葡萄糖一般杂质检查.ppt

葡萄糖一般杂质检查一、实验目的一、实验目的1 1、掌握葡萄糖中杂质的检查项目及方法。、掌握葡萄糖中杂质的检查项目及方法。2 2、熟悉供试品溶液与对照品溶液制备、熟悉供试品溶液与对照品溶液制备、检查、比色等操作方法。检查、比色等操作方法。3 3、了解称量、平行操作、干燥等操作要、了解称量、平行操作、干燥等操作要点。点。二、葡萄糖一般杂质检查项目二、葡萄糖一般杂质检查项目1 1、干燥失重、干燥失重 2 2、性状、性状 3 3、酸度、酸度 4 4、乙醇溶液的澄清度、乙醇溶液的澄清度5 5、亚硫酸盐与可溶性淀粉、亚硫酸盐与可溶性淀粉 6 6、蛋白质、蛋白质 7 7、氯化物、氯化物8 8、硫酸盐、硫酸盐 9 9、炽灼残渣、炽灼残渣1010、铁盐、铁盐 11 11、重金属、重金属1212、砷盐、砷盐三、实训原理三、实训原理 葡萄糖分子中具有醛基，还原碱性酒石酸铜葡萄糖分子中具有醛基，还原碱性酒石酸铜生成红色氧化亚铜沉淀。生成红色氧化亚铜沉淀。本品除了检查氯化物、硫酸盐、铁盐、重金本品除了检查氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐等到一般杂质外，还需检查溶液的澄清属、砷盐等到一般杂质外，还需检查溶液的澄清度与颜色（目的是检查水不溶性物质或有色杂质）度与颜色（目的是检查水不溶性物质或有色杂质）、乙醇溶液的澄清度（检查醇不溶性杂质如糊精、乙醇溶液的澄清度（检查醇不溶性杂质如糊精、蛋白质等）、亚硫酸盐与可溶性淀粉（因为制备蛋白质等）、亚硫酸盐与可溶性淀粉（因为制备时使用的酸可能带有亚硫酸盐，而可溶性淀粉是时使用的酸可能带有亚硫酸盐，而可溶性淀粉是中间体引入）。中间体引入）。本实验涉及各项杂志检查原理如下：本实验涉及各项杂志检查原理如下：氯化物检查法氯化物检查法 氯化物在硝酸酸性溶液中与硝氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量的酸银作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定量的标准氯化钠溶液和硝酸银在同样条件下处理生成标准氯化钠溶液和硝酸银在同样条件下处理生成的氯化银浑浊相比较，测定供试品中氯化物的限的氯化银浑浊相比较，测定供试品中氯化物的限量。量。C1C1-+Ag+Ag+AgCl AgCl 硫酸盐检查法硫酸盐检查法 药物中微量硫酸盐与氯化钡药物中微量硫酸盐与氯化钡在酸性溶液中作用，生成硫酸钡微粒而显白色浑在酸性溶液中作用，生成硫酸钡微粒而显白色浑浊液，同一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在同样浊液，同一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在同样条件下，用同法处理生成的浑浊比较，判断药物条件下，用同法处理生成的浑浊比较，判断药物中含硫酸盐的限量。中含硫酸盐的限量。SOSO4 4 2-2-十十BaBa2+2+BaS0 BaS04 4 铁盐检查法铁盐检查法 三价铁盐在硝酸酸性溶液中与硫三价铁盐在硝酸酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色可溶性硫氰酸铁络离子，与一定氰酸盐生成红色可溶性硫氰酸铁络离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。量标准铁溶液用同法处理后进行比色。FeFe3+3+6SCN+6SCN-Fe(SCN)Fe(SCN)6 6 3-3-红色红色 进行葡萄糖的铁盐检查时，需在显色前加硝酸进行葡萄糖的铁盐检查时，需在显色前加硝酸3 3滴，煮沸滴，煮沸5min5min，使，使Fe2+Fe2+氧化为氧化为Fe3+Fe3+。由于硝酸。