微生物培训演示文稿.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,目录,第一节 微生物的基础知识,第二节 微生物与药物变质,第三节 药品中微生物的来源,第四节 杀灭微生物的方法,第五节 防止药物污染微生物的措施,第一节、微生物的基础知识,微生物的定义：,是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。,微生物个体微小，肉眼不能看到，必须借助于显微镜或电子显微镜放大几百倍甚至数万倍才能看到。举例:细菌家族的“大个子”杆菌，让3千个杆菌头尾相接躺成一列，也只有一粒米那么大，让70个杆菌肩并肩排成一行，刚抵得上一根头发丝那么宽，相当于全地球人口数（50多亿），那么多的细菌加在一起，才只有一粒芝麻的重量。,微生物具有种类繁多，营养类型多，适应环境能力强等特性，所以，微生物的分布极为广泛。水、土壤、空气中均有微生物的存在，空气中的微生物主要来自尘埃与土壤。,微生物特点,小,（个体微小）,微米级（光学显微镜下可见细胞，纳米级（电子显微镜下可见病毒,简,（构造简单）,单细胞、简单多细胞、非细胞,低,（进化地位低）,原核类、真核类、非细胞类,微生物五大特性（概括）,体积小，面积大,吸收多，转化快,生长旺，繁殖快,适应强，易变异,分布广，种类多,微生物的形态特征与基本结构,下面主要介绍与我公司药品相关的需控制的微生物，有下面几种：有限度规定的细菌数、霉菌数及酵母菌数。不得检出的,活螨、大肠埃希菌、大肠菌群、沙门菌等控制菌。,一、细菌,1.细菌的形态特征,根据外形不同，可将细菌分为,球菌、杆菌和螺形菌,三类。,大多数细菌生长最适温度是2535，最适宜的PH6.87.4。,2.细菌的特殊结构 芽胞 当细菌遇到干燥、高温、缺氧或化学药品等恶劣环境时，就会几乎全部脱去身体中的水分，从而使细胞凝聚成椭圆形的休眠体，这就是芽胞，芽胞在干燥条件过几十年仍有活力，一旦环境变得适宜，芽胞就会吸水膨胀，又成为一个有活力的菌体。芽胞对干燥、热和化学药品的渗透性有强大的抵抗力，,灭菌必须以消灭芽胞为标准。,细菌的繁殖,（1）繁殖方式是无性的,二分裂法,。即细菌生长到一定时期在细胞中间形成横隔，将一个细胞分裂成二个新的等体积的子细胞。,（2）.细菌的生长过程分4个时期：迟缓期、对数生长期、稳定期、衰退期。,迟缓期：此期是准备繁殖时期，细菌不分裂，菌数不增加，细菌细胞较大，比原来大2-3倍，迟缓期一般为1-3小时。,对数生长期：这时期菌数按几何级数增加，细菌的增殖率最大，对数生长期的长短与营养物的多少有关，一般在10小时左右。,这时期细菌大量繁殖，产酸产气，如口服液就可能爆炸。,稳定期：对数生长期中细菌大量增殖，消耗了营养物质，产生有害的代谢产物和Ph变化等不利因素的积累、细菌繁殖速度逐步下降，此期的细菌增加数和死亡几乎相等。活菌数比较稳定，细菌开始产生芽胞。,衰退期：这一时期细菌死亡数大于增殖数，活菌数越来越少，细菌数总数也开始下降，产生的毒素对人体有害。,细菌代谢的特殊产物,细菌在代谢过程中，除将药品的营养物质和有效成分破坏了，同时自身还合成一些特殊产物。,（1）.热原质 引起人的发热反应，12020分钟不能破坏，必须25030分或1804小时高温处理，或用强酸、强碱、强氧化剂煮沸半小时方可破坏。,（2）.毒素 分为内毒素、外毒素。