高考生物复习第11单元生物技术实践第34讲微生物的培养和利用全国公开课一等奖百校联赛示范课赛课特等奖.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第,34,讲,PART 34,微生物培养和利用,考点互动探究,教师备用习题,第1页,考试说明,1.,微生物分离和培养,(,试验与探究能力,),。,2.,某种微生物数量测定,(,试验与探究能力,),。,3.,培养基对微生物选择作用,(,试验与探究能力,),。,4.,微生物在其它方面应用,(,试验与探究能力,),。,第2页,考点互动探究,知识梳理,1.,培养基,(1),概念,:,人们按照微生物对,不一样需求,配制出供其生长繁殖,。,(2),营养成份,:,水、,、,、无机盐四类营养物质,另外还需要满足微生物生长对,、特殊营养物质以及,要求。,(3),类型,:,培养基含凝固剂,培养基不含凝固剂。,考点一微生物试验室培养,营养物质,营养基质,碳源,氮源,pH,氧气,固体,液体,第3页,考点互动探究,2.,无菌技术,(1),目标,:,取得,。,(2),关键,:,预防,入侵。,(3),无菌技术主要方法及适用对象,(,连线,),纯净培养物,外来杂菌,答案,a-,a-,a-,b-,b-,b-,第4页,考点互动探究,3.,制备牛肉膏蛋白胨固体培养基,(1),步骤,:,计算,溶化,倒平板。,(2),倒平板过程,在火焰旁右手拿锥形瓶,左手,。,右手拿锥形瓶,使锥形瓶瓶口快速经过,。,左手将培养皿打开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,左手立刻盖上,。,待平板冷却凝固后,将平板,放置,使皿盖在下、皿底在上。,称量,灭菌,拔出棉塞,火焰,培养皿皿盖,倒过来,第5页,考点互动探究,4.,纯化大肠杆菌,(1),原理,:,在培养基上将细菌稀释或分散成,细胞,使其长成单个菌落,这个菌落就是纯化细菌菌落。,(2),平板划线法,(,图,11-34-1,中,):,经过接种环,在琼脂固体培养基表面,操作,将聚集,菌种逐步稀释分散到培养基表面。,(3),稀释涂布平板法,(,图,11-34-1,中,):,将菌液进行一系列梯度稀释,然后将不一样稀释度菌液分别涂布到,表面,进行培养。当稀释倍数足够高时,即可取得单个细菌形成,。,单个,A,连续划线,B,图,11-34-1,琼脂固体培养基,菌落,第6页,考点互动探究,5.,菌种保藏,(1),对于频繁使用菌种,能够采取,法。,(2),对于需要长久保留菌种,能够采取,法。,暂时保藏,甘油管藏,第7页,考点互动探究,关键讲解,1.,消毒和灭菌区分,条件,结果,消毒,较为温和物理或化学方法,仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害微生物(不包含芽孢和孢子),灭菌,强烈理化原因,杀死物体内外全部微生物,包含芽孢和孢子,第8页,考点互动探究,2.,两种纯化细菌方法比较,比较项目,平板划线法,稀释涂布平板法,关键操作,接种环在固体平板培养基表面连续划线,一系列梯度稀释,涂布平板操作,优点,能够依据菌落特点取得某种微生物单细胞菌落,既能够取得单细胞菌落,又能对微生物计数,缺点,不能对微生物计数,操作复杂,需要涂布多个平板,适用范围,适适用于好氧菌,适适用于厌氧菌和兼性厌氧菌,第9页,考点互动探究,3.,平板划线操作,3,个易错点,(1),灼烧接种环之后,要冷却后再进行接种,以免温度太高杀死菌种。,(2),划线时最终一区域不要与第一区域相连。,(3),划线用力要大小适当,预防用力过大将培养基划破。,第10页,1.,广东韶关一模,为了调查北江河中细菌污染情况,某研究性学习小组同学进行了试验。试验包含制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此试验相关问题。