环境监测实验3.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,环境监测实验,董树刚 刘阳,2010年10月,实验五 海水无机氮的测定,一、亚硝酸盐的测定,二、硝酸盐的测定,三、氨氮的测定,实验五 海水无机氮的测定,三、氨氮的测定靛酚蓝分光光度法,原理,氨氮的测定是在弱碱性介质中，以亚硝酰铁氰化钠为催化剂，氨与苯酚及次氯酸盐反应生成靛酚蓝，在 640nm处测定吸光值，用标准曲线法测定。,三、氨氮的测定靛酚蓝分光光度法,仪器,可见光分光光度计,试剂,（l）铵标准储备液：,称取0.4716克硫酸铵（NH,4,）,2,SO,4,（预先在110烘1小时，置于干燥器中冷却），溶于少量水中，加水定容至l000mL，混匀，加lmL三氯甲烷，振摇混合，贮于棕色试剂瓶中保存在冰箱中，此溶液浓度为100mgL-1一N，铵标准使用液：,取上述按溶液10mL于 l00mL容量瓶中定容，配成铵标准使用液，浓度为l0mgL-1一N，即lmL含氨氮10g，临用时配制。,三、氨氮的测定靛酚蓝分光光度法,试剂,（2）480g/L柠檬酸钠溶液：取240g柠檬酸钠（Na,3,C,6,H,5,O,7,2H,2,O）溶于500mL水中，加入0.4g氢氧化钠和数粒防爆沸石，煮沸除氨直至溶液体积小于500mL，冷却后用水稀释至500mL，盛于聚乙烯瓶中。,（3）苯酚溶液：取38g苯酚（C,6,H,5,OH）和400mg亚硝酰铵氰化钠Na,2,Fe（CN）,5,NO2H,2,O，溶于少量水中，稀释至1000mL，混匀，盛于棕色试剂瓶中，冰箱内保存。,三、氨氮的测定靛酚蓝分光光度法,试剂,（4）次氯酸钠使用液,用0.5molL,-1,的氢氧化钠溶液（10g氢氧化钠溶于1000mL水中，加热蒸发至500mL）稀释一定量的已标定的次氯酸钠溶液，使其含有1.5mg/mL有效氯，盛于聚乙烯瓶中保存于冰箱中。,三、氨氮的测定靛酚蓝分光光度法,操作步骤,l）绘制标准曲线：,a）取0.00、0.15、0.50、0.45、0.60、0.75mL氨氮标准使用液于6支50mL具塞比色管中，加水至标线，混匀。系列各点的浓度分别为0、0.030、0.060、0.090、0.12、0.15mgL,-1,-N。,b）在上述各比色管中各加入1.5mL柠檬酸钠溶液混匀，再加入1.5mL苯酚显色液，混匀，最后加入1.5mL次氯酸钠使用液混匀，放置3小时以上（海水样品6小时以上）。,c）以水为参比，用分光光度计，测定其640nm吸光度。（以Ai-A0）为横座标，氨氮浓度为纵座标，绘制标准曲线。,三、氨氮的测定靛酚蓝分光光度法,操作步骤,2）水样测定,取已过滤澄清的待测水样50mL分别置于50mL 具塞比色管中，绘制标准曲线的显色步骤进行显色，并测定水样的吸光度。,在标准曲线上查出相应的氨氮浓度。或用线性回归方程计算水样的氨氮浓度。,三、氨氮的测定靛酚蓝分光光度法,3）对于海水或河口区水样，若绘制标准曲线用的是淡水（无氨蒸馏水或等效水），则水样的吸光度应根据所测水样的盐度乘上相应的盐误差校正系数f，再求水样氨氮浓度。,盐误差校正系数表,三、氨氮的测定靛酚蓝分光光度法,对于过滤后仍混浊的水样，则需测定水样未显色时的640mm的吸光度A，用显色后的水样光密度值减去A,w,值后，再求水样的氨氮浓度。,实验六 海水无机磷的测定,一、原理,海水中无机磷的测定可用磷钼蓝法。活性磷与钼酸铵反应生成磷钼黄，在酒石酸锑钾的存在下，再被抗坏血酸还原为磷钼蓝，在680nm 或882nm处有吸收峰，可以用分光光度法测定。,实验六 海水无机磷的测定,二、仪器,25mL具塞比色管,移液管,分光光度计,实验六 海水无机磷的测定,三、试剂,l）磷标准溶液,磷标准储备液：,称取1.318g磷酸二氢钾（KH,2,PO,4,）（预先在110115烘1-2小时，置于干燥器中冷却），溶于10mL l+2硫酸中，加水定容到1000mL，混匀，加1mL三氯甲烷，振摇混合，贮于棕色试剂瓶中保存于冰箱中，此溶液浓度为300mgL,-1,-P。,磷标准使用液,取上述磷溶液1mL 定容到100mL，配成磷标准使用液，浓度为3mgL,-1,-P，临用时配制。,实验六 海水无机磷的测定,三、试剂,（2）测磷混合液,将45mL14%钼酸铵溶液,加入,200mL 1+2硫酸溶液中，再加入5mL3%酒石酸锑钾溶液，混匀，贮于棕色玻璃瓶中，溶液变混浊时应重配。,（6）抗坏血酸溶液：称取20g抗坏血酸（C,6,H,8,O,6,）溶解于200mL水中，避光04保存可以使用1周。,实验六 海水无机磷的测定,四、测定步骤,1）绘制标准曲线：,a）取0.00、0.25、0.50、1.00、1.50、2.00mL磷酸盐标准使用液于25mL具塞比色管中加水至刻度混匀。浓度依次为0.00、0.030、0.060、0.180、0.240mgL,-1,。,b）各加入0.5mL测磷混合液，0.5mL抗坏血酸溶液，混匀。显色15分钟，以水为参比测定其882nm的吸光度，以（A,i,-A,0,）为横坐标，相应的磷酸盐浓度为纵坐标，绘制标准曲线或求线性回归方程。,实验六 海水无机磷的测定,四、测定步骤,2）水样测定：取已过滤的待测水样25mL分别置于25mL具塞比色管中，按绘制标准曲线的步骤进行显色并测定水样的吸光度A,w,。用A,w,-A0的值查标准曲线求海水磷酸盐浓度，或用线性回归方程计算水样磷酸盐浓度。,实验要求,1.测定海水桶中一个海水样品的氨氮和磷浓度，要求测3次求平均值和标准差。,2.用标准使用液配制一个浓度位于标准曲线中间的标准样品，作为质量控制样品，测3次，求其平均值和标准差，判断测定结果的质量状况。,