动物实验基本技术和方法.PPT

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,动物实验基本技术和方法,广东药学院实验动物中心,主要内容,一、实验前准备,二、实验动物抓取与固定,三、年龄的大致判断,四、性别、发情、与妊娠鉴定,五、编号和标记,六、分组,七、去毛,八、给药途径与方法,九、采血方法,十、其他体液采集,十一、麻醉方法,十二、处死方法,十三、动物病理检查,一、实验前准备,理论准备：了解动物实验基础知识,制定研究计划和方案,查阅关于实验方法的参考文献,条件准备：仪器、器械、药品,运输,动物实验和饲养场所,二、实验动物抓取和固定,（一）小鼠,小鼠固定器固定,（二）大鼠,大鼠固定盒固定,（三）豚鼠,（四）家兔,兔子固定器固定,狗钳,狗的抓取固定,（五）犬,犬嘴固定方法,猫的抓取,犬固定,（六）猴抓取与保定,猴徒手固定,三、年龄的大致判断,（一）大、小鼠,1,、根据形态鉴定日龄（大、小鼠情况基本一样）,日龄,/d,外观形态特征,1,仔鼠裸体鲜红,3,耳壳露出表皮,4,脐带瘢痕脱落,5,能翻身,8,能爬行,日龄,/d,外观形态特征,10,能听到声音,9,11,全身被白毛，门齿长出,13,15,眼皮张开，能跳跃，能抓取东西,18,以后,能自行采食，独立生活,2,.,根据体重鉴定日龄,小鼠日龄与体重的对应,日龄,/d,初生,5 10 15 20 25 30,体重,/g,1.8 4.0 6.0 11.0 15.0 21.0,24.0,大鼠日龄与体重的对应,日龄,/d,初生,10 20 30 40,体重,/g,6,7 17,25 35,50 55,90 100,150,日龄,/d,50 60 70 80,体重,/g,150,210 170,240 210,270 240,320,（二）豚鼠,一般老年豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽，眼神呆滞，行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，眼睛圆亮，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。同样，也可根据体重来推断大致年龄。,同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性。与大鼠一样，其体重受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄。,日龄,/d,初生,7 20 30 60,体重,/g,60,80 100,120 150,200 170,220 240,300,日龄,/d,90 120 180,体重,/g,330,400,400,470 520,600,（,三）家兔,家兔的,门齿和爪,随年龄增长而增长，是年龄鉴别的重要标志。,青年兔门齿洁白，短小，排列整齐；老年兔门齿暗黄，厚而长，排列不整齐，有时破损。白色家兔趾小基本呈红色，尖端呈白色。,1,岁家兔红色与白色长度相等；,1,岁以下，红多于白；,1,岁以上，白多于红。还可根据趾爪的长度与弯曲度来区别。,青年兔趾爪较短，直平，隐在脚毛中，随年龄的增长，趾爪露出于脚毛之外，而且爪尖钩曲。另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮，行动活泼的为青年兔；皮厚而松，眼神颓废，行动迟缓的为老年兔。,（四）犬,犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、外形颜色等情况综合判定。,仔犬在出生后十几天即开始生出乳齿，,2,个月以后开始由门齿犬齿臼齿顺序逐渐更换为恒齿，,8,l0,个月齿换齐。但犬齿需要,1,岁半以后才能长坚实。