院消毒灭菌效果的监测及医院环境卫生学监测PPT课件.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,医院消毒灭菌效果监测及医院环境卫生学监测,苏州九龙医院,1,医院消毒灭菌效果监测,卫生部,医院感染管理规范,医院必须对消毒、灭菌效果定期进行监测；,灭菌合格率必须达到,100%,；,不合格的物品不得进入临床使用部门。,2,医院消毒灭菌效果监测,医院消毒灭菌效果监测的目的：,是预防医院内感染的重要措施之一。,对消毒效果的监测是评价：,其消毒设备运转是否正常、,消毒药剂是否有效、,消毒方法是否合理、,消毒效果是否达标的唯一手段。,3,医院消毒灭菌效果监测,消毒灭菌效果监测的目的：,是无菌技术操作及隔离技术的基础。,因此消毒灭菌效果监测是保证医院消毒灭,菌质量的重要措施。,4,医院消毒灭菌效果监测,消毒灭菌效果监测遵循原则：,监测人员必须经过专业培训，掌握一定的消毒知识，熟悉消毒设备和药剂性能，具有熟练的检验技能；,选择合理的采样时间（消毒后、使用前）；,遵循严格的无菌操作。,5,医院消毒灭菌,效果监测,的,内容,热力灭菌效果监测：,包括,，压力蒸汽、干热,低温灭菌效果监测：环氧乙烷,紫外线消毒效果监测；,医疗器械消毒灭菌效果监测：,使用中消毒剂的监测；,血液净化系统消毒效果监测：,医院环境卫生学监测：,包括,，空气、工作人员手、物体表面,6,一、热力灭菌效果的监测：,热力灭菌效果的监测包括：,压力蒸汽灭菌效果的监测,干热灭菌效果的监测,7,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,压力蒸汽灭菌器的分类：,根据排放空气的方式和程度不同可分为：,下排气式压力蒸汽灭菌器,预真空、脉动真空压力蒸汽灭菌器,8,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,压力蒸汽灭菌效果监测方法包括：,A,、,工艺,监测,B,、,化学,监测,C,、,生物,监测,9,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,A,、,工艺监测,（程序监测）,按照经过试验所确定的灭菌工艺和有关参数进行检查，以判断灭菌是否按照规定的条件进行,10,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,工艺监测的主要项目：,(,必须每锅进行,),物品的包装体积、重量：,下排气式：,30cm,30cm,25cm,预真空：,30cm,30cm,50cm,金属包的重量不超过,7kg,；敷料包不超过,5kg,快速蒸汽：一般无包装,11,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,工艺监测的主要项目：,排气情况：,灭菌温度,灭菌时间,压 力,每次灭菌应做详细记录，,包括：每锅,锅号、压力、温度、时间、灭菌,物品、灭菌操作者签名,12,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,压力蒸汽灭菌所需压力、温度、灭菌时间,灭菌器名称,压力,温度,维持灭菌时间,下排气,102.9kpa,（,1.05kg/cm,2,）,121,20-30 min,预真空、脉动真空,205.8kpa,（,2.1kg/cm,2,）,132,4min,注意：手机灭菌温度不能超过,136,13,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,工艺监测的主要项目：,物品的装放：,大包上层、小包下层,织物上层、金属下层,物品竖放不能贴靠柜壁,下排气：装量不超过柜室内容量,80%,14,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,工艺监测的主要项目：,物品的装放：,预真空：装载量不得柜室容积的,90%,；,装载量不得柜室容积的,10%,。