外毒素毒性强如破伤风毒素对小白鼠的致死量为10-6mg，白喉杆菌外毒素可引起心肌炎、肾上腺出血及神经麻痹，破伤风外毒素主要毒害，脊髓前角运动神经细胞，引起所属肌肉的痉挛强直。内毒素少量可引起身体发热反应，严重中毒时能导致内毒素性体克。,（3）.细菌素（4）.色素,二、真菌,真菌包括霉菌和酵母菌。,霉菌,是需氧菌，它们对营养的要求比较低，简单的糖类和无机盐可满足其营养需要，能引起药品、药材的霉烂变质。,最适合的温度是2030。PH值5.06.5，湿度要求75以上，潮湿的环境微生物将大量的繁殖。,1.霉菌的形态特征：霉菌由菌丝构成，绒毛状、蜘蛛网状、或絮状，成熟的菌丝产生各种色素，霉菌呈现各种颜色。如黄曲霉菌（黄），黑霉菌（黑）。,霉菌的繁殖：霉菌的繁殖能力很强，无性繁殖是最常见的繁殖方式。,无性繁殖：（1）.菌丝断裂：真菌的菌丝前端是生长点，可以延伸，分枝而生长，菌丝断裂的片段也能长出新的菌丝进行繁殖。,（2）.无性孢子 霉菌菌丝成熟后产生孢子，孢子萌发出芽长出菌丝，又形成新的霉菌。,真菌与人类疾病,（1）浅部感染性真菌,皮肤癣就是真菌，主要侵犯人体皮肤、毛发和指甲引起各种癣病，一般不侵犯皮下深部组织和内脏。,（2）深部感染性真菌,它们能侵袭深部组织和内脏以及能引起全身的真菌病。常见有白色念珠菌,真菌毒素,有些真菌产生毒素，人误食被真菌污染的药品和食物就可能发生程度不同的急性、慢性真菌毒症。毒性较强的有黄曲霉毒素，真菌毒素中毒症发病率高，死亡率也高，主要是使肝脏肾脏和中枢神经系统受到损害，长期多次被真菌毒素引起慢性中毒可诱发肝癌。,三、大肠埃希菌,是药品是否受到粪便污染的指示菌,它大量存在于人和温血动物的肠道中,随着粪便排出体外,污染环境如土壤、水源、饮食、药品等，如检出大肠杆菌，表明被粪便污染.有可能污染肠道病原菌,如伤寒、痢疾和其它肠道致病菌，人们饮用和食用被污染的物品，就引起消化道传染病。所以便后必须洗干净手再工作，以免大肠杆菌污染药品。,大肠杆菌的最适生长温度为3537。,近几年我们药品大肠菌群超标的是银翘解毒丸，大家集思广益一下解决的办法。,四、沙门菌,沙门菌是肠杆菌科重要的致病菌，包括伤寒、副伤寒、甲乙丙型、肠炎、鼠伤寒等沙门菌。沙门菌可通过人、畜、禽的粪便和带菌者接触，直接或间接的污染药品原辅料及生产的各个环节，以动物来源的药物，如动物脏器、粪便、全虫体等污染机率更高，因此药典规定的以动物来源的药物、生物脏器制品，不得检出沙门菌。我公司检沙门菌的品种有：琥珀消石颗粒、牛黄益金片、心可舒胶囊、四消丸、小活络丸、脑立清丸、安神补心丸等。,五、活螨,药品可因其原料生产过程或包装、运输、贮存、销售等条件不良受到螨的污染，尤其对大小蜜丸、糖浆类制剂含糖分、脂肪和淀粉较多的中药材及其炮制品等危害较大。有些仓贮螨以霉菌孢子为食物，在其消化道中以及排泻物中带有大量的霉菌孢子，药品染螨的同时污染大量的霉菌。螨类除蛀蚀损坏药品，使药品变质失效外，还可直接危害人体健康或传播疾病，对人具有致病力，能引起皮炎及消化系统、泌尿系统、呼吸系统的疾病。,第二节 微生物与药物变质,微生物广泛存在于自然界，因此在药物的原料中以及在药物制剂的生产过程中均有微生物污染。,染菌后对药品的危害：一广面可造成药物变质，失去疗效。另一方面，对病人可引起不良反应，甚至引起继发感染或危及生命。,药品的卫生状况对药品的质量及对人体健康有直接关系，在生产和使用药品历史上发生的药源性疾病屡见不鲜。