饲养场饲养的品种犬，可以根据记录，明确了解年龄，而收购的杂种犬就无法知道确切年龄。实际中，可根据犬齿更换和磨损情况，估计犬的年龄。,年龄,犬齿更换和磨损情况,2,个月以下,仅有乳齿,(,白、细、尖,),2,4,个月,更换门齿,4,6,个月,更换犬齿,(,白，牙尖圆钝,),6,10,个月,更换臼齿,1,岁,牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突,2,岁,下门齿尖突部分磨乎,3,岁,上、下门齿尖突大部分磨平,4,5,岁,上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄,6,8,岁,门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损,9,10,岁,唇部、胡须发白,10,岁以上,门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白,四、性别、发情、与妊娠鉴定,（一）大、小鼠的,性别鉴定,初生兔仔如阴部孔洞扁圆而略大于肛门，且与肛门相向、距离较近的是母兔；孔洞呈圆形而略小于肛门，孔洞向前而距肛门较远的是公兔。,三月龄以上的兔子，只要看有无阴囊即可区别公母。,（二）兔的,性别鉴定,Female,Male,（三）,大、小鼠发情,鉴定,小鼠性周期阴道分泌物涂片变化,阶 段,持续时间（,h,）,涂 片 可 见,卵 巢 变 化,动情前期,9-18,大量有核上皮细胞,少量角化上皮细胞,卵泡加速生长,动 情 期,6-12,满视野角化上皮细胞，少量有核上皮细胞,卵泡成熟、排卵,动情后期,30-48,角化上皮细胞及白细胞,黄体生成,动情间期,36-42,大量白细胞及少量粘液,黄体退化,（四）,妊娠,鉴定,1,、,阴道栓法,（大、小鼠、豚鼠）,2,、外部检查法,3,、,摸胎法,4,、阴道检查法,5,、直肠检查法,6,、超声波检查法,7,、孕酮含量测定法,阴道栓,五、编号和标记,1、染色法：浅色动物,3.5-5苦味酸溶液（黄色）,0.5%中性红或碱性品红溶液（红色）,煤焦油酒精溶液（黑色）,龙胆紫溶液（紫色）,2、打耳孔法：小型动物,3、剪趾法：小型动物,4、剪尾法：大、小鼠，仅限与两组间区分,5、烙印法：刺号钳，中、大型动物,6、针刺法：中、大型动物,7、号牌法：耳标签、项圈、腿圈，中、大型动物,8、剪毛法：大动物,9、笼子标号,六、分组,随机化分组：避免人为影响,例：将,14,只小鼠随机分成两组。,先将小鼠编为,I,14,号，,在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄1,4,个随机数字。编排如下：,动物编号,1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14,随机数字,16 22 77 94 39 49 54 43 54 82 17 37 93 23,归 组,B B A B A A B A B B A A A A,奇数代表,A,织，偶数代表,B,组,A,组：,3 5 6 8 11 12 13 14,B,组：,1 2 4 7 9 10,调整分组：接刚才随机数字,23,继续抄表得随机数字,78,，用,78,除以,8,（因为需要把,A,组的,8,个数字调整掉一个），得余数,6,，所以把,A,组的第,6,个动物，即,12,号动物调整到,B,组,最终分组,A,组：,3 5 6 8 11 13 14,B,组：,1 2 4 7 9 10 12,例：12只大鼠随机分为,3,组,大鼠编号112,在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄12个随机数字。