结直肠癌Tiam1高表达与其启动子低甲基化相关.ppt

Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系 结直肠癌结直肠癌Tiam1高表达高表达(biod)与其与其启动子低甲基化相关启动子低甲基化相关 林洁南方(nnfng)医科大学基础医学院病理学系南方医科大学南方医院病理科第一页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系背景背景Tiam1:T淋巴瘤侵袭转移诱导淋巴瘤侵袭转移诱导(yudo)(yudo)因子因子1 1Tiam1与肿瘤与肿瘤的增殖、侵袭和转移的增殖、侵袭和转移Tiam1的表达调控机制尚未完全阐明的表达调控机制尚未完全阐明表观遗传学：表观遗传学：DNA异常甲基化异常甲基化第二页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系 蓝色区域为蓝色区域为CpG岛，该岛，该CpG岛长岛长2183bp，跨越启动子和第一，跨越启动子和第一(dy)外外显子，存在显子，存在256个个CpG位点位点Tiam1基因基因(jyn)5端端CpG岛预测岛预测 第三页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系去甲基化药物处理去甲基化药物处理(chl)HT29细胞前后细胞前后Tiam1 mRNA表达表达1.SW620 2.HT29(5-aza-dC)3.HT29(对照对照(duzho)C.空白对照空白对照(duzho)GAPDH(580bp)GAPDH(580bp)Tiam1(252bp)Tiam1(252bp)marker 1 2 3 c第四页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系.116例配对例配对(pi du)结直肠癌组织中结直肠癌组织中Tiam1蛋白的表达蛋白的表达第五页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系第六页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系Tiam1蛋白在结直肠癌配对组织蛋白在结直肠癌配对组织(zzh)中的表达分布中的表达分布*Z=-4.608，P0.000#Z-3.115，P0.002 第七页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系Z-2.584，P0.01 Tiam1蛋白表达蛋白表达(biod)与结直肠癌转移的关系与结直肠癌转移的关系 第八页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系Tiam1蛋白在癌组织中的表达与临床蛋白在癌组织中的表达与临床(ln chun)病理资料之间的关系病理资料之间的关系第九页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系.结直肠癌组织中结直肠癌组织中Tiam1基因异常基因异常(ychng)甲基化的研究甲基化的研究 第十页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系MSP原理原理(yunl)第十一页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系 C M U 2n 2t 12n 12t 31n 31t 48n 48t 83n83t116n116tmu 2 12 31 48 83 116nt部分配对组织中部分配对组织中Tiam1 DNA甲基化及其蛋白甲基化及其蛋白(dnbi)表达情况表达情况第十二页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系MSP扩增产物扩增产物(chnw)测序部分结果测序部分结果 umoo.未转化未转化(zhunhu)(zhunhu)的原始序列的原始序列 m m.甲基化引物扩增产物甲基化引物扩增产物 u u.未甲基化引物扩增产物未甲基化引物扩增产物第十三页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系Z=-2.244,P=0.025 r=-0.494,P0.001116例配对例配对(pi du)组织中组织中Tiam1基因的甲基化状基因的甲基化状况况 232例组织例组织(zzh)中中Tiam1蛋白表达与甲基化之间的相关性蛋白表达与甲基化之间的相关性 第十四页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系肿瘤组织肿瘤组织Tiam1甲基化状态甲基化状态(zhungti)与临床病理资料之间的关系与临床病理资料之间的关系 第十五页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系.结直肠癌细胞株中结直肠癌细胞株中Tiam1基因异常基因异常(ychng)甲基化的研究甲基化的研究第十六页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系Tiam1高高表达表达(biod)结直肠癌细胞株：结直肠癌细胞株：LoVo细胞、细胞、SW620细胞细胞Tiam1低低表达结直肠癌细胞株：表达结直肠癌细胞株：LS174T细胞细胞Tiam1不不表达结直肠癌细胞株：表达结直肠癌细胞株：HT29 细胞细胞第十七页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系5-aza-dC处理对处理对Tiam1 mRNA在在HT29及及LS174T中表达中表达(biod)的影响的影响GAPDH(580bp)GAPDH(580bp)Tiam1(252bp)Tiam1(252bp)1 2 3 4 c markerLS174T(+)LS174T(-)HT29(+)HT29(-)5-aza-dC第十八页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系5-aza-dC（+）X2005-aza-dC（-）X200免疫细胞免疫细胞(xbo)化学检测化学检测5-aza-dC处理对处理对HT29细细胞胞(xbo)中中Tiam1蛋白表达的影响蛋白表达的影响第十九页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系免疫细胞化学检测免疫细胞化学检测(jin c)5-aza-dC处理对处理对LS174T细细胞中胞中Tiam1蛋白表达的影响蛋白表达的影响5-aza-dC（-）X2005-aza-dC（+）X200第二十页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系1.SW620 2.HT29 3.HT29(5-aza-dC)4.SW620 5.LS174T 6.LS174T(5-aza-dC)1 2 34 5 6GAPDHTiam1Western blot法检测法检测5-aza-dC处理对处理对HT29、LS174T细细胞胞(xbo)中中Tiam1蛋白表达的影响蛋白表达的影响第二十一页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系结论结论(jiln)1.Tiam1是一种促进结直肠癌增殖及转移的重要是一种促进结直肠癌增殖及转移的重要基因基因2.DNA异常甲基化可能是结直肠癌异常甲基化可能是结直肠癌Tiam1基因表达基因表达改变的重要调控改变的重要调控(dio kn)机制之一机制之一 第二十二页，共二十四页。Southern Medical University南方医科大学病理学系南方医科大学病理学系致谢：致谢：丁彦青教授丁彦青教授李建明教授李建明教授金贺博士金贺博士(bsh)张香梅博士张香梅博士李婷婷硕士李婷婷硕士第二十三页，共二十四页。内容(nirng)总结结直肠癌Tiam1高表达与其启动子低甲基化相关。南方医科大学南方医院病理科。蓝色区域为CpG岛，该CpG岛长2183bp，跨越启动子和第一外显子，存在256个CpG位点。Z-2.584，P0.01。5-aza-dC处理对Tiam1 mRNA在HT29及LS174T中表达的影响。5-aza-dC（+）X200。免疫细胞化学检测(jin c)5-aza-dC处理对HT29细胞中Tiam1蛋白表达的影响。李婷婷硕士第二十四页，共二十四页。