新生儿溶血的检测专家讲座.pptx
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1、复习复习n n新生儿溶血病机制n nABO-HDN特点n nRh-HDN特点n n临床表现新生儿溶血的检测第1页病理生理病理生理 Rh溶血溶血 ABO溶血溶血胎儿红细胞溶血重胎儿红细胞溶血重心力衰竭心力衰竭髓外造血髓外造血肝脾肿大肝脾肿大胎儿全身水肿胎儿全身水肿低蛋白血症低蛋白血症胎儿重度贫血胎儿重度贫血胎儿血中胆红素胎儿血中胆红素新生儿黄疸新生儿黄疸母亲肝脏母亲肝脏 胎盘胎盘娩出时黄疸不显著娩出时黄疸不显著 新生儿处理胆红素新生儿处理胆红素血清血清UCB过过高高胆红素脑病胆红素脑病 血脑屏障血脑屏障 胎儿红细胞溶血轻胎儿红细胞溶血轻新生儿溶血的检测第2页新生儿溶血的检测第3页新生儿溶血的检测
2、第4页新生儿溶血的检测第5页新生儿溶血病血清学检验 经过血清学检验可了解:经过血清学检验可了解:经过血清学检验可了解:经过血清学检验可了解:母婴血型是否不合母婴血型是否不合母婴血型是否不合母婴血型是否不合、母亲血清是否存在与患儿红细胞相对应母亲血清是否存在与患儿红细胞相对应母亲血清是否存在与患儿红细胞相对应母亲血清是否存在与患儿红细胞相对应IgGIgGIgGIgG性质抗性质抗性质抗性质抗体及效价体及效价体及效价体及效价、患儿红细胞是否被来自母亲患儿红细胞是否被来自母亲患儿红细胞是否被来自母亲患儿红细胞是否被来自母亲IgGIgGIgGIgG抗体所抗体所抗体所抗体所致敏致敏致敏致敏,从而对新生儿溶
3、血病进行预防诊疗和治疗。从而对新生儿溶血病进行预防诊疗和治疗。从而对新生儿溶血病进行预防诊疗和治疗。从而对新生儿溶血病进行预防诊疗和治疗。血型血清学检验对新生儿溶血病诊疗、血型血清学检验对新生儿溶血病诊疗、预防和治疗有主要意义预防和治疗有主要意义新生儿溶血的检测第6页产前检验 孕妇血样本检验孕妇血样本检验孕妇血样本检验孕妇血样本检验(产前检验产前检验产前检验产前检验)是孕妇血液常规进是孕妇血液常规进是孕妇血液常规进是孕妇血液常规进行产前检验,用以判定这些孕妇妊娠患新生儿行产前检验,用以判定这些孕妇妊娠患新生儿行产前检验,用以判定这些孕妇妊娠患新生儿行产前检验,用以判定这些孕妇妊娠患新生儿溶血病
4、胎儿危险,一旦被判定有此危险时,定溶血病胎儿危险,一旦被判定有此危险时,定溶血病胎儿危险,一旦被判定有此危险时,定溶血病胎儿危险,一旦被判定有此危险时,定时过筛试验可用于确定影响程度。时过筛试验可用于确定影响程度。时过筛试验可用于确定影响程度。时过筛试验可用于确定影响程度。新生儿溶血的检测第7页产前新生儿溶血病预测产前新生儿溶血病预测n n产前免疫血液学检验n n羊水检测n n其它检验n nIgGIgG分型分型n nB B超、胎心等超、胎心等新生儿溶血的检测第8页产前免疫血液学检验内容产前免疫血液学检验内容n n孕产史与输血史n n夫妇血型n nIgG不规则抗体新生儿溶血的检测第9页孕产输血史
5、影响孕产输血史影响无输血孕无输血孕产史产史1 15 5次输次输血孕产史血孕产史5 5次以上输次以上输血孕产史血孕产史统计人数统计人数323274741919检出抗体检出抗体*人数人数0 013136 6检出抗体检出抗体占总数占总数0 017.517.531.531.5抗体*:有临床意义不规则抗体数据来自Transfusion 1984 Nov-Dec;24(6):482-5.新生儿溶血的检测第10页妻子血型妻子血型妻子血型妻子血型丈夫配合血型丈夫配合血型丈夫配合血型丈夫配合血型丈夫不配合血型丈夫不配合血型丈夫不配合血型丈夫不配合血型O O O OO O O OA A A A、B B B B、A
