GB 5009.228-2016 食品安全国家标准 食品中挥发性盐基氮的测定.pdf
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1、中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B5 0 0 9.2 2 82 0 1 6食品安全国家标准食品中挥发性盐基氮的测定2 0 1 6 - 0 8 - 3 1发布2 0 1 6 - 0 9 - 2 0实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发 布G B5 0 0 9.2 2 82 0 1 6 前 言 本标准代替G B/T5 0 0 9.4 42 0 0 3 肉与肉制品卫生标准的分析方法 、G B/T5 0 0 9.4 52 0 0 3 水产品卫生标准的分析方法 、G B/T5 0 0 9.4 72 0 0 3 蛋与蛋制品卫生标准的分析方法 中的挥发性盐基氮测定部分, 代替S C/T3
2、 0 3 22 0 0 1 水产品中挥发性盐基氮的测定 。本标准与G B/T5 0 0 9.4 42 0 0 3相比, 主要修改如下: 标准名称修改为“ 食品安全国家标准 食品中挥发性盐基氮的测定” ; 修改了标准的适用范围; 整合了G B/T5 0 0 9.4 72 0 0 3 蛋与蛋制品卫生标准的分析方法 中皮蛋( 松花蛋) 挥发性盐基氮的测定方法; 增加了自动凯氏定氮仪法, 作为第二法; 改进了微量扩散法的操作方法。G B5 0 0 9.2 2 82 0 1 61 食品安全国家标准食品中挥发性盐基氮的测定1 范围本标准规定了食品中挥发性盐基氮的测定方法。本标准适用于以肉类为主要原料的食品
3、、 动物的鲜( 冻) 肉、 肉制品和调理肉制品、 动物性水产品和海产品及其调理制品、 皮蛋( 松花蛋) 和咸蛋等腌制蛋制品中挥发性盐基氮的测定。第一法 半微量定氮法2 原理挥发性盐基氮是动物性食品由于酶和细菌的作用, 在腐败过程中, 使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。挥发性盐基氮具有挥发性, 在碱性溶液中蒸出, 利用硼酸溶液吸收后, 用标准酸溶液滴定计算挥发性盐基氮含量。3 试剂和材料除非另有说明, 本方法所用试剂均为分析纯, 水为G B/T6 6 8 2规定的三级水。3.1 试剂3.1.1 氧化镁(M g O) 。3.1.2 硼酸(H3B O3) 。3.1.3 三氯乙酸(C2HC
4、l3O2) 。3.1.4 盐酸(HC l) 或硫酸(H2S O4) 。3.1.5 甲基红指示剂(C1 5H1 5N3O2) 。3.1.6 溴甲酚绿指示剂(C2 1H1 4B r4O5S) 或亚甲基蓝指示剂(C1 6H1 8C l N3S3 H2O) 。3.1.7 9 5%乙醇(C2H5OH) 。3.1.8 消泡硅油。3.2 试剂配制3.2.1 氧化镁混悬液(1 0g/L) : 称取1 0g氧化镁, 加10 0 0m L水, 振摇成混悬液。3.2.2 硼酸溶液(2 0g/L) : 称取2 0g硼酸, 加水溶解后并稀释至10 0 0m L。3.2.3 三氯乙酸溶液(2 0g/L) : 称取2 0g
5、三氯乙酸, 加水溶解后并稀释至10 0 0m L。3.2.4 盐酸标准滴定溶液(0.1 0 00m o l/L) 或硫酸标准滴定溶液(0.1 0 00 m o l/L) : 按照G B/T6 0 1制备。3.2.5 盐酸标准滴定溶液(0.0 1 00m o l/L) 或硫酸标准滴定溶液(0.0 1 00m o l/L) : 临用前以盐酸标准滴定溶液(0.1 0 00m o l/L) 或硫酸标准滴定溶液(0.1 0 00m o l/L) 配制。G B5 0 0 9.2 2 82 0 1 62 3.2.6 甲基红乙醇溶液(1g/L) : 称取0.1g甲基红, 溶于9 5%乙醇, 用9 5%乙醇稀释
6、至1 0 0m L。3.2.7 溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L) : 称取0.1g溴甲酚绿, 溶于9 5%乙醇, 用9 5%乙醇稀释至1 0 0m L。3.2.8 亚甲基蓝乙醇溶液(1g/L) : 称取0.1g亚甲基蓝, 溶于9 5%乙醇, 用9 5%乙醇稀释至1 0 0m L。3.2.9 混合指示液:1份甲基红乙醇溶液与5份溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合, 也可用2份甲基红乙醇溶液与1份亚甲基蓝乙醇溶液临用时混合。4 仪器和设备4.1 天平: 感量为1m g。4.2 搅拌机。4.3 具塞锥形瓶:3 0 0m L。4.4 半微量定氮装置: 如图A.1所示。4.5 吸量管:1 0.0m L、2 5.0m
