实验八核糖核酸的组分鉴定.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验八 核糖核酸的组分鉴定,一、实验目的,掌握核糖核酸组分鉴定的原理。,学会鉴定核糖核酸组分的方法。,核糖核酸的组成成分主要包括,核糖、磷酸和碱基,。,5,5,3,3,RNA,含量为干菌体的,2.67%10.0%,，,二、实验原理,2.,在碱性环境下，嘌呤碱能与银离子反应形成沉淀，但此处碱性环境不能用一般的强碱，否则强碱会与银离子反应产生沉淀而干扰结果判定。,3,.,核糖核酸与浓盐酸共热时，会发生降解，形成的核糖继而转变成糠醛，后者可与,3,，,5-,二羟基甲苯（地衣酚）反应，在,Fe,3+,或,Cu,2+,催化下，生成绿色复合物。,4.,磷酸组分可与定磷试剂在酸性环境中反应，生成蓝色物质。因此，可以根据以上性质，设计实验对各组分进行鉴定。,（,1,）,1.5M,硫酸,；,（,2,）,0.1mol/L,硝酸银溶液,；,（,3,）,1mol/L,浓氨水,；,（,4,）,三氯化铁,-,浓盐酸溶液,：,（,5,）,地衣酚,-,乙醇溶液,：,（,6,）,定磷试剂,：,17%,的硫酸，,10%,的抗坏血酸和,2.5%,的钼酸铵,。,三、试剂,1,.,取,100mg,实验七中提取的酵母,RNA,，加入,1.5M H,2,SO,4,溶液,5mL,，在沸水浴中加热,10-20,分钟，使核酸充分水解后，用于对各组分的鉴定。,2.,磷酸组分鉴定：取水解液,1mL,，加入干净的试管中，再加入等体积的新配制的定磷试剂,1mL,，混匀后，在,45,左右的水浴中加热,15-30min,，观察颜色变化。,四、实验步骤,3.,嘌呤碱的鉴定：取水解液,1mL,，加入干净的试管中，加入过量的浓氨水，再加入,1mL,的,0.1M,的硝酸银溶液，观察沉淀的生成。,4.,核糖的鉴定：取水解液,1mL,，加入干净的试管中，再加入,2mL,三氯化铁,-,浓盐酸溶液和,0.2mL,苔黑酚,-,乙醇溶液，放置在沸水浴中加热,10-30min,，观察颜色变化。,谢谢！,