体外受精和早起胚胎培养.pptx

3.23.2体外受精和早期胚胎培养体外受精和早期胚胎培养一、从试管牛说起一、从试管牛说起试管动物技术试管动物技术 是指通过人工操作使是指通过人工操作使卵子和精子在卵子和精子在体外体外条条件下件下成熟和受精成熟和受精，并，并通过培养发育成通过培养发育成早期早期胚胎胚胎后，再经后，再经移植移植产产生后代的技术。生后代的技术。精子精子卵子卵子受精卵受精卵早期胚胎早期胚胎移植移植子宫子宫个体试管动物技术过程：试管动物技术过程：第一步：体外受精第一步：体外受精 第二步：胚胎的早期培养第二步：胚胎的早期培养第三步：胚胎移植第三步：胚胎移植快速繁殖动物优良品种快速繁殖动物优良品种目的：目的：试管动物技术试管动物技术主要包括主要包括 、和和 等几个主要步骤等几个主要步骤 。概念：概念：采取雌性动采取雌性动物的物的 和雄和雄性动物的性动物的 ，使其在使其在 受精。受精。二、体外受精二、体外受精卵母细胞卵母细胞精子精子体外体外卵母细胞的采集卵母细胞的采集精子的获取精子的获取受精受精采用的主要方法是给供体注射采用的主要方法是给供体注射 ，使其排出更，使其排出更多的卵子，之后从多的卵子，之后从 中冲取卵子，直接与获能的精中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。子在体外受精。促性腺激素促性腺激素输卵管输卵管a.如何使雌性动物排出更多的卵子？如何使雌性动物排出更多的卵子？超数排卵处理超数排卵处理b.b.对对实实验验动动物物小小鼠鼠、兔兔和和小小家家畜畜猪猪、羊羊如如何何采采集卵子？集卵子？对不同动物对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。采集卵母细胞的方法不同。1.1.卵母细胞的采集和培养卵母细胞的采集和培养大家畜或大型动物，如牛，卵细胞的采集：大家畜或大型动物，如牛，卵细胞的采集：从屠宰场已屠宰母畜的从屠宰场已屠宰母畜的 中采集卵母细胞，也中采集卵母细胞，也可以借助可以借助 、或或 等工等工具，直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。具，直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。卵巢卵巢超声波超声波(B(B超超)探测仪探测仪内窥镜内窥镜腹腔镜腹腔镜采集的卵母细胞，都要在体外经采集的卵母细胞，都要在体外经采集的卵母细胞，都要在体外经采集的卵母细胞，都要在体外经 后，才后，才后，才后，才能与能与能与能与 精子结合完成受精。精子结合完成受精。精子结合完成受精。精子结合完成受精。人工培养成熟人工培养成熟人工培养成熟人工培养成熟获能获能2.2.精子的收集和获能精子的收集和获能1)1)收集的方法收集的方法:电刺激电刺激法法等等三种三种2)2)获能处理获能处理:培养法：培养法：把精子放入获能液中。把精子放入获能液中。（啮齿动物、家兔和猪）（啮齿动物、家兔和猪）化学法：化学法：把精子放入一定浓度肝素或钙离把精子放入一定浓度肝素或钙离子载体子载体A23187A23187溶液中。溶液中。（牛、羊等家畜）（牛、羊等家畜）3.3.受精受精获能溶液获能溶液专用受精溶液专用受精溶液 获能的精子和培获能的精子和培养成熟的卵子，养成熟的卵子，一般情况下在一般情况下在 或或中完成受精过程。中完成受精过程。精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养发育培养液液中继续培养，以中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力检查受精状况和受精卵的发育能力。培养液成分：培养液成分：有机盐、有机盐、无机盐无机盐、维生素、激素、维生素、激素、氨基酸氨基酸、核苷酸、核苷酸、血清血清等等三、胚胎的早期培养三、胚胎的早期培养培培养养发发育育到到适适宜宜阶阶段段时时，可可将将其其取取出出向向受受体体移移植植或冷动保存或冷动保存不同动物胚胎移植时间不同不同动物胚胎移植时间不同牛、羊：牛、羊：小鼠、家兔：小鼠、家兔：试管婴儿：试管婴儿：桑椹胚或囊胚阶段桑椹胚或囊胚阶段可在更早的阶段移植可在更早的阶段移植816816个细胞阶段个细胞阶段注：胚胎发育的主要场所是母体注：胚胎发育的主要场所是母体采集良种母牛的卵母细胞采集良种母牛的卵母细胞卵母细胞的体外培养卵母细胞的体外培养采集良种公牛精子采集良种公牛精子精子体外获能精子体外获能体外受精体外受精良种牛体外受精胚胎良种牛体外受精胚胎胚胎移植胚胎移植受体牛受体牛良种犊牛良种犊牛成熟期牛成熟期牛屠宰加工厂屠宰加工厂市场市场采集卵巢中的卵母细胞采集卵巢中的卵母细胞思考思考：试管牛的产生属于克隆吗？：试管牛的产生属于克隆吗？早期早期胚胎胚胎胚胎移植胚胎移植C代孕代孕母体母体D新个体新个体（与（与B遗传物质相同）遗传物质相同）克隆动物的培育克隆动物的培育过程过程A雌性动雌性动物卵子物卵子去核去核细胞质细胞质取核取核B B动物体动物体细胞细胞核移植核移植显微注射显微注射重组细胞重组细胞有性生殖 无性生殖 核移植技术、胚胎移植遵循 不遵循体外受精体外受精胚胎移植胚胎移植 试管动物试管动物 克隆动物克隆动物发育起点发育起点生殖方式生殖方式技术手段技术手段遗传物质遗传物质遗传规律遗传规律比较试管动物和克隆动物比较试管动物和克隆动物来自2个个体 主要来自核供体 受精卵重组细胞