其他有机毒物及其代谢产物的测定.pptx

L/O/G/O第八章第八章 其他有机毒物及其代谢产物的测定其他有机毒物及其代谢产物的测定亢延飞亢延飞第一节第一节 五氯酚五氯酚一一理化性质理化性质 五五氯氯酚酚（pentachlorophenol，PCP）为为白白色色晶晶体体，易易溶溶于于碱性水溶液，易溶于有机溶剂和植物油。碱性水溶液，易溶于有机溶剂和植物油。五五氯氯酚酚钠钠（sodium pentachlorophenate）的的工工业业品品为为浅浅黄黄色色鳞鳞片片状状晶晶体体，有有臭臭味味，易易溶溶于于水水、醇醇和和丙丙酮酮，不不溶溶于于苯苯和和石石油油。五五氯氯酚酚钠钠水水溶溶液液呈呈碱碱性性，加加酸酸即即析析出出五五氯氯酚酚。五五氯氯酚酚钠钠溶溶液液可可与与铜铜、铁铁、锌锌、金金、汞汞等等金金属属生生成成具具有有色色泽泽的的不不溶溶性性五五氯氯酚金属盐。五氯酚及其钠盐在日光照射下均易分解。酚金属盐。五氯酚及其钠盐在日光照射下均易分解。二二 代谢与生物监测指标代谢与生物监测指标 五五氯氯酚酚及及其其钠钠盐盐主主要要用用作作木木材材、皮皮革革、纺纺织织品品、纸纸张张和和绳绳索索等等的的防防腐腐剂剂，以以及及甘甘蔗蔗、菠菠萝萝和和稻稻田田的的除除草草剂剂等等。工工作作方方面面，除除生生产产者者难难免免要要与与之之接接触触以以外外，工工人人施施用用五五氯氯酚酚及及其其钠钠盐盐药药液液对对木木材材进进行行防防腐腐处处理理时时，也也可可以以通通过过皮皮肤肤或或呼呼吸吸道道吸吸收收而而引引起起中中毒毒。在在生生活活中中，误误食食、误误饮饮被被药药液液污污染染的的食食物物或或水水源源水水，则则可可以以造造成成中毒事故。中毒事故。五五氯氯酚酚及及其其钠钠盐盐经经皮皮肤肤、呼呼吸吸道道和和肠肠道道吸吸收收。进进入入人人体体的的五五氯氯酚酚主主要要以以原原型型或或与与葡葡萄萄糖糖苷苷酸酸结结合合的的形形式式从从尿尿液液中中排排出出，少少量量代代谢谢成成四四氯氯化化氢氢醌醌也也从从尿尿液液中中排排出出。另另有有一一小小部部分分结结合合或或为为结结合的五氯酚从粪便中排出合的五氯酚从粪便中排出。五五氯氯酚酚及及其其钠钠盐盐属属高高毒毒类类。五五氯氯酚酚及及其其钠钠盐盐对对皮皮肤肤、眼眼和和呼呼吸吸道道粘粘膜膜有有刺刺激激作作用用，直直接接接接触触后后可可引引起起局局部部损损害害。某某些些人人群群流流行行病病原原调调查查提提示示接接触触五五氯氯酚酚溶溶液液后后患患鼻鼻癌癌、鼻鼻咽咽癌癌和和软组织肉瘤的危险度增高。软组织肉瘤的危险度增高。测测定定尿尿中中五五氯氯酚酚及及其其盐盐的的含含量量，便便可可以以推推测测其其接接触触量量，并并对五氯酚中毒诊断和鉴别有参考价值。对五氯酚中毒诊断和鉴别有参考价值。五五氯氯酚酚及及其其钠钠盐盐进进入入体体内内吸吸收收后后，血血中中和和尿尿中中含含量量都都增增高高，但但尿尿中中浓浓度度高高于于血血中中浓浓度度，所所以以，尿尿样样常常用用作作接接触触五五氯氯酚酚的的生物监测指标试样生物监测指标试样。三三样品采集及保存样品采集及保存 采采集集现现场场尿尿样样或或晨晨尿尿，将将尿尿液液收收集集在在清清洁洁的的硬硬质质玻玻璃璃瓶瓶或或聚聚乙乙烯烯瓶瓶中中，可可用用于于直直接接测测定定游游离离五五氯氯酚。