,脉动真空：装载量不得柜室容积的,5%,。,（以防止,“,小装量效应,”,，残留空气影响灭菌效果）,15,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,B,、,化学监测,包括：,包内指示卡,(121,、,132,）、,包外指示胶带,要求：,指示胶带每包外必贴；,指示卡每包包内必放。,16,包内：,化学指示卡,结果判断：,打开灭菌包，指示剂由米色变成黑色，表示达到灭菌条件,17,包外：,化学指示胶带,18,灭菌包应有标签：,19,灭菌包标签：,20,注意事项：,包外化学指示胶带,，根据变色情况，只能代表物品是否已经灭菌，仅仅起到一个,鉴别,作用，不能代表灭菌是否彻底。,包内化学指示卡,，可以准确反映灭菌的时间、温度和饱和蒸汽的综合变化，是,鉴定,每一个包裹内部的情况，指示剂与对照色块颜色相符，表示灭菌彻底。,21,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,B,、,化学监测,、,B-D,试验,（空锅试验），需,每日一次,对于预真空、脉动真空压力蒸汽灭菌器应,每日空锅做,B-D,试验。,目的：,检测灭菌器内空气排除效果,22,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,C,、,生物监测,1,）,压力蒸汽灭菌器：,采用,“,自含式生物指示剂,”,每月,进行,一次,（指示菌株采用耐热的嗜热脂肪杆菌芽,孢）,2,）新灭菌,设备,和,维修后,在,投入使用前,，应,进行生物监测，合格后方可以投入使用,23,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,附：快速压力蒸汽灭菌器,有三种，可以分为：,1,、下排气,2,、预真空,3,、正压排气,24,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,快速压力蒸汽灭菌器,注意：,其灭菌参数，如时间和温度由灭菌器性质、灭菌物品材料性质（带孔和不带孔）、是否裸露而定：,25,（一）压力蒸汽灭菌效果监测,快速压力蒸汽灭菌器,注意：,一般灭菌时,要求,灭菌物品,裸露,。,快速压力蒸汽灭菌法的灭菌周期不包括干燥阶段，因此不管物品是否包裹，取出的物品应该尽快使用，,不能储存，无有效期,。,26,（二）干热灭菌效果监测,干热灭菌效果监测方法包括：,A,、,化学,检测法,B,、,物理,检测法,（电热偶,检测法,）,C,、,生物,检测法,27,（二）干热灭菌效果监测,注意事项：,1,、待干热灭菌物品必须清洗干净（温度高于,170,时，有机物会碳化），防止灭菌失败或污物碳化。,2,、灭菌后要待温度降到,40,以下再开箱，防炸裂。,3,、采用干热灭菌，油剂、粉剂的厚度不得超过,0.635cm,，凡士林纱布厚度不得超过,1.3cm,。,28,（二）干热灭菌效果监测,C,、,生物,检测法,2,）,检测方法,：,将枯草杆菌芽孢菌片分别装入灭菌试管内（,1,片,/,管）。,灭菌器与每层门把手对角线内 ，外角处放置,2,个菌片的试管 ，,试管帽置于试管旁，关好柜门，经过一个灭菌周期后，待温度,降至,80,时，加盖试管帽后取出试管。,在无菌条件下，加入普通营养肉汤培养基（,5ml/,管），以,36,1,培养,48,小时，观察初步结果，无菌生长管继续培养至第,7,日。,29,（二）干热灭菌效果监测,C,、,生物,检测法,3,）,结果判断,：,若每个指示菌片接种的肉汤管澄清，判为灭菌合格。,若指示菌片之一接种的肉汤管混浊，判为灭菌不合格。,对难以判定的肉汤管，取,0.1ml,接种于营养琼脂平板，用灭,菌,L,棒涂匀，放,36,1,培养,48,小时，观察菌落形态，并,做涂片染色镜检，判断是否有指示菌生长，若有指示菌生长，,判为灭菌不合格；若无指示菌生长，判为灭菌合格。