分子生物学实验室安全常识.ppt

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,实验室安全管理,内容介绍,分子生物学实验安全常识,1.1,实验室电、气、水、火,1.2,化学试剂的安全使用,1.3,微生物的危害及处理,1.4,紫外线辐射的危害及防护,分子生物学实验安全常识,1.1,实验室电、气、水、火,连线：仪器连线必须使用带有接地的三根线的护套线，不可使用普通的塑料绞线。电话线可用普通的塑料绞线。,严禁私拉乱扯。,接地：仪器应有良好的接地，提高仪器的稳定性及安全系数。,维修：仪器出现故障时，应切断电源，立即向实验室负责人报告。维修仪器时必须切断电源，方可拆机修理。,墙电：不得私自对墙电进行维修、改造，该工作由实验室负责人进行计划，由相关专业人员进行维修、改造。,检查：如遇线路老化或损坏应及时地更换。,触电：断电或,绝缘脱离 急救,电灯：进入实验室，有需要时打开电源开关、排气扇；离开实验室时若无人请关闭电灯及排气扇。,空调：进入实验室，有需要时可打开空调，温度不得低于,27,；每天下班时实验室负责人将关闭空调。若在非上班时间内打开空调，离开时请关闭！,电！,危险,节约,分子生物学实验安全常识,1.1,实验室电、气、水、火,气！,搬运,：搬运或转动钢瓶时，不得用手执着开关阀移动。,使用,：按气瓶的类别选用减压器，安装时螺扣应拧紧，并检漏。,开启钢瓶：逆时针方向为开；先开总阀，后开减压阀。,关闭钢瓶：顺时针方向为关；先关总阀，后关减压阀。,气嘴保护：用死扳手夹紧气嘴后再开总阀。,安全,：气瓶内的气体不可用尽。,惰性气体：应剩余,0.05MPa,以上压力的气体。,可燃气体：应剩余,0.2Mpa,以上压力的气体。,氢 气：应剩余,2.0MPa,以上压力的气体。,存放,：分类分处存放,直立放置时要稳妥；气瓶要远离热源；避免曝晒和强烈振动；,一般实验室内存放气瓶量不得超过两瓶。,氢气瓶和氧气瓶不能同存一处。,分子生物学实验安全常识,1.1,实验室电、气、水、火,水！,上 水：水龙头或水管漏水时，应及时向实验室负责人报告，以便及时维修。,下 水：,水池内不得倒入培养基、琼脂糖胶等凝胶物质；清洗废液缸时请注意将其中的固体物质倒入到垃圾桶后才能冲洗，特别是,tip,和,eppendorf,管。,下水道排水不畅时，应及时向实验室负责人报告，以便及时疏通。,冷却水：输水管必须使用橡胶管，不得使用乳胶管；上水管与水龙头的连接处及上水管、下水管与仪器或冷凝管的连接处必须用管箍夹紧；下水管必须插入水池的下水管中。,纯净水：应按照“操作规程”进行操作；取水时应注意及时地关闭取水开关，防止溢流。,分子生物学实验安全常识,1.1,实验室电、气、水、火,火,报警：,119,（说明火源、火情、单位名称、地理位置，或明显标志）,措施：早发现、早处理、早报告,灭火：,学会使用灭火器（一拔、二握、三瞄、四扫）,沉着、冷静,易燃固体、易燃气体、易燃液体和带电物体着火时，可用,干粉灭火器灭火；,导线或电器着火时，应先断电，再用,干粉,灭火器灭火。,切不可用泡沫灭火器，此灭火器导电。,衣服着火时，应尽快地脱掉衣服，并用水灭火。或就地滚动，,切忌外跑。,防火：火灾不能预期、不能杜绝、只能预防,消除,火灾,隐患（电、火、气、试剂）,备逃生四件宝（灭火器、绳、手电筒、防毒面具）,禁止吸烟！,分子生物学实验安全常识,1.2,化学试剂的安全使用,标 识：自配试剂应贴标签，并注明化合物名称、浓,度、配制日期，以及配制人姓名。,总原则：,药品状态定口径，瓶塞取决酸碱性；,受热见光易分解，存放低温棕色瓶；,特殊试剂特殊放，互不反应要记清。,分子生物学实验安全常识,1.2,化学试剂的安全使用,易燃易爆 化学试剂,：一般将闪点在,25,以下的化学试剂列入易燃化学试剂，它们多是极易挥发的液体，遇明火即可燃烧。,有毒 化学试剂,：以较小剂量进入人体而导致疾病或死亡的才被划为有毒物质。,腐蚀性 化学试剂,：化学试剂碰到皮肤、粘膜、眼、呼吸器官都有及时清洗，如各种酸和碱、溴、苯酚等。,强氧化性 化学试剂,：包括过氧化物和含有强氧化能力的含氧酸及其盐，如硝酸铵、高氯酸及其盐、重铬酸及其盐等。