6、B AB AB ABA A A AO O O O、A A A AB B B B、AB AB AB ABB B B BO O O O、B B B BA A A A、ABABABABABABABABO O O O、A A A A、B B B B、AB AB AB AB/RhD+RhD+RhD+RhD+RhD-RhD-RhD-RhD-RhD-RhD-RhD-RhD-/RhDRhDRhDRhDRhD-RhD-RhD-RhD-RhD+RhD+RhD+RhD+孕妇血样本检验1 1、血型判定、血型判定:包含夫妇:包含夫妇ABOABO、RhRh血型血型。新生儿溶血的检测第11页孕妇血样本检验2 2 2 2、抗
7、体筛选和判定、抗体筛选和判定、抗体筛选和判定、抗体筛选和判定 取母亲血清与筛选红细胞作取母亲血清与筛选红细胞作取母亲血清与筛选红细胞作取母亲血清与筛选红细胞作抗体筛选试验抗体筛选试验抗体筛选试验抗体筛选试验 。假如该试验阳性,应深入用配组谱细胞作假如该试验阳性,应深入用配组谱细胞作假如该试验阳性,应深入用配组谱细胞作假如该试验阳性,应深入用配组谱细胞作抗体判定,以确定抗体特异性。当检出某一抗抗体判定,以确定抗体特异性。当检出某一抗抗体判定,以确定抗体特异性。当检出某一抗抗体判定,以确定抗体特异性。当检出某一抗体后,需深入判定双亲相关红细胞抗原。体后,需深入判定双亲相关红细胞抗原。体后,需深入判
8、定双亲相关红细胞抗原。体后,需深入判定双亲相关红细胞抗原。如夫妇如夫妇如夫妇如夫妇ABOABOABOABO血型配合,可直接用孕妇血清加丈血型配合,可直接用孕妇血清加丈血型配合,可直接用孕妇血清加丈血型配合,可直接用孕妇血清加丈夫红细胞做抗体筛查试验。夫红细胞做抗体筛查试验。夫红细胞做抗体筛查试验。夫红细胞做抗体筛查试验。新生儿溶血的检测第12页 检出有意义抗体后,应定时复查,观检出有意义抗体后,应定时复查,观察抗体效价改变情况,抗体效价连续升高察抗体效价改变情况,抗体效价连续升高提醒胎儿可能受害。必要时可准备产后马提醒胎儿可能受害。必要时可准备产后马上换血。上换血。新生儿溶血的检测第13页n
9、n假如抗体筛选试验阴性,只有丈夫红细胞出现阳假如抗体筛选试验阴性,只有丈夫红细胞出现阳假如抗体筛选试验阴性,只有丈夫红细胞出现阳假如抗体筛选试验阴性,只有丈夫红细胞出现阳性反应,则提醒孕妇血清中存在针对低频率抗原性反应,则提醒孕妇血清中存在针对低频率抗原性反应,则提醒孕妇血清中存在针对低频率抗原性反应,则提醒孕妇血清中存在针对低频率抗原抗体。抗体。抗体。抗体。n n假如孕妇血清中抗体未针对其丈夫或婴儿血型抗假如孕妇血清中抗体未针对其丈夫或婴儿血型抗假如孕妇血清中抗体未针对其丈夫或婴儿血型抗假如孕妇血清中抗体未针对其丈夫或婴儿血型抗原,则该抗体可能是因为输血等原因引发对胎儿原,则该抗体可能是因为
10、输血等原因引发对胎儿原,则该抗体可能是因为输血等原因引发对胎儿原,则该抗体可能是因为输血等原因引发对胎儿无害。无害。无害。无害。新生儿溶血的检测第14页n n检测检测RhRh系系HDNHDN同时,注意母婴同时,注意母婴ABOABO系系HDNHDN并存,并存,需以缺乏该需以缺乏该RhRh抗体对应抗原抗体对应抗原A(B)A(B)红细胞进红细胞进行检测证实。行检测证实。n n如母亲如母亲Rh DRh D阴性,阴性,A A型型 父亲父亲Rh DRh D阳性阳性 B B型型检测母亲体内除抗检测母亲体内除抗-D-D外,是否存在抗外,是否存在抗B B应该用母亲血清应该用母亲血清+Rh D+Rh D阴性阴性B