,4,）,注意事项,：,检测所用的指示菌片需经卫生部认可，并在有效期内使用。,30,二、环氧乙烷灭菌效果监测,EO,监测方式：,A,、,工艺,监测：,每锅,进行工艺监测,B,、,化学,监测：,每包,进行化学监测,C,、,生物,监测：,每月,进行生物监测,31,二、环氧乙烷灭菌效果监测,B,、,化学,监测,每个灭菌物品的外包装应粘贴包外化学指示胶带，作为灭菌过程的标志；,包内放置化学指示卡，作为灭菌效果的参考。,只有当消毒工艺符合要求，化学指示物变色符合规定标准色要求的情况下，产品才可以使用。,32,33,二、环氧乙烷灭菌效果监测,C,、,生物,指示物监测,生物监测采用的指示物,“,枯草杆菌黑色变种芽孢,”,（,每月,）,EO,测试包分为：,挑战性测试包,常规测试包,34,三、紫外线消毒效果监测,紫外线消毒的监测，必须进行：,A,、,日常,监测,B,、,化学,监测,C,、,生物,监测,35,三、紫外线消毒效果监测,A,、,日常,监测：使用时,记录：新灯管启用日期、灯管使用照射时,间、累计照射时间、擦管时间、化,学及生物监测结果记录,36,三、紫外线消毒效果监测,B,、,化学,监测及,方法,要求,：,3 6,个月一次；主要监测使用,中灯管的照射强度。新灯管要,进行抽样监测。,37,三、紫外线消毒效果监测,监测方法：,采用紫外线消毒灯强度监测,化学指示卡,（必须经过卫生部批准认可，并在有效期内使用）；,注意擦干净紫外线消毒灯管并将其打开,5,分钟；,将紫外线消毒灯强度监测化学指示卡垂直平放于灯管一米处，有图案一面朝上，照射,1,分钟，（照射后，图案正中光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色，）观察指示卡色块的颜色与其标准色块比较，读出照射强度。,38,紫外线消毒灯,强度监测化学指示卡,：,39,三、紫外线消毒效果监测,监测方法：,采用紫外线消毒灯强度监测,紫外辐照计,；,注意擦干净紫外线消毒灯管并将其打开,5,分钟后；,将测定波长,254nm,的,紫外线辐照计,探头置于紫外线灯下垂直距离,1m,的中央处。,待仪表稳定后，所示数据即为紫外线灯管的,辐照度值。,40,41,三、紫外线消毒效果监测,注意事项：,测定时电压,220V,5V,；温度,2025,；相对湿度,60%,。,“,紫外辐照计,”,，必须在计量部门检定的有效期内使用。,“,紫外辐照计,”,，至少每,1,年标定一次。,42,三、紫外线消毒效果监测,结果判定：,普通,30 W,直管型紫外线灯，新灯辐照强度,90,W/cm,2,，为合格；,使用中紫外线灯辐照强度,70,W/cm,2,，为合格；,30 W,高强度紫外线新灯的辐照强度,180,W/cm,2,，为合格。,43,三、紫外线消毒效果监测,C,、,生物,监测：,经紫外线消毒后的物品或空气中的自然菌,应减少,90.00%,以上，人工染菌杀灭率达到,90.00%,。,空气消毒效果的监测：空气培养,表面消毒效果的监测：物体表面采样,44,使用,紫外线,消毒灯的,注意事项,：,1,、灯管是应采用对紫外线透过率高的石英玻,璃制成；,2,、使用强度应该,70,W/cm,2,；,70,W/cm,2,要及时更换灯管。采用室内悬吊灯，灯管,数量每,m,3,不少于,1.5W,，照射时间不少于,30,分钟；考虑到紫外线兼有表面消毒与空气,消毒的双重作用，可安装在桌面上方,1m,处,;,不考虑表面消毒的房间。可吸顶安装，也,可采用活动式紫外线灯照射，照射时间一,般均应大于,30min,；,45,使用,紫外线,消毒灯的,注意事项,：,3,、紫外线灯在使用过程中，应该保持清洁，,一般每二周用酒精棉球擦拭一次，发现灯,管表面有灰尘、油污时应该及时擦拭；,4,、用紫外线灯消毒室内空气时，房间内应,保持清洁干燥，温度低于,20,或高于,40,、相对湿度大于,60%,，应该适当延长,照射时间；,5,、用紫外线消毒物品时，应使照射表面受,到紫外线的直接照射，且应该达到足够,的照射剂量；,6,、不得使紫外线光源照射到人；,7,、紫外线强度计至少每,1,年标定一次。