,每个数分别用3除，记录余数，,根据余数分组,大鼠编号：1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12,随机数字：08，27，01，50，15，29，39，39，43，79，69，10,余数：2，0，1，2，0，2，0，0，1，1，0，1,组别：,B，C，A，B，C，B，C，C，A，A，C，,A,A：3，9，10，12,B；1，4，6,C：2，5，7，8，11,调整分组：接刚才随机数字10继续抄表得随机数字61，用61除以5（因为需要把,C,组的5个数字调整掉一个），得余数1，所以把,C,组的第1个动物，即2号动物调整到,B,组。,最终分组,A：3，9，10，12,B；1，2，4，6,C：5，7，8，11,七、去毛,1、剪毛：弯头剪毛剪。,2、拔毛：大小鼠尾静脉、家兔耳缘静脉注射。,3、剃毛：将剃毛部位先用剪刀粗剪一遍，蘸温肥皂水润湿，用剃刀顺着被毛方向剃毛，用电动剃毛推剪，则逆被毛向剃毛。,4、化学脱毛：,常用脱毛剂,8%硫化钠水溶液,硫化钠3份，洗衣粉1份、淀粉7份，加水调成糊状,硫化钡50克，氧化锌25克，淀粉25克，加水100毫升调成糊状,硫化钠10克，生石灰15克，加水到100毫升，适合犬和其他大动物。,八、给药途径与方法,（一）自动口服：加入饲料或饮水,（二）投喂药片：掰开口，放到舌根部,（三）灌胃（,i.g),1,、小鼠、大鼠、豚鼠,灌胃时将灌胃针按在注射器上，吸入药液。,左手抓住鼠背部及颈部皮肤将动物固定，右手持注射器，将灌胃针插入动物口中，沿咽后壁徐徐插入食道。动物应固定成垂直体位，针插入时应无阻力。若感到阻力或动物挣扎时，应立即停止进针或将针拔出，以兔损伤或穿破食道以及误入气管。,一般当灌胃针插入小鼠,3,4cm,，大鼠或豚鼠,4,6cm,后可将药物注入。常用的灌胃量小鼠为,0.2,1ml,，大鼠,1,4ml,，豚鼠为,1,5ml,。,2,、狗、兔、猫、猴,灌胃时，先将动物固定，再将特制的扩口器放入动物口中，扩口器之宽度可视动物口腔大小而定，如狗的扩口器可用木料制成长方形，长约,10,15cm,，粗细应适合狗嘴，约,2,3cm,，中间粘一小孔，孔的直途为,5,10cm,。,灌胃时将扩口器放于上述动物上下门牙之后，并用绳将它固定于嘴部，将带有弹性的橡皮导管（如导尿管），经扩口器上的小圆孔插入，沿咽后壁而进入食道，此时应检查导管是否正确插入食道，可将导管外口置于一盛水的烧杯中，如不发生气泡，即认为此导管是在食道中，未误入气管，即可将药液灌入。灌胃管插入长度狗为,20cm,，兔子为,12-15cm,。,动物最大灌胃量,（四）直肠给药,（五）呼吸道给药,（六）滴鼻,（七）点眼,（八）经皮肤给药：常用于检测药物、毒物、化妆品等的透皮吸收、局部作用、至敏作用等。家兔和豚鼠选择脊柱两侧皮肤，大小鼠常采取浸尾方式。,（九）皮内注射(,i.d)：,一般用于接种或过敏实验。将药液注射在真皮和表皮之间。,皮内注射时需将注射的局部脱去被毛，消毒后，用左手拇指和食指按住皮肤并使之绷紧，在两指之间，用注射器连,4(1/2),号细针头，紧贴皮肤表层刺入皮内，然后再向上挑起并再稍刺入，即可注射药液，此时可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。,（十）皮下注射(,s.c,)：,注射时以左手拇指和食指提起皮肤，将连有,5,（,1/2,）号针头的注射器刺入皮下。,皮下注射部位一般狗、猫多在大腿外侧，豚鼠在后大腿的内侧或小腹部；大白鼠可在侧下腹部。兔在背部或耳根部注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。,（十一）肌肉注射(,i.m)：,股部肌肉,（十二）腹腔注射(,i.p,)：,用大、小白鼠做实验时，以左手抓住动物，使腹部向上，右手将注射针头于左（或右）下腹部刺入皮下，使针头向前推,0.5,1.0cm,，再以,45,度角穿过腹肌，固定针头，缓缓注入药液，,为避免伤及内脏，可使动物处于头低位，使内脏移向上腹。