两种木贼提取物对AS早期大鼠血管平滑肌细胞形态学影响.docx

两种木贼提取物对AS早期大鼠血管平滑肌细胞形态学影响
【摘要】 目的研究麻杏石甘汤治疗支气管哮喘的药效学。方法采用豚鼠磷酸组胺引喘实验、二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验、氨水引起的小鼠咳嗽、小鼠气管酚红法等进行研究。结果实验组能增强豚鼠对磷酸组胺所致哮喘的抵抗力；抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀；抑制氨水引起的小鼠咳嗽；增强小鼠气管酚红分泌量，与阴性对照组比较，有显着性差异。与阳性对照组比较，多数指标无显着性差异。结论 麻杏石甘汤具有良好的抗支气管哮喘的作用，应进一步深入探讨其治疗哮喘的作用机制。
【关键词】 麻杏石甘汤； 支气管哮喘； 药效学
　　Experimental Study on the Effect of MaxingShigan Composition on Bronchial Asthma
　　Abstract:ObjectiveTo investigate the therapeutic effect of Maxingshigan Composition on Bronchial　phosphonic acid and histamine to evoke cobaya asthma. To use the dimethyl benzene induce the musculus albus aures engorgement. To use ammonia water to induce cough. The method of mouse phenolsulfonphthalein was also used. All above methods were to investigate the therapeutic effect of Maxingshigan Composition. ResultsMaxingshigan Composition could enhance cobaya‘s anti-asthma ablility, depress the mice‘s auricular tumefaction, depress the mice‘s on cough caused by histamine phosphate, increase excretory rate of the　effect of Maxingshigan Composition was shown to be superior to that in the blank group (P＜ P＜）.ConclusionThe drug plays a significant role in curing asthma,increasing the resistance to anoxia and fatigue,and has anti-inflammatory effect .
　　Key words:Maxingshigan Composition; Bronchial asthma; Pharmacodynamics

　　支气管哮喘是机体对抗原性或非抗原性刺激引起的一种气管-支气管反应性过度增高的疾病，简称哮喘，已成为严重威胁人类健康的疾病之一。据世界卫生组织统计，全球约有哮喘患者亿，年死亡率在%～5%之间，每年约10万人死于哮喘。尽管已有多种治疗哮喘的方法，但仍有近40%的成人哮喘病人有症状性发作，且有近50%为难以控制的哮喘，这可能与其复杂、多因素的发病机制有关［1］。麻杏石甘汤是《伤寒论》经典方剂之一，由麻黄、杏仁、石膏、炙甘草诸药组成，具有辛凉宣肺、清肺平喘的功效。现代药理研究表明麻杏石甘汤对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌感染有显着抑制作用，对流感病毒、副流感病毒感染具有一定的抵抗作用［2］。无论是古代还是现代，许多医家用麻杏石甘汤辨证治疗哮喘都取得了良好的疗效。本实验采用DNFP诱导小鼠DTH法，以及致敏BALB/C小鼠支气管肺泡灌洗法，对热哮方治疗支气管哮喘的作用机理进行探讨。现报道如下。
　　1 材料
　　仪器及试剂 722型分光光度计，尤尼柯仪器有限公司产品；电子分析天平，沈阳龙腾电子称量仪器有限公司产品；ES120J-4，CSW-28超声雾化治疗仪，上海合力医疗器材厂产品；1%磷酸组胺，美国Sigma公司产品；酚红及氨水，广州化学试剂厂产品。
　　动物 DHP豚鼠：雌雄各半；昆明种小鼠：雌雄各半；均购自广州中医药大学实验动物中心。
　　药物 氯化铵，汕头市化学试剂厂生产，批号20050721；麻杏石甘汤水煎剂；地塞米松， mg/片，天津药业集团新郑股份有限公司产品，批号050715；复方甘草片，长春市人民药厂产品，批号20050607。
　　麻杏石甘汤的制备 麻杏石甘汤由麻黄、杏仁、石膏、炙甘草组成。按古方比例及煎煮要求在蒸馏水煎汁后用生理盐水配制成浓度为 g/ml。
　　2 方法与结果
　　组胺引喘实验［3］选取g豚鼠，雌雄各半。放入密闭的玻璃钟罩内，用超声雾化器喷入%His20s，记录从喷雾开始到出现喘息、呼吸困难甚至抽搐跌倒的时间，即为引喘潜伏期，若引喘潜伏期大于120 s者则作为不敏感而舍弃。挑选合格动物随机分组，然后按10 ml/kg的体积灌胃给予待试药及对照药，空白对照组按相同体积给予生理盐水，1次/d，连续3 d。末次给药后1 h，以上述方法引喘，观察并记录引喘潜伏期，超过120 s不喘不跌倒者以120 s计算。计算潜伏期抑制率并进行统计分析。实验结果见表1。