,(1),试验中制备牛肉,膏蛋白胨培养基部分成份列表以下,:,表中各成份含量百分比确定标准是,。,(2),对培养基进行灭菌,通常采取方法是,。为了使培养基到达良好灭菌效果,普通在压力为,100 kPa,温度为,条件下,维持,1530 min,。,考点互动探究,题组训练,成份,牛肉膏,蛋白胨,NaCl,蒸馏水,含量,0.5 g,1 g,0.5 g,100 mL,第11页,考点互动探究,(3),为了更加好地对细菌计数,普通采取接种方法是,该方法操作是将菌液进行一系列,然后再分别,到琼脂固体培养基表面。,(4),接种后放在恒温箱培养一段时间后,为确保结果准确,选择菌落数在,平板进行计数。该组同学在菌落计数时发觉,统计菌落数比实际数目要低,可能原因是,。,答案,(1),依据所培养微生物对各营养成份需求量,(,或百分比,)(2),高压蒸汽灭菌,121,(3),稀释涂布平板法梯度稀释涂布,(4)30300,一些菌落可能是由两个或多个细菌连在一起形成,第12页,考点互动探究,解析,(1),培养基配制过程中,成份含量百分比确定标准是依据所培养微生物对各营养成份需求量,(,或百分比,),。,(2),对培养基进行灭菌,通常采取方法是高压蒸汽灭菌,即将灭菌物品放置在盛有适量水高压蒸汽灭菌锅内,为到达良好灭菌效果,普通在压力为,100 kPa,温度为,121,条件下,维持,1530 min,。,(3),为了更加好地对细菌计数,普通采取接种方法是稀释涂布平板法,该方法操作是将菌液进行一系列梯度稀释,然后再分别涂布到琼脂固体培养基表面。,(4),接种后放在恒温箱培养一段时间后,为确保结果准确,选择菌落数在,30300,平板进行计数。因为一些菌落可能是由两个或多个细菌连在一起形成,所以统计菌落比实际数目要低。,第13页,2.,福建漳州三模,如图,11-34-2,为微生物试验培养和纯化醋酸菌部分操作步骤。请回答以下问题,:,(1),是制备培养基时,中主要操作,该操作需使锥形瓶瓶口经过火焰,目标是经过,预防瓶口微生物污染培养基。,考点互动探究,图,11-34-2,第14页,(2),该纯化醋酸菌接种方法是,。完成步骤,操作,接种共需要,次灼烧处理。,(3),纯化醋酸菌菌种将频繁用于果醋生产,则能够采取,方法保留菌种,但这种方法保留时间不长,原因是,。,(4),将醋酸菌加入果酒中,乙醇可为醋酸菌生命活动提供,将温度控制在,能够取得较多果醋。,考点互动探究,答案,(1),倒平板灭菌,(2),平板划线法,6 (3),暂时保藏菌种轻易被污染或产生变异,(4),能量,3035,第15页,考点互动探究,解析,(1),是制备培养基时倒平板中主要操作,该操作需使锥形瓶瓶口经过火焰,目标是经过灭菌,预防瓶口微生物污染培养基。,(2),依据图,可知,该纯化醋酸菌接种方法是平板划线法。平板划线时,每次划线前都要进行灼烧,最终一次划线结束也要进行灼烧,所以共需要,6,次灼烧处理。,(3),纯化醋酸菌菌种将频繁用于果醋生产,则能够采取暂时保藏方法保留菌种,但这种方法保留时间不长,原因是菌种轻易被污染或产生变异。,(4),将醋酸菌加入果酒中,乙醇可为醋酸菌生命活动提供能量,;,果醋发酵适宜温度是,3035,。,第16页,考点互动探究,知识梳理,1.,筛选菌株,(1),自然界中目标菌株筛选依据,:,依据它对,要求,到对应环境中去寻找。,(2),试验室中微生物筛选原理,:,人为提供有利于,生长条件,(,包含营养、温度、,pH,等,),同时抑制或阻止其它微生物生长。,(3),选择培养基,:,允许特定种类微生物生长,同时,和,其它种类微生物生长培养基。,考点二土壤中分解尿素细菌分离与计数,生存环境,目标菌株,抑制,阻止,第17页,考点互动探究,2.,统计菌落数目,(1),惯用方法,:,法。,(2),统计依据,:,当样品,足够高时,培养基表面生长一个菌落,起源于样品稀释液中一个,。