若实验动物为家兔，进针部位为下腹部的腹白线离开,1cm,处。,（十三）静脉注射(,i.v,)：,1,、小鼠：尾静脉,2,、大鼠：尾静脉、,阴茎静脉、,舌下静脉、,浅背侧跖静脉,大小鼠有上、左、右,3根尾静脉，成品字型,小鼠尾静脉注射,大鼠阴茎静脉注射,大鼠舌下静脉注射,大鼠浅背侧跖静脉注射,3,、豚鼠：浅背侧跖静脉、耳静脉注射,4,、家兔：耳静脉注射,5,、猪：耳缘静脉,6,、猴：前肢桡静脉、后肢隐静脉注射,猪耳缘静脉注射,7,、猫、狗：前肢内侧头静脉、后肢外侧小隐静脉注射,狗前肢内侧头静脉,狗后肢外侧小隐静脉,猴的后肢皮下静脉注射,（十四）脑腔注射：,1,、小鼠,小指夹鼠尾，拇指和是指置小鼠头两侧固定，中指和无名指压住鼠身，在注射处消毒后，右手持注射器，以食指固定针芯，垂直刺入针头深度约,5,7mm,。,2,、兔,将兔用固定器固定好，剃去头顶的被毛，左手将头皮绷紧，消毒后，右手持锥子，自头顶正中稍偏一侧部位，锥穿头骨，即换以左手固定锥子，右手持注射器，使针头沿锥尖刺入，慢慢拔出锥子，即刻将针头刺入约,10,20mm,，即可推液。,（十五）,关节腔注射：,（十六）,椎管内注射：注射入蛛网膜下腔,（十七）,淋巴囊内注射：蛙和蟾蜍,（十八）小脑延髓池注射：,几种动物不同给药途径的常用注射量（毫升）,注射途径,小鼠,大鼠,豚鼠,兔,狗,腹腔,0.2,1.0,1,3,2,5,5,10,5,15,肌肉,0.1,0.2,0.2,0.5,0.2,0.5,0.5,1,2,5,静脉,0.2,0.5,1,2,1,5,3,10,5,15,皮下,0.1,0.5,0.5,1,0.5,2,1,3,3,10,九、采血方法,（一）大、小鼠：,1,、眶静脉丛（窦）：,少量多次采大小鼠血。,小鼠0.20.3,ml，,大鼠0.40.6,ml,2,、摘眼球：用于一次大量采小鼠血，可得到45体重的血量,3,、尾静脉：用于少量多次采大小鼠血,尾静脉采血,4,、剪头：用于一次性大量采小鼠血，可得到0.51.0,ml,的血量,5,、大血管：包括颈动脉（静脉），股动脉（静脉），腋下动脉（静脉），腹主动脉，此方法不常用于小鼠采血，而多用于大鼠一次性大量采血。可得5,ml,左右血量。,6,、心脏采血：小鼠少用，可用于大鼠一次性（开胸）或多次采血（不开胸）。,心脏采血,（二）家兔：,1,、耳缘静脉：中等血量的采集，可反复采血，每次510,ml。,2,、耳中央动脉：可反复采血，每次1015,ml。,3,、心脏采血：可用于,一次性（开胸）或,多次采血（不开胸）。,一次性开胸采血可,得到80100,ml,血量,4,、颈动静脉采血：用于一次性采血，需要手术，可得血量8010,ml。,（三）,豚鼠：,1,、心脏采血：可用于一次性（开胸）或多次采血（不开胸）。一次性开胸采血可得到510,ml,血量。,2,、背跖静脉采血：用于少量反复采血。,3,、耳缘剪口采血,（四）犬猫：和静脉注射部位相同，前肢内侧头静脉、后肢外侧小隐静脉。也可颈静脉（动脉）或心脏采血。,（五）,猪：前腔静脉或耳大静脉采血,（六）,羊：颈静脉采血,（七）,猴：前肢头静脉、后肢皮下静脉或耳缘静脉等。,（八）,禽类：翼下静脉,仔猪前腔静脉采血,采血注意事项,（一）,采血场所有充足的光线；室温夏季最好保持在,25,28,，冬季，,15,20,为宜；,（二）,采血用具有采用部位一般需要进行消毒；,（三）,采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；,（四）,若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂。,（五）,注意不同动物的采血量采血。