血清谷氨酸脱氢酶活力检测在肝胆疾病中的临床价值摘要.doc

血清谷氨酸脱氢酶活力检测在肝胆疾病中的临床价值（摘要）
赵元明 刘凌云
（济宁医学院附属医院 检验科 山东 济宁 272029）
　 谷氨酸脱氢酶(GLDH)为一种含锌线粒体酶，主要分布于肝脏、心肌和肾细胞线粒体的基质及内膜中,而以肝组织活性最高[1]。分布于肝细胞线粒体内的GLDH在肝细胞受损害时会明显升高[2]。天门冬氨酸氨基转移酶(AST)则主要存在于心、肝和骨骼肌中，其中肝中的AST大部分存在于线粒体中，所以AST的检测也可作为肝细胞损害的辅助性指标[3]。本文利用全自动生化分析仪测定各种肝病患者GLDH、AST和ALT活性，并与健康体检者比较，以分析评价其临床应用价值。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂 仪器： 日立7600-120全自动生化分析仪；试剂：GLDH试剂为罗氏公司提供，AST、ALT试剂均为德国CENTRONIC，质控品为英国RANDOX公司提供。并采用试剂公司推荐的参数进行相关测定。
1.2研究对象 健康对照组为73例，为2011年1月-8月期间在我院做健康体检的人群，各种理化指标均正常，并且排除心、脑、骨、肾及肝胆等系统的疾病。肝细胞损伤疾病组109例，均以临床症状结合血清病毒学标志及其他临床辅助综合判断的患者，其中急性肝炎12、肝癌28例、肝硬化13例、胆道肿瘤14例、胆结石17例、其它肝胆疾病15例(包括肝脓肿、胆结石及胆囊炎等)，亦为同期在我院住院的患者。所测标本均合格。
1.3测定方法 GLDH、AST和ALT测定均采用酶速率法，并分别采用低、中、高值进行精密度检测，严格按照试剂盒说明书进行操作和结果判定。
1.4统计学处理 计量数据以均数±标准差表示，采用SPSS17.0进行t检验和相关性分析。
2 结 果
2.1 各组GLDH、AST和ALT测定结果 测定结果显示：不同肝胆疾病组血清中GLDH 、AST和ALT活性均有不同程度升高，采用t检验将各疾病组与对照组比较，均有统计学差异(P<0.05)，但GLDH的平均升高倍数均高于AST；在急性肝炎患者组ALT的平均升高倍数远大于GLDH，肝癌患者组GLDH的平均升高倍数高于ALT，其他疾病组二者的升高倍数相当。
2.2 各疾病组GLDH和AST的相关性分析 在动态观察中，肝病患者GLDH和AST活性升高明显，并随病情好转而下降，观察患者GLDH活性升高均伴随不同程度AST活性增高，但AST活性增高并不都有GLDH活性升高。利用SPSS17.0统计软件对GLDH和AST进行相关性分析，结果显示：肝癌、胆结石患者血清中二酶活性变化有明显相关性(P<0.01)，急性肝炎和胆道肿瘤有相关性(P<0.05)，而肝硬化及其他肝胆疾病患者血清中两酶的变化无相关性(P>0.05)。
3 讨论
将ALT、AST与GLDH联合检测表明，GLDH反映肝实质损伤的特异性高于ALT和AST[6]。结果显示，ALT在肝脏轻度病变时即明显升高，而在中、重度肝脏病变时则升高不明显。虽然ALT在肝病早期即可出现改变，但特异性较差，其升高幅度亦不一定完全反映肝细胞损害的程度。ALT同时存在于线粒体及细胞浆，相对分子质量约为105，GLDH只存在于线粒体，而不存在于细胞浆，相对分子质量约为106[7]，因此，肝细胞病变仅为细胞膜通透性改变时，血清GLDH不升高，而当细胞坏死与线粒体崩解时，酶解离并逸出细胞。所以，GLDH正常不能排除肝细胞的轻度损害，而GLDH异常提示肝细胞坏死，GLDH与ALT二者同时测定，将有助于肝细胞损害及其严重程度的判定[8]。
对各疾病组的GLDH和AST活性相关性进行比较，结果显示，肝癌和胆结石组的GLDH和AST活性变化有明显相关性(P<0.01)，而肝硬化和其他疾病中则无相关性(P>0.05)，表明GLDH在诊断肝实质性损害时特异性优于AST。
由于GLDH在体内的生物半衰期为16h，所以当病情得到良好控制或改善后，GLDH活性随即降低，故GLDH可作为疗效判定的指标。GLDH持续高水平，示肝细胞线粒体破坏持续存在，表明预后不良。因此，测定GLDH的活性对肝病早期诊断，掌握病情，判断预后有其重要临床意义[9]。

血清谷氨酸脱氢酶活力检测在肝胆疾病中的临床价值
赵元明 刘凌云
（济宁医学院附属医院 检验科 山东 济宁 272029）