经过统计平板上菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。,(3),其它方法,:,还可利用,计数。,3.,设置对照,设置对照主要目标是排除试验组中,对试验结果影响,提升试验结果,比如为了排除培养基被杂菌污染可能性,需以,培养基培养作为空白对照。,稀释涂布平板,稀释度,活菌,显微镜直接,非测试原因,可信度,未接种,第18页,考点互动探究,4.,试验设计,项目,内容,试验原理,(1)能合成细菌才能分解尿素 (2)配制以为唯一氮源培养基,能够生长细菌就是能分解尿素细菌,试验流程,土壤取样,(,富含,),配制土壤溶液和制备培养基,涂布平板与培养菌落,判定,(1)方法:在以尿素为唯一氮源培养基中加入指示剂培养分解尿素细菌 (2)原理:细菌分解尿素反应中,细菌合成脲酶将尿素分解成了,其会使培养基中增强,pH升高,脲酶,尿素,有机质,系列稀释,计数,酚红,氨,碱性,第19页,1.,选择培养基作用原理,(1),在培养基中加入某种化学物质,如加入青霉素能够分离出酵母菌和霉菌,;,加入高浓度食盐能够得到金黄色葡萄球菌。这里加入是在满足基本所需培养成份基础上加入。,(2),改变培养基中营养成份,如缺乏氮源时能够分离出固氮微生物,;,以石油作为唯一碳源时,能够分离出能消除石油污染微生物。,(3),改变微生物培养条件,如将培养基放在高温环境中培养能够得到耐高温微生物。,考点互动探究,关键讲解,第20页,(4),经过一些特殊环境分离微生物,如在高盐环境中可分离出耐盐菌,;,在高温环境中可分离得到耐高温微生物。,2.,培养基种类与应用,考点互动探究,分类依据,种类,特点,应用,物理性质,液体培养基,不加凝固剂,工业生产,半固体培养基,加凝固剂,(,少,),观察微生物运动、微生物分离、判定,固体培养基,加凝固剂,(,多,),微生物分离、判定,活菌计数、保藏,第21页,考点互动探究,化学成份,天然培养基,含化学成份不明天然物质,工业生产,合成培养基,培养基成份明确或用一定化学物质配制,分类、判定,用途,选择培养基,添加某物质,抑制杂菌生长,促进所需微生物生长,培养分离出特定微生物,判别培养基,依据微生物代谢特点,在培养基中加入某种指示剂,判别微生物,第22页,3.,两种计数方法比较,考点互动探究,比较项目,间接计数法,(,稀释涂布平板法,),直接计数法,(,显微计数法,),原理,当样品稀释度足够高时,培养基表面生长一个菌落,起源于样品稀释液中一个活菌,经过统计平板上菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌,利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积样品中微生物数量,公式,每克样品中菌落数:(CV)M。C:某稀释度下平板上生长平均菌落数;V:涂布平板时所用稀释液体积(mL);M:稀释倍数,每毫升原液所含细菌数,:,每小格平均细菌数,40010 000,稀释倍数,缺点,当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到只是一个菌落,不能区分细胞死活,结果,比实际值偏小,比实际值偏大,第23页,1.,南昌一模,下表为某微生物培养基配方,请回答相关问题,:,(1),按物理性质划分,该培养基属于,培养基,不论配制何种培养基,在原料称量、溶,化之后都要先,然后分装、包扎,并灭菌,惯用灭菌方法是,。,(2),依据培养基成份判断,该培养基能否,用于分离土壤中分解尿素细菌,?,原因是,。,考点互动探究,题组训练,成份,含量,成份,含量,Na,2,HPO,4,3 g,尿素,1.0 g,K,2,HPO,4,1 g,C,6,H,12,O,6,30 g,MgSO,4,7H,2,O,0.5 g,琼脂,15 g,FeSO,4,0.01 g,H,2,O,1000 mL,NH,4,NO,3,0.3 g,第24页,(3),为检测尿素分解菌是否存在,还应加入,假如存在,将出现,反应。