,例如：美国25个医院由于输注染菌的葡萄糖致使3778个患者得了败血症，40人死亡。,我国发生输注污染的人血白蛋白后46例感染、8例死亡的事故。点眼剂常在保存和反复使用过程中被微生物污染。在眼角膜外伤的情况下使用是十分危险的，可造成感染甚至失明。,第三节 药品中微生物的来源,药物制剂中的微生物，主要决定于制剂生产所处的环境以及原材料。因为微生物的来源主要是原料、制造过程所应用的设备、空气、操作人员及最后包装使用的容器等。,来自空气中的微生物,2.,来自水中的微生物,3.,来自原料，设备容器具的微生物,4.,来自操作人员的微生物,1.,来自空气中的微生物,几乎各种微生物均可存在于空气中。但其中的种类与数量随条件不同有很大的变化。如环境中有开动的机器或活动的人们，空气中的含菌量就增多；如空气中的湿度较高时，雾滴下降，空气中的含菌量亦就随之下降；当有人讲话、咳嗽、打喷嚏时，可增加空气中微生物数量，在空气中最常见的微生物，其中细菌为葡萄球菌，链球菌，棒状杆菌，芽胞杆菌，梭状芽胞杆菌等；真菌为青霉，曲霉，毛霉，红酵母菌等。,由于空气中含有微生物，在生产药物制剂时，就可能进入半成品，而使药物制剂发生污染，而且污染的程度与空气中含菌量有关。,2.来自水中的微生物,水也是药物中微生物的重要来源。因除在配制各类制剂时本身需要水以外，在洗涤及冷却过程中均涉及到水。,水中常见微生物有假单胞菌，黄杆菌，色丁菌和沙雷氏杆菌等。有时还可有枯草杆菌，巨大牙包杆菌，产气克氏杆菌等。如果受到粪便污染时，则可有变形杆菌，大肠杆菌，粪链球菌和其他肠道菌等。因此用于药物制剂的水必须符合水质的卫生标准。,3.来自原料，设备容器具的微生物,一些脏器制剂，因用动物脏器为原料往往带有革兰氏阴性细菌，革兰氏阳性细菌，并可能带有沙门氏菌，葡萄球菌等；如以植物为原料，往往带有各种真菌，如链胞霉，酵母菌等，并可带有土壤中的各种细菌，设备容器具用完一定冲冼干净，用时消毒。,4.来自操作人员的微生物,由于在生产过程中与操作人员相接触，因而人体的正常微生物亦可随之进入药物制剂中。为了保证药物的质量，操作人员必须保持良好的个人卫生习惯，在操作时减少流动与讲话，则污染的程度可大大减低。,人是药品生产中引起产品污染的最大污染源之一。,（1）体表脱落物体表排出物（2）汗液分泌物等（3）呼吸道排出物（4）正常人体常见的微生物,5.来自操作人员的微生物,（1）.体表脱落物 人每35天就由新的细胞更换一次，每人每天大约脱落1000万个皮屑粒。,（2）.体表排出物 汗液分泌物等。,（3）.呼吸道排出物 咳嗽、打喷嚏会使空气中尘粒数增加520倍。,（4）正常人体常见的微生物,人类的体表以及和外界相通的腔道如口腔、鼻咽腔、肠道、眼结膜等，经常有微生物的存在，其中一部分由于长期适应的结果，能长期寄生在人体上述部位，称为正常菌群。例如，大肠杆菌大量存在于肠道中，甲型链球菌常见于鼻咽部，表皮葡萄球菌常见于皮肤。在一般情况下，正常菌群与人体保持着平衡，正常菌群之间也相互制约，所以不会使人致病。有些正常菌群甚至是维持人体健康不可缺少的，如肠道中的大肠杆菌能合成维生素B和维生素K,经肠壁吸收,供机体利用。但是，当机体防御机能减弱，如受凉、过度劳累，电脑辐射，大面积烧伤、恶性肿瘤及慢性消耗性疾病时，某些正常菌群，就可以引起疾病，例如，鼻咽的甲型链球菌就可以引起咽炎或气管炎；大肠杆菌进入腹腔，可以引起腹膜炎。