细胞朊蛋白.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第二十九章,人乳头瘤病毒,(,Human Papillomavirus,HPV,),是乳多空病毒科（,Papovaviridae,）、乳头瘤病毒属的一个种。,引起人皮肤、粘膜的增生性病变，临床表现为良性疣或乳头状瘤。,HPV,也是尖锐湿疣（,condyloma acminatum,，,CA,）的病原体。,某些型别的,HPV,可使组织发生癌变，引起子宫颈癌等。,球形，直径,52-55 nm,，,20,面体对称，无包膜，环状,dsDNA,，,3,个基因区组成,早期区,含有,6,个,ORF,E,1,、,E,2,基因,:,与病毒复制转录调控有关,E,5,、,E,6,、,E,7,基因,:,诱导细胞转化，,晚期区,编码结构蛋白,L,1,和,L,2,是衣壳的主要蛋白和次要蛋白。,上游调控区,复制起点和调控元件,一）生物学性状,HPV,增殖方式独特，,与上皮细胞的分化阶段相关，因此不能在常规组织细胞中培养。,成熟病毒仅在角质细胞中产生，抗原接触免疫系统的机会少，免疫原性低，易形成持续感染。,一）生物学性状,HPV,具有高度的宿主和组织特异性，对人的皮肤和粘膜上皮细胞具有特殊的亲嗜性，在易感细胞核内增殖形成核内嗜酸性包涵体，使感染细胞转变为空泡细胞。,HPV,不能在实验动物中增殖，组织培养也未成功。,一）生物学性状,培养特性,传播途径,直接接触感染,先天感染（产道感染）,性感染,所致疾病,不引起病毒血症,临床表现多样性,与宫颈癌有关,二）致病性与免疫性,扁平疣：,常由,HPV 3,和,10,型引起。,6,、,11,、,16,、,18,、,31,和,33,等型别为粘膜嗜性,HPV,，感染泌尿生殖道及口腔。,生殖器疣又称尖锐湿疣（,condylemata acuminata,）：,性传播疾病（,STD,），主要由,HPV-6,感染所致，也可由,HPV-11,引起。,77,个血清型，根据感染部位不同可将,HPV,分为嗜皮肤性和嗜粘膜性两大类，两类之间有一定交叉。,二）致病性与免疫性,某些型别,HPV,与一些肛门、生殖器肿瘤发生密切相关。根据,HPV,的致癌潜力将其分为：,高危型：,主要包括,HPV 16,、,18,、,31,、,33,、,45,、,35,、,39,、,51,、,52,和,58,等型别，其中,16,、,18,、,33,型,与,子宫颈癌,发生密切相关；,低危型,：主要包括,HPV6,和,11,型,。,二）致病性与免疫性,扁平疣,尖锐湿疣,肛周疣,三）微生物学检查,（一）醋酸白试验,（二）细胞学检查,（三）组织病理学检查,（四）核酸分子杂交技术,1.,斑点杂交法,2.,原位杂交法,3.DNA,印迹法,（五）聚合酶链反应（,PCR,）,防治：,加强教育、严格社会管理,治疗,:,1.,局部敷药，如,5%5-,咪奎莫特，,5%5-,氟尿嘧啶；,25%,竹叶脂液。,2.,用激光、冷冻、电灼或者手术去除疣；,3.,局部注射干扰素。,4.,复发应连续或者综合治疗。,四）防治原则,第三十一章,狂犬病毒,（,Rabies virus,）,狂犬病是人畜共患的自然疫原性传染病，目前尚无有效的治疗方法，一旦发病，死亡率近乎,100%,。,狂犬病病毒,是一种嗜神经性病毒。属于,弹状病毒科,(Rhabdoviridae),、狂犬病毒属,(Lyssavirus),。,多种野生动物和家畜等可以发生狂犬病病毒的自然感染与传播，并且可以通过咬伤、抓伤或密切接触等形式感染人类而引起,狂犬病,。