,(4),微生物惯用接种方法有,。,考点互动探究,答案,(1),固体调,pH,高压蒸汽灭菌,(2),不能培养基中含有,NH,4,NO,3,尿素不是唯一氮源,(3),酚红红色,(4),平板划线法、稀释涂布平板法和稀释混合平板法,第25页,考点互动探究,解析,微生物培养基普通都含有水、碳源、氮源、无机盐,另外还要满足微生物生长对,pH,、特殊营养物质以及氧气要求,对异养微生物来说,含,C,、,N,化合物既是碳源,也是氮源,即有些化合物作为营养要素成份时并不是起单一方向作用。,(1),分析题中表格可知,该培养基中加入琼脂作为凝固剂,所以属于固体培养基,不论何种培养基,在各成份都溶化后分装前,要先调整,pH,培养基惯用灭菌方法为高压蒸汽灭菌。,(2),依据培养基成份判断,该培养基中含有,NH,4,NO,3,尿素不是唯一氮源,所以该培养基不能用于分离土壤中分解尿素细菌。,(3),为检测尿素分解菌存在是否,在以尿素为唯一氮源选择培养基中加入酚红指示剂,假如存在尿素分解菌,则指示剂将变红色。,(4),微生物惯用接种方法有平板划线法、稀释涂布平板法和稀释混合平板法。,第26页,考点互动探究,第27页,(2),配制培养基时,需添加琼脂,琼脂起,作用,;,培养基中添加,作为指示剂,可使目标菌落周围产生红色环带。,(3),对尿素溶液进行灭菌最适方法是,灭菌。,A.,高压蒸汽,B.,干热,C.,添加抗生素,D.,过滤,E.,紫外线照射,F.70%,酒精浸泡,(4),该小组在接种前,随机取若干灭菌后空白平板先行培养了一段时间,这么做目标是,;,然后将,1 mL,瘤胃样液稀释,1000,倍,在,3,个平板上用涂布法分别接入,0.1 mL,稀释液,;,经适当培养后,3,个平板菌落数分别为,49,、,47,和,45,。据此可得出每升瘤胃样液中分解尿素微生物活菌数为,个,理论上,统计菌落数往往,(,填“低”“等”或“高”,),于接种实际活菌数目。,考点互动探究,第28页,考点互动探究,答案,(1),脲酶,(,或分解尿素酶,),氨,(,或,NH,3,),(2),凝固剂酚红,(3)D,(4),检测培养基平板灭菌是否合格,4.710,8,低,解析,惯用灭菌方法,:,高压蒸汽灭菌法适合用于普通培养基和玻璃器皿灭菌,;,干热灭菌适合用于需要保持干燥玻璃器皿灭菌,凡带有橡胶物品和培养基都不能进行干热灭菌,;,无菌室、缓冲间和接种箱惯用紫外线进行空气灭菌,;,微生物接种时金属接种工具和试管口能够用灼烧灭菌,;,煮沸灭菌通常不能彻底杀灭一些生物孢子和芽孢,普通适合用于餐具和不耐高温食品等消毒。,(1),分解尿素酶是脲酶,所以分解尿素微生物含有脲酶。尿素含有,C,、,H,、,O,、,N,元素,其水解产物是二氧化碳、水和氨气,氨气使培养基碱性增强。,第29页,考点互动探究,(2),琼脂是凝固剂,使培养基呈固态,;,培养基中碱性物质能够与酚酞反应产生红色环带。,(3),对尿素溶液进行灭菌最适方法是过滤灭菌。,(4),空白平板作用是检测培养基平板是否合格,依据题干提供数据进行计算,每升瘤胃样液中分解尿素微生物活菌数为,(49+47+45)31000101000=4.710,8,(,个,),。因为菌种可能重合,所以统计菌落数往往低于接种实际活菌数目。,第30页,易错点拨,“选择菌落数在,30300,平板”提醒,(1),只好到,1,个菌落数在,30300,平板是错误,原因是不符合试验重复标准,易受到偶然原因影响。,(2),得到,3,个或,3,个以上菌落数在,30300,平板,也不一定正确,原因是假如不一样平板间差异较大,如得到,3,个平板,菌落数分别为,230,、,34,、,240,即使菌落数均在“,30300,”,但因为,34,与另外两个平板差异较大,应找出原因并重新试验。