生物制品鉴定市公开课金奖市赛课一等奖课件.pptx

第八章第八章 生物制品鉴定生物制品鉴定第1页第1页一一、掌握掌握消毒、灭菌、滤过除菌、无菌试验消毒、灭菌、滤过除菌、无菌试验 及热原质试验概念。及热原质试验概念。二二、掌握掌握生物制品惯用防腐剂。生物制品惯用防腐剂。三、三、掌握掌握无菌试验抽样原则；无菌试验抽样原则；熟悉熟悉无菌试无菌试 验办法；验办法；理解理解无菌试验用培养基无菌试验用培养基。四四、掌握掌握生物制品热原质试验合格原则。生物制品热原质试验合格原则。【目要求】第2页第2页第一节第一节 消毒灭菌与滤过除菌消毒灭菌与滤过除菌消毒消毒杀死物体上致病性微生物杀死物体上致病性微生物，但但不不 一定一定杀死所有微生物。杀死所有微生物。灭菌灭菌将物体上所有微生物将物体上所有微生物，包括，包括致病致病和和 非非致病致病，以及，以及细菌芽胞在内，所有杀死。细菌芽胞在内，所有杀死。一、消毒灭菌基本概念一、消毒灭菌基本概念（一）定义（一）定义第3页第3页4防腐防腐:预防或克制体外细菌生长繁殖办法。预防或克制体外细菌生长繁殖办法。防腐剂防腐剂用以克制细菌生长繁殖物质用以克制细菌生长繁殖物质。杀菌剂杀菌剂用以杀死细菌物质称为杀菌剂。漂白用以杀死细菌物质称为杀菌剂。漂白粉、亚硫酸盐等粉、亚硫酸盐等无菌无菌:不含活菌。预防细菌进入机体或物品不含活菌。预防细菌进入机体或物品 技术，称无菌操作。技术，称无菌操作。第4页第4页消毒灭菌消毒灭菌办法办法物理法物理法化学法化学法生物学法生物学法二、消毒灭菌二、消毒灭菌第5页第5页（一）物理（一）物理消毒灭菌法消毒灭菌法 1 1、热力消毒灭菌法、热力消毒灭菌法（干热、湿热）（干热、湿热）2 2、辐射杀菌法、辐射杀菌法（紫外线、电离幅射、微波）（紫外线、电离幅射、微波）3 3、滤过除菌法、滤过除菌法（除菌滤器、合用物品）（除菌滤器、合用物品）4 4、超声波（机制：裂解细菌，主要用于粉碎细、超声波（机制：裂解细菌，主要用于粉碎细 胞、提取抗原）胞、提取抗原）5 5、低温抑菌、低温抑菌第6页第6页7（一）物理（一）物理消毒灭菌法消毒灭菌法 1、热力消毒灭菌法、热力消毒灭菌法高温杀灭细菌高温杀灭细菌干热灭菌法干热灭菌法焚烧焚烧 最彻底灭菌办法最彻底灭菌办法烧灼烧灼 直接用火焰灭菌办法直接用火焰灭菌办法干烤干烤 加热加热 160-180；2 h红外线红外线 热效应热效应 与干烤类似与干烤类似第7页第7页（一）物理（一）物理消毒灭菌法消毒灭菌法 热力消毒灭菌法热力消毒灭菌法湿热灭菌法湿热灭菌法巴氏消毒法巴氏消毒法 较低温度较低温度61 30min/71 15-30s 杀灭致病菌繁殖体杀灭致病菌繁殖体煮沸消毒法煮沸消毒法 100 5 mim(繁殖体繁殖体)；2h(芽胞芽胞)流动蒸汽消毒法流动蒸汽消毒法 水蒸气水蒸气100 15-30 mim(繁殖体繁殖体)高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法 最有效灭菌办法最有效灭菌办法 121 20-30mim第8页第8页9第9页第9页10湿热灭菌与干热灭菌效果比较湿热灭菌与干热灭菌效果比较同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好1 1、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固。