DB34T4625-2023石榴脱毒苗木繁育技术规程.pdf
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1、 ICS 65.020.20 CCS B 61 34 安徽省地方标准 DB34/T 46252023 石榴脱毒苗木繁育技术规程 Technical regulations for virus-eliminated tissue culture seedling propagation of pomegranate 2023-10-07 发布 2023-11-07 实施 安徽省市场监督管理局 发 布 前言 本文件按照GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由安徽中以农
2、业科技有限公司提出。本文件由安徽省林业局归口。本文件起草单位:安徽中以农业科技有限公司、安徽科技学院、安徽省中以智农众创空间有限公司、安徽省红玛瑙石榴科技有限公司、安徽省质量和标准化研究院。本文件主要起草人:钱晶晶、葛伟强、马纪忠、洪少民、胡能兵、杨友婷、崔广荣、姚登波、洪登华、王宁、吕群龙、杨小元、韩啸。石榴脱毒苗木繁育技术规程 1 范围 本文件规定了石榴脱毒苗木组培生产过程的术语和定义、环境要求、组培技术、病毒检测和质量要求。本文件适用于果用、观赏石榴品种的脱毒苗木繁育。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应
3、的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB 6000 主要造林树种苗木质量分级 GB/T 8321(所有部分)农药合理使用准则 LY/T 1893 石榴苗木培育技术规程 DB34/T 3410 石榴生产技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 外植体 explants 植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组织的片段。3.2 石榴组培 tissue culture of pomegranates 利用石榴茎尖等组织作为外植体,在无菌条件下通过人工培育出完整植株的过程。3.3 茎尖脱毒 virus-eliminated of pl
4、ant shoot tip 采用茎尖接种的离体培养方式,达到脱除植物病毒的目的。3.4 褐化 browning 培养材料向培养基中释放褐色物质,致使培养基逐渐变成褐色,影响培养物的生长、分化,甚至死亡的现象。4 环境要求 操作间要求由准备室、缓冲室、接种室、培养室、炼苗室和移栽温室等部分组成。其中接种室、培养室需要严格无菌,所处环境要求具备可以自动杀菌、控温、控光等条件。准备室 4.1 用于药品和培养基配置、器具洗涤及灭菌等,面积15 m2,温度为 2028。缓冲室 4.2 用于室外与接种室或培养室的隔离缓冲区间,应具备换衣区、风淋区,面积2 m2。接种室 4.3 单间接种室面积10 m2,高
5、度3 m;接种室要求严格无菌,应具备超净工作台,室内应吊装紫外线灭菌灯,距离地面 1 m 处,其辐射强度应70 Wcm-2;2 d3 d 进行 1 次紫外消杀灭菌,1 月2月进行 1 次甲醛熏蒸消杀灭菌处理;室内温度 2126,相对湿度 50%70%。培养室 4.4 用于组培苗的培养,面积50 m2,方便隔离和消杀;培养室要求严格无菌,应具备培养架,室内应吊装紫外线灭菌灯,距离地面 1 m 处,其辐射强度应70 Wcm-2;1 月2 月进行 1 次甲醛熏蒸消杀灭菌处理;培养室环境相对湿度 70%80%;光培养 16 h,2226,光照强度 2000 Lux5000 Lux;暗培养 8 h,22
6、26。炼苗室 4.5 应具有自动喷雾或加湿设施,温度 2228、相对湿度 50%70%、光照 1000 Lux5000 Lux。移栽温室 4.6 应具有遮光设施,遮阳率 25%50%、温度 1525、相对湿度 50%70%、自然光照,光照过于强烈时采取遮光措施。5 组培技术 技术路线 5.1 组培技术路线:外植体选取茎尖接种扩繁培养生根培养病毒检测炼苗移栽。组培流程 5.2 5.2.1 外植体选取 选取无病虫害、长势健壮的品种作为取样母株,截取健康、幼嫩、无病虫害的新梢,放置于室内水培 5 d7 d。5.2.2 培养基配置 培养基采用WPM为基本培养基,以6-BA、IBA为常用激素,活性炭作为
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