分支杆菌.ppt
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1、第十五章第十五章 分支杆菌及相似属分支杆菌及相似属 分支杆菌属为分支杆菌属为分支杆菌属为分支杆菌属为G+G+G+G+抗酸菌的代表,广泛存在于自然界,许多抗酸菌的代表,广泛存在于自然界,许多抗酸菌的代表,广泛存在于自然界,许多抗酸菌的代表,广泛存在于自然界,许多是人和多种动物的病原菌,对动物有致病性的主要是:是人和多种动物的病原菌,对动物有致病性的主要是:是人和多种动物的病原菌,对动物有致病性的主要是:是人和多种动物的病原菌,对动物有致病性的主要是:n结核分枝杆菌结核分枝杆菌n牛分支杆菌牛分支杆菌n禽分支杆菌禽分支杆菌n副结核分支杆菌副结核分支杆菌 代表种为结核分支杆菌。代表种为结核分支杆菌。n
2、 n结核分枝杆菌(结核分枝杆菌(M.tuberculosisM.tuberculosis)是结核病的病原菌,)是结核病的病原菌,俗名结核杆菌,俗名结核杆菌,18821882年由德国细菌学家科赫(年由德国细菌学家科赫(KochKoch)发现。发现。n n传染源:痰中带菌传染源:痰中带菌传染源:痰中带菌传染源:痰中带菌的病人的病人的病人的病人n n传播途径传播途径传播途径传播途径n n呼吸道为主呼吸道为主呼吸道为主呼吸道为主n n消化道消化道消化道消化道n n泌尿生殖系统泌尿生殖系统泌尿生殖系统泌尿生殖系统n n皮肤皮肤皮肤皮肤n n淋巴、血行播散淋巴、血行播散淋巴、血行播散淋巴、血行播散n n易
3、感人群易感人群易感人群易感人群 牛分支杆菌与人的结核分支杆菌以及禽分支杆菌的许牛分支杆菌与人的结核分支杆菌以及禽分支杆菌的许牛分支杆菌与人的结核分支杆菌以及禽分支杆菌的许牛分支杆菌与人的结核分支杆菌以及禽分支杆菌的许多特性相近,本节一并介绍,下面主要介绍一下多特性相近,本节一并介绍,下面主要介绍一下多特性相近,本节一并介绍,下面主要介绍一下多特性相近,本节一并介绍,下面主要介绍一下牛分牛分牛分牛分支杆菌支杆菌支杆菌支杆菌。细长、直或微弯曲,杆菌,大小约细长、直或微弯曲,杆菌,大小约细长、直或微弯曲,杆菌,大小约细长、直或微弯曲,杆菌,大小约1 1 1 14 4 4 40.4um0.4um0.4
4、um0.4um,单在、,单在、,单在、,单在、少数成丛。在该属中,牛结核较短粗。其余则细长,禽少数成丛。在该属中,牛结核较短粗。其余则细长,禽少数成丛。在该属中,牛结核较短粗。其余则细长,禽少数成丛。在该属中,牛结核较短粗。其余则细长,禽分支杆菌呈多形性,在陈旧培养物及干酪性病灶中菌体分支杆菌呈多形性,在陈旧培养物及干酪性病灶中菌体分支杆菌呈多形性,在陈旧培养物及干酪性病灶中菌体分支杆菌呈多形性,在陈旧培养物及干酪性病灶中菌体呈分枝状。呈分枝状。呈分枝状。呈分枝状。一、形态及染色特性一、形态及染色特性n n结核杆菌一般常用萎结核杆菌一般常用萎结核杆菌一般常用萎结核杆菌一般常用萎-钠氏钠氏钠氏钠
5、氏(Ziehl-Neelsen)(Ziehl-Neelsen)(Ziehl-Neelsen)(Ziehl-Neelsen)抗酸性染抗酸性染抗酸性染抗酸性染色法染色,色法染色,色法染色,色法染色,结核杆菌染成红色结核杆菌染成红色结核杆菌染成红色结核杆菌染成红色,其他非抗酸性细菌及,其他非抗酸性细菌及,其他非抗酸性细菌及,其他非抗酸性细菌及细胞浆质等呈蓝色。结核杆菌的抗酸性取决于胞壁内细胞浆质等呈蓝色。结核杆菌的抗酸性取决于胞壁内细胞浆质等呈蓝色。结核杆菌的抗酸性取决于胞壁内细胞浆质等呈蓝色。结核杆菌的抗酸性取决于胞壁内所含分枝菌酸残基和胞壁固有层的完整性有关。所含分枝菌酸残基和胞壁固有层的完整性