、湿热中细菌菌体蛋白较易凝固。2 2、湿热穿透力比干热大。、湿热穿透力比干热大。3 3、湿热蒸汽有潜热。、湿热蒸汽有潜热。第10页第10页112、辐射灭菌法、辐射灭菌法日光：日光：污染衣物、被单等污染衣物、被单等紫外线：紫外线：不耐热物品表面不耐热物品表面 消毒消毒 手术室、传染病房、细菌试验室手术室、传染病房、细菌试验室电离辐射：电离辐射：一次性医用塑料制品一次性医用塑料制品 消毒、食品消毒消毒、食品消毒 第11页第11页123、滤过、滤过除菌法除菌法 定义：定义：许多可溶性抗原、毒素、类毒许多可溶性抗原、毒素、类毒素、免疫血清、抗毒素、细胞因子制品、素、免疫血清、抗毒素、细胞因子制品、血液制剂、酶制剂等血液制剂、酶制剂等不耐高温不耐高温溶液，多采溶液，多采用滤过除菌法达到灭菌目的。用滤过除菌法达到灭菌目的。用物理阻留办法将液体或空气中细菌除用物理阻留办法将液体或空气中细菌除去，以达到除菌目的。去，以达到除菌目的。第12页第12页 滤滤过过除除菌菌法法必必须须通通过过滤滤器器才才干干达达到到除除菌菌目目的的。滤滤菌菌器器种种类类诸诸多多，如如薄薄膜膜滤滤菌菌器器、SeitzSeitz滤滤菌菌器器、玻玻璃璃滤滤菌器菌器等。等。第13页第13页14滤菌器滤菌器合用范围合用范围血清、毒素、抗生素以及空气等除菌。血清、毒素、抗生素以及空气等除菌。含有微细小孔含有微细小孔 0.22m，只允许液体或气体及，只允许液体或气体及孔径孔径 0.22m 颗粒通过，细菌不能滤过。颗粒通过，细菌不能滤过。第14页第14页 （1）薄膜滤菌器薄膜滤菌器 滤膜滤膜都是由高分子聚合物制成，如都是由高分子聚合物制成，如醋酸纤维醋酸纤维、巨砜及聚亚乙烯氟等、巨砜及聚亚乙烯氟等。这。这类类滤膜可耐滤膜可耐121121高压蒸汽灭菌。高压蒸汽灭菌。用于除用于除菌膜孔径为菌膜孔径为0.220.22m m。（更高要求（更高要求0.150.15m m ）醋酸纤维醋酸纤维平面膜装在不锈平面膜装在不锈钢支架上进行除菌过滤。巨砜与聚亚乙钢支架上进行除菌过滤。巨砜与聚亚乙烯氟滤膜更含有化学稳定性，可用酸或烯氟滤膜更含有化学稳定性，可用酸或碱清洗处理，并且聚亚乙烯氟滤膜能够碱清洗处理，并且聚亚乙烯氟滤膜能够重复灭菌重复使用重复灭菌重复使用。第15页第15页16第16页第16页（2 2）SeitzSeitz滤菌器滤菌器 滤滤菌器用金属制成，中菌器用金属制成，中嵌以嵌以石棉滤板石棉滤板。滤板孔径。滤板孔径分三级分三级：K K最大，澄清用；最大，澄清用；EKEK较小，可除去普通细菌；较小，可除去普通细菌；EK-SEK-S最小，可制止所有细最小，可制止所有细菌甚至大病毒通过菌甚至大病毒通过。由于。由于石棉是致癌物质，石棉滤石棉是致癌物质，石棉滤板在国际上已严禁使用。板在国际上已严禁使用。无石棉无石棉SeitzSeitz滤板仍可应滤板仍可应用于生产用于生产。第17页第17页（3）玻璃滤菌器玻璃滤菌器 滤滤板系用玻璃细砂板系用玻璃细砂在一定温度下压成滤板，在一定温度下压成滤板，镶嵌在玻璃漏斗中制成镶嵌在玻璃漏斗中制成玻璃滤菌器。按孔径大玻璃滤菌器。按孔径大小普通分为小普通分为G1G1G6G6六种六种型号，型号，G5G5和和G6G6滤器能制滤器能制止细菌通过止细菌通过。