,第四节 杀灭微生物的方法,一、灭菌,定义：凡能杀灭物体中所有微生物繁殖体和芽胞的作用称为灭菌。,（1）热力灭菌,利用高温杀灭微生物，强热能使蛋白质凝固，而导致细菌死亡。分为干热灭菌法和湿热灭菌法。,（2）气体灭菌,（3）辐射灭菌,（一）热力灭菌,利用高温杀灭微生物，强热能使蛋白质凝固，而导致细菌死亡。分为干热灭菌法和湿热灭菌法。,1.,干热灭菌法,（1）焚烧 仅限于耐热器皿和废弃物的或尸体的灭菌，最彻底的灭菌方法。,（2）干热灭菌 利用烘箱中的热空气灭菌的方法。仅适用于玻璃器皿、磁器、小金属用具等耐热物品的灭菌。,2.,湿热灭菌法,通过热蒸汽或沸水使细菌蛋白质变性而杀灭微生物的方法。湿热灭菌穿透力比干热灭菌的效果好。,（1）煮沸灭菌 是加热使水至沸而杀灭细菌的方法，凡不适于高压灭菌的物品可用此方法，此法灭菌少数抵抗力极强的芽胞仍有可能存活。,（2）流通蒸汽灭菌 在常压下，用蒸锅、蒸笼在100灭菌可杀死细菌繁殖体，不能完全杀死芽胞。,（3）高压蒸汽灭菌 此方法为最可靠、最适用、最广泛的灭菌方法，它穿透力强、温度高，灭菌效果最好，生产中常利用此种方法灭菌。如口服液最终灭菌，粉末高压灭菌等。,（二）气体灭菌,气体灭菌的概念：利用化学消毒剂形成的气体来杀灭微生物的措施称为气体灭菌。,环氧乙烷灭菌,我公司现用的粉末灭菌的方法就是这种方法。此气体有广谱的杀菌作用，能杀细菌芽胞真菌等。无腐蚀作用，穿透力较强，能穿过纺织品，纸、薄的塑料制品等，环氧乙烷灭菌效果受浓度、温度、相对湿度及灭菌时间等因素的影响。,臭氧灭菌,我公司现用臭氧对,水处理、空气消毒,。臭氧的灭菌机制属于生物化学氧化反应。具广谱性，臭氧对细菌、病毒等微生物内部结构有极强的氧化破坏性，可达到杀灭细菌繁殖体、芽孢、甲乙型肝炎病毒、真菌和原虫胞囊等各种细菌。,（三）辐射灭菌,紫外线灭菌 紫外线是光谱中对生物危害最大的部分，是一种电磁辐射，杀菌原因主要是DNA吸收了紫外线引起胸腺嘧啶二聚体的形成，从而干扰了DNA的复制，轻则发生突变，重则导致死亡。在紫外线直射下，对眼、皮肤有损害。紫外线照射过和中产生臭氧，臭氧过多对眼及鼻腔有刺激，产生头晕、胸闷、血压下降。所以工作时要稍等片刻，让臭氧消散，方可进行实验操作。紫外线辐射的穿透力般很弱，不能穿透正常的包装材料，即使是一层薄的普通玻璃、塑料薄膜、纸等，所以紫外线灭菌主要用于工作区的空气灭菌和物体表面灭菌。,二、消毒,消毒的定义：是用物理和化学的方法杀灭物体上的病原微生物的作用。,消毒只杀死病原菌，杀不死芽胞等全部微生物。,常用的消毒剂,1.乙醇 浓度7075 能迅速杀死细菌繁殖体，对一般病毒有一定的消毒作用。,2.苯扎溴铵（新洁而灭）常用浓度 0.050.1 0.1水溶液对皮肤粘膜创伤和器械具有清洁或消毒的双重作用。对皮肤的刺激性小，与肥皂或其他合成洗涤剂、有机物接触时活性减小。,3过氧化氢（双氧水）常用浓度3%利用新生氧杀菌，无毒，适用于皮肤及大量物具的消毒。缺点是不稳定，容易失效。,4过氧乙酸 常用浓度0.5%广谱消毒剂能杀死细菌繁殖体、芽孢、真菌与某些病毒，对空气、皮肤消毒常用。,第五节 防止药物污染微生物的措施,防止污染就要加强卫生管理工作，只有加强卫生管理工作才能有效地减少药品污染的可能性，,生产卫生是指生产过程中所采取的各种防止微生物污染的措施。