6、有关。所含分枝菌酸残基和胞壁固有层的完整性有关。所含分枝菌酸残基和胞壁固有层的完整性有关。n n抗酸染色方法:首先在已经固定好的抹片上滴加较多抗酸染色方法:首先在已经固定好的抹片上滴加较多抗酸染色方法:首先在已经固定好的抹片上滴加较多抗酸染色方法:首先在已经固定好的抹片上滴加较多的石碳酸复红染色液,加温染色(维持产生蒸汽)的石碳酸复红染色液,加温染色(维持产生蒸汽)的石碳酸复红染色液,加温染色(维持产生蒸汽)的石碳酸复红染色液,加温染色(维持产生蒸汽)3-3-3-3-5min5min5min5min,水洗,然后用,水洗,然后用,水洗,然后用,水洗,然后用3%3%3%3%盐酸酒精脱色,至标本无颜
7、色盐酸酒精脱色,至标本无颜色盐酸酒精脱色,至标本无颜色盐酸酒精脱色,至标本无颜色脱出为止,充分水洗,再用碱性美兰染色脱出为止,充分水洗,再用碱性美兰染色脱出为止,充分水洗,再用碱性美兰染色脱出为止,充分水洗,再用碱性美兰染色1min1min1min1min,水洗。,水洗。,水洗。,水洗。干燥镜检。干燥镜检。干燥镜检。干燥镜检。一、形态及染色特性一、形态及染色特性n n细胞壁组成:细胞壁组成:G+G+,但其细胞壁除含,但其细胞壁除含G+G+细细胞壁的肽聚糖成分外,还含特殊的糖酯,胞壁的肽聚糖成分外,还含特殊的糖酯,使革兰氏染色不易着色,而抗酸染色为使革兰氏染色不易着色,而抗酸染色为红色。糖酯具有
8、刺激哺乳动物免疫系统红色。糖酯具有刺激哺乳动物免疫系统的作用。因此结核分支杆菌可做免疫增的作用。因此结核分支杆菌可做免疫增强剂或免疫佐剂。强剂或免疫佐剂。n n专性需氧,专性需氧,专性需氧,专性需氧,6.4-7.06.4-7.06.4-7.06.4-7.0,37-37.537-37.537-37.537-37.5最适。对最适。对最适。对最适。对营养要求高。营养要求高。营养要求高。营养要求高。n n培养基常用的有:罗杰二氏,改良罗杰二氏,培养基常用的有:罗杰二氏,改良罗杰二氏,培养基常用的有:罗杰二氏,改良罗杰二氏,培养基常用的有:罗杰二氏,改良罗杰二氏,丙酮酸、小川培养基,(内含蛋黄、甘油、马
9、丙酮酸、小川培养基,(内含蛋黄、甘油、马丙酮酸、小川培养基,(内含蛋黄、甘油、马丙酮酸、小川培养基,(内含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐、孔雀绿等)铃薯、无机盐、孔雀绿等)铃薯、无机盐、孔雀绿等)铃薯、无机盐、孔雀绿等)n n结核杆菌在上述培养基中结核杆菌在上述培养基中结核杆菌在上述培养基中结核杆菌在上述培养基中14-15h14-15h14-15h14-15h分裂一次,分裂一次,分裂一次,分裂一次,5%5%5%5%甘油或甘油或甘油或甘油或5-10%CO25-10%CO25-10%CO25-10%CO2可促进(除牛结核外)的结可促进(除牛结核外)的结可促进(除牛结核外)的结可促进(除牛结核外)的结核
10、杆菌生长。核杆菌生长。核杆菌生长。核杆菌生长。二、培养特性二、培养特性 在适宜的培养基在适宜的培养基在适宜的培养基在适宜的培养基生长缓慢生长缓慢生长缓慢生长缓慢,10-3010-3010-3010-30天才形成菌落,菌落粗天才形成菌落,菌落粗天才形成菌落,菌落粗天才形成菌落,菌落粗糙隆起,不透明,边缘不整齐,呈颗粒、结节或菜花状,糙隆起,不透明,边缘不整齐,呈颗粒、结节或菜花状,糙隆起,不透明,边缘不整齐,呈颗粒、结节或菜花状,糙隆起,不透明,边缘不整齐,呈颗粒、结节或菜花状,乳白或米黄色(类似于在组织中形成的病变形态)。乳白或米黄色(类似于在组织中形成的病变形态)。乳白或米黄色(类似于在组织