第18页第18页（二）（二）化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法 （1 1）含氯消毒剂含氯消毒剂 （漂白粉）（漂白粉）（2 2）过氧化物类消毒剂过氧化物类消毒剂 （3 3）醛类醛类消毒剂（甲醛）消毒剂（甲醛）（4 4）杂环类气体杂环类气体消毒剂（环氧乙烷）消毒剂（环氧乙烷）（5 5）醇类消毒剂醇类消毒剂 （6 6）季铵盐类消毒剂季铵盐类消毒剂 （新洁尔灭）（新洁尔灭）（7 7）其它其它消毒剂（洗必太、碘酊）消毒剂（洗必太、碘酊）第19页第19页类别类别类别类别作用机制作用机制作用机制作用机制惯惯用种用种类类酚类酚类蛋白变性，细胞膜损伤蛋白变性，细胞膜损伤石炭酸石炭酸醇类醇类蛋白变性蛋白变性乙醇乙醇氧化剂氧化剂氧化、蛋白沉淀氧化、蛋白沉淀高锰酸钾、过氧乙高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒酸、碘酒重金属盐重金属盐氧化、蛋白酶变性氧化、蛋白酶变性红汞、红汞、硫柳汞硫柳汞表面活性剂表面活性剂蛋白变性，细胞膜损伤蛋白变性，细胞膜损伤新洁而灭新洁而灭染料染料干扰氧化、克制繁殖龙胆紫龙胆紫酸碱类酸碱类破坏膜、壁，蛋白凝固破坏膜、壁，蛋白凝固醋酸、生石灰醋酸、生石灰烷化剂烷化剂蛋白质、核酸烷基化蛋白质、核酸烷基化环氧乙烷环氧乙烷惯用消毒剂主要种类惯用消毒剂主要种类第20页第20页各种消毒剂应用各种消毒剂应用种种类用途用途石炭酸石炭酸地面、器具表面、皮肤消毒地面、器具表面、皮肤消毒乙醇乙醇皮肤、体温皮肤、体温计消毒消毒高高锰酸酸钾皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒皮肤、尿道、蔬菜、水果消毒红汞汞皮肤、粘膜、小皮肤、粘膜、小创伤消毒消毒硫柳汞硫柳汞皮肤消毒、手皮肤消毒、手术部位消毒部位消毒过氧乙酸氧乙酸塑料、玻璃器材消毒塑料、玻璃器材消毒碘酒碘酒皮肤消毒皮肤消毒新新洁而而灭手手术洗手、浸泡手洗手、浸泡手术器械器械龙胆紫胆紫浅表浅表创伤消毒消毒第21页第21页四、生物制品抑菌防腐四、生物制品抑菌防腐(1)(1)硫硫柳柳汞（汞（0.01%0.01%）(2)(2)氯仿（氯仿（0.5%0.5%）(3)(3)硝酸硝酸汞苯汞苯 (4)(4)石炭酸石炭酸 (5)(5)福尔马林福尔马林 除活疫苗及冻干制品均加防腐剂除活疫苗及冻干制品均加防腐剂第22页第22页惯惯用种用种类类类别类别类别类别作用机制作用机制作用机制作用机制用途用途用途用途硫柳汞硫柳汞重金属盐重金属盐重金属离子与菌体蛋白巯基结合使酶变性疫苗、类毒素疫苗、类毒素及血液制品及血液制品氯仿氯仿抗毒素、胎盘抗毒素、胎盘蛋白蛋白石炭酸石炭酸酚类酚类蛋白变性，细胞膜损蛋白变性，细胞膜损伤伤肠道死菌疫苗肠道死菌疫苗 甲醛 醛类对菌体蛋白进行烷化，使酶失活疫苗灭活剂、毒素解毒剂惯用生物制品防腐剂主要种类及用途惯用生物制品防腐剂主要种类及用途第23页第23页新型消毒剂（无污染消毒剂）新型消毒剂（无污染消毒剂）臭氧臭氧O3（O3=O2+O）1、绿色、绿色消毒剂消毒剂2、新新生态氧，破坏膜结构及膜内脂蛋白、脂多糖，生态氧，破坏膜结构及膜内脂蛋白、脂多糖，直接破坏病毒直接破坏病毒DNA和和RNA3、瞬间瞬间杀毒，杀菌能力是氯杀毒，杀菌能力是氯6003000倍倍4、应用应用广泛广泛第24页第24页25双锥常温臭氧灭菌罐双锥常温臭氧灭菌罐第25页第25页26选择适当防腐剂选择适当防腐剂低低毒毒低低破破坏坏有有效效价价廉廉以以便便易易贮贮存存第26页第26页第二节第二节 生物制品无菌试验生物制品无菌试验 生生物物制制品品不不得得含含有有杂杂菌菌（有有专专门门要要求求者者除除外外），灭灭活活菌菌苗苗、疫疫苗苗不不得得含含有有活活本本菌菌、本本毒毒。