ABO血型鉴定试管法操作程序110503.doc

输血科作业指导书

ABO血型鉴定试管法操作程序
编号：XK-SOP-
版本：1/0
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1、 原理
根据红细胞上有或无A抗原（或）B抗原，将血型分为A型、B型、AB型、O型四种。可利用红细胞凝集试验，通过正（血清试验）反（细胞试验）定型，准确鉴定ABO血型。所谓正定型是用已知抗A和抗B分型血清来测定红细胞上有无相应的A 抗原和（或）B抗原，所谓反定型是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗A 或抗B抗体。
2、 标本采集
紫管抗凝静脉血。
3、 试剂材料
3.1 抗-A，抗-B。
3.2 A、B型试剂红细胞
4、 操作程序
4.1 取洁净小试管2支，分别标明抗A、抗B，加抗A、抗B分型血清各两滴于细胞底部，再以滴管分别加受检者3~5%红细胞盐水悬液1滴混匀。
4.2 另取洁净小试管2支分别标明A、B型红细胞，用滴管分别加入受检者血清1~2滴与底部，再分别以滴管加入A、B型试剂红细胞悬液1滴混匀。
4.3 120g离心1min或1300g离心15s。
4.4 将试管轻轻摇动，是沉于底部的红细胞浮起，先用肉眼观察有无凝集（溶血）现象，如肉眼不见凝集，应将反应物倒在玻片上，再以低倍镜观察。注意摇动力度，细胞扣边缘情况，弱凝集的判断（亚型尤其重要），血型判断并记录。
4.5结果判断（见下表）
ABO血型正反定型结果判读表
标准血清+受检者红细胞
受检者血型
受检者血清+试剂红细胞
抗A
抗B
A细胞
B细胞
+
-
A
-
+
-
+
B
+
-
-
-
O
+
+
+
+
AB
-
-

注：+表示凝集；-表示不凝集
5、 质量控制
5.1 试管必须清洁干燥，防止溶血。
5.2 判断结果后应仔细核对、记录，避免差错。
6、 注意事项
6.1 试剂浓度与配比合适，比例不合适可能漏检亚型。
6.2 操作准确，漏加试剂可导致结果出错。
6.3 结果判定，尤其对溶血结果的认识，如果是血清标本可能遇到，56度破坏补体验证。
6.4 记录错误，实际工作中错误报告占很大比例
6.5 标本错误
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7、 临床意义
输血原则是同型输注，ABO血型的确定是输血前的第一步检测。