医学猪繁殖和呼吸综合征病毒(2).ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,猪繁殖和呼吸综合征病毒,一,、,PRRSV的形态特征,1、套式病毒,目,动脉炎病毒,科,动脉炎病毒,属,2、基本形态及核酸,病毒粒子,呈卵圆形，直径50,65nm。,核衣壳,直径30,35nm，呈二十面体对称。,有,囊膜。,单分子线状,单股正链RNA病毒。,3、病毒蛋白有,核衣壳蛋白,（N，分子质量120000u）和两种主要,囊膜蛋白,（M和GP5）。,M,是非糖基化的嵌膜蛋白，分子质量160000u。,GP5,为糖蛋白，分子质量约25 000u。,GP5与M通过,二硫键,形成二聚体，对病毒的感染力及中和作用至关重要。,此外，还有4种次要囊膜蛋白（GP2、GP3、GP4及E）及两种大分子非结构蛋白（NSP）。,4、,基因组,大小为13000,15000nt。,5,端帽，约75%为RNA聚合酶基团。,3,端聚A尾，有编码病毒结构蛋白的基因。,有感染性,。,5、表面有约5nm大小的突起，,无血凝活性,，不凝集哺乳动物或禽类红细胞。,二、PRRSV的增殖与变异1、病毒的增殖,病毒增殖的细胞：,猪,的单核细胞-,巨噬细胞系统内增殖,猪肺泡,巨噬细胞,外周,单核细胞,肺间质,巨噬细胞,最为敏感,在宿主,细胞浆的空泡膜及滑面内质网,小池膜上“出芽”，成熟的病毒粒子多蓄积在空泡腔内。,病毒增殖数量与其适应宿主细胞程度有密切关系。,病毒增殖的过程：,鼻黏膜或,上呼吸道系统,(巨噬细胞),血液循环,初级复制部位,病毒增殖的特点：,增殖的特点,有严格的,宿主专一性,对巨噬细胞有,专嗜性,。,抗体依赖性,增强作用,即在亚中和抗体水平存在的情况下，在细胞上的,复制能力反而得到增强,。,2、病毒的变异,PRRSV,分为两个型：,（1）以Lelystad virus(LV株)为代表的,欧洲型,（简称A亚群）。,（2）以ATCC VR-2332毒株为代表的,美洲型,（简称B亚群）。,两者,在抗原上有显著差异，只有很少的交叉反应。,A亚群,：广泛的基因组,变异,。,B亚群,：呈较为,保守性,。,不同毒株之间在,毒力和致病力,上有明显的差异。,我国,的PRRSV均属美洲型，迄今还没有发现欧洲型株，同时我国的分离毒株也存在变异现象，现已发现有缺失变异毒株的存在。,三,、,PRRSV的致病机理,畜体,病毒,巨噬细胞,广泛性的血管炎,其他组织的破坏,脾广泛坏死,淋巴结的严重破坏,四、PRRSV的抵抗力,1、病毒的稳定性受,pH和温度,的影响比较大。,在,pH,5或 pH,7,的条件下，其感染力降低95%以上。,病毒在-70可保存18个月，4保存1个月，37 48h，56 45min完全失去感染力。,2、,干燥,可很快使病毒失活。,3、,对有机溶剂十分敏感,，经氯仿处理后，其感染性 可下降99.99。,4、对常用的,化学消毒剂,的抵抗力不强。,五、PRRSV的流行病学,1、易感,动物,PRRSV只感染,猪,。,各种品种、不同年龄和用途的猪均可感染，但以,妊娠母猪,和1月龄以内的,仔猪,最易感。,2、,传染源,患病猪和带毒猪是本病的重要传染源。,4、,传播途径,PRRSV主要传播途径是,接触感染、空气传播，,也可通过胎盘垂直传播。,易感猪可经以下几种途径而感染病毒：,经口、鼻腔、肌肉、腹腔、静脉及子宫内接种,。,与带毒猪,直接接触。,与污染有PRRSV的,运输工具、器械,接触。,感染猪的流动,也是本病的重要传播方式。,4、流行病学,特点,高度,接触性,传染病，呈,地方,流行性。,持续性感染,是PRRSV流行病学的重要特征。,PRRSV可在感染猪体内,存在很长时间,。,猪感染病毒后,214周,均可通过接触将病毒 传播给其它易感猪。,六、PRRSV的实验室诊断,该病毒确切诊断需依赖实验室诊断技术，包括,病毒分离鉴定、血清学诊断和分子生物学诊断技术,。,（一）病毒分离鉴定,病毒分离鉴定是诊断PRRSV,最确切,的方法,1、,病料,首选材料,：肺、扁桃体、脾、淋巴结和血清。,适宜,的检验材料：死产和流产胎儿的脾肺血清和胸水。,检出率最高：,弱胎猪和有呼吸道症状的急性感染猪。,2、,分离病毒的细胞,原代细胞：,PAM。,传代细胞：,CL2621、MAl04、Marcl45等细胞系。,但就临诊分离率而言，PAM的敏感性要高于传代细胞。,注意：,（1）一般来说,日龄小,的猪对病毒的敏感性更高些。,（2）,首次传代,有时可能无CPE，需盲传23代。,（3）,不同的毒株,可能适应不同的细胞系。,有些毒株仅能在PAM或仅能在CL2621细胞中生长。,欧洲株,在PAM上的复制速度更快、效率更高。,北美毒株,在CL2621上更有利于分离。,3、,病毒鉴定的技术,（1）单克隆抗体或多克隆抗体免疫荧光抗体技术,（2）单层过氧化物酶试验,（3）RT-PCR技术,（4）电镜技术,（二）血清学诊断,采用血清学抗体检测技术是应用,最为广泛,的实验室诊断方法。,目前有,4,种不同的方法用于检测血清中的 PRRSV抗体，包括：,方法,优点,缺点,间接免疫荧光抗体试验,（,IFA,）,特异性高 早期诊断,抗原变异会影响结果,结果主观判定,免疫过氧化物酶单层试验,（,IPMA,）,特异性高 敏感性高 早期诊断,结果主观判定,高背景,抗原变异会影响结果,血清中和试验,（,SN,）,可检测期长,敏感性低,耗时,抗原变异会影响结果,酶联免疫吸附试验,（,ELISA,）,自动化操作 高品质控制,高背景,（三）分子生物学诊断技术,1、RT-PCR,2、巢式PCR,3、原位PCR,4、RT-PCR-RFLP,5、核酸探针技术,直接检测病料组织中的病毒,。,七、PRRSV的防治,(1)坚持,自繁自养,的原则，建立稳定的种猪群，不轻,易引种。,(2)规模化猪场应彻底实现,全进全出,，至少要做到产,房和保育两个阶段的全进全出。,(3)建立健全规模化猪场的,生物安全体系,，定期对猪,舍和环境进行消毒，保持猪舍、饲养管理用具及环,境的清洁卫生。,(4)适当使用,药物控制,猪群的细菌性继发感染。,(5)定期对猪群中PRRSV的感染状况进行,监测,，以了解该病在猪场的活动状况。,(6)对发病猪场要严密,封锁,，对发病猪场周围的,猪场也要采取一定的防范措施，避免疫源扩,散。,(7)关于,免疫接种,，目前尚无十分有效的免疫防,制措施。,