JJG(教委) 025-1996 光栅型荧光分光光度计检定规程.pdf
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1、MV_RR_CNJ_0051 光栅型荧光分光光度计检定规程 1.光栅型荧光分光光度计检定规程的说明 编号 JJG(教委)025-1996JJG(教委)025-1996 名称(中文)光栅型荧光分光光度计检定规程(英文)Verification regulation for grating fluorescence spectrophotometer 归口单位 国家教育委员会 起草单位 国家教育委员会 主要起草人 田笠卿 批准日期 1997 年 1 月 22 日 实施日期 1997 年 4 月 1 日 替代规程号 无 适用范围 本规程适用于新安装、使用中和维修后的各种光栅型荧光分光光度计(以下简称
2、仪器)的检定。主要技术要求 1.外观要求 2.安装条件 3.检定环境 4.检定设备 5.检定项目和检定方法 是否分级 无 检定周期(年)1 附录数目 3 出版单位 科学技术文献出版社 检定用标准物质 相关技术文件 备注 2.光栅型荧光分光光度计检定规程的摘要 2 范围 2 范围 本规程适用于新安装、使用中和维修后的各种光栅型荧光分光光度计(以下简称仪器)的检定。2.12.1 原理 物质被某一波长的光照射后,会发射出比照射波长稍长的光,这种光称为荧光,它的过程是当物质的分子处于基态时,吸收光后,可跃迁到激发态,各激发态分子相互撞击而以无辐射能量损失的形式回到第一激发态的最低振动能级,这一振动能级
3、的分子在返回基态时,所发射的光称为荧光,但当它转入亚稳的三重线级,停留一段时间,返回至基态时所发出的光称为磷光,荧光(磷光)强度与物质浓度的关系为 FKI0(1eLC)式中 F荧光强度 K仪器常数 量子效率 I0激发光强度 荧光物质的摩尔吸收系数 L荧光池厚度 C荧光物质浓度 2.22.2 构成 仪器结构如图1所示,光源与检测器成直角方式安排。检测器光 源 激发单色器 样 品 室 发射单色器记录仪 图 1 仪器结构原理图 2.2.12.2.1 光 源 仪器的光源有高压汞蒸气灯和氙弧灯,后者能发射出强度较大的连续光谱,且在300nm400nm范围内强度几乎相等,故较常用。2.2.22.2.2 单
4、色器 置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器,置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器,常采用光栅为单色器。2.2.32.2.3 样品室 通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。测量液体时,光源与检测器成直角安排;测量固体时,光源与检测器成锐角安排。2.2.42.2.4 检测器 一般用光电管或光电倍增管作检测器。3 计量单位 3 计量单位 采用我国公布的法定计量单位。4 计量要求 4 计量要求 新安装的各种仪器应符合仪器说明书中规定的计量要求,其技术指标应优于本规程表1中的规定。使用中和维修后的各种仪器应符合本规程表1中规定的技术指标。表表 1 仪器技术指
5、标仪器技术指标 计量类别 技 术 指 标 波长准确度 0.5nm 波长重复性 0.3nm 检出限 5.01011g/ml 线性误差 2.0 信噪比(S/N)参照出厂说明的指标,已测出检出限的仪器,可不进行此项检定 光谱校正误差 带光谱校正的这类仪器在指定光谱校正的波长范围内进行校正 荧光池成套性 配套使用的荧光池的配套误差应不大于1.0 5 技术要求 5 技术要求 5.15.1 外观要求 仪器应有下列标志:仪器名称、型号、制造厂名、出厂时间和仪器编号。5.25.2 安装条件 5.2.15.2.1 仪器应平稳地置于工作台上,各紧固件均应紧固良好,各调节旋钮、按键和开关均能正常工作,无松动现象,电
6、缆线的插接件均应紧密配合,接触良好,外观不应有妨碍正常工作的机械损伤。5.2.25.2.2 仪器的波长度盘,狭缝带宽刻度,指示仪表度盘刻线、刻字应粗细均匀清晰,数显仪器的数字显示不应断线和缺线。5.2.35.2.3 带记录仪的仪器,记录仪的满量程时间应符合出厂要求、记录仪绘图画线应清晰,不间断。5.2.45.2.4 仪器所配荧光池各透光面应光洁,不得有灰尘、油污、划痕及任何裂纹。5.35.3 检定环境 5.3.15.3.1 环境温度205,且相对稳定。相对湿度不大于70。电源电压220V22V。5.3.25.3.2 仪器应平稳地放在工作台上,无强光直射在仪器上。5.3.35.3.3 仪器周围无
7、强磁场、电场干扰,无振动,无强气流影响。5.3.45.3.4 检定前仪器应预热20min。5.45.4 检定设备 5.4.15.4.1 便携式笔型低压石英汞灯或高压石英汞灯,其光谱线波长值见附录A。5.4.25.4.2 工作标准荧光池,其配套误差应不大于0.5。5.4.35.4.3 秒表,分度值0.1s。5.4.45.4.4 调压变压器(500VA)。5.4.55.4.5 试验电压500V的兆欧表。5.4.65.4.6 配制标准溶液所需的设备及器材见附录B。5.4.75.4.7 0.05mol/L H2SO4溶液。5.4.85.4.8 以0.05mol/L H2SO4作溶剂的硫酸奎宁标准溶液,
8、其(g/ml)分别为:5.01011,1.00107,2.00107,4.00107,6.0107,8.0107和1.00106。5.55.5 检定项目和检定方法 5.5.15.5.1 直观检定 用目力观察应符合本规程安装条件(5.2)和检定环境(5.3)之要求。5.5.25.5.2 波长准确度与重复性测定 5.5.2.15.5.2.1 激发单色器波长准确度与重复性的测定 5.5.2.1.15.5.2.1.1 将发射单色器置零级位置,灯室内正确安好笔型汞灯,响应时间“快”,扫描速度“慢”,通带“窄”,横坐标“小”,选择特殊方式中的“波长核对”。5.5.2.1.25.5.2.1.2 以附录A汞谱
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