酶联免疫.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,酶联免疫吸附测定（ELISA）,2016年8月,将可溶性的,抗原或抗体,结合到聚苯乙烯等,固相载体,上，利用抗原抗体结合专一性进行,免疫反应,的,定性和定量,检测方法,ELISA基本规则,抗原或抗体的固相化、特异性结合以及抗原或抗体的酶标记,体系中的抗原和抗体保持免疫学活性,体系中的酶保持活性,所有未被固定的部分会被洗去,酶标物与受检样本的含量能呈现出特定的比例,根据酶对底物的催化会产生某种可以检测的信号变化,常见的检测方法有以下几种：,直接法,/,间接法,双抗体（抗原）夹心法,竞争法,间接法,双抗体（抗原）夹心法,在载体表面,预包被,已知数量的捕获,抗体,（,1,）,加入,无关蛋白,封闭不需要的结合位点,加入,待测抗原,，令其被抗体捕获（,2,）,将未被固定的抗原洗去,加入,特异性抗体,，使其连接到该抗原另外的结合位点（,3,）,加入,酶标二抗,连结到检测抗体的,FC,段（,4,）,再次清洗，去除未固定的酶标二抗,最后加入可在酶作用下产生颜色,/,荧光,/,电化学信号变化的,底物,（,5,）,通过信号的变化检测抗原含量,竞争法,直接竞争法,：标记,抗原,，与检测样品中的,抗原,竞争,抗体,间接竞争法,：标记,抗体,，固相,抗原,与液相,抗原,（样本）竞争标记,抗体,竞争抗原,竞争抗原,竞争抗原,间接竞争法,载体,载体,酶,酶,酶,待测抗原,待测抗原,底物,载体,待测抗原,间接竞争法,：标记,抗体,，固相,抗原,与液相,抗原,（样本）竞争标记,抗体,结束,谢谢！,