11、 B型红细胞反应型红细胞反应新生儿溶血的检测第15页母婴Rh血型不合溶血病血清学检验孕妇血样本检验孕妇血样本检验孕妇血样本检验孕妇血样本检验 RhRhRhRh阴性第一次怀孕孕妇抗体检测应分别在阴性第一次怀孕孕妇抗体检测应分别在阴性第一次怀孕孕妇抗体检测应分别在阴性第一次怀孕孕妇抗体检测应分别在20202020、28282828、34343434周进行。检测包含对母亲血清用抗体筛选周进行。检测包含对母亲血清用抗体筛选周进行。检测包含对母亲血清用抗体筛选周进行。检测包含对母亲血清用抗体筛选红细胞以及红细胞以及红细胞以及红细胞以及(在在在在ABOABOABOABO血型配合时)丈夫红细胞作抗血型配合时
12、)丈夫红细胞作抗血型配合时)丈夫红细胞作抗血型配合时)丈夫红细胞作抗体筛选。体筛选。体筛选。体筛选。经产妇或曾输过经产妇或曾输过经产妇或曾输过经产妇或曾输过RhRhRhRh阳性血,怀孕早期作抗体筛阳性血,怀孕早期作抗体筛阳性血,怀孕早期作抗体筛阳性血,怀孕早期作抗体筛查,一旦检出,则最少查,一旦检出,则最少查,一旦检出,则最少查,一旦检出,则最少每每每每4 4 4 4周周周周检测一次,亲密观察检测一次,亲密观察检测一次,亲密观察检测一次,亲密观察抗体效价改变抗体效价改变抗体效价改变抗体效价改变。新生儿溶血的检测第16页孕妇血样本检验3 3、血清中、血清中IgGIgG抗体及效价检验抗体及效价检验
13、:ABOABOABOABO系系系系HDNHDN由由由由IgGIgG抗抗抗抗A A(B B)引发,检测母亲血清引发,检测母亲血清引发,检测母亲血清引发,检测母亲血清中有没有中有没有中有没有中有没有IgGIgG性质抗性质抗性质抗性质抗A A(B B)抗体及效价,即可预抗体及效价,即可预抗体及效价,即可预抗体及效价,即可预ABOABO系系系系HDNHDN发生可能性。发生可能性。发生可能性。发生可能性。新生儿溶血的检测第17页效价测定方法:效价测定方法:应用应用2-2-巯基乙醇(巯基乙醇(2-Me2-Me)或二硫苏糖)或二硫苏糖醇(醇(DTTDTT)破坏或中和)破坏或中和IgMIgM抗体使之不能再抗体
14、使之不能再与盐水介质中相对应红细胞凝集。经处理与盐水介质中相对应红细胞凝集。经处理后血清加盐水进行倍比稀释后血清加盐水进行倍比稀释 加入相对应红加入相对应红细胞用间接抗球蛋白法检测。细胞用间接抗球蛋白法检测。怎样检测IgG类血型抗体?新生儿溶血的检测第18页IgGIgG抗体检测方法抗体检测方法n n当IAT效价盐水效价4倍或以上时结果可信。n nIgG抗A、B效价能够从32开始检测,其它不规则抗体均从1或2开始检测。n n用唾液血型物质中和IgM抗A,B?值得注意是无公认检测高滴度抗A、抗B试验方法,亦无明确试验室操作指南。新生儿溶血的检测第19页思索:1 1、你认为是否全部孕妇都应该作抗体筛
15、查?为何你认为是否全部孕妇都应该作抗体筛查?为何?2 2、假如不是,什么情况下提议孕妇作抗体筛查?、假如不是,什么情况下提议孕妇作抗体筛查?新生儿溶血的检测第20页产前检验产前检验羊水检验羊水检验n n抽取羊水检测胆红素抽取羊水检测胆红素n n检测羊水中卵磷脂和鞘磷脂百分比检测羊水中卵磷脂和鞘磷脂百分比(L/S)(L/S)n n检测羊水中血型抗原帮助判断检测羊水中血型抗原帮助判断ABOABO血型血型 羊水穿刺术轻易造成母亲和胎儿出血,并引发羊水穿刺术轻易造成母亲和胎儿出血,并引发母亲免疫反应,所以现在极少有医院采取。母亲免疫反应,所以现在极少有医院采取。新生儿溶血的检测第21页新生儿溶血患儿血