11、中形成的病变形态)。乳白或米黄色(类似于在组织中形成的病变形态)。二、培养特性二、培养特性 结核杆菌在结核杆菌在罗杰二氏培养基上的罗杰二氏培养基上的菌落特征(菌落特征(4 4星期)星期)牛胸膜结核呈现的珍珠状结节二、培养特性二、培养特性 在液体培养基中由于其壁有糖酯,具疏水性,形在液体培养基中由于其壁有糖酯,具疏水性,形在液体培养基中由于其壁有糖酯,具疏水性,形在液体培养基中由于其壁有糖酯,具疏水性,形成浮于液面的皱褶菌膜。成浮于液面的皱褶菌膜。成浮于液面的皱褶菌膜。成浮于液面的皱褶菌膜。n n结核杆菌对某些理化因子的抵抗力较强。在干痰结核杆菌对某些理化因子的抵抗力较强。在干痰结核杆菌对某些理
12、化因子的抵抗力较强。在干痰结核杆菌对某些理化因子的抵抗力较强。在干痰中存活中存活中存活中存活6 6 6 68 8 8 8个月,若粘附于尘埃上,保持传染性个月,若粘附于尘埃上,保持传染性个月,若粘附于尘埃上,保持传染性个月,若粘附于尘埃上,保持传染性8 8 8 810101010天。天。天。天。n n在在在在3%HCl3%HCl3%HCl3%HCl或或或或NaOHNaOHNaOHNaOH溶液中能耐受溶液中能耐受溶液中能耐受溶液中能耐受30303030分钟,因而常以分钟,因而常以分钟,因而常以分钟,因而常以酸碱中和处理严重污染的检材,杀死杂菌和消化酸碱中和处理严重污染的检材,杀死杂菌和消化酸碱中和
13、处理严重污染的检材,杀死杂菌和消化酸碱中和处理严重污染的检材,杀死杂菌和消化粘稠物质,提高检出率。粘稠物质,提高检出率。粘稠物质,提高检出率。粘稠物质,提高检出率。n n但对湿热、紫外线、酒精的抵抗力弱。在液体中但对湿热、紫外线、酒精的抵抗力弱。在液体中但对湿热、紫外线、酒精的抵抗力弱。在液体中但对湿热、紫外线、酒精的抵抗力弱。在液体中加热加热加热加热626262626315631563156315分钟,直射日光下分钟,直射日光下分钟,直射日光下分钟,直射日光下2 2 2 23 3 3 3小时,小时,小时,小时,75%75%75%75%酒精内数分钟即死亡。酒精内数分钟即死亡。酒精内数分钟即死亡
14、。酒精内数分钟即死亡。三、抵抗力三、抵抗力n n致病性:可引起多种动物的结核病。致病性:可引起多种动物的结核病。致病性:可引起多种动物的结核病。致病性:可引起多种动物的结核病。n n本菌为细胞内寄生菌,病变为局灶性病变,当细菌由呼本菌为细胞内寄生菌,病变为局灶性病变,当细菌由呼本菌为细胞内寄生菌,病变为局灶性病变,当细菌由呼本菌为细胞内寄生菌,病变为局灶性病变,当细菌由呼吸道吸入时,进入肺泡时,被肺内的巨噬细胞(尘细胞)吸道吸入时,进入肺泡时,被肺内的巨噬细胞(尘细胞)吸道吸入时,进入肺泡时,被肺内的巨噬细胞(尘细胞)吸道吸入时,进入肺泡时,被肺内的巨噬细胞(尘细胞)吞噬,但不能被其消化降解,
15、而是在其内增殖形成病灶,吞噬,但不能被其消化降解,而是在其内增殖形成病灶,吞噬,但不能被其消化降解,而是在其内增殖形成病灶,吞噬,但不能被其消化降解,而是在其内增殖形成病灶,产生干酪样坏死。坏死灶被各种吞噬细胞,产生干酪样坏死。坏死灶被各种吞噬细胞,产生干酪样坏死。坏死灶被各种吞噬细胞,产生干酪样坏死。坏死灶被各种吞噬细胞,T T T T、B B B B细胞包细胞包细胞包细胞包围着病灶形成结核结节。免疫低下者这种局部病灶可以围着病灶形成结核结节。免疫低下者这种局部病灶可以围着病灶形成结核结节。免疫低下者这种局部病灶可以围着病灶形成结核结节。免疫低下者这种局部病灶可以破溃,菌体通过气管随痰排出体
