普通电泳的原理.ppt
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- 普通 电泳 原理
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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,普通电泳的原理,生物大分子(如蛋白质,核酸,多糖等)大多都有阳离子和阴离子基团,称为两性离子。常以颗粒分散在溶液中,它们的静电荷取决于介质的,H+,浓度或与其他大分子的相互作用。,在电场中,带电颗粒向阴极或阳极迁移,迁移的方向取决于它们带电的符号,这种迁移现象即所谓电泳。,电泳的样品支持物,生物实验大多为凝胶。,普通电泳设备组成,电泳仪,+,电泳槽,普通电泳槽分三种:,水平电泳,垂直电泳,转移电泳,水平电泳,用,琼脂糖凝胶,作支持物的电泳法。借助琼脂糖凝胶的分子筛作用,核酸片段因其分子量或分子形状不同,电泳移动速度有差异而分离。,是基因操作中常用的重要方法。,水平电泳槽图片,湿转电泳,将混杂的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,转移至固相膜上,,再用标记的抗体或二抗与之反应,以显示膜上特定的蛋白条带。,整个电泳过程,完全浸在缓冲液中,完成的称为湿转电泳,湿转电泳槽图片,半干转电泳,将混杂的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,转移至固相膜上,,再用标记的抗体或二抗与之反应,以显示膜上特定的蛋白条带。,膜和滤纸均为浸湿,而非整个电泳过程完全浸在缓冲液中完成的称为半干转电泳,半干转电泳槽图片,安全盖,带有弹簧锁的负电极装置,滤纸,凝胶,膜,滤纸,带弹簧的正电极平台固定于,4,个固定栓上,电缆,底座,普通电泳仪大体分三种,基础电泳仪,高电流电泳仪,高电压电泳仪,基础电泳仪,参数:一般电压为,几百伏特,,电流为,几百毫安,。,应用:主要用于,水平电泳、垂直电泳、湿转电泳,高电流电泳仪,参数:一般电压为,几百伏特,,电流为,几千毫安,。,应用:主要应用于水平电泳、垂直电泳、湿转电泳、,半干转电泳,高电压电泳仪,参数:一般电压为,几千伏特,,电流为,几百毫安,。,应用:主要应用于,等电聚焦电泳、,DNA,测序电泳,等。,THANKS,!,具体操作及注意事项请见下一个,PPT,展开阅读全文
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