六-肥达反应ppt课件.ppt

一一 肥达氏反应肥达氏反应v原理：用已知原理：用已知伤寒沙寒沙门菌菌O、H抗原，以及引起抗原，以及引起 副副伤寒的副寒的副伤寒沙寒沙门菌菌H抗原与受抗原与受检血清作定量凝集血清作定量凝集试验，测定受定受检血清中有无相血清中有无相应抗体及其效价的抗体及其效价的试验。作。作为临床上床上诊断断伤寒和副寒和副伤寒的参考。寒的参考。v实验材料材料 (1)待待测血清血清(1:10)，伤寒杆菌寒杆菌O、H菌液，甲型副菌液，甲型副伤寒杆菌寒杆菌(PA)和乙型副和乙型副伤寒杆菌寒杆菌(PB)H菌液，生理菌液，生理盐水。水。(2)小小试管，吸管，管，吸管，试管架，吸耳球管架，吸耳球(或橡皮乳或橡皮乳头)，水浴箱，水浴箱，记号笔等。号笔等。v方法：方法：v在在试管架上放管架上放4排排试管，每排支，做好管，每排支，做好标记。v每排每支每排每支试管各加入管各加入0.5ml生理生理盐水。水。v每排第每排第1管中分管中分别加入待加入待测血清血清0.5ml。混匀后。混匀后用吸管吸取用吸管吸取0.5ml混合液加到第混合液加到第2管内。混匀后再管内。混匀后再从中吸取从中吸取0.5ml液体到第液体到第3管中，如此重复直至第管中，如此重复直至第6管。第管。第6管稀管稀释完后吸取完后吸取0.5ml混合液弃去。第混合液弃去。第7管不加待管不加待测血清作阴性血清作阴性对照。每一排照。每一排试管均重复上管均重复上述步述步骤。v在第在第1排每个排每个试管中加入管中加入伤寒杆菌寒杆菌“O”抗原抗原0.5ml，第，第2排，第排，第3排和第排和第4排排则每管分每管分别加入加入0.5ml伤寒寒杆菌、甲型副杆菌、甲型副伤寒杆菌、乙型副寒杆菌、乙型副伤寒杆菌的寒杆菌的“H”抗原。抗原。v将所有的将所有的试管充分振管充分振荡，使其混匀，置，使其混匀，置50水浴水浴45分分钟，取出，取出观察察结果。果。肥达反肥达反应稀稀释法示意表法示意表试验管（每管试验管（每管0.5ml）对照管对照管 1234567生理盐水生理盐水0.50.50.50.5 0.50.5 0.5-1“O”抗原抗原 0.50.50.50.5 0.50.50.52“H”抗原抗原0.50.50.50.50.50.50.53PA抗原抗原0.50.50.50.50.50.50.54PB抗原抗原0.50.50.50.50.50.50.5血清最终稀释度血清最终稀释度 1:401:801:1601:3201:640 1:1280-抗原构造与分类抗原构造与分类成分成分产生产生抗体抗体产生特点产生特点制备制备反应特点反应特点O O抗抗原原LPSLPSIgMIgM出现早出现早维持时间维持时间短短酒精处理酒精处理或加热或加热反应速度慢反应速度慢颗粒状凝集颗粒状凝集H H抗抗原原蛋白蛋白质质IgGIgG出现较晚，出现较晚，维持时间维持时间长长甲醛固定甲醛固定后使后使O O抗原抗原被遮盖被遮盖反应速度快反应速度快絮状凝集絮状凝集肥达实验结果判定肥达实验结果判定v血清的凝集效价（滴度）：血清的凝集效价（滴度）：是指能与一定量的抗是指能与一定量的抗原发生肉眼可见的明显凝集的血清最高稀释倍数。原发生肉眼可见的明显凝集的血清最高稀释倍数。血清效价代表血清中抗体的含量，血清效价越高，血清效价代表血清中抗体的含量，血清效价越高，所含抗体的量愈多。所含抗体的量愈多。结果判断结果判断1、正常凝集效价、正常凝集效价 伤寒沙门菌伤寒沙门菌“O”抗体凝集效价在抗体凝集效价在1：80以下，伤以下，伤寒沙门菌寒沙门菌“H”抗体在抗体在1：160以下，以下，甲、乙型副伤寒沙门菌甲、乙型副伤寒沙门菌“H”抗体凝集效价在抗体凝集效价在1：80以下。以下。2、病程中动态观察、病程中动态观察 二份血清，第二次效价增长四倍以上有意义二份血清，第二次效价增长四倍以上有意义3、O与与H抗体在诊断上的意义抗体在诊断上的意义 O H A B 诊诊 断断 意意 义（义（可能可能）伤寒及副寒及副伤寒感染早期寒感染早期/交叉反交叉反应伤寒及副寒及副伤寒感染晚期寒感染晚期/预防接种防接种/非特异性回非特异性回忆反反应伤寒寒甲型副甲型副伤寒寒乙型副乙型副伤寒寒接种接种伤寒及副寒及副伤寒三寒三联疫苗疫苗非非肠热症症/早期用抗生素早期用抗生素/免疫功能低下免疫功能低下O 与与H抗体在诊断上的意义抗体在诊断上的意义实验二实验二 其他细菌其他细菌白喉棒状杆菌：白喉棒状杆菌：G+一端或两端膨大，排列不规则，常呈一端或两端膨大，排列不规则，常呈栅栏状或英文字母样，如栅栏状或英文字母样，如V、W、X等等观察异染颗粒观察异染颗粒炭疽杆菌：炭疽杆菌：G G粗大杆菌，两端平切、排列呈粗大杆菌，两端平切、排列呈竹节状竹节状；有荚膜，有荚膜，芽胞芽胞呈椭圆形，位于菌体中央呈椭圆形，位于菌体中央肉毒梭菌肉毒梭菌：G G粗大杆菌，粗大杆菌，芽胞位于近极端，成网球拍状芽胞位于近极端，成网球拍状实验二实验二 炭疽杆菌菌落炭疽杆菌菌落 3035 3035，普通琼脂培养基上形成灰白色粗糙，普通琼脂培养基上形成灰白色粗糙型菌落，边缘不整齐，在低倍镜下观察呈卷型菌落，边缘不整齐，在低倍镜下观察呈卷发状发状