第三章 药物的杂质检查.ppt

中国药科大学 药分教研室,第三章药物的杂质检查,Test for purity,中国药科大学 药分教研室,第三章 药物的杂质检查,Test for purity,概 述,一般杂质检查,特殊杂质检查,有效性,针对某些药效进行检查的项目,如,Al(OH),3,的制酸力，反映主要质量；,明胶的凝冻度，控制物理性能；,利福平的结晶度，影响生物利用度,均一性,含量均一性,如,“,含量均匀度,”,试验,一、,概 述,安全性,进行异常毒性、热原、降压物质和无菌等项目,纯度要求,对杂质限量进行检查,一、,概 述,例：纯度要求,Pethidine,Hydrochloride,盐酸哌替啶,无效异构体,I,无效异构体,II,二、杂质来源与种类,source and sorts of impurities,1.,制备过程中产生,酸度：,水解试剂带入,乙醇中不溶物,：,水解中间体,(,糊精,),SO,3,2,-,：,产品,用,H,2,SO,3,漂白,可溶性淀粉：,水解不完全,2.,贮藏过程中产生,外界条件影响：日光、空气、温度、湿度、,微生物等引起药物产生,例如：麻醉乙醚 醛及有毒的,过氧化物,(1),一般杂质：,在,多种药物中普遍存在的杂质。,(,Cl,-,SO,4,2-,Pb,As Fe),有害杂质,(,Pb,As),信号杂质,（,Cl,-,SO,4,2-,）：,考察生产工艺，,反映药物的纯度水平,(2),特殊杂质：,个别药物的生产及贮藏中引入的杂质。,杂质的种类,杂质的限量：药物中所含杂质的最大允许量。,限量表示,(,g/g,),：百分之几（,%,）,百万分之几（,10,-6,）,限量检查：,检查所含杂质是否超过杂质限量的规定，,通常不要求测定其准确含量。,3,、杂质的限量检查,（,limit test,）,杂质限量检查方法,取,一定量,(,CV,),与被检杂质相同的纯品或对照品配成对照品溶液，与,一定量,(,S,),药物供试溶液在相同条件下处理后，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过规定。,NaCl,对照液,葡萄糖,稀硝酸,10ml,硝酸银,1ml,稀硝酸,10ml,硝酸银,1ml,对照液浊度,供试液浊度,杂质限量的计算：,式中：,L,杂质的限度（,%,）,C,对照液浓度（,g/ml,）,V,对照液的加入体积（,ml)S,供试品的量,(g),注意,:,单位统一,例,1,：,对乙酰氨基酚中氯化物的检查：,样,2.0g,溶于,100ml,水中，取,25,ml,检查,Cl,-,，与标准,NaCl,溶液,(10g/ml)5ml,对照液相比，不得更深。,C=10g/ml,V=5.0ml,S=25,2.0,100=0.5g,第二节 一般杂质检查方法,条件：硝酸酸性条件（稀硝酸,10ml,）,反应试剂：硝酸银试液,1.0ml,杂质对照：,NaCl,(10,g/ml,),灵敏度范围：,5080,g /50ml,讨论：选择稀硝酸反应条件的意义。,一、氯化物（,Chloride,）检查,原理：,比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。,平行操作原则。,3.,若供试品有色，需经处理后方可检查。,注 意：,）干扰及排除,（,1,）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，,可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。