它包括,生产环境卫生、生产人员卫生、生产工艺卫生,三个方面。,一、生产环境卫生,药品生产有它的特殊性，药品污染最大危险之一来自环境，所以药品环境卫生管理就显得特别重要。生产厂房及周围应无污染源。废料及垃圾转运站应远离生产区。厂区内，特别是洁净厂房周围应绿化，尽量减少厂区内的露土面积。更重要的是生产车间的内环境更要严格管理。,（一）不同生产区域的卫生要求,非洁净区（无洁净度要求区域）,1.地面整洁、门窗玻璃、墙面、顶棚洁净完好、设备、管道、管线排列整齐并包扎光洁，无跑、冒、滴、漏，定期清洁、维修并记录。,2.设备、容器、工具按定置管理要求放置并符合清洗标准。,3.生产场所不得吸烟，不得吃食品，不得存放与生产无关的物品和私人杂物。,洁净区,1.除符合非洁净区的要求外，必须做到设备、容器、工具、管道保持清洁。外包装材料未彻底清洁前不得进入本区域。,2.区域内的环境控制应符合温度1826、湿度4565、压差、送风量、新鲜空气量等要求。,（质量保证部派按规程对洁净区沉降菌、浮游菌、尘埃粒子的监测，不符合规定的消毒、灭菌处理，直至合格方能使用。）,（二）不同生产区域的清洁与消毒,洁净室应定期消毒，使用的消毒剂不得对设备、物料和成品产生污染。,（必要时应,做,消毒剂残留验证试验。）,消毒剂品种应定期更换，防止产生耐药菌株。,我们经常使用的消毒剂有0.1新洁而灭、1:100的,84,消毒液、75的乙醇等。,（三）区域清洁工作内容,非洁净区清洁工作内容,每日,1.清除并清洗废物贮器；,2.擦拭地面、室内桌椅柜及设备外壁；,3.擦去门窗、水池及其他设施上污迹。,每周,1.擦洗门窗、水池及其他设施；,2.刷洗地面、废物贮器、地漏、排水道及墙裙等处,每月,1.对墙面、顶棚、照明及其他附属装置除尘；,2.全面清洗工作场所及生活设施,（四）洁净区清洁工作内容,每日 1.清除并清洗废物贮器；2.擦门窗、地面、室内用具及设备外壁；3.擦去墙面污迹。,每周 1.用消毒剂擦拭门窗、地面、室内用具及设备外壁；,2.用消毒剂刷洗地面、废物贮器、地漏、排水道等处,每月 1.全面擦拭工作场所、墙面、顶棚、照明、排风及其他附属装置；,2.室内用紫外线、溴氧或者是化学消毒剂熏蒸定期消毒,（五）注意点,车间内使用的拖把是很大的污染源，要注意消毒，因经常处于潮湿的环境中最适合微生物的生长，主要有以下几类：1.细菌、霉菌、念珠菌。2.尘螨。如果用这样的拖把拖地，微生物就会四处活动而到处传播。消毒用0.1新洁而灭、84消毒液、75乙醇等浸泡30分钟均能消毒。,二、生产人员卫生,由于在药品生产过程中始终有人的操作活动，所以说人是药品生产过程中的最大污染源之一。人作为药品生产的污染源，包括自身产生和携带的两类污染物。自身产生指的是头发、皮肤等脱落物、体表与呼吸道的排出物。携带是指任何可能附着人体、衣服上的各种尘埃微生物。这两类污染物随着人体的活动不断产生与扩散污染药品（一）个人健康（二）个体卫生（三）工作服（四）人员在洁净区内的自我约束,生产人员卫生（GMP),（一）、个人健康,1 从事药品生产的人员每年体检一次，并建立个人健康档案。发现患有急、慢性传染病的人员要立即调离，不得从事直接接触药品的工作。,2 避免体表有伤口、患有传染病或其他可能污染药品疾病的人员从事直接接触药品的生产。,3 操作人员应当避免裸手直接接触药品、与药品直接接触的包装材料和设备表面。