【摘要】 目的 探讨血清中谷氨酸脱氢酶活性的变化在肝细胞损害性疾病中的临床价值，以指导临床治疗，并对预后进行判断。方法 在日立7600全自动生化分析仪上，同时对73例健康组和109例肝胆疾病组进行GLDH、AST、ALT检测，用SPSS17.0软件进行统计学分析。结果 对于肝细胞损伤疾病患者，血清中GLDH、AST、ALT活性明显高于健康者和其他疾病患者（P<0.05）；其他疾病患者此三种酶活性也随病情、病程的变化而有不同程度的升高，但升高倍数不高；GLDH和AST相关性分析显示：对血清中二酶的变化，肝癌、肝胆结石疾病患者有明显相关性（P<0.01），急性肝炎和胆道肿瘤患者有相关性（P<0.05），而肝硬化及其他肝胆疾病患者无相关性（P>0.05）。结论 GLDH作为肝细胞病变的诊断指标具有重要临床价值；在肝细胞损伤累及线粒体时，GLDH的升高幅度往往比AST、ALT高，特异性也较好，可作为肝细胞损伤的特异性指标。
【关键词】 谷氨酸脱氢酶；丙氨酸氨基转移酶；天门冬氨酸氨基转移酶；肝损伤；临床应用
【Abstract】 Objective to investigate the clinical value of the change in serum glutamate dehydrogenase （GLDH） in patients with hepatic injury. Methods GLDH was determined with the Hitachi 7600 automatic biochemical analyzer in 73 healthy controls and 109 patients with hepatic injury diseases。Meanwhile，AST and ALT were detected。 The results were analysed with software SPSS17.0. Results the activity of GLDH，AST and ALT were significantly higher in patients with hepatic injury than in controls (P <0.05); the level of these three enzymes in patients with other diseases have different degrees with the severity changes，but not high multiple。The correlation analysis of GLDH and AST showed：there was significant correlation in patients with liver-cholelithiasis disease (P <0.01), while there was correlation in patients with acute hepatitis and bile duct cancer(P <0.05)，no correlation in patients with liver cirrhosis and other liver-cholelithiasis disease(P> 0.05)。Conclusion GLDH has important clinical value as indicators of liver lesions；and GLDH could be used as a specific marker of liver cell injury as it increased higher than AST and ALT when Liver cell injury involving the mitochondrial。
【Keywords】 glutamate dehydrogenase; alanine aminotransferase; aspartate aminotransferase; liver injury; clinical application