,一）生物学性状,形态与结构,子弹头形状,:,一端钝圆，另一端扁平，平均大小为,130-300 nm60-85 nm,核酸：,-ssRNA,RNA,基因组编码,5,种蛋白,:3-N,P,M,G,L-5,有一层磷脂层包被，包膜上嵌有钉状突起,在易感动物或人的中枢神经细胞、主要是,大脑海马回的锥体细胞,中增殖时，可以在胞质内形成一个或多个、圆形或椭圆形、直径为,20-30nm,的嗜酸性包涵体，称,内基小体（,Negri body,）,。,培养特性,一）生物学性状,糖蛋白,G:,病毒表面，刺激机体产生中和抗体、血凝抑制抗体和细胞免疫应答；,核蛋白,N,：,病毒核心，属特异性抗原，能够以核蛋白,(RNP),的形式诱生保护性的细胞免疫应答，但不能刺激机体产生中和抗体。,主要抗原,一）生物学性状,野毒株（,wild strain,）或街毒株（,street strain,）,:,从自然感染的动物体内分离到的病毒，潜伏期长，毒力强,固定毒株（,fixed strain,）：,将野毒株接种实验动物脑内，并连续传,50,代以上获得的潜伏期为,4-6,天的毒株，潜伏期短，毒力弱。,变异,一）生物学性状,病毒抵抗力不强。,对热敏感，,60,经,30 min,或,100 2 min,即可灭活。,易被强酸、强碱、乙醇、乙醚等灭活。,肥皂水、离子型或非离子型去垢剂亦有灭活作用。,抵抗力,一）生物学性状,主要是,病犬,（,80-90%,），其次是由,猫和狼,。发达国家的野生动物如,狐狸、食血蝙蝠、臭鼬和浣熊等,逐渐成为重要传染源。,隐性感染的犬、猫等动物,亦有传染性。,患病动物,唾液中,含有大量的病毒，于,发病前,5d,即具有传染性,传染源,二）致病性与免疫性,病毒主要通过被咬伤、抓伤的,皮肤损伤,处进入人体。,粘膜,也是病毒的侵入门户，如患病动物的唾液污染眼结膜等，也可发病。,传播途径,二）致病性与免疫性,狂犬病的传播,动物狂犬病,1-,野生动物,2-,家畜动物,人类狂犬病,野生食肉动物,翼手目动物,狐狸、臭鼬、獾、狼,吸血蝙蝠,食果类,C.S.,食虫类,家畜型,食肉动物,家畜型,食草动物,狗猫,牛绵羊,山羊,人类,人类,发病机制,人被病犬咬伤,病毒随犬唾液经伤口进入人体,（病毒在入侵部位的肌细胞中增殖）,通过神经肌肉接头侵入外周神经,细胞,-,细胞间传递形式,神经节直至中枢神经系统（脑组织中病毒迅速增殖扩散）,沿传出神经传至唾液腺及其他组织。,二）致病性与免疫性,laboratory diagnosis,dogs and cats in a rabies endemic area should beheld for 10 days for observation,Histopathology:Negri bodies,Rapid virus antigen detection,therapy,wound treatment,passive immunization,horse anti-rabies serum,human rabies immune globulin,active immunization:inactivated vaccine,犬患狂犬病按症状分为,狂暴型,和,麻痹型,两种：,狂暴型分前驱期、兴奋期、麻痹期；,麻痹型病犬以麻痹症状为主，兴奋期极短或无。犬狂犬病整个病程不超过,5-6 d,。,病猫以狂暴型为多，病程较短，症状与犬相似。因其与人接触密切，咬伤人的危险性甚大。,二）致病性与免疫性,前驱期,发热、头痛、乏力、周身不适等症状，对痛、声、光等刺激较敏感，并有咽喉紧缩感。