16、外或病灶液化,扩散进破溃,菌体通过气管随痰排出体外或病灶液化,扩散进破溃,菌体通过气管随痰排出体外或病灶液化,扩散进破溃,菌体通过气管随痰排出体外或病灶液化,扩散进入血流及其他器官,使机体死亡;免疫正常者局限性病入血流及其他器官,使机体死亡;免疫正常者局限性病入血流及其他器官,使机体死亡;免疫正常者局限性病入血流及其他器官,使机体死亡;免疫正常者局限性病灶在活化巨噬细胞作用下,使细胞内的细菌停止生长,灶在活化巨噬细胞作用下,使细胞内的细菌停止生长,灶在活化巨噬细胞作用下,使细胞内的细菌停止生长,灶在活化巨噬细胞作用下,使细胞内的细菌停止生长,病灶钙化而痊愈。病灶钙化而痊愈。病灶钙化而痊愈。病灶
17、钙化而痊愈。四、致病机理及致病性四、致病机理及致病性释放多种水解酶T.B.入侵巨噬细胞TC趋化因子巨噬细胞激活因子巨噬细胞移动抑制因子 吞噬结核结节结核结节 病病变变局局限限 再次入侵淋巴素炎症因子病病变变扩扩散散五、变异性五、变异性n n L L L L型变异:型变异:型变异:型变异:即细胞壁消失,呈多形性。(即细胞壁消失,呈多形性。(即细胞壁消失,呈多形性。(即细胞壁消失,呈多形性。(L L L L型对异烟肼耐药)。型对异烟肼耐药)。型对异烟肼耐药)。型对异烟肼耐药)。异烟肼俗称雷米封,为治疗结核的首选药物。异烟肼俗称雷米封,为治疗结核的首选药物。异烟肼俗称雷米封,为治疗结核的首选药物。异
18、烟肼俗称雷米封,为治疗结核的首选药物。n n RSRSRSRS变异:变异:变异:变异:导致毒力减弱。导致毒力减弱。导致毒力减弱。导致毒力减弱。n n强毒强毒强毒强毒弱毒的毒力减弱变异:弱毒的毒力减弱变异:弱毒的毒力减弱变异:弱毒的毒力减弱变异:制成卡介苗。卡介苗是经制成卡介苗。卡介苗是经制成卡介苗。卡介苗是经制成卡介苗。卡介苗是经230230230230次传代后而得的弱毒次传代后而得的弱毒次传代后而得的弱毒次传代后而得的弱毒株。株。株。株。n n1.1.1.1.免疫性:免疫性:免疫性:免疫性:1977 1977 1977 1977年发现结核病的年发现结核病的年发现结核病的年发现结核病的细胞免疫
19、和体液免疫存在细胞免疫和体液免疫存在细胞免疫和体液免疫存在细胞免疫和体液免疫存在分离现象分离现象分离现象分离现象,在病情加重时细胞免疫功能减弱,在病情加重时细胞免疫功能减弱,在病情加重时细胞免疫功能减弱,在病情加重时细胞免疫功能减弱,而体液免疫增强;但恢复期的动物(已经康复而体液免疫增强;但恢复期的动物(已经康复而体液免疫增强;但恢复期的动物(已经康复而体液免疫增强;但恢复期的动物(已经康复或病情得到控制的动物)其细胞免疫功能增强,或病情得到控制的动物)其细胞免疫功能增强,或病情得到控制的动物)其细胞免疫功能增强,或病情得到控制的动物)其细胞免疫功能增强,而体液免疫水平较低;重症动物的细胞免疫
20、反而体液免疫水平较低;重症动物的细胞免疫反而体液免疫水平较低;重症动物的细胞免疫反而体液免疫水平较低;重症动物的细胞免疫反应低下,甚至消失,而抗体显著增加。应低下,甚至消失,而抗体显著增加。应低下,甚至消失,而抗体显著增加。应低下,甚至消失,而抗体显著增加。六、免疫性与变态反应六、免疫性与变态反应n n2.2.2.2.变态反应:变态反应:变态反应:变态反应:n n结核杆菌在刺激机体产生免疫应答的同时,也刺激机体产生变结核杆菌在刺激机体产生免疫应答的同时,也刺激机体产生变结核杆菌在刺激机体产生免疫应答的同时,也刺激机体产生变结核杆菌在刺激机体产生免疫应答的同时,也刺激机体产生变态反应,二者均有态