,部 位,动物种类,尾静脉,大鼠、小鼠,耳静脉,兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊,眼底静脉丛,兔、大鼠、小鼠,d,舌下静脉,兔,e,腹壁静脉,青蛙、蟾蜍,f,冠、脚蹼皮下静脉,鸡、鸭、鹅,、取少量血,、取中量血,部 位,动物种类,后肢外侧皮下小隐静脉,狗、猴、猫,前肢内侧皮下头静脉,狗、猴、猫,耳中央动脉,兔,颈静脉,狗、猫、兔,心脏,豚鼠、大鼠、小鼠,断头,大鼠、小鼠,翼下静脉,鸡、鸭、鸽、鹅,颈动脉,鸡、鸭、鸽、鹅,、取大量血,部 位,动物种类,股动脉、颈动脉,狗、猴、猫、兔,心脏,狗、猴、猫、兔,颈静脉,马、牛、山羊、绵羊,摘眼球,大鼠、小鼠,4,、最大安全采血量与最小致死采血量,动物种类,最大安全采,血量,(ml),最小致死采,血量,(ml),小鼠,0.2,0.3,大鼠,1,2,豚鼠,5,10,兔,10,40,狼狗,100,500,猎狗,50,200,猴,15,60,常用抗凝剂：,1,、肝素：抑制凝血酶活力，阻止血小板凝集。纯品肝素1,mg125U，10U20U,抗1,ml,血凝集，但通常应用23倍剂量。,用法：可配成1%肝素溶液，用时取0.1,ml,于试管内，100烘干，每管可抗凝510,ml,血。或用1%肝素溶液湿润采血注射器。,肝素可改变蛋白质等电点，当用盐析法分离蛋白作分类测定时，不可用肝素抗凝。,2,、枸橼酸钠：使凝血必需的钙离子失活。常用35%水溶液，碱性较强。,3,、草酸盐合剂：草酸铵1.2,g，,草酸钾0.8,g，,福尔马林1.0,ml，,加蒸馏水至100,ml。,使凝血必需的钙离子失活。每毫升血加草酸盐合剂0.1,ml。,4,、氟化钠：每毫升血加6,mg。,十、其他体液采集,1、胸水、腹水采集：穿刺,2、消化液采集：唾液，胃液，胰液，胆汁,3、精液采集：中、大动物用假阴道，小动物穿刺附睾来采集精液。,4、脑脊液采集：手术或小脑延髓池抽取,5、,骨髓采集：大动物活体穿刺，小动物处死后取股骨或胸骨骨髓。,6、尿液采集：,代谢笼收集,导尿管采集,膀胱穿刺,压迫排尿,十一、麻醉方法,（一）,麻醉方法,：,1,、全麻,吸入麻醉，静脉注射、腹腔注射。,2,、局麻,浸润麻醉。根据手术，按皮下、筋膜、肌肉、腹膜、骨膜等顺序逐步深入注射到术野周围。,（二）,麻醉前准备：,1,、禁食812,h，,防止呕吐，可饮水。,2,、根据实验部位和种类，给动物脱毛。,3,、犬、猪、猴等大动物可在麻醉前给予一些药物以减少动物紧张，减少支气管分泌。,（,1,）阿托品：,减少支气管和唾液腺分泌，防止气管阻塞。,副作用：加快心率。用量：肌肉或皮下注射0.04,mg/kg,（,2,）安定：,产生镇静作用，加强麻醉效果，,使骨骼肌松弛。用量：2.55,mg/kg,（,3,）吗啡：,产生镇静作用。,副作用：抑制呼吸中枢。用量：皮下注射,12mg/kg，,肌肉注射1020,mg/kg,。,（三）麻醉药物：,1,、全麻药物,（,1,）乙醚：强挥发性、易燃。乙醚是最常用的吸入麻醉剂，各种动物适用。,机制：抑制中枢神经系统。,特点：,安全范围大，肌肉完全松弛，对肝肾毒性小，麻醉诱导期和苏醒期较长。,副作用：局部刺激大，引起上呼吸道黏膜分泌增加，导致呼吸道阻塞，可用阿托品对抗解救。,（,2,）巴比妥类：种类很多，有巴比妥钠，戊巴比妥钠，硫喷妥那，苯巴比妥钠等。适用于各种动物。如实验中大小鼠常用,3,戊巴比妥钠溶液腹腔注射进行麻醉。,特点：,安全范围广，毒性小，麻醉潜伏期短，麻醉维持时间长。可腹腔或静脉给药。,机理：阻断神经冲动传递到大脑。,副作用：过量使用可导致呼吸肌麻痹而死亡，同时抑制末梢循环，导致血压降低，并影响基础代谢，导致体温降低。,（,3,）氯胺酮：常用其盐酸盐。,特点：,麻醉潜伏期短，麻醉维持期仅1020,min，,麻醉浅，安全性高，可重复给药。,机制：阻断大脑联络途径。,副作用：兴奋心血管系统，使血压升高，心率加快，偶尔引起呕吐。,（,4,）水合氯醛：,作用特点和巴比妥类相似。