约,50,80%,病人伤口部位及其附近有麻木或蚊走感；,兴奋期或痉挛期,处于兴奋状态，如极度恐惧、烦燥，对水声、风等刺激非常敏感，易于引起发作性咽肌痉挛、呼吸困难等。部分患者出现特殊的恐水症状，在饮水、见水、流水声或谈及饮水时，可引起严重咽喉肌痉挛，称为,“恐水症”（,hydrophobia,）。,随后，部分病人出现精神失常、定向力障碍、幻觉、谵妄等。病程进展很快；,麻痹期,痉挛减少或停止，出现弛缓性瘫痪，神志不清，最终因呼吸麻痹和循环衰竭而死亡。,二）致病性与免疫性,典型临床表现,体液免疫：,感染后机体产生,中和抗体,。有中和游离状态的病毒、阻断病毒进入神经细胞内的作用。,细胞免疫：,杀伤性,T,淋巴细胞,特异性地作用于病毒的蛋白抗原，引起病毒溶解；单核细胞产生的,IFN,和,IL-2,具有抑制病毒复制和抵抗病毒攻击的作用。,免疫性,二）致病性与免疫性,(,一,),标本直接检查,1,显微镜检查,内基小体,2.,抗原检查,（,1,）免疫荧光法,（,2,）免疫酶法,（,3,）斑点免疫结合法（,DIA,）,3,核酸检测：,用,RT-PCR,法检测,标本中狂犬病病毒,RNA,。,三）微生物学检查法,（二）分离培养,（三）抗体检测,（四）捕捉动物观察,捕捉消灭野犬，加强家犬的管理和普及接种犬用狂犬疫苗是预防狂犬病的重要措施。,人被患病动物咬伤、抓伤或其他带毒的实验用具伤害皮肤和肌肉时，应采取妥善处理伤口和特异性防治相结合的措施。,四）防治原则,伤口处理,立即,用,20%,肥皂水、清水充分冲洗数分钟，然后用,5%,碘酒烧灼伤口。若伤口过深，可作清创术。,再用,3%H,2,O,2,溶液，,0.1%,高锰酸钾或,0.1%,新洁尔灭处理。,最后,伤口周围用抗狂犬病病毒免疫球蛋白作浸润性注射。剂量为,40 IU/kg,。,四）防治原则,预防接种,接种,狂犬疫苗,是预防发病的重要措施。即所谓的,预防性治疗,。由于狂犬病的潜伏期长，从被咬伤到发病一般经过几十天或几个月，在此期间尽早接种疫苗可免于发病。,严重咬伤者，除应给予,高效价免疫血清,进行被动免疫外，仍需要接种狂犬疫苗，可收到更佳效果。,四）防治原则,第三十二章 朊粒（,prion,）,传染性蛋白粒子,(proteinaceous infectious particle),个体微小,(300 nm),，,不含核酸,，,构象异常的蛋白酶抗性,蛋白,，称为朊蛋白,(PrP),。,对各种理化作用的,抵抗力强，具有传染性。,传染性海绵状脑病,(transmissible spongiform encephalopathies,TSEs),的病原体。,是一种不含核酸和脂类的疏水性糖蛋白。,细胞朊蛋白,(cellular isoform of PrP,PrP,C,),：,正常人和动物的神经细胞编码的一种糖基化膜蛋白，分子量为,33-35,10,3,，称为,PrP33-35,，命名,PrP,C,，,它,对蛋白酶、去污剂敏感,。,羊瘙痒病朊蛋白,(scrapie isoform of PrP,PrP,SC,),：,分子量为,27-30,10,3,，称为,PrP27-30,，能,抵抗蛋白酶,的消化作用。,PrP,C,和,PrP,SC,的一级结构完全相同，但其空间结构不同,一）生物学性状,PrP,c,PrP,sc,分子构型,4,个,-,螺旋，,无,折叠,2,个,-,螺旋,4,个,折叠,对蛋白酶,K,抗性,敏感,抗性,存在,正常及感染动物,感染动物,致病性,无害,具致病性与传染性,PrP,c,和,PrP,sc,主要区别,对理化因素的抵抗力强,对,甲醛、乙醇、蛋白酶,和放射性核素等具有抵抗力,消毒常用,5%,次氯酸钠或,2 mol/L,的氢氧化钠浸泡手术器械,2 h,，,高压灭菌,需用,202 kPa,、,134,处理,1 h,，以彻底灭活,朊粒,一）生物学性状,抵抗力,共同特征：,潜伏期长（可达数年至数十年之久）一旦发病即呈慢性进行性发展，最终死亡。