食源性致病菌的快速检验.pdf
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1、Thermo FisherSCIENTIFIC食源性致病菌的快速检验The world leader in serving scienceMarketing Special ist Microbiol ogy Division Thermo Fisher Scientific食源性致病微生物检验 大肠菌群检验:Bril l iance大肠菌群/大肠杆菌显色培养基 阪崎肠杆菌检验:Bril l iance阪崎肠杆菌显色培养基 金葡菌检验:Dryspot金葡菌乳胶凝集试剂盒 生化鉴定:RapID鉴定板条0X010remel0X010Thermo FisherSCIENTIFIC2大肠菌群(col
2、iforms)的检验 大肠菌群:在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼 性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌群主要来源人的粪便,作为粪便污染指标评价食品的卫生状 况,推断食品中肠道致病菌污染的可能性。传统检验方法:1、MPN法;2、平板计数法;时间至少需要2-4天Thermo FisherSCIENTIFIC3GB/T4789.320 10食品卫生微生物学检验大肠菌群计数第一法:MPN法0X010Thermo FisherSCIENTIFIC4GB/T4789.320 10食品卫生微生物学检验大肠菌群计数第二法:平板计数法0X010Thermo FisherSCIENTIFIC5Bril
3、l iance大肠杆菌/大肠菌群显色琼脂原理:培养基中含有两种显色底物 Rose-Gal(检测B-半乳糖普酶)和X-Gl u(B-葡萄糖醛酸酶活性)菌种0 葡萄糖桂酸酶B 半乳糖昔酶菌落颜色大肠杆菌十黑色大肠黄群粉红色其它,无色或蓝色使用方法:采取涂布法、倾注法或 滤膜法均可;37 C培养24h制成培养基:B08004M(100ml/瓶);B08004T(250ml/瓶);B08004V(500ml/瓶);大肠杆菌/大肠菌群显色琼脂干粉:CM1046B(500g)Thermo FisherSCIENTIFICOXOID6阪崎肠杆菌(Ecterobacfer sakazak/7)的检验 革兰氏阴
4、性杆菌,可引新生儿脑膜炎、败血症及致死性小肠结肠 炎 高度耐受干燥,为其在奶粉生产的干燥环境中存活提供了非常有 利的条件 婴幼儿配方奶粉是婴儿感染阪崎肠杆菌的主要途径Thermo FisherSCIENTIFIC阪崎肠杆菌(Ecterobacfer sakazak/7)显色培养基曾写入GB2008版阪崎肠杆菌 检测方法原理:与其他肠杆菌不同,阪崎肠杆菌独有Q-葡萄糖甘酸 酶。显色琼脂中含有该种酶 的底物。CopyfFgHI Oxoid Ltd.All rights reserved干粉:CM1055B制成培养基:B08002M(100ml/瓶);B08002T(250ml/瓶);B08002V
5、(500ml/瓶);篇种颜色阪崎肠杆菌蓝绿色粘质沙雷氏菌红色大肠杆菌麦秆鱼普通变胫杆菌灰色/黑色其它抑制0X010Thermo FisherSCIENTIFIC9金葡菌的鉴定传统方法血浆凝固酶试验:取新鲜配置兔血浆0.5 mL,放入小试管中,再 加入BHI培养物0.2 mL0.3 mL,振荡摇匀,置361 温箱 或水浴箱内,每半小时观察一次,观察6h,如呈现凝固(即将试 管倾斜或倒置时,呈现凝块)或凝固体积大于原体积的一半,被 判定为阳性结果。Confirm using tube co&grtjlueThermo FisherSCIENTIFIC10Dryspot加强型金黄色葡萄球菌试剂盒检测
6、的乳胶试剂完全固定在检测卡上 减少手工操作 减少操作错误 降低污染的可能 室温储存,质量更稳定,储存运输更安全货号:DR0100M规格:120测试 原理凝集因子一纤维蛋白原蛋白质A IgG荚膜多糖-igGdry 3SPTThermo FisherSCIENTIFICOXOID11F式乳胶凝集试剂 Reagent FormulationAntibody absorbed to l atexDry formul ation spottedBacterial suspension or sera addedAggl utination observedThermo FisherSCIENTIFIC1
7、2操作程序:盐水试验反应 区和对照 反应区的 小环内挑取疑似菌 A落在盐水中乳化铺开整个菌 悬液,覆盖 整个反应区结果观察:阳性结果:20秒之内发生凝集与乳胶点混 合阴性结果:20秒之后在检测圈内未发生凝集反应且蓝色悬浮液保 持光滑注意事项:2 至25 之间保存,确保干燥,防止卡片上形成冷 凝水Thermo FisherSCIENTIFICOXOID13生化鉴定Remel RapID 丁171手工鉴定系统原理:生化鉴定;酶学技术;基于特定底物的微生物降解可被多 种指示剂系统检测到特点:简单的一步接种4小时孵育,无需厌氧培养无需覆盖矿物油检测构成酶,无需微生物的生长,结果清晰颜色鲜艳清晰,与比色
8、卡对比更易判读大容量、及时更新的数据库remelThermo FisherSCIENTIFIC14RapID 丁171手工鉴定系统 RapID ONE-用于氧化酶阴性、革兰氏染色阴性杆菌(如肠杆菌科细菌)的鉴定 RapID ANA II-用于厌氧菌鉴定 RapID NF Pl us-用于不发酵葡萄糖的革兰氏菌阴性菌以及其他选 择性发酵葡萄糖的氧化酶阳性的革兰氏阴性菌的鉴定 RapID NH-用于奈瑟氏菌、嗜血杆菌和包括卡他莫拉菌在内的其 他菌的鉴定 RapID CB Pl us-用于棒状杆菌和其他不规则的革兰氏阳性菌的鉴 定Thermo FisherSCIENTIFICOXOID15RapID
9、 丁171手工鉴定系统 RapID Yeast Pl us-用于酵母菌和类酵母菌的鉴定 RapID STR-用于链球菌和其他相关微生物(如肠球菌、明串珠 菌和单增李斯特菌等)的鉴定-用于尿路致病菌(革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和一定的酵母)的鉴定 RapID STAPH PLUS-用于葡萄球菌和其他过氧化氢酶阳性、革兰 氏阳性球菌的鉴定Thermo FisherSCIENTIFIC16RapID操作程序 取适合的培养基上经纯培养得到分离株 选择适合的接种液,制成一定浓度的菌悬液(与麦氏浊度标准管比 较浊度)掀开一角的塑料盖,用移液管向板条中加入菌悬液Thermo FisherSCIENTIFIC
10、17RapID操作程序反应槽接种槽(槽 板后部)反应槽(槽 板前部)Thermo FisherSCIENTIFICOXOID18RapID ProceduresOE fe,RapIDOZE Color Uv ideW(fo(fK-Mhfitinn 3*y xOavities 2-A:5Caan mas、田 1w、B:1,BOO-AA7-3AA Voccai9、3-895-4、28 cm3*ooai JgZGVmt intr r ptvK*l“、p*atiM sltU t al longer than 2 minutvs for color development davities A 5-A7
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