,考点互动探究,第31页,考点互动探究,知识梳理,考点三分解纤维素微生物分离,C,1,酶,C,X,酶,葡萄糖苷酶,纤维二糖,葡萄糖,第32页,考点互动探究,刚果红染色,红色复合物,透明圈,纤维素,第33页,考点互动探究,纤维素,选择培养基,梯度稀释,判别纤维素分解菌,透明圈,第34页,1.,分离纤维素分解菌所用两种培养基比较,分离纤维素分解菌试验中先用选择培养基,再用判别培养基。,(1),选择培养基为液体培养基,以纤维素为碳源和能源微生物能够正常生长,而其它绝大多数微生物不能正常生长,;,因培养基中无凝固剂,故其为液体培养基,利用液体培养基能使营养成份被充分消耗,以增加纤维素分解菌浓度。,(2),判别培养基含琼脂,为固体培养基,细菌可在培养基上形成肉眼可见菌落。刚果红染色法应用就是判别培养基。,考点互动探究,关键讲解,第35页,2.,筛选微生物两个实例比较,考点互动探究,比较项目,土壤中分解尿素细菌分离,分解纤维素微生物分离,方法,利用以尿素为唯一氮源选择培养基进行选择培养,利用以纤维素为唯一碳源选择培养基进行选择培养,原理,分解尿素细菌能够合成脲酶,故能在以尿素为唯一氮源培养基上生长,培养基中含有丰富纤维素,能够分解纤维素微生物含有更多生存机会而大量繁殖,判定,在培养基中加入酚红指示剂,指示剂变红说明尿素被分解,从而说明菌落中细菌为分解尿素细菌,刚果红染色法,菌落周围出现红色消失透明圈,该菌落为分解纤维素微生物菌落,第36页,1.,成都一诊,牛食物主要是草茎类,其中含有大量纤维素。牛胃内微生物在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性作用。回答以下问题,:,(1),纤维素是地球上含量最丰富多糖类物质,组成纤维素单体为,。牛胃中一些微生物能够产生纤维素酶,这种酶是一个复合酶,其中,能使纤维素分解成纤维二糖。,(2),试验室培养牛胃内微生物,分离得到高纯度纤维素分解菌关键步骤是,。为防止周围环境中微生物污染,试验操作应在,附近进行,;,倒平板用培养皿需要保持干燥,能够采取,法进行灭菌。,考点互动探究,题组训练,第37页,(3),为了从牛胃食糜中分离出纤维素分解菌,配制选择培养基要以,为唯一碳源。筛选纤维素分解菌时,惯用刚果红染色法有两种,一个是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一个是,。在涂布平板时滴加到培养基表面菌悬液量不宜过多,原因是,。,考点互动探究,答案,(1),葡萄糖,C,1,酶、,C,X,酶,(2),预防外来杂菌入侵酒精灯火焰干热灭菌,(3),纤维素在倒平板时就加入刚果红培养基表面菌悬液过多会造成菌体堆积,影响分离效果,第38页,考点互动探究,解析,(1),纤维素是一个多糖,其基本组成单位是葡萄糖,;,纤维素酶是一个复合酶,其中,C,1,酶、,C,X,酶能使纤维素分解成纤维二糖。,(2),微生物分离和培养关键步骤是预防外来杂菌入侵,;,为防止周围环境中微生物污染,试验操作应在酒精灯火焰附近进行,;,倒平板用培养皿需要保持干燥,能够采取干热灭菌法进行灭菌。,(3),为了分离出纤维素分解菌,配制选择培养基要以纤维素为唯一碳源。筛选纤维素分解菌时,惯用刚果红染色法有两种,一个是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,另一个是在倒平板时就加入刚果红。在涂布平板时滴加到培养基表面菌悬液量不宜过多,原因是培养基表面菌悬液过多会造成菌体堆积,影响分离效果。,第39页,2.,河北石家庄二模,为了分离和纯化高效分解石油细菌,科研人员利用被石油污染过土壤进行如图,11-34-4,所表示试验。,(1),配制好培养基通常使用,法灭菌。步骤,与步骤,中培养基成份相比,最大区分是,。,考点互动探究,图,11-34-4,第40页,(2),同学,A,进行步骤,操作,其中一个平板经培养后菌落分布如图乙所表示。