,（,2,）内消色法：倍量法,供试品有色处理方法,二、重金属,（,Heavy Metals,）,的检查,1,、第一法 硫代乙酰胺法,适用对象：溶于水、稀酸和乙醇的药物,原 理：,Pb,2+,+,醋酸盐缓冲液,+,硫代乙酰胺,(CH,3,CSNH,2,),PbS,(,黄,棕黑,),条件：,介质：醋酸盐缓冲液,(pH 3.5)2ml,试剂：硫代乙酰胺,(CH,3,CSNH,2,)2ml,杂质对照液：,PbNO,3,(10,g/ml,),灵敏度范围：,1020,g /27ml,葡萄糖中重金属的检查：样,4.0g,溶于,23ml,水，加入,2ml,缓冲盐，依法检查，其重金属不得超过 百万分之五，取标准铅（,10g/ml,），,v=?,C=10g/ml L=5,10,-6,S=4.0g,V=2.0 ml,例,2,：,注意：供试品如有色，需经处理后方可检查。,1.,外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。,2.,内消色法。,3.,改用第四法，微孔滤膜过滤法。,第二法：,含芳环或杂环的有机药物,如苯佐卡因、甲硝唑,第三法,:,溶于碱的药物或在稀酸产生,沉淀的药物,如磺胺类、巴比妥类,第四法：,铅斑法,C,垫圈,(,外径,10mm,内径,6mm),D,滤膜,(,直径,10mm,孔径,3.0m),E,辅助滤板,CD,A,B,F,E,滤器下部,滤器上盖,连接头,微孔滤膜过滤法检查重金属装置,三、砷 盐,(arsenic),第一法 古蔡氏法,Gutzeit,第二法,Ag-DDC,法,白田道夫法,Bettendorff,国内外常用方法：,古 蔡 氏 法：,SbH,3,+HgBr,2,SbH,2,(HgBr)+HBr,锑斑,Zn+HCl,白田道夫法,检查砷盐仪器装置,8cm,18cm,有孔玻璃旋塞,导气管,AsH,3,发生瓶,二乙基二硫代氨基甲酸银法,Ag-,d,iethyl,d,ithio,c,arbamate,Ag-DDC,法,四、干燥失重,（,loss on drying,）,恒温干燥,干燥剂干燥,减压干燥,热分析法,thermal,analysis,TA,干燥失重物主要指水分,(,结晶水或吸附水,),或挥发性物质,在程序控制温度下,测量物质的质量与温度关系的方法,热重分析法,t,hermal,g,ravimetric,a,nalysis,TGA,:,差示热分析法,在程序控制温度下,测定供试品与,参比物质之间的温差,(T),随温,度变化的函数关系,d,ifferential,t,hermal,a,nalysis,DTA,:,草酸钙,(CaC,2,O,4,H,2,O),的热重曲线,G,1,G,2,G,3,1000,800,600,400,200,0,W,T,1,T,2,T,3,398,838,635,478,134,226,T,(),在温度,T,1,时,CaC,2,O,4,H,2,O CaC,2,O,4,+H,2,O,在温度,T,2,时,CaC,2,O,4,CaCO,3,+CO,在温度,T,3,时,CaCO,3,CaO+CO,2,样品,参比,加热炉,至信号放大器,加热器,导线,炉温,控制器,热差曲线的直线,吸热峰,放热峰,T,(),T,热差曲线示意图,差示热分析仪主要结构简图,盐酸多巴酚丁胺的,DTA-TGA,曲线,100,90,80,70,60,DTA,T(/min),196,233,15/min Program,1,、纯双氯青霉素转变成液态并降解,2,、加入乳糖,3,、加入硬脂酸镁,4,、加入硬脂酸，主成分峰消失,5,、单加入硬脂酸，主峰亦消失,0,100,200,T,1,2,3,4,5,DTA,扫描图,甲磺酸二氢麦角毒碱的,DSC-TGA,曲线,50,100,150,200,DSC,TGA,t,(min,),T,不纯物质的,DSC,图,不同纯度苯甲酸的,DSC,曲线,温度,97.2%,98.6%,标准品,温度,(),50 80 110 140 170 200 230 260 