7、 L、5 0.0m L。4.6 微量滴定管:1 0m L, 最小分度0.0 1m L。5 分析步骤5.1 半微量定氮装置按图A.1安装好半微量定氮装置。装置使用前做清洗和密封性检查。5.2 试样处理鲜( 冻) 肉去除皮、 脂肪、 骨、 筋腱, 取瘦肉部分, 鲜( 冻) 海产品和水产品去除外壳、 皮、 头部、 内脏、 骨刺, 取可食部分, 绞碎搅匀。制成品直接绞碎搅匀。肉糜、 肉粉、 肉松、 鱼粉、 鱼松、 液体样品可直接使用。皮蛋( 松花蛋) 、 咸蛋等腌制蛋去蛋壳、 去蛋膜, 按蛋水=21的比例加入水, 用搅拌机绞碎搅匀成匀浆。鲜( 冻) 样品称取试样2 0g, 肉粉、 肉松、 鱼粉、 鱼松
8、等干制品称取试样1 0g, 精确至0.0 0 1g, 液体样品吸取1 0.0m L或2 5.0m L, 置于具塞锥形瓶中, 准确加入1 0 0.0m L水, 不时振摇, 试样在样液中分散均匀, 浸渍3 0m i n后过滤。皮蛋、 咸蛋样品称取蛋匀浆1 5g( 计算含量时, 蛋匀浆的质量乘以2/3即为试样质量) , 精确至0.0 0 1g, 置于具塞锥形瓶中, 准确加入1 0 0.0m L三氯乙酸溶液, 用力充分振摇1m i n,静置1 5m i n待蛋白质沉淀后过滤。滤液应及时使用, 不能及时使用的滤液置冰箱内04冷藏备用。对于蛋白质胶质多、 粘性大、 不容易过滤的特殊样品, 可使用三氯乙酸溶
9、液替代水进行实验。蒸馏过程泡沫较多的样品可滴加1滴2滴消泡硅油。5.3 测定向接收瓶内加入1 0 m L硼酸溶液,5滴混合指示液, 并使冷凝管下端插入液面下, 准确吸取1 0.0m L滤液, 由小玻杯注入反应室, 以1 0m L水洗涤小玻杯并使之流入反应室内, 随后塞紧棒状玻塞。再向反应室内注入5m L氧化镁混悬液, 立即将玻塞盖紧, 并加水于小玻杯以防漏气。夹紧螺旋夹, 开始蒸馏。蒸馏5m i n后移动蒸馏液接收瓶, 液面离开冷凝管下端, 再蒸馏1m i n。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部, 取下蒸馏液接收瓶。以盐酸或硫酸标准滴定溶液(0.0 1 00m o l/L) 滴定至终点。使用1份甲
10、基红乙醇溶液与5份溴甲酚绿乙醇溶液混合指示液, 终点颜色至紫红色。使用2份甲基红乙醇溶液与1份亚甲基蓝乙醇溶液混合指示液, 终点颜色至蓝紫色。同时做试剂空白。G B5 0 0 9.2 2 82 0 1 63 6 分析结果的表述试样中挥发性盐基氮的含量按式(1) 计算:X=(V1-V2)c1 4m(V/V0)1 0 0(1) 式中:X 试样中挥发性盐基氮的含量, 单位为毫克每百克(m g/1 0 0g) 或毫克每百毫升(m g/1 0 0m L) ;V1 试液消耗盐酸或硫酸标准滴定溶液的体积, 单位为毫升(m L) ;V2 试剂空白消耗盐酸或硫酸标准滴定溶液的体积, 单位为毫升(m L) ;c
11、盐酸或硫酸标准滴定溶液的浓度, 单位为摩尔每升(m o l/L) ;1 4 滴定1.0m L盐酸c(HC l)=1.0 0 0m o l/L 或硫酸c(1/2 H2S O4)=1.0 0 0m o l/L 标准滴定溶液相当的氮的质量, 单位为克每摩尔(g/m o l) ;m 试样质量, 单位为克(g) , 或试样体积, 单位为(m L) ;V 准确吸取的滤液体积, 单位为毫升(m L) , 本方法中V=1 0;V0 样液总体积, 单位为毫升(m L) , 本方法中V0=1 0 0;1 0 0 计算结果换算为毫克每百克(m g/1 0 0g) 或毫克每百毫升(m g/1 0 0m L) 的换算系
12、数。实验结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示, 结果保留三位有效数字。7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的1 0%。第二法 自动凯氏定氮仪法8 试剂和材料除非另有说明, 本方法所用试剂均为分析纯, 水为G B/T6 6 8 2规定的三级水。8.1 试剂8.1.1 氧化镁(M g O) 。8.1.2 硼酸(H3B O3) 。8.1.3 盐酸(HC l) 或硫酸(H2S O4) 。8.1.4 甲基红指示剂(C1 5H1 5N3O2) 。8.1.5 溴甲酚绿指示剂(C2 1H1 4B r4O5S) 。8.1.6 9 5%乙醇(C2H5OH)
13、 。8.2 试剂配制8.2.1 硼酸溶液(2 0g/L) : 同3.2.2。8.2.2 盐酸标准滴定溶液(0.1 0 00m o l/L) 或硫酸标准滴定溶液(0.1 0 00m o l/L) : 同3.2.4。8.2.3 甲基红乙醇溶液(1g/L) : 同3.2.6。8.2.4 溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L) : 同3.2.7。8.2.5 混合指示液:1份甲基红乙醇溶液与5份溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。G B5 0 0 9.2 2 82 0 1 64 9 仪器和设备9.1 天平: 感量为1m g。9.2 搅拌机。9.3 自动凯氏定氮仪。9.4 蒸馏管:5 0 0m L或7 5 0m L。9.5
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