在在制制造造过过程程中中应应由由制制造造部部门门按按各各制制品品制制造造及及检检定定规规程程要要求求进进行行无无菌菌试试验验，分分装后制品须经质量检定部门做最后检定。装后制品须经质量检定部门做最后检定。生物制品无菌试验：生物制品在制造生物制品无菌试验：生物制品在制造过程中按各个制品制造及检定规程要求进过程中按各个制品制造及检定规程要求进行无菌试验。行无菌试验。第27页第27页一、抽样一、抽样（一）原液及半成品（一）原液及半成品 原液原液及及半成品半成品应应每瓶每瓶分别进行无菌试验，分别进行无菌试验，其抽样量应至少为其抽样量应至少为0.1%0.1%，但不得少于但不得少于1.0ml1.0ml。1 1、大罐稀释制品抽样数量不得少于、大罐稀释制品抽样数量不得少于10ml10ml。2 2、原液及半成品每开瓶一次，应如上法抽验。、原液及半成品每开瓶一次，应如上法抽验。第28页第28页1000110001支（瓶）以上者抽检支（瓶）以上者抽检4040支（瓶）支（瓶）（二）成品（二）成品 每亚批每亚批均应进行无菌试验，样品应随机抽取，均应进行无菌试验，样品应随机抽取，应含有代表性（包括分装过程应含有代表性（包括分装过程前、中、后前、中、后样品）。样品）。分装量在分装量在100100支（瓶）或下列者抽检不少于支（瓶）或下列者抽检不少于5 5支支101101500500支（瓶）者抽检不少于支（瓶）者抽检不少于1010支（瓶）支（瓶）5015011000010000支（瓶）者抽检不少于支（瓶）者抽检不少于2020支（瓶支（瓶)第29页第29页30冻冻干干血血液液制制品品无无菌菌抽抽样样第30页第30页 冻干血液制品冻干血液制品1 1、单瓶装量、单瓶装量20ml20ml以上冻干血液制品以上冻干血液制品 每柜冻干每柜冻干200200瓶下列者抽检瓶下列者抽检2 2瓶瓶 200 200瓶及以上者抽检瓶及以上者抽检4 4瓶瓶2 2、单瓶装量、单瓶装量6 620ml20ml冻干血液制品抽检量加倍。冻干血液制品抽检量加倍。3 3、单瓶装量、单瓶装量5ml5ml及及5ml5ml下列者，按普通成品抽检量下列者，按普通成品抽检量 抽检。抽检。（三）凡要求需作（三）凡要求需作支原体检查支原体检查制品，均应在制品，均应在半半成品成品时按亚批进行检查，成品可不再做。时按亚批进行检查，成品可不再做。第31页第31页（1）检查制品检查制品中中本身本身菌菌体体是否是否存活应采用适存活应采用适于本菌发育生长培养基（在半成品时检查，于本菌发育生长培养基（在半成品时检查，有专门要求者除外）。有专门要求者除外）。检查检查需氧性和厌氧性杂菌应采用需氧性和厌氧性杂菌应采用硫乙醇酸硫乙醇酸盐盐培养基培养基。检查。检查不含汞类防腐剂制品中需氧不含汞类防腐剂制品中需氧性和厌氧性杂菌时，该培养基中可不加硫乙性和厌氧性杂菌时，该培养基中可不加硫乙醇酸盐。醇酸盐。二.无菌试验用培养基无菌试验用培养基 第32页第32页 检查检查霉菌和腐生菌应采用改霉菌和腐生菌应采用改良马丁培良马丁培 养基。养基。检查混浊制品可采用不含琼脂硫乙检查混浊制品可采用不含琼脂硫乙 醇酸醇酸盐培养基。检查活菌苗时可盐培养基。检查活菌苗时可加大加大 琼脂琼脂含量，做成斜面含量，做成斜面。