、,4 生产区、仓库区应当禁止吸烟和饮食，禁止存放食品、饮料、香烟和个人用品等非生产用物品。,5 参观人员和未经培训的人员不得进入生产区和质量控制区，特殊情况需进入的，应当事先对个人卫生、更衣等事项进行指导。,（二）、个体卫生,1 手的卫生,手是最大的细菌传播工具。在药品生产过程中，必须要一直保持手的清洁。操作人员要养成勤洗手、勤剪指甲的卫生习惯，禁止使用指甲油，指甲油一般比较硬，过一段时间就会出现裂痕，尘粒和微生物就可能藏在其中，并到处传播，禁止带手表，它们难于清洗，可能成为污染源。特别是下列情况之一时必须要洗手：工作前便 后 肮脏时。洗手的时间一定要控制好，在洗手十分钟后，细菌明显减少，但继续洗至15分钟时，z细菌反而又多起来原来埋藏在深部的细菌被暴露出来。,2口腔、鼻腔、头发的卫生,人体卫生除了手的卫生外，还要注意口腔、鼻腔、头发、胡子的卫生。因为从人体污染源来看，引起污染药品的因素很多，其中以手、口腔、鼻腔、头发等关系最大。人的口腔粘膜鼻腔粘膜存在大量的细菌。当人们讲话、咳嗽和打喷嚏时均能散发大量细菌和排泄物。为了防止药品生产过程中由于口腔和鼻腔散发的污物造成药品细菌污染，所以生产过程中必须戴口罩、帽子。保持头发的清洁能减少对药品的污染。操作人员要养成勤理发、勤洗澡的良好卫生习惯。,图 片,未消毒的与消毒后的手拿平皿细菌培养,生产人员卫生,、工作服,人体在自然活动中每分钟能产生千百万粒径大于0.3um的粒子，在注意人体清洁卫生的同时，必须穿工作服，,工作服的作用一是防止生产人员对药品的污染；二是保护操作人员不受药品的影响。,、人员在洁净区内的自我约束,在洁净区工作的人员必须严格遵守洁净区的规则,人员操作动作的幅度及工作服的质量、式样、穿戴等对微生物的含量有明显的影响，因此，在洁净室出入次数应尽可能在少，同时在操作过程中应减少动作幅度，尽量避免不必要的走动和移动，活动时每分钟产生0.5微米粒子的数量坐立、站不动10万正常行走750万以保持洁净室的气流、风量和风压，保持洁净区的净化级别。也就是说，在洁净区工作的人员，操作和行动等要有自我约束的概念。,进入洁净生产区的人员不得化妆和佩戴饰品。,三、生产工艺卫生,生产卫生包括原辅料、设备、生产介质、工艺技术等方面的卫生。,（一）、原辅料卫生,原辅料的质量直接影响药品的质量，对于原辅料卫生的问题，应该从原辅料订购开始引起重视，原辅料进厂后的检检验、使用全过程，均要严格按照GMP规定的卫生要求进行处理。各种药剂制作后都应进行灭菌处理。目前我公司使用环氧乙烷灭菌和高压蒸汽灭菌。,（二）、仪器设备,用前和用后用一般采用化学消毒剂进行消毒。（胶囊填充工序解决超霉菌的问题）,（三）、水的卫生,定期对纯化水的管道进行清洗，每周对微生物进行一次检验。,生产工艺卫生,（四）、工艺技术卫生,1.温度因素的影响,适宜的温度正是微生物繁殖的条件，也会造成原料、中间体、产品的污染。,2.时间因素的影响,要尽量控制各工序之间的时间，尽可能的缩短从投料要出成品的时间，减少微生物污染的时间。,3.PH值的影响,微生物的生长都有一定的最佳PH范围，控制PH也可以影响细菌的生长速率。,（五）合理的储存,药物制剂制成后，如储存不妥，也可使微生物的数量增加，引起药物分解与变质，如片剂和中药材，尤其在梅雨季节更须注意相对湿度。任何药物制剂在保存时，均不宜温度过高，如此可减少微生物生长繁殖的机会。,谢谢！,谢谢大家支持！,共同努力，共同提高质量！,