章小结n n螺旋体的基本结构与细菌相似，具有轴丝而能活泼运螺旋体的基本结构与细菌相似，具有轴丝而能活泼运螺旋体的基本结构与细菌相似，具有轴丝而能活泼运螺旋体的基本结构与细菌相似，具有轴丝而能活泼运动，用暗视野显微镜或相差显微镜可观察其形态，多动，用暗视野显微镜或相差显微镜可观察其形态，多动，用暗视野显微镜或相差显微镜可观察其形态，多动，用暗视野显微镜或相差显微镜可观察其形态，多数需要厌氧培养。数需要厌氧培养。数需要厌氧培养。数需要厌氧培养。n n具有致病性的有疏螺旋体、短螺旋体、密螺旋体及钩具有致病性的有疏螺旋体、短螺旋体、密螺旋体及钩具有致病性的有疏螺旋体、短螺旋体、密螺旋体及钩具有致病性的有疏螺旋体、短螺旋体、密螺旋体及钩端螺旋体属。端螺旋体属。端螺旋体属。端螺旋体属。n n引致莱姆病的伯氏螺旋体，其传播媒介为硬蜱，啮齿引致莱姆病的伯氏螺旋体，其传播媒介为硬蜱，啮齿引致莱姆病的伯氏螺旋体，其传播媒介为硬蜱，啮齿引致莱姆病的伯氏螺旋体，其传播媒介为硬蜱，啮齿动物为贮藏宿主，它的外膜脂蛋白在致病、检测及免动物为贮藏宿主，它的外膜脂蛋白在致病、检测及免动物为贮藏宿主，它的外膜脂蛋白在致病、检测及免动物为贮藏宿主，它的外膜脂蛋白在致病、检测及免疫方面均值得重视。疫方面均值得重视。疫方面均值得重视。疫方面均值得重视。本章复习参考题本章复习参考题1.1.1.1.螺旋体有哪些主要生物学特性？目前分类状况如何？螺旋体有哪些主要生物学特性？目前分类状况如何？螺旋体有哪些主要生物学特性？目前分类状况如何？螺旋体有哪些主要生物学特性？目前分类状况如何？2.2.2.2.疏螺旋体有哪些特性，伯氏螺旋体引致何病，如何诊断？疏螺旋体有哪些特性，伯氏螺旋体引致何病，如何诊断？疏螺旋体有哪些特性，伯氏螺旋体引致何病，如何诊断？疏螺旋体有哪些特性，伯氏螺旋体引致何病，如何诊断？n n又称为霉形体，是一类又称为霉形体，是一类又称为霉形体，是一类又称为霉形体，是一类无细胞壁的细菌无细胞壁的细菌无细胞壁的细菌无细胞壁的细菌，细胞，细胞，细胞，细胞柔软呈多形性，能通过细菌滤器。能在人工培柔软呈多形性，能通过细菌滤器。能在人工培柔软呈多形性，能通过细菌滤器。能在人工培柔软呈多形性，能通过细菌滤器。能在人工培养基中生长繁殖，含有养基中生长繁殖，含有养基中生长繁殖，含有养基中生长繁殖，含有DNADNADNADNA和和和和RNARNARNARNA，二分裂或芽，二分裂或芽，二分裂或芽，二分裂或芽生繁殖。生繁殖。生繁殖。生繁殖。n n为柔膜体纲，有为柔膜体纲，有为柔膜体纲，有为柔膜体纲，有8 8 8 8个属。兽医学的主要对象为个属。兽医学的主要对象为个属。兽医学的主要对象为个属。兽医学的主要对象为霉形体属霉形体属霉形体属霉形体属及及及及脲原体属脲原体属脲原体属脲原体属的成员。的成员。的成员。的成员。第十七章第十七章 支原体支原体n n霉形体因无细胞壁，因此具多形性、可滤过性、霉形体因无细胞壁，因此具多形性、可滤过性、霉形体因无细胞壁，因此具多形性、可滤过性、霉形体因无细胞壁，因此具多形性、可滤过性、滤过性。