　 谷氨酸脱氢酶(GLDH)为一种含锌线粒体酶，主要分布于肝脏、心肌和肾细胞线粒体的基质及内膜中,而以肝组织活性最高[1]。分布于肝细胞线粒体内的GLDH在肝细胞受损害时会明显升高[2]。天门冬氨酸氨基转移酶(AST)则主要存在于心、肝和骨骼肌中，其中肝中的AST大部分存在于线粒体中，所以AST的检测也可作为肝细胞损害的辅助性指标[3]。本文利用全自动生化分析仪测定各种肝病患者GLDH、AST和ALT活性，并与健康体检者比较，以分析评价其临床应用价值。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂 仪器： 日立7600-120全自动生化分析仪；试剂：GLDH试剂为罗氏公司提供，AST、ALT试剂均为德国CENTRONIC，质控品为英国RANDOX公司提供。并采用试剂公司推荐的参数进行相关测定。
1.2研究对象 健康对照组为73例，为2011年1月-8月期间在我院做健康体检的人群，各种理化指标均正常，并且排除心、脑、骨、肾及肝胆等系统的疾病。肝细胞损伤疾病组109例，均以临床症状结合血清病毒学标志及其他临床辅助综合判断的患者，其中急性肝炎12、肝癌28例、肝硬化13例、胆道肿瘤14例、胆结石17例、其它肝胆疾病15例(包括肝脓肿、胆结石及胆囊炎等)，亦为同期在我院住院的患者。所测标本均合格。
1.3测定方法 GLDH、AST和ALT测定均采用酶速率法，并分别采用低、中、高值进行精密度检测，严格按照试剂盒说明书进行操作和结果判定。
1.4统计学处理 计量数据以均数±标准差表示，采用SPSS17.0进行t检验和相关性分析。
3 结 果
2.1 精密度测定 低、中、高值质控品的批内变异系数(CV)值分别为2.36%、3.24%和2.75%。2.2 各组GLDH、AST和ALT测定结果 测定结果显示：不同肝胆疾病组血清中GLDH 、AST和ALT活性均有不同程度升高，采用t检验将各疾病组与对照组比较，均有统计学差异(P<0.05)，但GLDH的平均升高倍数均高于AST；在急性肝炎患者组ALT的平均升高倍数远大于GLDH，肝癌患者组GLDH的平均升高倍数高于ALT，其他疾病组二者的升高倍数相当。具体见表1及图1。
表1 健康组和各疾病组GLDH和AST酶活性检测值
组别 例数 GLDH(u/L) AST(u/L) ALT(u/L)
健康组 73 4.25±1.93 23.90±5.14 19.61±4.12
急性肝炎组 12 43.73±25.22** 149.30±72.63** 1075.54±691.58**
肝癌组 28 67.96±24.57 ** 153.29±67.91** 94.29±50.01**
肝硬化组 13 37.93±11.28** 105.81±58.42** 162.38±72.72**
胆道肿瘤组 14 17.36±9.83* 89.53±37.41* 178.93±63.81**
胆结石组 17 29.36±15.53** 75.94±37.29* 153.82±69.71**
其他疾病组 15 21.59±7.82** 62.31±27.58* 31.28±12.54
注：与对照组比较，*表示P<0.05，**表示P<0.01。

图1 各疾病组与健康组GLDH、AST和ALT平均升高倍数比较
2.3 各疾病组GLDH和AST的相关性分析 在动态观察中，肝病患者GLDH和AST活性升高明显，并随病情好转而下降，观察患者GLDH活性升高均伴随不同程度AST活性增高，但AST活性增高并不都有GLDH活性升高。利用SPSS17.0统计软件对GLDH和AST进行相关性分析，结果显示：肝癌、胆结石患者血清中二酶活性变化有明显相关性(P<0.01)，急性肝炎和胆道肿瘤有相关性(P<0.05)，而肝硬化及其他肝胆疾病患者血清中两酶的变化无相关性(P>0.05)。
3 讨论
本研究精密度试验显示，GLDH、AST和ALT试剂的批内精密度CV<5%，表明检测结果有很好的重复性。
GLDH是一种含锌线粒体酶，存在于人体细胞内线粒体基质中，主要分布在肝脏、胃、胰腺、肠、脑等重要器官细胞的线粒体中，其中以肝细胞线粒体内活性最高。健康人正常情况下血中含量很低，但在肝细胞损伤或坏死时可进入血流，使血清中GLDH活性明显增高[4]，且GLDH活性无季节性波动，个体差异小，不受其他因素影响，故测定血清GLDH活性，可作为诊断肝细胞病变的重要指标[5]。若同时测定血清ALT和AST活性，并求出以血清ALT与AST活性之和与血清GLDH活性之比值，对鉴别各型黄疸具有重要作用。
