微生物的实验室培养第二课时.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,1/8/2022,#,微生物的实验室培养第二课时,微生物的实验室培养第二课时,第1页,2,微生物试验室培养,（知识点总结）,微生物的实验室培养第二课时,第2页,3,复习题,1,、甲、乙、丙是三种微生物，下表、是用来培养微生物三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖；甲能在中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生长繁殖，甲、丙都不能。以下说法正确是：,粉状硫,10g,K,2,HPO,4,4g,FeSO,4,0.5g,蔗糖,10g,（,NH,）,2,SO,4,0.4g,H,2,O,100mL,MgSO,4,9.25g,CaCI,2,0.5g,+,+,+,+,-,+,+,+,+,+,+,-,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,+,A,、甲乙丙都是异养微生物,B,、甲乙都是自养微生物、丙是异养微生物,C,、甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物,D,、甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物,微生物的实验室培养第二课时,第3页,4,复习题,2,、培养基、培养皿、接种环、试验操作者双手、空气、牛奶所采取灭菌、消毒方法依次是：,化学消毒 灼烧灭菌 干热灭菌 紫外线灭菌,高压蒸汽灭菌 巴氏消毒法,A,、,B,、,C,、,D,、,微生物的实验室培养第二课时,第4页,5,三、纯化大肠杆菌,试验目标：,接种大肠杆菌于培养基上，经过培养使其形成由单个细胞繁殖形成子细胞群体，即菌落。,试验过程：,(,知识网络）,配制培养基,接种大肠杆菌,恒温培养箱中培养（,1224h,）,结果分析与评价,计算 称量 溶化 灭菌 倒平板,调,PH,分装 包扎,菌种保藏,平板划线,稀释涂布平板,未接种培养（对照组）,接种培养（试验组）,培养基配制成功是否？,接种操作成功是否？,微生物的实验室培养第二课时,第5页,6,配制培养基,在火焰旁,右手拿,锥形瓶，,左手拔出,棉塞；,右手拿锥形瓶，使锥形瓶瓶口,快速,经过火焰；,左手,将培养皿,打开一条缝隙,，,右手,将培养基,倒,入培养皿，,立刻盖,上皿盖。,待平板冷却,凝固后,，将平板,倒过来,放置。,倒平板过程总结：,微生物的实验室培养第二课时,第6页,7,Q1.,培养基高压蒸汽灭菌后，需冷却到,_,左右时，才能倒平板。用什么方法来预计培养基温度？,_,Q2.,操作时锥形瓶口经过酒精灯火焰目标是：,_,Q3.,将平板倒置目标是：,_,Q4.,在倒平板过程中，将培养基溅在皿盖与皿底之间部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为何？,_,50,感觉锥形瓶温度刚才,不烫手，,就能够倒平板了,预防,瓶口微生物,污染,培养基,既能够使,培养基表面冷凝水分更加好挥发，,又能够预防,皿盖上水珠落入培养基，造成污染,不能，,因为,空气中,微生物可能,在皿盖和皿底之间培养基上,滋生,。,配制培养基,微生物的实验室培养第二课时,第7页,8,平板划线接种,原理：,经过,接种环在琼脂固体培养基表面,连续划线操,作,，将聚集菌种,逐步稀释,分散到培养基表面。,微生物的实验室培养第二课时,第8页,9,平板划线接种,灼烧接种环,冷却,划线 （第一区域）,蘸取菌液,灼烧接种环,冷却,划线 （第二区域）,灼烧接种环,冷却,划线 （第三区域）,灼烧接种环,冷却,划线 （第四区域）,灼烧接种环,冷却,划线 （第五区域）,灼烧接种环,平板倒置放置培养,微生物的实验室培养第二课时,第9页,10,平板划线接种,第一区域,第二区域,第三区域,第四区域,第五区域,微生物的实验室培养第二课时,第10页,11,Q2,：,每次划线前灼烧接种环目标：,Q3,：,划线结束后灼烧接种环目标：,平板划线接种,答案：,防止,接种环上可能存在微生物,污染,培养基,答案：,杀死,上次划线结束后,残留菌种,答案：,及时杀死接种环上残留菌种，,防止污染,环 境和操作者。,Q1,：,第一步灼烧接种环目标：,微生物的实验室培养第二课时,第11页,12,稀释涂布平板接种,原理：,将,菌液,进行一系列梯度稀释，,并将,不一样稀释度,菌液,分别,涂布到,琼脂,固体培养基,上进行培养。,当稀释倍数足够高时，即可取得单个细菌形成,标准菌落,。,微生物的实验室培养第二课时,第12页,13,1,、梯度稀释,2,、涂布平板,稀释涂布平板接种,微生物的实验室培养第二课时,第13页,14,结果分析与评价,1,、培养基制备成功标准,2,、接种操作成功标准,假如,未接种,培养基在恒温箱中保温,12,天后,无菌落,生长，,说明,培养基配制是,成功,，不然试验失败，需重新配制。,假如,培养基上生长菌落颜色、性状、大小基础一致，,并符合大肠杆菌菌落特点，,则说明,操作是符合要求。,假如,培养基上出现了其它菌落，,则说明,接种过程中，无菌,操作还未到达要求，试验失败，需分析原因，再次试验。,微生物的实验室培养第二课时,第14页,15,菌种保藏（了解）,1,、,暂时保藏,：适合用于,频繁使用,菌种。,将菌种接种到固体斜面培养基，在适宜温度下培养。当菌落长成后，将试管置于,4,冰箱中保藏,2,、,甘油冷冻管保藏：,适合用于需,长久保留,菌种。,在,3mL,甘油瓶中，装入,1mL,甘油灭菌。将,1mL,培养菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀，放,-20,冷冻箱中保藏,微生物的实验室培养第二课时,第15页,