常呈球状、环状、杆状，偶见分枝丝滤过性。常呈球状、环状、杆状，偶见分枝丝滤过性。常呈球状、环状、杆状，偶见分枝丝滤过性。常呈球状、环状、杆状，偶见分枝丝状。状。状。状。n nG-G-G-G-，但不易着色，通常着色不良，姬姆萨或瑞，但不易着色，通常着色不良，姬姆萨或瑞，但不易着色，通常着色不良，姬姆萨或瑞，但不易着色，通常着色不良，姬姆萨或瑞氏染色良好，呈淡紫色。氏染色良好，呈淡紫色。氏染色良好，呈淡紫色。氏染色良好，呈淡紫色。一、形态结构一、形态结构二、培养特性二、培养特性n n霉形体的核质是一个环形双股霉形体的核质是一个环形双股霉形体的核质是一个环形双股霉形体的核质是一个环形双股DNADNADNADNA，但分子量较小，生，但分子量较小，生，但分子量较小，生，但分子量较小，生物合成能力较弱。物合成能力较弱。物合成能力较弱。物合成能力较弱。n n营养要求高营养要求高营养要求高营养要求高，培养时除基础营养外，还需要牛心浸出，培养时除基础营养外，还需要牛心浸出，培养时除基础营养外，还需要牛心浸出，培养时除基础营养外，还需要牛心浸出液、酵母膏、辅酶液、酵母膏、辅酶液、酵母膏、辅酶液、酵母膏、辅酶、胆固醇、氨基酸、动物血清等，、胆固醇、氨基酸、动物血清等，、胆固醇、氨基酸、动物血清等，、胆固醇、氨基酸、动物血清等，为抑制细菌生长，常加入青霉素、醋酸铊、叠氮钠等为抑制细菌生长，常加入青霉素、醋酸铊、叠氮钠等为抑制细菌生长，常加入青霉素、醋酸铊、叠氮钠等为抑制细菌生长，常加入青霉素、醋酸铊、叠氮钠等药物。药物。药物。药物。n n培养时要培养时要培养时要培养时要供给供给供给供给5%CO25%CO25%CO25%CO2 。n n霉形体生长较慢，一般培养霉形体生长较慢，一般培养霉形体生长较慢，一般培养霉形体生长较慢，一般培养2-62-62-62-6天后出现微小菌落，菌落呈天后出现微小菌落，菌落呈天后出现微小菌落，菌落呈天后出现微小菌落，菌落呈“煎荷煎荷煎荷煎荷包蛋包蛋包蛋包蛋”状，状，状，状，中心深入培养基中，致密色暗，周围长在培养基表面，中心深入培养基中，致密色暗，周围长在培养基表面，中心深入培养基中，致密色暗，周围长在培养基表面，中心深入培养基中，致密色暗，周围长在培养基表面，较透明（此为霉形体的典型菌落）。猪肺炎霉形体和肺霉形体等较透明（此为霉形体的典型菌落）。猪肺炎霉形体和肺霉形体等较透明（此为霉形体的典型菌落）。猪肺炎霉形体和肺霉形体等较透明（此为霉形体的典型菌落）。猪肺炎霉形体和肺霉形体等的菌落不典型，无中心生长点。的菌落不典型，无中心生长点。的菌落不典型，无中心生长点。的菌落不典型，无中心生长点。n n圆形透明，露滴样，圆形透明，露滴样，圆形透明，露滴样，圆形透明，露滴样，直径直径直径直径10-600m10-600m10-600m10-600m，需要使用放大镜或低倍显微，需要使用放大镜或低倍显微，需要使用放大镜或低倍显微，需要使用放大镜或低倍显微镜才可见。镜才可见。镜才可见。镜才可见。二、培养特性二、培养特性人型支原体在固体培养基上的典型油煎蛋状菌落人型支原体在固体培养基上的典型油煎蛋状菌