,放射性 化学试剂,：同位素示踪技术的发展，广泛应用于生物化学与分子生物学。,由于其特殊性，该种试剂不得带入公共实验室，在各自实验室进行专项管理或者由学院进行统一管理。,不相容 化学试剂,：一些化学试剂在储存和操作过程中不能与其他物质接触，否则就发生爆炸，这些化学试剂称为不相容化学试剂。如：叠氮化物通常用作溶液中的抗菌剂，由于轻微碰撞就可能造成叠氮化铜的爆炸，因此不能与铜接触（如污水管及管道设施）。,分子生物学实验安全常识,1.2,化学试剂的安全使用,EB,EB,是一种强诱变剂（可能造成遗传性危害），直接接触有中等毒性。,EB,可以通过皮肤吸收，因此应当避免一切与,EB,的直接接触。,EB,对皮肤，眼睛，口腔和上呼吸道系统有刺激性作用。应将,EB,安全密封，并密闭存放于干燥避光处。,提取组织和细胞,RNA,的一种重要试剂，在提取,RNA,时一定要在通风橱进行。如皮肤接触,Trizol,，请立即用大量去垢剂和水冲洗，废液埋入地下。,Trizol,分子生物学实验安全常识,1.2,化学试剂的安全使用,RNA,酶的强抑制剂，一种潜在的致癌物质。操作时戴口罩，在通风橱中进行。沾到手上立即冲洗，废液通过废液道排泄。,DEPC,(Diethylprocarbonate),(,二乙基焦碳酸酯,),常用于,DNA,和,RNA,提取，对皮肤、眼睛、黏膜和呼吸道有强烈的刺激作用和腐蚀性，易损害肝和肾。,操作时戴手套在通风橱里进行,，废液收集后埋入地下。,CHCl,3,（,Chloroform,，氯仿）,Acrylamide,（丙烯酰胺）,DNA,测序、,SSR,及蛋白质分离等技术中作电泳支持物，具神经毒性，聚合后毒性消失。操作时戴手套在通风橱内进行，聚合后的聚丙烯酰胺凝胶没有毒性，可随普通垃圾一起扔掉，千万不要倒入下水道,.,。,分子生物学实验安全常识,1.2,化学试剂的安全使用,DMSO,（二甲亚砜）,是一种既溶于水又溶于有机溶剂的非质子极性溶剂，常用作细胞的冻存液和配制,AS,。皮肤沾上之后用大量的水洗及,1%5%,稀氨水洗涤。,有毒，易损害眼睛。质粒提取时作裂解液破坏细胞膜和,Southern,杂交时的洗膜液中的去垢剂。戴合适的手套和安全护目镜，不要吸入其粉末。,十二烷基硫酸钠,(SDS),强神经毒性，防止误吸，操作时快速，存放时密封。,TEMED,分子生物学实验安全常识,1.2,化学试剂的安全使用,很强的还原剂，散发难闻的气味。可因吸入、咽下或皮肤吸收而危害健康。当使用固体或高浓度储存液时，戴手套和护目镜，在通风橱中操作。,DTT,二硫苏糖醇,一种高强度毒性的胆碱酯酶抑制剂。它对呼吸道黏膜、眼睛和皮肤有非常大的破坏性。可因吸入、咽下或皮肤吸收而致命。戴合适的手套和安全眼镜，始终在化学通风橱里使用。在接触到的情况下，要立即用大量的水冲洗眼睛或皮肤，已污染的工作服作为有害废物处理。,PMSF,苯甲基磺酰氟,引起严重的眼睛刺激和灼伤。可因吸入、咽下或皮肤吸收而受害。戴合适的手套和护目镜。,Triton X-100,分子生物学实验安全常识,1.2,化学试剂的安全使用,对黏膜和上呼吸道组织、眼睛和皮肤有极大危害性。吸入可致命。操作时戴合适的手套、安全眼镜和防护服。始终在通风橱里操作，操作完后彻底洗手。,过硫酸铵,(NH4),2,S,2,O,8,毒性非常大。它阻断细胞色素电子运送系统。含有叠氮钠的溶液要标记清楚。可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。戴合适的手套和安全护目镜，操作时要格外小心。,叠氮钠（,NaN,3,）,染料咽下可致命或引起眼睛失明，通过吸入和皮肤吸收是有毒的。其可能的危险是不可逆的效应。戴合适的手套和安全护目镜。在化学通风橱里操作，不要吸入其粉末。,吉姆萨（,Giemsa,）,分子生物学实验安全常识,1.3,微生物的危害及处理,生物安全,重点任务：实验室感染的控制、实验室对周围环境影响的控制以及实验室和感染性实验材料的管理控制。,世界大多国家都是以致病微生物的危害程度进行分类，形成不同的实验室安全防护等级。我国一般以,BSL-1,、,BSL-2,、,BSL-3,、,BSL-4,表示实验室的相应生物安全防护水平,;,以,ABSL-1,、,ABSL-2,、,ABSL-3,、,ABSL-4,表示动物实验室的相应生物安全防护水平。