酶标仪软件操作步骤.doc

酶标仪软件操作步骤
一、 软件运行前的连接
酶标仪插上电源，和电脑连接好后，打开电脑和酶标仪开关，酶标仪至少稳定15min后开始读数，效果比较好。注意，当酶标仪处于power on 的状态时，不要手动打开酶标板室和比色皿室的门，以免紫外辐射的伤害或者仪器的损伤。
二、软件的运行
1.打开桌面快捷方式SkanIt RE for MSS 2.4.2运行软件，出现Log on To SkanIt software的界面。
2.use name默认为“admin”, password为空
3.点OK进入SkanIt software 2.4.2界面，New session-新建任务程序，Open session-打开已有程序。
4.在界面上方的setting中选择Instrument，出现Instrument setting的界面，在Instrument中选中Multiskan spectrum on COMⅠ,Themo Electron。点击右侧的setup，在serial number中输入1500-850，然后点击OK。再点击Default instrument右边的connect，即可设定好连接。然后点击close关闭窗口。
三．New session操作
1．新建任务程序：
→点击new session进入protocol options界面，在session name中输入新的程序名称
→点击next进入plate layout options界面，在select plate template中选择所需模板类型（一般96孔板选择use default，比色皿选择cuvette，其他的可以选择相应的类型）
→输入plate layout name(系统默认的与session name相同)
→点击next进入Definition done界面，在select location中选择任务程序所要保存的目的文件夹（该界面可进行新建，重命名及删除文件夹操作）
→点击finish完成新建，进入SkanIt software 2.4.2程序操作主界面（主要有三大块： platelayout用于模板区域选择，protocol用于程序编辑，results用于数据处理）。
2.plate layout对模板区域进行选取
→点击wizard进入选取模板区域操作界面fill wizard（任务类型type有： blank空白，calibrator标准蛋白，control对照，empty空白，unkown一般为样品）。
→在右边模板中选取开始点位置，即红圆点所在位置。
→选取方向，在Filling order中可通过箭头设定。
→对于blank，在No.of replicates中填写好重复数，选择好开始位点和方向，点击Add可完成。
→对于calibrator，在No.of calibrators 中填写标准蛋白的个数，在No.of replicates中填写好重复数，选择好开始位点和方向。如有浓度梯度，可选择Generate series进行设置。
例如，取7个浓度蛋白做标准曲线，稀释倍数分别为20，40，80，160，320，640，1320，每个浓度重复两次，则在No.of calibrators 中填写7，在No.of replicates中填写2，选择好开始位点和方向。然后选中Generate series，出现conventions的界面，在Initial value中填写20，在operators中选择Multiply，step by中填写2，点击ok。
→对于control，操作基本和calibrators相似。
→对于Empty操作基本和blank相似。
→对于unknown，填写好No.of replicates，No.of unknowns并选择好开始位点和方向，点击Add即可完成。
→第一块板填满后，有时会自动进入第二块板的编辑，注意看Fill wizard的模板下方的current plate，如果显示为2/2,则可以直接关掉窗口，模板区域即可编好。
标注：对于单一型任务可先选取全模板【即在No.of unkown选项中设为模板最大孔数】，然后对不要的区域进行删除。
对于非blank和empty型任务，若有浓度差，可勾选generate series,然后进行设定：series为有规则的浓度差，multiple values为不规则的浓度差。有规则的可通过运算公式，系统直接算出，无规则的通过键盘输入，点击add进行添加。
3.编辑程序
→选好所用模板区域后，点击protocol进入程序编辑界面。
→在protocol properties所属框内的execution order选项中选中数据读取路径（共有四种，第一种一般为常用路径，一次读四个孔）。
→在Settle delay选项中设定读数时间间隔。一般比色皿不需要读书时间间隔，设置为零即可，对于测量板而言，由于板在移动过程中液体表面共振波的影响，需要稳定一段时间，一般设置为5s in a 6-well plate，300ms in a 96-well plate，<20ms in a 384-well plate。
→在steps所属框内空白处或选中程序单击鼠标右键得到应用程序子菜单。
→在子菜单中选取你所要运行的程序（如常用的程序有photometric,photometric-scanning,Incubate和shake等），并在该程序的选项中设定你所需的参数。一般测蛋白含量选择photometric，在wavelength中设置好波长即可。
→所有程序编写好后，在session中点击save保存好模板程序，不保存将无法运行上面所设的模板程序。
4．测读数据
→在Execution所属框内点击connect链接机器，链接过程中会出现机器状态列表窗口，无异常后点Close关闭。
→在Execution所属框内点击run plate out弹出酶标板载板，把酶标板底部擦干后放上去后，确保平稳后点击run plate in，等酶标板进去。
→在Execution所属框内点击Execute session按钮运行所设程序，弹出Run name窗口，点击Ok确认运行。接着会出现读数窗口，不要关闭读数窗口，读数完毕后窗口会自动消失，并弹出酶标板载板。
注：以前，无法进行人工读板，这是因为机器序列号的设置不对，要仔细查看机器上的机器序列号，将正确的序列号填入操作软件中的设置中。
5．数据分析及保存
→仪器读数完毕后，系统自动进入Results操作界面，在Result界面所属框中，可对所得数据进行分析。
→在Result所属框中，单击要分析数据的程序，如测蛋白一般选择的photometric，点鼠标右键得到数据分析方法主菜单。
→选择要分析的方法，测蛋白选择Quantitative Curve Fit，出现Parameters，Graph，Table，List可以点击查看结果。
→如果需要标准曲线，则在Graph的曲线图中单击右键选择Toolbar，图标上方会出现一系列图标，点击Copy to clipboard选择As a Bitmap，将其粘贴在新建word文档中并保存。
→点击Result左侧图标框中选择Export，在Parameters中的select items to report中选择要保存的内容，一般选择layout，Photometric， Quantitative Curve Fit，然后点击Add，在；右边的Report items中出现所选择的内容。
→在After execution中选中Save to file，通过右下方的Browse选择要保存的文件。注意此次操作可能没有保存到目的文件夹。必须进行以下步骤。
→点击上方的Report可看见结果，点击Save选择所要保存到的目的文件夹。并检查是否所有要保存的数据都已经保存到相应文件夹中。
四、Open session操作
若要运行或查看已有的程序，在登录界面点击Open session,打开程序所在文件夹，单击所要运行或查看的程序（提示：在该界面中，点NewFolder可新建文件夹,Rename可对已有文件夹重命名，delete可对程序及文件夹进行删除），点Open打开。然后可进行所需操作。
五、仪器的断开与关闭
在读数完成后若要关闭仪器，应先在Execution所属框内点击Run plate in，待酶标板载板进去后，点击disconnect断开仪器，然后再关闭仪器开关，盖好外罩。
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