（2）检查）检查支原体支原体应采用猪胃消化液半应采用猪胃消化液半固固 体体或牛心消化液半固体培养基。或牛心消化液半固体培养基。第33页第33页（3 3）生物制品无菌试验生物制品无菌试验用用培养基可用培养基可用经检定合格经检定合格干燥培养基干燥培养基配制。配制。（4 4）无菌试验培养基无菌试验培养基灵敏度灵敏度。乙型乙型溶溶血性链球菌（血性链球菌（3221032210株）应达到株）应达到1010-8-8，短芽胞杆菌（短芽胞杆菌（73167316株）和生孢子梭状株）和生孢子梭状芽胞杆菌（芽胞杆菌（6494164941株）应达到株）应达到1010-7-7，白，白色念珠菌（色念珠菌（ATCc 10231ATCc 10231）和腊叶芽枝）和腊叶芽枝霉应达到霉应达到1010-6-6。第34页第34页（5 5）生物制品无菌试验培养基生物制品无菌试验培养基由质量检定由质量检定部门与培养基制造部门与培养基制造部门部门一同一同进行灵敏度试进行灵敏度试验。每当更换主要原材料时，应进行灵敏验。每当更换主要原材料时，应进行灵敏度试验，合格后方可应用度试验，合格后方可应用。（6 6）各各生产单位质量检定部门生产单位质量检定部门应定期抽检应定期抽检无菌试验培养基灵敏度，无菌试验培养基灵敏度，检定所检定所应定期抽应定期抽检各所无菌试验培养基。检各所无菌试验培养基。第35页第35页三、无菌试验办法三、无菌试验办法（一）直接（一）直接接种法接种法 1 1、菌苗、菌苗、疫苗、类毒素、抗毒素、疫苗、类毒素、抗毒素类制品类制品 每安瓿装量每安瓿装量5.0ml5.0ml以上者（不含以上者（不含5.0ml5.0ml）取样不应少于取样不应少于1.0ml1.0ml 装量在装量在5.0ml5.0ml下列者（含下列者（含5.0ml5.0ml）取样不得）取样不得少于少于0.5ml0.5ml 装量不足装量不足0.5ml0.5ml者，所有吸取。者，所有吸取。第36页第36页 含含防腐剂防腐剂制品接种量制品接种量与培养基与培养基百分比：百分比：用用苯酚或氯仿作防腐剂者至少为苯酚或氯仿作防腐剂者至少为1:201:20；用用汞汞作作防防腐腐剂剂者者或或制制品品内内含含有有甲甲醛醛、抗抗生生素素者至少为者至少为1:501:50。先先按按此此百百分分比比接接种种于于硫硫乙乙醇醇酸酸盐盐培培养养基基内内增增菌菌，20202525哺哺育育3 34 4天天后后移移种种至至硫硫乙乙醇醇酸酸盐盐培培养养基基、适适宜宜琼琼脂脂斜斜面面、改改良良马马丁丁培培养养基基各各2 2管管，每管每管0.5ml0.5ml。（1 1）含防腐剂制品）含防腐剂制品第37页第37页（2 2）不含防腐剂制品）不含防腐剂制品 不含防腐剂制品，装量在不含防腐剂制品，装量在5.0ml5.0ml下列者下列者（包括（包括5.0ml5.0ml）每）每1010支安瓿混合。支安瓿混合。装量在装量在5.0ml5.0ml以上者每以上者每7 7支安瓿混合。支安瓿混合。将混合后样品直接接种一组培养基分别将混合后样品直接接种一组培养基分别置置20202525、30303535哺育，哺育时间共哺育，哺育时间共为为8 8天。天。第38页第38页（3 3）混浊）混浊和接种后不能鉴定结果和接种后不能鉴定结果制品制品 可取可取要求量样品接种于不含琼脂硫乙醇要求量样品接种于不含琼脂硫乙醇酸盐培养基（酸盐培养基（200ml200ml）内进行增菌培养，）内进行增菌培养，3 34 4天后移种天后移种。