酚。四四 尿中五氯酚的测定尿中五氯酚的测定尿尿中中五五氯氯酚酚及及其其钠钠盐盐的的测测定定方方法法有有分分光光光光度度法法、气气相相色色谱谱法法和和高高效效液液相相色色谱谱法法。分分光光光光度度法法主主要要有有4-氨氨基基安安替替比比林林分分光光光光度度法法，亚亚甲甲蓝蓝分分光光光光度度法法和和藏藏红红花花分分光光光光度度法法。但但分分光光光光度度法法灵灵敏敏度度较低，干扰较多。较低，干扰较多。气气相相色色谱谱法法包包括括直直接接气气相相色色谱谱法法和和衍衍生生化化气气相相色色谱谱法法。由由于于五五氯氯酚酚沸沸点点高高，蒸蒸气气压压小小，不不易易气气化化，给给直直接接气气相相色色谱谱法法带带来来困困难难，故故常常需需先先将将五五氯氯酚酚或或五五氯氯酚酚钠钠与与重重氮氮甲甲烷烷作作用用生生成成衍衍生生物物五五氯氯苯苯甲甲烷烷后后，再再作作气气相相色色谱谱测测定定。这这样样，使使操操作作步步骤骤比比较较繁繁琐，而且使用的试剂苯、重氮甲烷有致癌危险。琐，而且使用的试剂苯、重氮甲烷有致癌危险。高效液相色谱分析法测定尿中五氯酚及其钠盐是较好的方法高效液相色谱分析法测定尿中五氯酚及其钠盐是较好的方法。（一）（一）4-氨基安替比林分光光度法氨基安替比林分光光度法1.原原理理 尿尿中中五五氯氯酚酚或或五五氯氯酚酚钠钠在在弱弱酸酸性性条条件件下下随随水水蒸蒸气气蒸蒸馏馏出出来来，吸吸收收在在氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液中中，生生成成的的五五氯氯酚酚钠钠在在铁铁氰氰化化钾钾（氧氧化化剂剂）存存在在下下，与与4-氨氨基基安安替替比比林林作作用用生生成成蓝蓝色色安安替替比比林染料，用二甲苯提取，在林染料，用二甲苯提取，在580nm波长处比色定量。波长处比色定量。2.样样品品处处理理 取取尿尿样样,加加适适量量柠柠檬檬酸酸溶溶液液和和蒸蒸馏馏水水进进行行蒸蒸馏馏，馏馏出出液液用用100mL刻刻度度烧烧杯杯接接收收。接接收收烧烧杯杯内内先先加加入入少少量量蒸蒸馏馏水水和和氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液。将将冷冷凝凝管管出出口口进进入入接接收收烧烧杯杯溶溶液液中中。当当馏馏出出液液达达到到约约100mL时时停停止止蒸蒸馏馏，将将馏馏出出液液加加水水至至100mL，待待测。测。3 样样品品测测定定 取取馏馏出出液液20mL于于50mL带带塞塞试试管管中中，加加入入pH=6的的柠柠檬檬酸酸盐盐缓缓冲冲液液1.00mL和和0.4%4-氨氨基基安安替替比比林林溶溶液液1.00mL，混混匀匀。加加入入10%铁铁氰氰化化钾钾1.00mL，混混匀匀。快快速速加加入入二二甲甲苯苯5.00mL，用用力力振振摇摇后后静静置置分分层层，取取上上层层提提取取液液转转入入比比色色杯杯，在在5800nm波长处测定吸光度，按标准曲线法定量。波长处测定吸光度，按标准曲线法定量。(二二)亚甲蓝分光光度法亚甲蓝分光光度法1 原原理理 在在弱弱碱碱性性溶溶液液中中，五五氯氯酚酚钠钠可可与与亚亚甲甲蓝蓝定定量量结结合合生生成成有有色色化化合合物物，萃萃取取后后的的波波长长660nm或或590 nm处进行分光光度法测定。