DB4201T530-2017名优樱花组织培养快速繁殖技术规程.docx
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1、ICS 65.020.20B 05DB4201武汉市地方标准DB4201/T 5302017名优樱花组织培养快速繁殖技术规程2017-06-20 发布2017-07-20 实施武汉市质量技术监督局 发 布DB4201/T 530-2017前言本规程按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本规程由江汉大学、武汉法雅园林集团有限公司提出。本规程由武汉市农业科学技术研究院归口。本规程起草单位:江汉大学、武汉法雅园林集团有限公司。本规程主要起草人:蒋细旺、况红玲、戴希刚、张灵灵、徐海芹、张兵、姚中华、徐建刚、陆露、翟敬华。IDB4201/T 530-2017名优樱花组织培养快速繁殖技术规程1
2、范围本规程规定了武汉地区名优樱花的种类或品种及组织培养快速繁殖技术的启动培养、增殖培养、生根培养、炼苗和移栽、组培苗的田间管理的要求。本规程适用于武汉地区名优樱花组织培养快速繁殖,立地条件相近地区亦可参照执行。2 种类或品种适宜本地栽植,观赏性、抗性强樱花种类或品种,如:山樱花(Cerasus serreulat)、染井吉野(C.yedoensis)、日本晚樱杨贵妃(C. serrulata var. lannesiana Mollis)、醉红(C. serrulata var. lannesiana Zuihong)等。3 组织培养快速繁殖技术3.1 启动培养3.1.1 茎段外植体的获得将嫩
3、枝剪成6 cm10 cm的茎段,室内用清水将材料洗净,自来水冲洗0.5 h2 h,在超净台上用70的酒精浸泡40 s,用无菌水冲洗4 次;再用0.1的升汞浸泡10 min,无菌水冲洗5 次。用滤纸吸干,将材料切成1 cm2 cm带一个腋芽的茎段。3.1.2 芽的启动与形成3.1.2.1 培养基组成以MS为基本培养基,将茎段接种于启动培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L蔗糖 30 g/L 琼脂 6 g/L,pH5.86.0(用0.1 mol/L的HCl或NaOH调节)。MS培养基配方见附录A。3.1.2.2 培养基制备培养基先配制,装大瓶,连直径90 mm的圆形玻璃
4、培养皿一起用蒸汽高压灭菌锅121 灭菌20 min, 再无菌分装,每个培养皿约含30 ml的培养基。腋芽萌发用灭菌培养皿培养。3.1.2.3 培养条件培养室温度(252),日光灯光源,光照强度1 500 lx2 000 lx,光照周期16 d。3.1.2.4 接种茎段外植体采用水平接种。3.1.2.5 芽的萌动与生长1培养4 周5 周后形成芽,直至幼苗高6 cm8 cm。3.2 增殖培养3.2.1 培养基组成当植株长至6 cm8 cm时,将植株切成带1 个节2 个节的茎段进行增殖。接种到增殖培养基WPM+KT 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L蔗糖 30 g/L琼脂 6 g/L0.5
5、g/L的活性炭颗粒,pH5.86.0。WPM培养基配方(pH 5.2)见附录B3.2.2 培养基制备增殖培养用400 ml的带有透气膜的培养瓶培养,每个培养瓶约含80 ml的培养基。培养基用蒸汽高压灭菌锅121 灭菌20 min。3.2.3 增殖培养条件培养条件见3.1.2.3。增殖培养4 周5 周开始形成丛生芽。3.2.4 继代培养将丛生芽切成单芽继代培养,每2 周4 周更换培养基。3.3 生根培养3.3.1 含生长素的培养基培养3.3.1.1 培养基组成将增殖获得的幼苗,长至6 cm8 cm时,切成带1 个2 个节的茎段进行生根培养。以1/2 WPM(大量元素减半)为基本培养基。接种到含生
6、长素的生根培养基1/2 WPM+IBA 1.0 mg/L +NAA 0.5 mg/L 蔗糖 25 g/L琼脂 6 g/L0.5 g/L的活性炭颗粒,pH5.86.0。WPM培养基配方(pH 5.2)见附录B。3.3.1.2 培养基制备生根诱导采用250 ml的锥形瓶培养,每瓶约含75 ml的培养基。培养基用蒸汽高压灭菌锅121 灭菌20 min。3.3.1.3 培养条件培养条件见3.1.2.3。培养4 d6 d。3.3.2 不含生长素的培养基培养3.3.2.1 培养基组成将培养4 d6 d的增殖材料转接到无激素的生根培养基1/2 WPM蔗糖 25 g/L琼脂 6 g/L0.5 g/L的活性炭颗
7、粒,pH5.86.0。WPM培养基配方(pH 5.2)见附录B。3.3.2.2 培养基制备见3.3.1.2。23.3.2.3 培养条件培养条件见3.1.2.3。培养4 周5 周。3.4 炼苗和移栽3.4.1 苗床的准备选择排水良好地块做苗床,苗床宽80 cm100 cm,高15 cm20 cm,长度6 m10 m。用蛭石、珍珠岩、泥炭土(体积比1:1:1)混合均匀作为基质,基质厚度15 cm20 cm。基质先喷多菌灵50 可湿性粉剂500 倍液消毒,再用水淋透,放置1 d2 d,再用水淋透,搭盖拱高40 cm60 的塑料拱棚, 然后用塑料薄膜覆盖保湿7 d,保证基质潮湿和较高空气湿度。3.4.
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