该同学接种方法是,出现图乙结果可能失误操作是,。,(3),同学,B,也按照同学,A,接种方法进行了步骤,操作,:,将,1 mL,样品稀释,100,倍,在,3,个平板上分别接入,0.1 mL,稀释液,;,经适当培养后,3,个平板上菌落数分别为,56,、,58,和,57,。据此可得出每升样品中活菌数为,个。,(4),步骤,需要振荡培养,原因是,。,(5),步骤,后取样测定石油含量目标是,。,考点互动探究,第41页,考点互动探究,答案,(1),高压蒸汽灭菌步骤,培养基中石油是唯一碳源,(2),稀释涂布平板法涂布不均匀,(3)5.710,7,(4),提升培养液中,(,溶解,),氧含量,经过振荡可使菌体与培养液充分接触,提升营养物质利用率,(5),筛选出分解石油能力最强细菌,第42页,考点互动探究,解析,(1),配制好培养基通常使用高压蒸汽灭菌法灭菌。步骤,与步骤,中培养基成份相比,最大区分是步骤,培养基中石油是唯一碳源。,(2),同学,A,进行步骤,操作,其中一个平板经培养后菌落分布如题图乙所表示。该同学接种方法是稀释涂布平板法,出现图乙结果可能失误操作是涂布不均匀。,(3),同学,B,也按照同学,A,接种方法进行了步骤,操作,:,将,1 mL,样品稀释,100,倍,在,3,个平板上分别接入,0.1 mL,稀释液,;,经适当培养后,3,个平板上菌落数分别为,56,、,58,和,57,。据此可得出每升样品中活菌数为,(56+58+57)30.11000100=5.710,7,(,个,),。,(4),步骤,需要振荡培养,原因是提升培养液中,(,溶解,),氧含量,经过振荡可使菌体与培养液充分接触,提升营养物质利用率。,(5),步骤,后取样测定石油含量目标是筛选出分解石油能力最强细菌。,第43页,考点互动探究,1.,全国卷,一些土壤细菌可将尿素分解成,CO,2,和,NH,3,供植物吸收和利用。回答以下问题,:,(1),有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生,。能分解尿素细菌不能以尿素分解产物,CO,2,作为碳源,原因是,。,但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内葡萄糖主要作用是,(,答出两点即可,),。,历年真题明考向,第44页,考点互动探究,(2),为了筛选可分解尿素细菌,在配制培养基时,应选择,(,填“尿素”“,NH,4,NO,3,”或“尿素,+NH,4,NO,3,”,),作为氮源,不选择其它两组原因是,。,(3),用来筛选分解尿素细菌培养基含有,KH,2,PO,4,和,Na,2,HPO,4,其作用有,(,答出两点即可,),。,答案,(1),脲酶分解尿素细菌是异养生物,不能利用,CO,2,来合成有机物为细胞生命活动提供能量,为其它有机物合成提供原料,(2),尿素其它两组都含有,NH,4,NO,3,能分解尿素细菌和不能分解尿素细菌都能利用,NH,4,NO,3,不能起到筛选作用,(3),为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中,pH,稳定,第45页,考点互动探究,解析,(1),催化尿素分解酶为脲酶。分解尿素细菌是异养生物,不能利用,CO,2,来合成有机物。进入细菌体内葡萄糖主要作用是为细胞生命活动提供能量,葡萄糖代谢中间产物能够作为合成其它有机物原料。,(2),能分解尿素细菌和不能分解尿素细菌都能利用,NH,4,NO,3,假如培养基中含有,NH,4,NO,3,则不能起到筛选作用。,(3),培养基中,KH,2,PO,4,和,Na,2,HPO,4,能够为微生物生长提供钠离子、钾离子等,其还能够作为缓冲剂保持细胞生长过程中,pH,稳定。