但安全范围小，麻醉剂量和中毒剂量接近，对皮肤和黏膜有较强刺激。,2,、局麻药物,（,1,）普鲁卡因：是无刺激性的局麻药物。,特点：,麻醉速度快，注射后13分钟就可产生麻醉。可以维持3045分钟。,对皮肤和黏膜穿透力很弱，需要注射给药才能产生局麻效果。它可以使血管舒张，易被吸收入血液而失去效果。,在其溶液中加入肾上腺素（每100,ml,加入0.1%肾上腺素0.20.5,ml）,可以使麻醉时间延长12小时。,（,2,）利多卡因：效力和穿透力比普鲁卡因强。,（,3,）的卡因：化学结构和普鲁卡因类似，效力和穿透力比普鲁卡因强。,（四）实验动物的急救,动物实验过程中，可因麻醉药过量、出血过多、分泌物或血块堵塞气管造成窒息以及某种药物原因引起动物血压、呼吸不规则等现象，此时应立即进行急救处理措施。,急救处理措施首先要迅速排查原因，并中断诱因（如止血、停药、排除分泌物等），然后对症实施急救措施。,1,、呼吸、心跳（血压）的改变,动物实验过程中，需密切观察实验动物的呼吸、心跳及血压的变化，一者它们是实验反应的数据指标，二者是实验动物状态的主要指征。尤其对呼吸的观察，因为动物的死亡首先是呼吸的停止。,（,1,）诱发原因,麻醉给药速度过快或过量：实施静脉给药麻醉，可因给药速度过快或过量导致呼吸停止。因此，为防止麻醉剂过量，注射速度一定不要过快，严密观察动物状况，,若需追加麻醉剂，一次不宜超过总量的,1/5,。,气道不畅或堵塞：常见于麻醉后，因为气管分泌物增多或气管切口的出血凝块堵塞气管，动物呼吸不规则、呼吸困难甚至引起的窒息。,大失血：如因大动脉插管的松脱所造成的大失血。,实验药物的作用：如静脉注射乙酰胆碱过量或动物对其反应过强，引起心搏减弱减慢，继而出现呼吸、心跳的停止。,2,、急救措施,（,1,）迅速排查、中断、排除诱因。如应用棉签清除干净气管、气管插管内的分泌物及血凝块。必要时拔出气管插管冲洗后再行气管插管术。,（,2,）根据下列不同情况采取相应的急救措施：,呼吸极慢、不规则，但心跳正常时：给予人工呼吸,-,压胸法，适当给予苏醒剂。,呼吸停止仍有心跳时：实施人工呼吸，必要时可使用人工呼吸机或吸氧（吸入气中,O,2,占,95%,，,CO,2,占,5,）；注射,50,葡萄糖液,5,10ml,；给肾上腺素及苏醒剂。,呼吸、心跳均停止时：用,l,：,10000,肾上腺素溶液心内注射，其余同,。,3,、大失血,（,1,）诱发原因,多因动脉插管结扎不牢、动物挣扎，导致大动脉插管的松脱，或在进行动脉插管术时，因未放置动脉夹或动脉夹夹闭不全而剪切动脉引起。,（,2,）急救措施,立即止血：应迅速手指压迫或捏住出血处（尽量不要用止血钳，以防损伤动脉和神经），然后仔细检查分离出血点，于近心端放置动脉夹，再行动脉插管术。,补充血容量：若失血太多，适当加快输液,(,生理盐水,),速度，增加血容量。,注射强心剂：静脉注射,110000,肾上腺素,0.5ml,。,十二、处死方法,1、颈椎脱臼法：小鼠、大鼠,2、空气栓塞法：兔、猫、犬等大动物,3、放血法：心脏放血或大血管放血,4、断头法：小鼠、大鼠,5、吸入二氧化碳,6、麻醉法：如注射巴比妥类药物,十三、,动物病理检查,（一）一般病理检查,1,、实验动物不明原因死亡或实验需要时必须进行尸检以查明死亡原因。,2,、对动物进行尸检应该在动物死亡后立即进行，不能立即进行的需在冷冻的条件下保存动物尸体，以尽量保持病变与死亡前状态一致。,3,、外观检查：检查动物的发育状况、营养状况、精神状态、感觉器官、呼吸系统、消化系统、皮肤及被毛等指标。,4,、病理剖检：主要观察组织器官的大小、色泽、质地、切面和粘膜等指标。,（二）组织病理学检查,1,、取材：按要求切取相应的组织器官，并用固定液进行固定。,2,、制片：按程序将切取的组织器官制作成组织切片。,3,、读片：在显微镜下观察动物的心、肝、脾、肺、肾、脑等重点器官。,尸体需要做无害化处理：高压、焚烧、深埋等。,谢谢！,