,病理特点,：,朊粒致,中枢神经系统退化性病变,，大脑和小脑的神经细胞融合、消失，形成多数小空泡并伴有星状胶质细胞增生，出现,海绵状改变,为特征，病变部位,无炎症反应,，而是由朊粒蛋白（,PrP,）大量堆积在神经组织里，形成,淀粉样斑块,二）致病性与免疫性,脑组织海绵样改变，空泡形成,临床表现,：,痴呆、共济失调、震颤等中枢神经系统症状。,致病机制：,未明。目前认为，,PrP,C,转变为,PrP,SC,是疾病发生的基本条件，,PrP,SC,在中枢神经系统细胞内聚集而导致疾病的发生。,二）致病性与免疫性,动物,prion,病,人类,prion,病,羊瘙痒病,(scrapie of sheep and goat),库鲁病,(Kuru disease),水貂传染性脑病,(transmissible mink encephalopathy,TMM),克,-,雅病,(Creutzfeld-Jakob disease,CJD),鹿慢性退行性变,(chronic wasting disease of deer,CWD),格斯特曼综合征,(Grestmann-Straussler Syndrome,GSS),牛海绵状脑病,(bovine spongiform encephalopathy,BSE),致死性家庭失眠症,(fatal familial insomnia,FFI),猫海绵状脑病,(feline spongiform encephalopathy,FSE),克,-,雅病变种,(variant CJD,v-CJD),人和动物,prion,病,normal,在欧洲已流行了近,300,年（第一个被发现的,TSE,）,感染动物表现为消瘦、步态不稳、脱毛、麻痹等，因病羊由于瘙痒而常在围栏上摩擦身体而得名，病死率极高。,1.,羊瘙痒病,(scrapie of sheep and goat),俗称,疯牛病,(mad cow disease),，,1986,年首次在英国报道。该病潜伏期,4-5 y,，发病初期表现为体质变差，体重减轻，产奶量下降等非特异性症状。随后神经系统症状逐步明显，出现运动失调、震颤等，由于病牛常表现出感觉过敏、恐惧甚至狂乱，因此俗称“疯牛病”。,2.,牛海绵状脑病,(bovine spongiform encephalopathy,BSE),3.,颤抖病（,Kuru Disease,）,病人小脑受损，产生共济失调和震颤。“,Kuru”,一词是当地方言，用来形容本病颤抖和跳动的特征,Kuru,病的潜伏期为,5-30,年，早期症状为运动失调、颤抖，晚期出现痴呆。病程一般不超过,1,年，大多在,6-9,个月内死亡,当地有宗教性,食尸恶习,，这是感染本病的原因,Kuru disease,4.,克雅病（,CJD),又称,传染性痴呆病,或,早老性痴呆病,，是一种致命性人海绵状脑病,潜伏期可达数十年，开始出现精神、感觉方面的症状，随后出现运动失调，晚期出现肌肉痉挛并伴有痴呆，多在,5-12,个月内死亡,现已证实此病是由朊粒蛋白,PrPSC,大量沉积在神经组织里，形成淀粉样斑块，引起,致死性中枢神经系统慢性退化性疾病,有传染型、家族遗传型和散发型等三型,传染型：,占,10%,，主要由医源性传播，如角膜移植和硬脑膜移植等，或使用污染的手术器械，或使用人垂体制备的生长激素等，多于手术后,18,个月发病,家族遗传型：,占,10-15%,，,GSS,综合征,:,主要临床特征是小脑运动失调，眼球震颤和步态异常，后期出现痴呆；,致死性家族性失眠,:,是一种特别罕见的遗传性失调，临床特点是睡眠紊乱与智力下降,散发型,：最为常见，占,75-80%,一种新型的人类传染性海绵状脑病，,1996,年由英国,CJD,监测中心首次报导。