,第46页,考点互动探究,2.,江苏卷,苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据图,11-34-5,操作步骤,从处理废水活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答以下问题,:,(1),酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、,K,2,HPO,4,、,MgSO,4,、苯酚和水,其中,可作为碳源有,。,(2),将采集到样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐步,以到达富集酚降解菌目标。若上图平板中菌落过于密集,应深入,方便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加,。,图,11-34-5,第47页,考点互动探究,(3),图,11-34-6,为连续划线法示意图,在图中,(,填图中,序号,),区域更易取得单菌落。,(4),采取比色测定法,(,使用苯酚显色剂,),检测降解后废水中,苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下,表中,15,号比色管苯酚浓度应分别为,。,假如废水为,50 mg/L,苯酚溶液,降解后约有,21%,苯酚残留,则需将残留液稀释,(,填序号,:5,10,20),倍后,再进行比色。,图,11-34-6,管号,1,2,3,4,5,6,苯酚浓度,g/L),1,第48页,考点互动探究,答案,(1),蛋白胨、苯酚,(2),增加稀释涂布凝固剂,(3),(4)0,、,0.2,、,0.4,、,0.6,、,0.8,解析,(1),蛋白胨、苯酚都能够作为碳源。,(2),为了筛选酚降解菌,苯酚用量应随转接次数增加而逐步增加。若平板中菌落过于密集,说明浓度太大,为方便菌落计数与分离,应深入稀释涂布。平板培养基为固体培养基,制备时必须添加凝固剂。,(3),连续划线法中在划线末尾区域菌种浓度最小,更易取得单菌落。,(4)1,号比色管作对照,苯酚浓度为,0,16,号比色管苯酚浓度由,0,逐步增加到,1 mg/L,且有梯度,所以,15,号比色管苯酚浓度应分别为,0,、,0.2,、,0.4,、,0.6,、,0.8 mg/L,。废水为,50 mg/L,苯酚溶液,降解后约有,21%,苯酚残留,则需将残留液稀释,20,倍后,再进行比色。,第49页,考点互动探究,3.,全国卷,空气中微生物在重力等作用下,能够一定程度地沉降。某研究小组欲用平板搜集教室空气中微生物,以了解教室内不一样高度空气中微生物分布情况。试验步骤以下,:,配制培养基,(,成份,:,牛肉膏、蛋白胨、,NaCl,、,X,、,H,2,O);,制作无菌平板,;,设置空白对照组和若干试验组,进行相关操作,;,将各组平板置于,37,恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落平均数。,回答以下问题,:,第50页,考点互动探究,(1),该培养基中微生物所需氮起源于,。若要完成步骤,该培养基中成份,X,通常是,。,(2),步骤,中,试验组操作是,。,(3),若在某次调查中,某一试验组平板上菌落平均数为,36,个,/,平板,而空白对照组一个平板上出现了,6,个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了,现象。若将,30(,即,36-6),个,/,平板作为本组菌落数平均值,该做法,(,填“正确”或“不正确”,),。,第51页,考点互动探究,答案,(1),牛肉膏、蛋白胨琼脂,(2),将各试验组平板分别放置在教室不一样高度位置上,开盖暴露一段时间,(3),污染不正确,解析,本题考查微生物培养与计数,主要考查学生识记、了解与试验设计能力。,(1),培养基中牛肉膏和蛋白胨中都含有蛋白质,可作为氮源。