由于硝酸中可能含有亚硝酸，亚硝酸也能与硫氰酸根离子中可能含有亚硝酸，亚硝酸也能与硫氰酸根离子反应生成红色的亚硝酰硫氰化物，影响比色，因反应生成红色的亚硝酰硫氰化物，影响比色，因此加入显色剂之前加热煮沸有助于除去氧化氮，此加入显色剂之前加热煮沸有助于除去氧化氮，以消除以消除氧化氮生产的亚硝酸干扰。氧化氮生产的亚硝酸干扰。四、仪器与试剂四、仪器与试剂仪器：仪器：50mL50mL比色管，量筒，比色管，量筒，50mL50mL烧杯，石蕊试纸，烧杯，石蕊试纸，普通电炉，水浴锅，普通电炉，水浴锅，药品：葡萄糖，硝酸银，硝酸，硫酸，药品：葡萄糖，硝酸银，硝酸，硫酸，氯化钡，硫氰酸铵，硫代乙酰胺，氢氯化钡，硫氰酸铵，硫代乙酰胺，氢氧化钠，盐酸，硫酸铁铵氧化钠，盐酸，硫酸铁铵 需现配：标准氯化钠溶液，标准硫酸钾需现配：标准氯化钠溶液，标准硫酸钾溶液，标准硫酸铁铵溶液溶液，标准硫酸铁铵溶液五、试验方法及操作五、试验方法及操作1 1、氯化物、氯化物 取本品取本品0.60g0.60g，加水溶解使成，加水溶解使成25mL(25mL(如溶液呈如溶液呈碱性，可滴加硝酸使遇石蕊试纸显中性反应碱性，可滴加硝酸使遇石蕊试纸显中性反应)，再，再加稀硝酸（取加稀硝酸（取105mL105mL硫酸加水稀释至硫酸加水稀释至1000mL1000mL，即，即得）得）10mL10mL，溶液如不澄清，应滤过；置，溶液如不澄清，应滤过；置50mL50mL纳纳氏比色管中，加水使成约氏比色管中，加水使成约40mL40mL，摇匀，即得供试，摇匀，即得供试液。另取标准氯化钠溶液液。另取标准氯化钠溶液6.0mL6.0mL置置50mL50mL纳氏比色纳氏比色管中，加稀硝酸管中，加稀硝酸10mL10mL，用水稀释使成约，用水稀释使成约40mL40mL，摇匀，即得对照液。向供试液与对照液中分别加摇匀，即得对照液。向供试液与对照液中分别加硝酸银试液硝酸银试液(0.1mol/L)1.0mL(0.1mol/L)1.0mL，用水稀释使成，用水稀释使成50mL50mL，摇匀，暗处放置，摇匀，暗处放置5min5min，同置黑色背景上，从比，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，如发生浑浊，样品管不得比色管上方向下观察，如发生浑浊，样品管不得比对照管更浓对照管更浓(0.01(0.01)。标准氯化钠溶液的制备：称取氯化钠标准氯化钠溶液的制备：称取氯化钠0.165g0.165g，置，置1000mL1000mL量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。液。临用前，精密量贮备液临用前，精密量贮备液10mL10mL，置，置100mL100mL量瓶中，加水稀量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每释至刻度，摇匀，即得（每1mL1mL相当于相当于10gCl10gCl）2 2、硫酸盐、硫酸盐 取本品取本品2.0g2.0g，加水溶解使成约，加水溶解使成约40mL(40mL(如溶液显碱性，如溶液显碱性，可滴加盐酸使遇石蕊试纸显中性反应可滴加盐酸使遇石蕊试纸显中性反应)；溶液如不澄清，；溶液如不澄清，应滤过；置应滤过；置50mL50mL纳氏比色管中，加稀盐酸（取纳氏比色管中，加稀盐酸（取234mL234mL硫硫酸加水稀释至酸加水稀释至1000mL1000mL，即得。），即得。）2mL2mL，2525氯化钡溶液氯化钡溶液5mL5mL，加水稀释使成，加水稀释使成50mL50mL，摇匀，放置，摇匀，放置10min10min，如发生浑，如发生浑浊，与标准硫酸钾溶液浊，与标准硫酸钾溶液2.0mL2.0mL同法制成的对照液比较，不同法制成的对照液比较，不得更浓得更浓(0.01(0.01)。