处进行分光光度法测定。2 样样品品处处理理 取取尿尿样样50 mL置置于于蒸蒸馏馏瓶瓶中中，加加盐盐酸酸1 mL和和数数毫毫升升饱饱和和碳碳酸酸氢氢钠钠溶溶液液，放放数数粒粒玻玻璃璃珠珠，然然后进行蒸馏，待用。后进行蒸馏，待用。3 样品测定样品测定 取取10 mL馏出液于比色管中，加入亚甲蓝应馏出液于比色管中，加入亚甲蓝应用液用液1 mL，三氯甲烷，三氯甲烷3 mL，混合，静置分层，取三氯，混合，静置分层，取三氯甲烷层于比色管中，在波长甲烷层于比色管中，在波长660 nm或或590nm处测定吸光处测定吸光度，按标准曲线法定量。度，按标准曲线法定量。（三）气相色谱（三）气相色谱1 原原理理 尿尿样样中中五五氯氯酚酚用用正正己己烷烷提提取取，再再用用重重氮氮甲甲烷烷甲甲基基化化试试剂剂作作用用生生成成五五氯氯苯苯甲甲醚醚，然然后后进进行行气气相相色色谱谱测测定定。将将样样品品与与标标准准品品在在相相同同条条件件下下的的色色谱谱峰峰的的保保留留时时间间进进行行比比较较，确确证证尿尿样样中中是是否否含含五五氯氯酚酚，如如含含五五氯氯酚酚，采采用用标标准曲线法以峰高定量。准曲线法以峰高定量。3 样样品品处处理理和和测测定定 取取尿尿样样于于具具塞塞离离心心管管中中，加加氢氢氧氧化化钠钠溶溶液液碱碱化化后后再再加加正正己己烷烷，振振摇摇后后，除除去去正正己己烷烷。酸酸化化处处理理后后的的水水相相，正正己己烷烷提提取取，再再加加重重氮氮甲甲烷烷，混混合合数数分分钟钟，静静置置，加加入入甲甲醇醇水水溶溶液液混混合合，分分层层后后取取正正己己烷烷层层，测定。测定。（四）高效液相（四）高效液相1 原原理理 尿尿样样中中加加入入盐盐酸酸后后，置置于于沸沸水水中中，使使结结合合型型的的五五氯氯酚酚水水解解，并并在在碱碱性性条条件件下下用用二二氯氯甲甲烷烷提提取取部部分分干干扰扰物物，然然后后在在酸酸性性条条件件下下用用乙乙醚醚提提取取尿尿中中五五氯氯酚酚，浓浓缩后，高效液相色谱法测定。缩后，高效液相色谱法测定。3 样样品品处处理理和和测测定定 取取尿尿样样于于消消化化瓶瓶中中，加加盐盐酸酸，水水浴浴加加热热，后后冷冷却却至至室室温温，转转入入分分液液漏漏斗斗中中，调调至至碱碱性性，二二氯氯甲甲烷烷提提取取干干扰扰物物，再再将将溶溶液液调调至至酸酸性性，乙乙醚醚萃萃取取，浓缩，甲醇定容，离心，取上清分析。浓缩，甲醇定容，离心，取上清分析。第二节第二节 甲醇甲醇一一理化性质理化性质甲甲醇醇（methanol）又又称称木木醇醇或或木木酒酒精精（wood alcohol）为为无无色色透透明明液液体体。易易挥挥发发，易易燃燃易易爆爆。可可与与水水，乙乙醇醇，酮，醚，酯，卤代烃和苯混溶。酮，醚，酯，卤代烃和苯混溶。二二代谢及生物监测指标代谢及生物监测指标甲甲醇醇主主要要用用于于溶溶剂剂，医医药药行行业业及及日日用用化化妆妆品品行行业业，还还是是化化工工原原料料。还还作作防防冻冻剂剂，管管道道脱脱水水剂剂，复复印印，汽汽油油燃燃料料等。等。甲醇具有强挥发性，所以易经呼吸道，胃肠道和皮肤吸收。甲醇具有强挥发性，所以易经呼吸道，胃肠道和皮肤吸收。甲醇的毒性与其原形及其代谢产物的蓄积量有关。