用于计数培养基应为固体培养基,需加入琼脂等凝固剂。,(2),该试验目标是了解教室内不一样高度空气中微生物分布情况,所以需将灭菌后平板放置在教室不一样高度位置上,开盖暴露一段时间,然后再在恒温箱中培养。,(3),空白对照组应是无菌平板,所以应该无菌落出现,有菌落出现说明培养基被污染了,那么其它各试验组培养基也不合格,所以需要重新制作平板。,第52页,考点互动探究,4.,全国卷,某同学用新鲜泡菜滤液为试验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生乳酸能溶解培养基中碳酸钙。回答以下问题,:,(1),分离纯化乳酸菌时,首先需要用,对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释理由是,。,(2),推测在分离纯化所用培养基中加入碳酸钙作用有,和,。分离纯化时应挑选出,菌落作为候选菌。,(3),乳酸菌在,-20,长久保留时,菌液中常需要加入一定量,(,填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”,),。,第53页,考点互动探究,答案,(1),无菌水泡菜滤液中菌浓度高,直接培养极难分离得到单菌落,(2),判别乳酸菌中和产生乳酸,(,或酸,),含有透明圈,(3),甘油,解析,本题考查微生物培养及泡菜制作方面知识。,(1),分离纯化乳酸菌时,首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释理由是在稀释度足够高菌液里,聚集在一起乳酸菌将被分散成单个细菌,从而能在培养基表面形成单菌落。,(2),在分离纯化所用培养基中加入碳酸钙作用有中和乳酸菌代谢过程中产生乳酸和利于乳酸菌识别与分离。分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈菌落作为候选菌。,(3),乳酸菌在,-20,长久保留时,甘油可起到密封和隔绝空气作用。,第54页,有机农药苯磺隆是一个除草剂,长久使用会污染环境。研究发觉,苯磺隆能被土壤中一些微生物降解。分离降解苯磺隆菌株和探索其降解机制试验过程如图甲、乙所表示。,(1),微生物生长繁殖所需主要营养物质有碳源、水、,四类,该试验所用选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源,其原因是,。,教师备用习题,第55页,(2),纯化菌株时,通常使用划线工具是,。划线某个平板培养后,第一划线区域划线上都不间断地长满了菌,第二划线区域及其它划线区域均无菌落,造成划线无菌落可能操作失误有,、,。,(3),为探究苯磺隆降解机制,将该菌种培养液过滤离心,取上清液做图乙所表示试验。该试验假设是,该试验设计是否合理,?,。为何,?,。,教师备用习题,答案,(1),氮源和无机盐只有能利用苯磺隆微生物能正常生长和繁殖,(2),接种环接种环灼烧后未冷却划线未从第一区域末端开始,(3),目标菌株能分泌降解苯磺隆蛋白质不合理缺乏空白对照,第56页,教师备用习题,解析,(1),微生物各种培养基配方普通都含有水、碳源、氮源和无机盐四类营养物质,;,选择培养基允许特定种类微生物生长,同时抑制或阻止其它种类微生物生长,因而培养基必须以苯磺隆为唯一碳源,只让目标菌株生长繁殖。,(2),纯化菌株时,通常使用划线工具是接种环,(,或接种针,);,接种环在平板内每一次划线前,都要先灼烧灭菌冷却后划线,而且要从上一次划线末端而非空白处划线,不冷却会烫死上次划线末端菌株,从空白处划线是不会有菌落生长。,(3),图乙上清液中加入蛋白酶溶液是用于水解上清液中某蛋白质,由此可判定,试验假设是目标菌株经过分泌某种蛋白质来降解苯磺隆,不过尚需设置不加入蛋白酶对照组试验,不然没有说服力,因而试验设计不合理。,第57页,