实验报告-戊巴比妥钠半数有效量测定.doc

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实验二 戊巴比妥钠半数有效量测定
Experiment 2 Determination of Median Effective Dose (ED50) of Sodium Pentobarbital in Mice
[实验操作过程]
1．你所在实验室，本次实验的分组数为 5 ，r值为 1.316 。
2．预实验中，Dm 代表 确定引起100%阳性反应的剂量 ，
Dn 代表 0%阳性反应的剂量 ，
3．实验中，各剂量组的剂量值要成 比例 ，且公比值要求在 1.2-1.5 之间，以确保其线性相关性，一般分成 4-8 个剂量组较为合适。
4. 本次实验所采用的计算方法是 改良寇氏法 。
5．较理想的实验结果最小剂量组产生阳性反应率小于 30% ，最大剂量组产生阳性反应率大于 70% 。
6. 戊巴比妥钠溶液的浓度为 1% ，你所在小组所用的稀释浓度为 2.6mg/ml ，剂量为 26mg/kg 。
7. 观察指标为 给药15min内翻正反射消失的动物数 ，应持续 1 分钟以上。
8. 小白鼠注射的容量为 0.1 ml/10g。你所在组的动物数为 10 只。
9. 戊巴比妥钠的药理作用包括 镇静 、 催眠 、 抗惊厥 、 麻醉 （请写出四种以上作用）。
[实验操作过程]
1.请描述你们小组探索剂量范围的过程：
(1)参考剂量（Dm：60mg/kg； Dn：20mg/kg ）
(2)取小鼠12只，平均分成3组，腹腔注射不同剂量戊巴比妥钠（0.1ml/10g）
(3)观察给药15min内各组翻正反射消失的动物数
(4)确定引起100% （Dm） 、0% （Dn）阳性反应的剂量
2.药物稀释过程
Tab .1 Data Sheet for Drug Dilution
Group n Dose(mg/kg) Concentration（%） Volume (ml)
1 10 20 0.20 5
2 10 26 0.26 5
3 10 35 0.35 5
4 10 46 0.46 5
5 10 60 0.60 5

3.请描述所在小组的实验操作过程
（1）每只小鼠称重、标号
（2）按0.1ml/10g给每只小鼠腹腔注射戊巴比妥稀释液。
（3）将小鼠放回鼠笼， 15min后观察阳性反应的小鼠只数。
（4）记录数据并计算阳性率。
[实验结果]
Tab.2 Data Sheet for the Experiment
Group Dosage n Positive response number（n） Percentage (P) P2
1 20.0mg/kg 10 0 0% 0%
2 26.3mg/kg 10 1 10% 1%
3 34.6mg/kg 10 4 40% 16%
4 45.6mg/kg 10 7 70% 49%
5 60.0mg/kg 10 10 100% 100%
∑p=220% ∑p2=166%
计算公式(以ED50为例)：
ED50 = lg-1[Xm-i(∑p-0.5)]
=37.62mg/kg
Sx50=i×[（∑p-∑p2）/(n-1)]1/2
=0.029mg/kg
ED50的95%可信限 = lg-1（X50±1.96Sx50）
=(32.97mg/kg，42.84mg/kg)
ED50的95%可信限 = ED50±（ED50高限-ED50 低限）/2
=(32.67mg/kg，42.56mg/kg)
[回答下列问题]
1．为什么用ED50和LD50来衡量药物疗效和毒性（从质反应量效曲线角度分析）？
因为质反应量效曲线中段近似呈直线，在此范围内药物反应阳性率与对数剂量成正比，且反应敏感。因此以能引起50％个体产生阳性反应的剂量反映药物的作用强弱最为合理。若反应指标为药效，称半数有效量(ED50)；若反应指标为毒性，则称半数中毒量(TD50)；反应指标为死亡率，则称半数致死量(LD50)。曲线中段斜率不仅反映药效强度，也反映受试对象个体差异的离散度，斜率陡峻提示标准差较小，个体差异也较小。
2．分析测定ED50(或LD50)的原理和意义
原理：实验动物对药物的敏感性存在个体差异。以不同剂量对动物的死亡率绘制成曲线图可发现出现50%死亡率的变动比较骤急，说明50%死亡率是比较灵敏的指标。为使图像成为对称的S形，数据改为剂量对数与死亡数分布的曲线。曲线上死亡率为50%点的剂量对数，再从反对数求得剂量。
意义：半数致死量（LD50）是评价化学物质急性毒性大小最重要的参数，也是对不同化学物质进行急性毒性分级的基础标准。化学物质的急性毒性越大，其LD50的数值越小。常与半数有效量（ED50）配合计算治疗指数LD50/ED50，用以评价药物的安全性，治疗指数大的药物相对安全。
LD50越大越好，就是说浓度要很高很高才会导致半数死亡；ED50就越小越好，意思是很少的剂量就能发挥作用。单就以上某一项来说是没有意义的,LD50大ED50也大，同样是危险性大，所以用其比值描述药物的安全性，而单独的LD50就只能描述药物的毒性了。
3. 改良寇氏法测定ED50所需的基本条件是什么？
每组动物个数相同、已知最大剂量（dmax）和最小剂量（dmin）、组间剂量比值相同
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