甲醇本身具甲醇的毒性与其原形及其代谢产物的蓄积量有关。甲醇本身具有麻醉作用，可使中枢神经系统受到抑制。虽然甲醇的麻醉作有麻醉作用，可使中枢神经系统受到抑制。虽然甲醇的麻醉作用比乙醇弱，但因在体内代谢缓慢和蓄积作用而呈现了比乙醇用比乙醇弱，但因在体内代谢缓慢和蓄积作用而呈现了比乙醇更大的毒性。甲醇中毒引起的代谢性酸中毒和眼部损害主要与更大的毒性。甲醇中毒引起的代谢性酸中毒和眼部损害主要与甲酸含量有关。甲酸含量有关。急性中毒以神经系统的损害，酸中毒和视神经炎为主，长期接急性中毒以神经系统的损害，酸中毒和视神经炎为主，长期接触低浓度的甲醇会引起慢性中毒，对黏膜和皮肤有不同程度的触低浓度的甲醇会引起慢性中毒，对黏膜和皮肤有不同程度的刺激。空腹时甲醇最小中毒量为刺激。空腹时甲醇最小中毒量为10g，2-20g可致盲，中毒致死可致盲，中毒致死量为量为120-240g。呼吸道吸入甲醇，属于低剂量摄入，半减期较短，尿样作为生呼吸道吸入甲醇，属于低剂量摄入，半减期较短，尿样作为生物监测指标试样，需要注意采样时间。物监测指标试样，需要注意采样时间。三三 样品采集及保持样品采集及保持采采集集接接触触者者班班后后尿尿或或晨晨尿尿，尽尽快快送送实实验验室室分分析析。采采样样时时应应注注意意饮酒，服药及可影响甲醇含量的其他毒物的接触情况。饮酒，服药及可影响甲醇含量的其他毒物的接触情况。四四 尿中甲醇的测定尿中甲醇的测定常用分光光度法气相色谱法。常用分光光度法气相色谱法。（一）品红亚硫酸光度法（一）品红亚硫酸光度法1 原原理理 在在酸酸性性介介质质中中用用高高锰锰酸酸钾钾氧氧化化甲甲醇醇为为甲甲醛醛，甲甲醛醛用用品品红红亚亚硫硫酸酸显显色色，与与标标准准比比色色定定量量分分析析。在在加加入入显显色色剂剂之之前前，须须加草酸使过量高锰酸钾褪色，以免引起干扰。加草酸使过量高锰酸钾褪色，以免引起干扰。2 样样品品处处理理和和测测定定 取取尿尿样样加加水水蒸蒸馏馏。将将蒸蒸馏馏液液加加乙乙酸，此为样品溶液。酸，此为样品溶液。取取样样品品溶溶液液和和甲甲醇醇标标准准液液，分分别别于于试试管管中中，各各加加高高锰锰酸酸钾钾，再再加加草草酸酸褪褪色色，最最后后加加品品红红亚亚硫硫酸酸显显色色，进进行行比色分析。比色分析。（二）顶空气相色谱法（二）顶空气相色谱法1 原原理理 静静态态顶顶空空气气相相色色谱谱法法测测定定尿尿中中甲甲醇醇是是将将尿尿样样置置于于密密闭闭容容器器中中，在在一一定定温温度度下下，容容器器上上方方的的蒸蒸气气达达到到平衡时，甲醇的饱和蒸气符合拉乌尔定律。甲醇在平衡时，甲醇的饱和蒸气符合拉乌尔定律。甲醇在气气相相中中的的浓浓度度与与尿尿样样溶溶液液中中甲甲醇醇的的浓浓度度成成正正比比。并并抽抽取取瓶瓶顶顶部部蒸蒸气气进进行行气气相相色色谱谱分分析析。气气相相中中的的甲甲醇醇经经色色谱谱柱柱分分离离，氢氢火火焰焰离离子子化化检检测测器器检检测测，保保留留时时间间定定性性，峰峰高高峰面积定量。峰面积定量。3 样样品品处处理理 在在顶顶空空瓶瓶中中加加入入2g无无水水硫硫酸酸钠钠，2 mL尿尿样样，立即封口。混匀，移入水浴箱恒温平衡，然后进样。立即封口。混匀，移入水浴箱恒温平衡，然后进样。