培养基种类和支数、哺育。培养基种类和支数、哺育温度同含防腐剂制品，哺育温度同含防腐剂制品，哺育8 8天后鉴定结天后鉴定结果。果。第39页第39页 样品每瓶装量不足样品每瓶装量不足1.0ml1.0ml者，抽取全量者，抽取全量 1 120ml20ml下列者（不含下列者（不含20ml20ml），抽取），抽取1.0ml1.0ml以以上，每支装量为上，每支装量为15ml15ml培养基，接种培养基，接种1.0ml1.0ml。2 2、血液制品、血液制品 应接种培养基支数依取样总量而定。接种硫乙醇应接种培养基支数依取样总量而定。接种硫乙醇酸盐培养基与改良马丁培养基支数之比为酸盐培养基与改良马丁培养基支数之比为2:12:1。接种后将硫乙醇酸盐培养基总支数接种后将硫乙醇酸盐培养基总支数1/21/2置置30303535哺育，其余置哺育，其余置20202525哺育，改良马丁培养基置哺育，改良马丁培养基置20202525哺育，哺育时间不少于哺育，哺育时间不少于1414天。天。第40页第40页（二）薄（二）薄膜膜过滤过滤法：法：滤膜孔径为滤膜孔径为0.220.220.3m0.3m。要求。要求抽检样品抽检样品数：数：每瓶装量每瓶装量100ml100ml及及100ml100ml下列者取全量下列者取全量 100ml100ml以上者取半量以上者取半量 加入灭菌薄膜过滤器内，加压或减压过滤。加入灭菌薄膜过滤器内，加压或减压过滤。最好采用全封闭式一次性微孔过滤集菌器。最好采用全封闭式一次性微孔过滤集菌器。无菌取出过滤后滤膜在培养基中培养。无菌取出过滤后滤膜在培养基中培养。人血白蛋白、人丙种球蛋白人血白蛋白、人丙种球蛋白第41页第41页42四、无菌试验鉴定四、无菌试验鉴定（1）无杂菌生长判为合格。）无杂菌生长判为合格。（2）如有杂菌生长，可复试，但抽样量加）如有杂菌生长，可复试，但抽样量加 倍。如复试仍有杂菌生长，判为不合格倍。如复试仍有杂菌生长，判为不合格第42页第42页 第三第三节节 生物制品热原质试验生物制品热原质试验热原质：热原质：菌体中脂多糖，多数由革菌体中脂多糖，多数由革兰阴性菌产生，注入人或动物体内兰阴性菌产生，注入人或动物体内能引起发热反应物质。能引起发热反应物质。第43页第43页生物制品生物制品热原质热原质试验概念试验概念 将一定剂量供试品静脉注入家兔体内，在规定期间内观测家兔体温升高情况，以鉴定供试品中所含热原质限度是否符合规定一种办法。X第44页第44页一、供一、供试家兔试家兔 健康无伤，雌者无孕。体重健康无伤，雌者无孕。体重1.71.72.5kg2.5kg。测温前至少测温前至少3 3日应用同一饲料饲养。此日应用同一饲料饲养。此期间，体重应不减轻，精神、食欲、排泄期间，体重应不减轻，精神、食欲、排泄等不得有异常。等不得有异常。第45页第45页 未曾用于热原质试验家兔，应在试验前未曾用于热原质试验家兔，应在试验前1 13 3日内预检体温一次，不注射药液。日内预检体温一次，不注射药液。1h1h测测温温1 1次，连续测次，连续测4h4h。4h4h内体温均在内体温均在38.038.039.839.8 ，且最高与最低温差不超出，且最高与最低温差不超出0.5 0.5 者方可使用。者方可使用。第46页第46页 动物自动测温仪动物自动测温仪第47页第47页48 凡热原质试验用过凡热原质试验用过家兔，若供试品判为符家兔，若供试品判为符合要求，家兔休息合要求，家兔休息4848小时后小时后可重复使用可重复使用。