　　引喘潜伏期抑制率=给药前潜伏期×100%

　　结果表示，与对照组相比，给药前麻杏石甘汤各剂量组和地塞米松组对组胺喷雾所致哮喘的引喘潜伏期无显着差异；给药后麻杏石甘汤中、高剂量及地塞米松组对引喘潜伏期及抑制率有显着抑制作用。
　　小鼠耳廓肿胀实验［4］取昆明种小鼠50只，雌雄各半，体重g，随机分为5组，即：麻杏石甘汤大剂量组、麻杏石甘汤中剂量组、麻杏石甘汤小剂量组、阳性对照组、阴性对照组。灌胃给药，1次/d。第5天给药1 h后，将二甲苯涂于小鼠右耳前后两面，40 μl/只，2h后将小鼠脱颈处死，沿耳廓基线剪下两耳，用9 mm打孔器分别在同一部位打下圆耳片，称重，计算肿胀率。

　　小鼠耳廓肿胀率=左耳重×100%

　　用生理盐水作对照，中药大、中、小剂量组均能显着减轻小鼠由二甲苯所致的耳廓肿胀程度，且随剂量增大作用逐渐增强；中药大、中剂量组与地塞米松组比较，作用无显着性差异。见表2。
　　对氨水引起小鼠咳嗽的影响取昆明种小鼠100只，雌雄各半，体重g，随机分为5组，分为对照组，阳性对照组，麻杏石甘汤高、中、低3个剂量组，各组分别按表3剂量灌胃给药，1次/d，连续4d，对照组给同体积蒸馏水。末次给药1 h后，将动物置于500 ml玻璃罩内，喷入10%氨水10 ml，分别记录各组动物咳嗽的阳性率。结果见表3。说明麻杏石甘汤对氨水引起的咳嗽则有明显的止咳作用。
　　表1 麻杏石甘汤对组胺喷雾致喘的影响
　　与空白组比较，*P＜,** P＜; 与地塞米松组比较，▲P＜, ▲▲P＜; n=10
　　表2 麻杏石甘汤对小鼠二甲苯致耳肿胀的影响
　　与空白组比较，*P＜,**P＜; 与地塞米松组比较，▲ P＜, ▲▲ P＜; n=10
　　表3 麻杏石甘汤对氨水引起小鼠咳嗽的影响
　　对小鼠气管酚红分泌量的影响［5］选取昆明种小鼠，体重g，雌雄各半，随机分组，灌胃给药1次/d，连续3 d。末次给药后30 min，腹腔注射酚红 ml/10 g,30 min后处死动物，仔细分离气管，用2 ml生理盐水加 ml 1 mol/L NaOH浸泡，避光静置30 min，用722型分光光度计，测OD值。同时，用万分之一分析天平准确称取一定量酚红以5% NaHCO3溶解，使1 ml含酚红1 000 μg，依次稀释成每毫升含酚红，，，，1，3，5 μg，测OD值，以酚红剂量为横坐标，OD值为纵坐标，作出标准曲线，并计算出小鼠酚红分泌量。实验结果显示，与空白对照组相比较，麻杏石甘汤中、高剂量及氯化铵都增加小鼠气管酚红分泌。
　　3 讨论

　　中医学认为，哮喘之为病，乃有“夙根”为祟，与伏痰、留饮有关。其发作之病机为“内有壅塞之气，外有非时之感，膈有胶固之痰，三者相合，闭拒气道,搏击有声，发为哮病”。现代医学认为，哮喘是一种以EOS、淋巴细胞和肥大细胞浸润为主的气道慢性炎症性疾病，发作时表现为呼气性呼吸困难，烦躁不安，并常伴有咳嗽、喉中痰鸣等症状，严重者呈端坐呼吸，张口抬肩，不能平卧，甚至紫绀。
　　表4 麻杏石甘汤对小鼠气管酚红分泌量的影响
　　与空白组比较，*P＜,** P＜; 与氯化铵组比较，▲P＜, ▲▲P＜; n=20

　　根据中西医对哮喘的认识及哮喘发作的主要临床表现症状，我们通过选择止咳、祛痰、平喘及抗炎实验来进行麻杏石甘汤治疗哮喘的药效学研究。结果显示麻杏石甘汤可减少豚鼠咳嗽次数和增加小鼠气管酚红分泌量、抑制小鼠二甲苯耳肿胀的作用，且随着剂量的加大，平喘、止咳祛痰及抗炎作用也增强。应进一步深入探讨其治疗哮喘的作用机理。
【参考文献】
　　［1］ Heaney LG, Robinson　asthma treatment: need for characterizing patients［J］.Lancet , 2005, 365(9463)：974.
　　［2］ 陈 娜，梁 仁.麻杏石甘汤的现代药理研究及临床应用［J］.广东药学院学报，2004，22：545.
　　［3］ 王北婴.中药新药研制并开发技术与方法［M］.上海：上海科学技术出版社，2001：491.
　　［4］ 徐叔云，卞如濂，陈 修.药理实验方法学［M］.北京：人民卫生出版社，2002：910.
　　［5］ 陈 奇.中药药理研究方法［M］.北京：人民卫生出版社，2000：366，642，648.