本病与典型的,CJD,在好发年龄、临床特征、脑电图和病理等方面有明显变化，因此被认为是新变种,(new variant CJD,v-CJD),。,5.,克,-,雅病变种,(variant CJD,v-CJD),1.,免疫组化技术,是目前确认,TSE,的有效手段。,2.,免疫印迹技术,蛋白印迹,(Western blotting),检测,PrP,SC,是一种简单而敏感的诊断方法。,3.,基因分析,从病人外周血白细胞中提取,DNA,，对,20,号染色体,prion,基因进行分子遗传学分析，可协助诊断家族性,CJD,患者。,三）微生物学检查法,朊粒感染所致疾病目前,均无治疗方法,应及早建立长期监督、监测和报道疫情的机构，采取有效措施，杜绝,PrP,的传入和扩散,杜绝医源性感染：,患者和任何退行性神经系统疾病患者的器官移植,禁止用任何动物脏器加工成牛或其他动物的饲料,，加强进口牛、羊制品和饲料的检疫,强化消毒,：由于朊粒对理化因子的抵抗力强，高压灭菌时需,134,，处理,1,小时，手术器械如需化学消毒时选用有效制剂（如,5%,次氯酸钠等）浸泡,1,小时以上,四）防治原则,性传播疾病,(sexually transmitted disease,STD),：,通过性行为引起流行的传染病。,淋球菌,-,淋病，,HSV-2-,生殖器疱疹，,HIV-AIDS,，,HPV-,尖锐湿疣，,溶脲脲原体、沙眼衣原体,-,非淋菌性尿道炎，,梅毒螺旋体,-,梅毒,可引起性传播疾病的微生物,结核分枝杆菌、链球菌属（链球菌、肺炎链球菌）、脑膜炎奈瑟菌,流行性感冒病毒、麻疹病毒、冠状病毒和,SARS,冠状病毒,肺炎支原体,其它：,白喉棒状杆菌、百日咳鲍特菌、军团菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、副流感病毒、水痘,-,带状疱疹病毒、风疹病毒、腮腺炎病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、鼻病毒,呼吸道传播的微生物,埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、弧菌属、幽门螺杆菌属,HAV,、,HEV,、肠道感染病毒,其它：,肉毒梭菌、空肠弯曲菌,消化道传播的微生物,葡萄球菌属、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌,其它：,铜绿假单胞菌、诺卡菌属、狂犬病毒、汉塞巴通体,创伤感染的微生物,炭疽芽孢杆菌、布鲁菌、麻风分枝杆菌,疱疹病毒、汉坦病毒、埃博拉病毒,钩端螺旋体、沙眼衣原体,浅部感染真菌,接触感染的微生物,HBV,、,HCV,、,其它：,HDV,、,HGV,、输血传播病毒（,transfusion transmitted virus,TTV,）、人类嗜,T,细胞病毒,I,型、,II,型,输血及血制品传播的微生物,鼠疫耶尔森菌、,流行性乙型脑炎病毒、,伯氏疏螺旋体、立克次体,节肢动物传播的微生物,结核分枝杆菌、衣原体、疱疹病毒、水痘,-,带状疱疹病毒、,EB,病毒、,HIV,、,可潜伏感染的微生物,溶脲脲原体、梅毒螺旋体、钩端螺旋体、疱疹病毒、巨细胞病毒、,HIV,、,可垂直传播的微生物,