对。对血液制品、抗毒素和其它同一过敏原供试品血液制品、抗毒素和其它同一过敏原供试品在在5 5天内可重复使用。天内可重复使用。第48页第48页 二二、试验前准备、试验前准备(1)(1)试试验验用用注注射射器器、针针头头及及一一切切与与供供试试液液接接触触器器皿皿，洗洗净净后后应应经经250250至至少少3030分分钟钟或或180180至少至少2 2小时干烤灭热原质。小时干烤灭热原质。(2)(2)测测温温探探头头准准确确度度应应为为0.10.1。每每只只家家兔注射前、后应使用同一支测温探头。兔注射前、后应使用同一支测温探头。第49页第49页(3)热原质检验前12日，供试验用家兔尽也许处于同一温度环境中。试验室温度保持在1525。试验全过程中室温改变不得大于3，(4)应保持安静，避免强光照射和噪音干扰。空气中氨含量应低于20ppm。第50页第50页三、试验三、试验 试验试验前家兔应禁食前家兔应禁食2 2小时以上再开始测小时以上再开始测量正常体温，共测两次，间隔量正常体温，共测两次，间隔30306060分钟，分钟，两次温差不得不小于两次温差不得不小于0.20.2；同；同组兔间正组兔间正常体温之差不得不小于常体温之差不得不小于1.01.0。用测温探。用测温探头测量时，家兔固定头测量时，家兔固定30306060分钟后开始检分钟后开始检温。温。每批供试品初试用每批供试品初试用3 3只，复试用只，复试用5 5只家兔。只家兔。第51页第51页 测测家兔正常体温后家兔正常体温后1515分钟内，按要分钟内，按要求剂量自耳边静脉缓缓注入预热至求剂量自耳边静脉缓缓注入预热至3838供试品，每隔供试品，每隔3030分钟测量体温分钟测量体温1 1次，连次，连测测6 6次。次。第52页第52页四、结果判断四、结果判断 每每只兔正常体温与注射供试品后最高升只兔正常体温与注射供试品后最高升温之差，为该兔应答。温之差，为该兔应答。出现负值要求下列：出现负值要求下列：降温值降温值0.40.4为兔温正常波动范围，以为兔温正常波动范围，以“0 0”计。降温值计。降温值0.60.6需重试。降温需重试。降温值值0.4-0.60.4-0.6时，若供试组家兔中仅一只降温时，若供试组家兔中仅一只降温在此范围内，以在此范围内，以“0 0”计，若供试组家兔中计，若供试组家兔中有有2 2只或只或2 2只以上降温在此范围内，应重试。只以上降温在此范围内，应重试。第53页第53页（一）肌内注射制品鉴定原则（一）肌内注射制品鉴定原则1 1、初试结果鉴定、初试结果鉴定 符合符合下列情况之一者，判为合格：下列情况之一者，判为合格：3 3兔升温均低于兔升温均低于0.80.8，且，且3 3兔升温总和兔升温总和不超不超1.81.8 3 3兔中兔中1 1只升温达只升温达0.80.8，其它升温均低于，其它升温均低于0.80.8，并且，并且3 3兔升温总和不超出兔升温总和不超出1.81.8。特殊者按指定原则：干扰素单只不超出特殊者按指定原则：干扰素单只不超出0.6 。第54页第54页 3 3兔中有兔中有2 2只升温只升温0.80.8或或0.80.8以上；以上；3 3兔升温总和超出兔升温总和超出2.42.4。3 3兔中兔中1 1只升温超出只升温超出0.80.8；3 3兔升温总兔升温总和超出和超出1.81.8。