标准硫酸钾溶液的制备：称取硫酸钾标准硫酸钾溶液的制备：称取硫酸钾0.181g0.181g，置，置1000mL1000mL量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL1mL相当于相当于100g100g的的SOSO4 4）3 3、铁盐、铁盐 取本品取本品2.0g2.0g，加水，加水20mL20mL溶解后，加硝酸溶解后，加硝酸3 3滴，滴，缓缓煮沸缓缓煮沸5min5min，放冷，加水稀释使成，放冷，加水稀释使成45mL45mL，加，加硫氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液(30100)3mL(30100)3mL，摇匀，如显色，与，摇匀，如显色，与标准铁溶液标准铁溶液2.0mL2.0mL用同一方法制成的对照液比较，用同一方法制成的对照液比较，不得更深不得更深(0.001(0.001)。标准铁溶液的制备：称取硫酸铁铵标准铁溶液的制备：称取硫酸铁铵（FeNHFeNH4 4(SO(SO4 4)2 212H12H2 2O O）0.863g0.863g，置，置1000mL1000mL量瓶中，量瓶中，加水溶解后，加硫酸加水溶解后，加硫酸2.5mL2.5mL，用水稀释至刻度，摇，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液临用前，精密量取贮备液10mL10mL，置，置100mL100mL量瓶量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL1mL相当于相当于10g10g的的FeFe）六、操作注意事项六、操作注意事项1 1纳氏比色管的选择与洗涤纳氏比色管的选择与洗涤 比色或比浊操作，一般均在纳氏比色管中进行，因此比色或比浊操作，一般均在纳氏比色管中进行，因此在选用比色管时，必须注意使样品与标准管的体积相等，在选用比色管时，必须注意使样品与标准管的体积相等，玻璃色质一致，最好不带任何颜色，管上的刻度均匀，如玻璃色质一致，最好不带任何颜色，管上的刻度均匀，如有差别，不得大于有差别，不得大于2mm2mm。纳氏比色管用后应立即冲洗，比。纳氏比色管用后应立即冲洗，比色管洗涤时避免用毛刷或去污粉等洗刷，以免管壁划出条色管洗涤时避免用毛刷或去污粉等洗刷，以免管壁划出条痕影响比色或比浊。痕影响比色或比浊。2 2平行操作原则平行操作原则 进行比色、比浊检查时，样品液与对照液的实验条件进行比色、比浊检查时，样品液与对照液的实验条件应尽可能一致，严格按照操作步骤平行操作，按规定顺序应尽可能一致，严格按照操作步骤平行操作，按规定顺序加入试剂。比色、比浊前可利用手腕转动加入试剂。比色、比浊前可利用手腕转动360360的旋摇使比的旋摇使比色管内试剂充分混匀。比色方法一般是将两管同置于白色色管内试剂充分混匀。比色方法一般是将两管同置于白色背景上，从侧面观察；比浊方法是将两管同置于黑色或白背景上，从侧面观察；比浊方法是将两管同置于黑色或白色背景上，自上而下地观察。色背景上，自上而下地观察。3 3实验中应准确选用量具实验中应准确选用量具 杂质检查中允许的误差为杂质检查中允许的误差为1010，量筒的绝对，量筒的绝对误差为误差为1mL1mL，刻度吸管的绝对误差为，刻度吸管的绝对误差为0.010.010.1mL0.1mL，在实验中，应根据样品、标准液的取用量正确，在实验中，应根据样品、标准液的取用量正确选用量器。例如，取标准液选用量器。例如，取标准液2mL2mL应选择刻度吸管应选择刻度吸管或移液管吸取标准液。取样品或移液管吸取标准液。取样品2g2g，允许的误差为，允许的误差为0.2g0.2g，可选用称量精度为，可选用称量精度为0.1g0.1g的普通天平。的普通天平。4 4进行铁盐检查时，采用硝酸将进行铁盐检查时，采用硝酸将FeFe2+2+氧化为氧化为FeFe3+3+，标准液应与样品液同法操作。样品液加硝酸煮沸标准液应与样品液同法操作。样品液加硝酸煮沸时，应注意防止暴沸，必要时补充适量水。时，应注意防止暴沸，必要时补充适量水。