16、样本检验 患儿血样本检验是诊疗患儿血样本检验是诊疗HDNHDN最有利证最有利证据,证实患儿红细胞是否被来自母体据,证实患儿红细胞是否被来自母体IgGIgG抗抗A A(B B)抗体所致敏。)抗体所致敏。试验包含试验包含红细胞直接抗球蛋白试验、游红细胞直接抗球蛋白试验、游离抗体试验、抗体放散试验。离抗体试验、抗体放散试验。新生儿溶血的检测第22页试验室检验试验室检验 试验名称试验名称n n目标目标方法方法结果判定结果判定 意义意义直接抗人球直接抗人球蛋白试验蛋白试验n n测测定定患患儿儿红红细细胞胞上上结结合合血血型型抗抗体体n n“最适稀释度最适稀释度”抗人球蛋白抗人球蛋白血清与充分洗血清与充分
17、洗涤后受检红细涤后受检红细胞盐水悬液混胞盐水悬液混合合红细胞凝红细胞凝聚为阳性聚为阳性n n红细胞已红细胞已致敏,为致敏,为确诊试验确诊试验n nRhRh溶血病溶血病阳性率高阳性率高而而ABOABO溶溶血病低血病低抗体释放试抗体释放试验验n n测定测定患儿患儿红细红细胞上胞上结合结合血型血型抗体抗体n n使患儿致敏红使患儿致敏红细胞结合母体细胞结合母体血型抗体释放血型抗体释放于释放液中,于释放液中,该释放液与同该释放液与同型成人红细胞型成人红细胞混合,再加入混合,再加入抗人球蛋白血抗人球蛋白血清清红细胞凝红细胞凝聚为阳性聚为阳性n n检测致敏检测致敏红细胞敏红细胞敏感试验,感试验,为确诊试为确
18、诊试验验n nRhRh和和ABOABO溶血病普溶血病普通均为阳通均为阳性性游离抗体试游离抗体试验验n n测定测定患儿患儿血清血清中来中来自母自母体血体血型抗型抗体体n n在患儿血清中在患儿血清中加入与其相同加入与其相同血型成人红细血型成人红细胞,再加入抗胞,再加入抗人球蛋白血清人球蛋白血清红细胞凝红细胞凝聚为阳性聚为阳性n n预计是否预计是否继续溶血继续溶血和换血效和换血效果,不是果,不是确诊试验确诊试验新生儿溶血的检测第23页新生儿溶血患儿血型判定n nABO血型判定:常规方法n nRh血型判定:常规方法ABO-HDN患儿新生儿溶血的检测第24页新生儿溶血患儿血型判定n nABO血型判定:常
19、规方法n nRh血型判定:Rh溶血病婴儿Rh血型定型比较困难,原因是婴儿红细胞直抗呈强阳性,不论在酶,抗球蛋白中都必定呈阳性,所以普通检测方法都不能适用。Rh-HDN患儿新生儿溶血的检测第25页Rh-HDNRh-HDN患儿患儿RhRh血型判定血型判定 n n对新生儿红细胞进行热放散(无须放散到直抗完全阴性)后再用酶法或抗球蛋白法或盐水法判定血型。n n用恰当盐水介质抗体。包含全部单克隆盐水介质试剂;n n对于化学改性盐水介质试剂除非说明书中注明能够用于直抗阳性细胞血型判定,普通不能在此应用。新生儿溶血的检测第26页n n新生儿红细胞“遮断现象”新生儿新生儿RhDRhD阳性而且红细胞完全被母亲抗
20、阳性而且红细胞完全被母亲抗D D所饱所饱和,以至于红细胞上没有和,以至于红细胞上没有D D位点与盐水介质定型试位点与盐水介质定型试剂起反应,又称封闭性剂起反应,又称封闭性D D。此时用盐水介质抗体检测结果可能出现弱阳性此时用盐水介质抗体检测结果可能出现弱阳性甚至阴性。甚至阴性。所以此时假如母亲为所以此时假如母亲为RhDRhD阴性,且血清中已经阴性,且血清中已经检出抗检出抗D D,新生儿直抗强阳性且与抗,新生儿直抗强阳性且与抗D D产生阴性或产生阴性或模棱两可结果,应考虑这种情况,依据需要将细模棱两可结果,应考虑这种情况,依据需要将细胞热放散后再定型。胞热放散后再定型。新生儿溶血的检测第27页H