,病原微生物实验室生物安全管理条例,中华人民共和国传染病防治法,中华人民共和国传染病防治法实施办法,中华人民共和国国境卫生检疫法,中华人民共和国进出境动植物检疫法,中华人民共和国卫生行业标准,微生物和生物医学实验室生物安全通用准则,实验室生物安全通用要求,动物病原微生物菌（毒）种保藏管理办法,高致病性动物病原微生物实验室生物安全管理审批办法,我国实验室生物安全法规,1.3,微生物的危害及处理,分子生物学实验安全常识,重组核酸技术和生物安全,方法,121,15-40min,：适用于所有污染物的灭菌,紫外线照射灭菌：空气、物体表面，无菌室或污染区域照射，至少,30min,乙醇，次氯酸钠 消毒,分子生物学实验安全常识,1.4,紫外线辐射的危害和防护,紫外辐射是指波长范围在,100nm,400nm,的光辐射，一般把,100nm,280nm,称作,UVC,，把,280nm,315nm,称作,UVB,，把,315nm,400nm,称作,UVA,。其中我们,观察胶体,用的最多的就是,280nm,315nm,的紫外线,。,紫外线的有害效应主要是由于紫外线对脱氧核糖核酸（,DNA,）的作用造成的。最,有害,的效应是细胞致死，其它的效应则包括,致突、致癌、干扰,DNA,、核糖核酸（,RNA,）和蛋白质的合成、细胞分裂的延迟、以及在通透性和能动性上的变化,等。,1.,紫外光对眼睛的损伤,白内障,被认为过量紫外光辐射的主要原因，经紫外光照射后，射线大部分被角膜上皮细胞核蛋白吸收，导致细胞核膨胀，碎裂和细胞死亡，以至损伤眼角膜和晶状体，导致浑浊。总的说来，紫外光辐射增加，人类的白内障患者增加。,分子生物学实验安全常识,1.4,紫外线辐射的危害和防护,2,、,紫外光对人皮肤的损伤,紫外光的影响有积累作用，它的主要机理：蛋白质受紫外光照射后，形成光解产物，此外，其溶解度和粘度，对热变性的敏感性及荧光等物理化学和光学性质均有显著的改变。紫外光对皮肤的作用分为,急性作用和慢性作用,。急性作用表现为,红斑效应,其症状为,水肿脱皮,，全身症状有寒战，发烧，恶心，罕见循环衰竭。慢性作用如致,皮肤老化，色素沉着，加速老化，甚至引起肿瘤,。轻者皮肤出现水肿性红斑，重者会出现水疱或大疱，还可伴有休克，发热，畏寒，恶心，心悸和头昏等症状。,3,、,紫外光对其他部位的损伤,紫外光辐射对免疫系统的影响，免疫系统的一些成分存在于皮肤中，皮肤暴露在紫外光下，使得免疫系统受紫外光辐射，使其功能受到干扰。研究表明，紫外光辐射的,免疫抑制作用可导致皮肤癌,，同时引起一些传染病和其他一些疾病。,分子生物学实验安全常识,1.4,紫外线辐射的危害和防护,在实验室里常用的紫外光源包括,手提式紫外灯和紫外透射仪、凝胶成像系统,。只能通过吸收有害波长的滤片或安全玻璃片才能观察。在紫外光下操作时要戴合适的预防性手套。,应佩戴具有紫外线防护功能的护目镜和,/,或防护面罩，并遮蔽暴露的皮肤。,紫外照射消毒后由于空气中臭氧富集，不宜立即开始工作，应在停止紫外照射,30 min,后开始工作，有条件的实验室，可安装无臭氧紫外灯。,超净工作台中进行紫外照射消毒,后，也应用强风进行吹扫后再进行工作，以免臭氧危害身体健康。,胶房,EB,清除方案,B,除污剂：,4.2,克亚硝酸钠（,NaNO,2,和,20,毫升,的次磷酸,(H,3,PO,2,)(50,),，加入,300,毫升水。,用纸巾蘸取去污剂擦洗被污染的区域，再用纸巾加自来水清洗,5,次，每次实用的纸巾都必须是干净未污染的。,实验室安全守则,不要在实验室吃东西、喝水和抽烟,不要穿漏脚趾的鞋或短裤,在实验过程穿实验服,不在试验区域以外的区域穿实验服,事先了解你所接触的每个药品的组分,实验室工作礼节,公用试剂剩下或快用完时，多配置或订购备用,不要移动物品或仪器在试验区域内的位置,不要到处乱放东西、实验完毕台面收拾干净,没有许可不要使用别人的专用试剂或缓冲液,设备的破损及时报告或提出警告,请问，而不是命令；他人是合作伙伴,实验室资源外借务必通过老板！,建议胶房,UV,护目镜购置,毕业生请开始整理自己的重要质粒、菌种、重要引物以及全长数据。,自用试剂转交师弟妹或放公用盒子。,