将ALT、AST与GLDH联合检测表明，GLDH反映肝实质损伤的特异性高于ALT和AST[6]。另外从表1结果显示，ALT在肝脏轻度病变时即明显升高，而在中、重度肝脏病变时则升高不明显。虽然ALT在肝病早期即可出现改变，但特异性较差，其升高幅度亦不一定完全反映肝细胞损害的程度。ALT同时存在于线粒体及细胞浆，相对分子质量约为105，GLDH只存在于线粒体，而不存在于细胞浆，相对分子质量约为106[7]，因此，肝细胞病变仅为细胞膜通透性改变时，血清GLDH不升高，而当细胞坏死与线粒体崩解时，酶解离并逸出细胞。所以，GLDH正常不能排除肝细胞的轻度损害，而GLDH异常提示肝细胞坏死，GLDH与ALT二者同时测定，将有助于肝细胞损害及其严重程度的判定[8]。
本文结果显示，不同肝胆疾病血清中GLDH、AST和ALT活性都明显高于健康对照组，与健康对照组比较均有统计学差异(P<0.05)，表明在不同肝胆疾病中，三种酶的活性均升高。但升高幅度不同，GLDH的升高幅度均高于AST， 这种差异在肝癌和肝硬化患者中表现更明显，在胆道疾病、胆结石和其他疾病中GLDH活性亦较AST升高幅度高，但差异相对肝癌和肝硬化较低。这可能与GLDH在正常情况下血清中的含量较低，而在肝细胞损伤累及线粒体时，血清中GLDH的活性明显升高；而AST同时存在与肝细胞胞质中，当肝细胞损伤时升高不如GLDH不明显，本文的结果证明了这一点。
对各疾病组的GLDH和AST活性相关性进行比较，结果显示，肝癌和胆结石组的GLDH和AST活性变化有明显相关性(P<0.01)，而肝硬化和其他疾病中则无相关性(P>0.05)，表明GLDH在诊断肝实质性损害时特异性优于AST。
由于GLDH在体内的生物半衰期为16h，所以当病情得到良好控制或改善后，GLDH活性随即降低，故GLDH可作为疗效判定的指标。GLDH持续高水平，示肝细胞线粒体破坏持续存在，表明预后不良。因此，测定GLDH的活性对肝病早期诊断，掌握病情，判断预后有其重要临床意义[9]。
综上所述，测定血清中GLDH活性可作为诊断肝细胞病变，特别是坏死性肝病的重要指标之一，同时动态观察GLDH变化，对其治疗的效果及预后有重要意义。而对于其他一些疾病GLDH也有诊断价值，并且有应用和开发前景。
参考文献
[1] 肖晓光，孙国华，王华，等.血清谷氨酸脱氢酶的检测及对肝病诊断的临床应用[J].大连医科大学学报，2004，26(1)：48-50.
［2］丁旭，刘传喜，杜伯榕等。谷氨酸脱氢酶速率分析法及初步临床作用。［J］中华医学检验杂志，1991,14:329
[3] 高玲，孙艳红，王勇强. 几种肝胆疾病血清中谷氨酸脱氢酶和AST活性变化的研究.实用医学杂志，2004，20(2)：201-202.
［4］Schmide E Schmidt Fw Glutamate dehydrogenase:biochemical and
Clinical aspect of an interesting enzyme IJ
[5] 潘峰，李荣斌，张丽霞. 血清GLDH和AST-m在诊断几种肝脏疾病中的意义[J].中国实验诊断学，2005，6：986-987.
［6］张学山，帅真，戴晨阳，等。血清谷氨酸脱氢酶的连续监测法［J］临床检验杂志，1996,14:257-258
［7］耿焱、张珊梅、张蓉，等。血清谷氨酸脱氢酶的临床应用评价［J］。云南医药，1997,18（6）：517—518
［8］周伯英，杨振华。速率法检测血清谷氨酸脱氢酶及其实验条件的探讨［J］。临床检验杂志，1989，（4）：172-174
[9]Di Fraia R, Wilquet V, Ciardiello MA, et al. NADP+ dependent glutamate dehydrogenase in the Antarctic psychrotolerant bacterium psychrobacter sp.TAD1.Charaterization,protein and DNA sequence, and relationship to other glutamate dehydrogenases [J]. Eur J Bioche, 2000, 267(1):121-131.