290,15.00,0.00,7.50,盐酸舍曲林晶型,的,DSC,曲线,mcal,/sec,温度,(),50 80 110 140 170 200 230 260 290,5.00,0.00,2.50,mcal,/sec,盐酸舍曲林晶型,的,DSC,曲线,有机溶剂残留量,测定法,有机溶剂 限度,%,限度,%,苯,0.01 0.0002,氯仿,0.005 0.006,二氧六环,0.01 0.038,二氯甲烷,0.01 0.06,吡啶,0.01 0.02,甲苯,0.01 0.089,环氧乙烷,0.001,0.001,Ch.P(95),Ch.P(2000),六、有机溶剂残留量测定,色谱系统与系统适用性试验,S,ystem,S,uitability,T,est,s,;,SST,s,以直径为,0.250.18mm,的二乙烯苯,-,乙基乙烯苯型高分子多孔小球作为固定相，柱温为,80170,；并,符合下列条件,：,用待测物的色谱峰计算的,N,应大于,1000,；,内标物与待测物的两个色谱峰的,R,1.5,；,每个标准溶液进样,5,次，所得待测物与内标物峰面积之比的,RSD,5%,；,若以,外标法,测定，所得待测物峰面积的,RSD,10%,嗅味及挥发性的差异颜色的差异溶解行为的差异旋光性质的差异吸附或分配性质的差异对光选择吸收性质的差异,第三节 特殊杂质检查,物理性质上差异：,酸、碱性,质的差异,氧化还原性,的差异杂质与一定试剂产生,沉淀,杂质与一定试剂产生,颜色,反应杂质与一定试剂反应产生,气体,化学性质上差异：,旋光性质,的差异,Ch.P,规定黄体酮在乙醇中的,比旋度,为：,186,198,黄体酮及其中间体的比旋度（,溶剂：乙醇,）,化合物,浓度,%,温度,D,黄体酮,1,1.4,20,25,+1934,醋酸双烯醇酮,0.9 20 -312,醋酸妊娠烯醇酮 ,1,常温,+202,220 260 300 nm,肾上腺酮,及,肾上腺素,的紫外吸收曲线,max,310nm,吸附或分配性质的差异薄层色谱法,TLC,一般要求：,颗粒直径,1040,m,薄层涂布：无粘合剂,含粘合剂：常加入,1015%,煅石膏,(CaSO,4,2H,2,O,180,烘,4h),或,0.50.7%,羧甲基纤维素钠水溶液,比移值,常 用 方 法：,杂质对照品法,供试品自身对照法,对照药物法,供试品,10,l,N-,甲基哌嗪,10l,50mg/ml,50g/ml,枸橼酸乙胺嗪,I,2,蒸气显色,规定,：,如显杂质斑点，不得多于,2,个，其颜色与对照品主斑点相比较，不得更深。,地塞米松磷酸钠,地塞米松,20mg/ml,0.20mg/ml,如有,12,个杂质点超过时，应不得深于,0.01%,对照液的主斑点。,其中有,1,个杂质点应不深于,0.002%,供试品的主斑点。,氨苯砜中检查“有关物质”,规定,：,0.01%,供试品,100g/ml,1%,供试品,10mg/ml,0.002%,供试品,20,g/ml,分类,柱填充剂,流动相,正相色谱,硅胶,极性小的有机溶剂,极性化学键合硅胶,正己烷,氯仿,二氧六环等,反相色谱,十八烷基硅烷键合硅胶,甲醇,/,水,乙腈,/,水,四氢呋喃,/,水,离子对色谱,ODS,RP,流动相中加离子对试剂,离子交换色谱,离子交换填料,电解质水溶液,排阻色谱,凝胶渗透,有机凝胶,有机溶剂,凝胶过滤,玻璃微孔球,水溶液,高效液相色谱法,HPLC,主 要 方 法：,峰面积归一化法,不加校正因子的主成分自身对照法,加校正因子的主成分自身对照法,：用于,有杂质对照品,时，,杂质的含量测定。,内标法加校正因子测定供试品中杂质的含量：用于,有杂质对照品,时，,杂质的含量测定。,外标法测定供试品中某个杂质或主成分的含量：用于,有杂质对照品,或杂质对照品易制备的情况。,供试品,供试品,+,内标,内标峰,内标峰,杂质,杂质,