第三节第三节 丙酮丙酮一一 理化性质理化性质丙丙酮酮（acetone）别别名名二二甲甲基基甲甲酮酮（dimethyl ketone）为为无无色色透透明明液液体体，具具有有特特殊殊的的芳芳香香气气味味，易易挥挥发发，高高度可燃，易溶于水和其他有机溶剂。度可燃，易溶于水和其他有机溶剂。二二代谢和生物监测指标代谢和生物监测指标丙丙酮酮主主要要作作为为溶溶剂剂，化化工工原原料料，炸炸药药，制制药药，化化妆妆品品，人造丝，制革和油脂等工业。人造丝，制革和油脂等工业。丙酮经呼吸道，胃肠道和皮肤吸收。丙酮经呼吸道，胃肠道和皮肤吸收。丙丙酮酮是是人人体体内内正正常常的的内内源源性性物物质质。属属于于微微毒毒类类物物质质。急急性性毒毒性性主主要要是是对对中中枢枢神神经经系系统统的的麻麻痹痹作作用用，其其蒸蒸汽汽具具有有刺刺激激作作用用。吸吸入入性性中中毒毒表表现现为为流流泪泪，流流涎涎，嗜嗜睡睡，运动失调，昏迷，呼吸衰竭，直至死亡。运动失调，昏迷，呼吸衰竭，直至死亡。呼出气和尿样中的丙酮是检测的两个生物指标呼出气。呼出气和尿样中的丙酮是检测的两个生物指标呼出气。三三样品采集及保存样品采集及保存四四呼出气中丙酮的测定呼出气中丙酮的测定 第四节第四节 正己烷正己烷一一 物理性质物理性质正正己己烷烷（hexane）为为微微有有异异臭臭味味的的无无色色透透明明液液体体，易易挥发，几乎不溶于水，易溶于三氯甲烷，醚和醇。挥发，几乎不溶于水，易溶于三氯甲烷，醚和醇。正正己己烷烷在在体体内内的的代代谢谢产产物物2，5-己己二二酮酮，它它为为无无色色透透明明低挥发性液体，具有芳香气味，易溶于水和有机溶剂。低挥发性液体，具有芳香气味，易溶于水和有机溶剂。二二代谢和生物检测指标代谢和生物检测指标在石油馏分，炼厂气，天然气中分离得到正己烷。在石油馏分，炼厂气，天然气中分离得到正己烷。正正己己烷烷可可以以作作为为有有机机溶溶剂剂，还还用用于于印印刷刷，五五金金，电电子子等行业中的除污清洁剂。等行业中的除污清洁剂。正正己己烷烷以以蒸蒸气气形形式式经经呼呼吸吸道道进进入入人人体体，也也可可经经消消化化道道或皮肤吸收。或皮肤吸收。呼呼出出气气中中正正己己烷烷和和尿尿样样中中2,5-己己二二酮酮可可作作为为生生物物监监测测指标指标。图图 8-1 正己烷在体内的生物转化正己烷在体内的生物转化三三样品采集及保存样品采集及保存1 呼出气呼出气2 尿样尿样四四呼出气中正己烷的测定呼出气中正己烷的测定气相色谱法测定气相色谱法测定五五尿中尿中2,5-己二酮的测定己二酮的测定测测定定方方法法主主要要是是气气相相色色谱谱法法，但但根根据据样样品品处处理理方方法法不同可分为萃取法和顶空气相法。不同可分为萃取法和顶空气相法。（一）气相色谱法（一）气相色谱法1 原理原理2 仪器操作条件仪器操作条件3 样品处理和测定样品处理和测定 准确吸取准确吸取2.0 mL尿样具塞比尿样具塞比色管中，加入色管中，加入2 d 盐酸，摇匀，于盐酸，摇匀，于90-100 oC水浴中水浴中恒温恒温40 min，取出冷却至室温，加，取出冷却至室温，加2mL乙醚萃取，乙醚萃取，静置分层。进样分析。静置分层。进样分析。（二）顶空气相色谱（二）顶空气相色谱L/O/G/OThank You!