21、反应,二者均有态反应,二者均有态反应,二者均有T T T T细胞介导产生。细胞介导产生。细胞介导产生。细胞介导产生。n n结核杆菌的结核菌素和细胞壁成分,可激活体内产生巨噬细胞结核杆菌的结核菌素和细胞壁成分,可激活体内产生巨噬细胞结核杆菌的结核菌素和细胞壁成分,可激活体内产生巨噬细胞结核杆菌的结核菌素和细胞壁成分,可激活体内产生巨噬细胞移动抑制因子的移动抑制因子的移动抑制因子的移动抑制因子的T T T T细胞,导致变态反应性炎症的发生;而结核杆细胞,导致变态反应性炎症的发生;而结核杆细胞,导致变态反应性炎症的发生;而结核杆细胞,导致变态反应性炎症的发生;而结核杆菌的核蛋白体菌的核蛋白体菌的核蛋
22、白体菌的核蛋白体RNARNARNARNA可激活产生结核杆菌生长抑制因子的可激活产生结核杆菌生长抑制因子的可激活产生结核杆菌生长抑制因子的可激活产生结核杆菌生长抑制因子的T T T T细胞,细胞,细胞,细胞,使机体产生免疫反应。使机体产生免疫反应。使机体产生免疫反应。使机体产生免疫反应。n n完整的结核杆菌可刺激完整的结核杆菌可刺激完整的结核杆菌可刺激完整的结核杆菌可刺激MIF(MIF(MIF(MIF(巨噬细胞移动抑制因子巨噬细胞移动抑制因子巨噬细胞移动抑制因子巨噬细胞移动抑制因子)、MycoIFMycoIFMycoIFMycoIF(细菌生长抑制因子)的(细菌生长抑制因子)的(细菌生长抑制因子)
23、的(细菌生长抑制因子)的T T T T细胞同时产生,因此检测机体对结核细胞同时产生,因此检测机体对结核细胞同时产生,因此检测机体对结核细胞同时产生,因此检测机体对结核杆菌是否发生变态反应,即可判定是否有免疫力,结核菌素试杆菌是否发生变态反应,即可判定是否有免疫力,结核菌素试杆菌是否发生变态反应,即可判定是否有免疫力,结核菌素试杆菌是否发生变态反应,即可判定是否有免疫力,结核菌素试验正是根据这一原理设计的最常用的免疫学检测手段。验正是根据这一原理设计的最常用的免疫学检测手段。验正是根据这一原理设计的最常用的免疫学检测手段。验正是根据这一原理设计的最常用的免疫学检测手段。六、免疫性与变态反应六、免
24、疫性与变态反应 结核菌素是结核杆菌的蛋白质组分之一,用其进行结核菌素是结核杆菌的蛋白质组分之一,用其进行结核菌素是结核杆菌的蛋白质组分之一,用其进行结核菌素是结核杆菌的蛋白质组分之一,用其进行皮内注射皮内注射皮内注射皮内注射或或或或滴入眼结膜囊滴入眼结膜囊滴入眼结膜囊滴入眼结膜囊,可判定机体对结核杆菌,可判定机体对结核杆菌,可判定机体对结核杆菌,可判定机体对结核杆菌是否引致变态反应。常用的有两种:是否引致变态反应。常用的有两种:是否引致变态反应。常用的有两种:是否引致变态反应。常用的有两种:1.1.1.1.一种是一种是一种是一种是OTOTOTOT(旧结核菌素)(旧结核菌素)(旧结核菌素)(旧结
25、核菌素)2.2.2.2.另一种是另一种是另一种是另一种是PPDPPDPPDPPD (OTOTOTOT经三氯醋酸沉淀后的纯化物)经三氯醋酸沉淀后的纯化物)经三氯醋酸沉淀后的纯化物)经三氯醋酸沉淀后的纯化物)六、免疫性与变态反应六、免疫性与变态反应n n1.1.1.1.病料采集:病料采集:病料采集:病料采集:取患病器官的组织结节及取患病器官的组织结节及取患病器官的组织结节及取患病器官的组织结节及病变与非病变交界处病变与非病变交界处病变与非病变交界处病变与非病变交界处组织组织组织组织 。n n2.2.2.2.涂片镜检涂片镜检涂片镜检涂片镜检 病料涂片,抗酸染色后镜检,若发现红色成丛杆菌,可做初步诊断
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