有下列情况之一者，复试一次：有下列情况之一者，复试一次：有下列情况之一者，判为不合格：有下列情况之一者，判为不合格：第55页第55页 2 2、复试结果鉴定、复试结果鉴定 符合符合下列情况者，判为合格下列情况者，判为合格：初、复试初、复试8 8兔中，有兔中，有2 2只或只或2 2只下列升只下列升温温0.80.8或或0.80.8以上，并且升温总和不以上，并且升温总和不超出超出4.04.0。有下列情况之一者，判为不合格：有下列情况之一者，判为不合格：初、复试初、复试8 8兔中，有兔中，有2 2只以上升温只以上升温0.80.8或或0.80.8以上，并且升温总和超出以上，并且升温总和超出4.04.0。第56页第56页（二）静脉注射制品鉴定原则（二）静脉注射制品鉴定原则符合符合下列情况者，判为合格下列情况者，判为合格：1 1、初试结果鉴定、初试结果鉴定 3 3兔升温均低于兔升温均低于0.60.6，并且，并且3 3兔升温总兔升温总和不超出和不超出1.41.4。有下列情况之一者，复试一次：有下列情况之一者，复试一次：3 3兔中兔中1 1只体温升高只体温升高0.60.6或或0.60.6以上；以上；3 3兔升温总和超出兔升温总和超出1.41.4。第57页第57页有下列情况之一者，判为不合格：有下列情况之一者，判为不合格：3 3兔中兔中2 2只体温升高只体温升高0.60.6或或0.60.6以上；以上；3 3兔升温总和为兔升温总和为1.81.8或超出或超出1.81.8。第58页第58页2 2、复试结果鉴定、复试结果鉴定符合下列情况者，判为合格：符合下列情况者，判为合格：初、复试初、复试8 8兔中，兔中，2 2只或只或2 2只下列升温只下列升温0.60.6或或0.60.6以上，并且升温总和不以上，并且升温总和不超出超出3.53.5。第59页第59页有下列情况之一者，判为不合格：有下列情况之一者，判为不合格：初、复试初、复试8 8兔中，兔中，2 2只以上升温只以上升温0.60.6或或0.60.6以上；初、复试以上；初、复试8 8兔升温总和兔升温总和超出超出3.53.5。第60页第60页第四节第四节 国家原则品制备和标定国家原则品制备和标定一、原则品种类和定义一、原则品种类和定义国家原则品分三类国家原则品分三类：国家原则品、国家参考品、国家参考试剂国家原则品、国家参考品、国家参考试剂第61页第61页（二）（二）国家参考品国家参考品系系指用国际参考品标定，指用国际参考品标定，用途与国家原则品相同特定物质，普通不定用途与国家原则品相同特定物质，普通不定国际单位。国际单位。（三）（三）国家参考试剂国家参考试剂系指用国际参考试剂标系指用国际参考试剂标定，用于微生物（或其产物）鉴定或疾病诊定，用于微生物（或其产物）鉴定或疾病诊断生物诊断试剂，生物材料或特异性抗血清。断生物诊断试剂，生物材料或特异性抗血清。（一）（一）国家原则品国家原则品系指用国际原则品标定系指用国际原则品标定 ，用于衡量某一制品效价或毒性特，用于衡量某一制品效价或毒性特 定物质，其生物活性以国际单位表示。定物质，其生物活性以国际单位表示。第62页第62页复习题复习题1 1、基本概念：消毒、灭菌、滤过除菌。、基本概念：消毒、灭菌、滤过除菌。2 2、生物制品惯用哪些防腐剂？、生物制品惯用哪些防腐剂？3 3、生物制品无菌试验。、生物制品无菌试验。4 4、生物制品成品抽样原则是什么？、生物制品成品抽样原则是什么？5 5、生物制品热原试验合格原则如何判断、生物制品热原试验合格原则如何判断？63第63页第63页