21、DN患儿血样本检验1 1 1 1、红细胞直接抗球蛋白、红细胞直接抗球蛋白、红细胞直接抗球蛋白、红细胞直接抗球蛋白 假如新生儿红细胞被假如新生儿红细胞被假如新生儿红细胞被假如新生儿红细胞被IgGIgGIgGIgG抗体抗体抗体抗体所致敏,直接抗球蛋所致敏,直接抗球蛋所致敏,直接抗球蛋所致敏,直接抗球蛋白试验能得到阳性结果。因为新生儿白试验能得到阳性结果。因为新生儿白试验能得到阳性结果。因为新生儿白试验能得到阳性结果。因为新生儿A A A A(B B B B)抗原密度抗原密度抗原密度抗原密度比成人低,所以被结合抗体亦极少,呈弱阳性混合比成人低,所以被结合抗体亦极少,呈弱阳性混合比成人低,所以被结合抗
22、体亦极少,呈弱阳性混合比成人低,所以被结合抗体亦极少,呈弱阳性混合视野外观。视野外观。视野外观。视野外观。RH RH RH RH血型不合血型不合血型不合血型不合HDNHDNHDNHDN直抗试验往往强阳性。这是区分直抗试验往往强阳性。这是区分直抗试验往往强阳性。这是区分直抗试验往往强阳性。这是区分ABOABOABOABO新生儿溶血病主要标志。新生儿溶血病主要标志。新生儿溶血病主要标志。新生儿溶血病主要标志。直抗试验越强,通常病情越重。直抗试验越强,通常病情越重。直抗试验越强,通常病情越重。直抗试验越强,通常病情越重。新生儿溶血的检测第28页新生儿溶血的检测第29页2 2、游离抗体试验、游离抗体试
23、验ABO-HDNABO-HDN患儿血样本检验患儿血样本检验 新生儿血清中新生儿血清中新生儿血清中新生儿血清中IgGIgG抗抗抗抗A A(B B)抗体来自母亲,抗体来自母亲,抗体来自母亲,抗体来自母亲,假如患儿血清中发觉有与其红细胞不配合假如患儿血清中发觉有与其红细胞不配合假如患儿血清中发觉有与其红细胞不配合假如患儿血清中发觉有与其红细胞不配合IgGIgG抗抗抗抗A A(B B)时,应将其血清与时,应将其血清与时,应将其血清与时,应将其血清与A A、B B、O O试剂红细胞试剂红细胞试剂红细胞试剂红细胞用间接抗球蛋白试验加以证实。用间接抗球蛋白试验加以证实。用间接抗球蛋白试验加以证实。用间接抗球
24、蛋白试验加以证实。新生儿溶血的检测第30页Rh-HDN患儿游离试验患儿游离试验 n nRh溶血病游离试验要求最好用母亲血清代替婴儿血清做一组谱细胞。n n该试验阳性不能证实新生儿溶血病,因为该试验检出抗体可能是因为母亲以前经输血或孕产留下。该试验只能确定婴儿血清中可能存在血型抗体。n n确诊Rh新生儿溶血病要靠直抗和释放试验。n n同时用婴儿本身血清加对应A、B细胞排除ABO溶血病。加入A、B细胞应不含能与母亲血清中Rh抗体反应抗原。新生儿溶血的检测第31页 3 3、抗体放散试验抗体放散试验 用放散法提取致敏于红细胞表面抗体。将用放散法提取致敏于红细胞表面抗体。将用放散法提取致敏于红细胞表面抗
25、体。将用放散法提取致敏于红细胞表面抗体。将抗体放散于盐水溶液中,然后加入抗体放散于盐水溶液中,然后加入抗体放散于盐水溶液中,然后加入抗体放散于盐水溶液中,然后加入A A、B B、O O红细红细红细红细胞,作胞,作胞,作胞,作间接抗球蛋白试验间接抗球蛋白试验间接抗球蛋白试验间接抗球蛋白试验,放散试验中使用红,放散试验中使用红,放散试验中使用红,放散试验中使用红细胞是直抗试验几百倍,所以此法甚为敏感,细胞是直抗试验几百倍,所以此法甚为敏感,细胞是直抗试验几百倍,所以此法甚为敏感,细胞是直抗试验几百倍,所以此法甚为敏感,即使是直接抗球蛋白试验阴性患儿,一旦本试即使是直接抗球蛋白试验阴性患儿,一旦本试
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