,46,四、医疗器械消毒灭菌效果监测,各种医疗用品,消毒灭菌后,国家卫生标准：,1,、进入人体无菌组织、器官或接触破损皮肤、粘膜,的医疗用品必须无菌。,2,、接触粘膜的医疗用品，细菌菌落总数应,20cfu/g,或,20cfu/100cm,2,；不得检出致病性微生物。,3,、接触皮肤的医疗用品，细菌菌落总数应,200,cfu/g,或,200cfu/100cm,2,；不得检出致病性微,生物。,47,四、医疗器械消毒灭菌效果监测,各种医疗用品,消毒灭菌效果,的监测,1,、采样,时间,：在灭菌处理后，存放有效期内采,样。,（要求：重点科室,每月至少监测一次,）,2,、采样,地点,：在百级净化台下进行，避免微生,物污染；对单向流空气区域及工,作台面，必须进行洁净度验证。,48,四、医疗器械消毒灭菌效果监测,各种医疗用品,消毒灭菌效果,的监测,3,、,检测方法,：用无菌操作的方法,小件的医疗器械：,对象：缝合针、针头、手术刀片等,检测数量：取,5,件,采样方法：直接分别浸入,6,管需,-,厌氧培养管（其中,一管为阳性对照）与,4,管霉菌培养管。,培养基用量为,15ml/,管,49,四、医疗器械消毒灭菌效果监测,各种医疗用品,消毒灭菌效果,的监测,注射器：,对象：各类注射器,检测数量：取,5,支,采样方法：在,5ml,的无菌洗脱液中反复抽吸,5,次（洗下管内细菌混匀后再接种）,50,四、医疗器械消毒灭菌效果监测,各种医疗用品,消毒灭菌效果,的监测,3,、,检测方法,：用无菌操作的方法,大件的医疗器械：,对象：手术钳、镊子等大的医疗器械,检测数量：取,2,件,采样方法：用蘸有无菌洗脱液的棉拭子反复涂擦采,样，并将棉拭子投入,5ml,的无菌洗脱液中。,（将采样液混匀后再接种需,-,厌氧培养管（共,6,管其中一管作阳性对照；霉菌培养管,4,管。接种量为,1ml/,管，培养基用量,15ml/,管）,51,四、医疗器械消毒灭菌效果监测,各种医疗用品,消毒灭菌效果,的监测,4,、,培养,：,在待检样品的需,-,厌氧培养管中，接种预先准备的金黄色葡萄球菌阳性对照管液,1,：,1000,稀释,1ml,，将,需,-,厌氧培养管及阳性与阴性对照管均于,3035,培养,5,天，霉菌培养管与阴性对照管于,2025,培养,7,天,，培养期间逐日检查是否有菌生长，如加入供试品后培养基出现混浊或沉淀，经培养后不能从外观上判断时，可再取培养液转种入另一支相同的培养基中，培养,4872,小时后再观察有无菌落生长，并在转种的同时，取培养液少量，涂片染色，用显微镜观察是否有菌生长。,52,四、医疗器械消毒灭菌效果监测,各种医疗用品,消毒灭菌效果,的监测,5,、,结果判定,：,其,阳性,对照在,24,小时内应,“,有菌生长,”,；,阴性,对照在培养期间应,“,无菌生长,”,，如需,-,厌氧菌及霉菌培养管内均为澄清，判为灭菌合格。（除,阳性,对照外，其他各管均不得有菌生长，否则判为灭菌不合格）,6,、,注意事项,：,样本送检时间不得超过,6,小时，若样本保存于,04,时不得超过,24,小时。,若消毒因子为化学消毒剂时，采样液中应该加入相应中和剂。,53,五、消毒剂的监测,卫生部,医院感染管理规范,规定：,必须对使用中的消毒剂、灭菌剂，进行,生物,和,化学,的监测。,使用中的消毒剂,国家卫生标准,：,细菌菌落总数应,100cfu/ml,，致病性微生,物不得检出。,54,五、消毒剂的监测,化学,监测要求,应该根据消毒剂、灭菌剂的性能定期监测。,含氯消毒剂、过氧乙酸、戊二醛,（作为消毒剂使用）,等：应该,每日,监测浓度，并做好记录；消毒剂使用的时间不得超过产品说明书规定的使用期限,戊二醛（作为灭菌剂使用）：,每周,不少于,1,次,监测浓度；应同时对消毒、灭菌的,物品,进行,消毒灭菌效果,的监测,消毒物品，,不得检出致病性微生物；,灭菌物品，,不得检出任何微生物。,55,五、消毒剂的监测,化学,监测,含,氯,消毒剂浓度,测试纸,：,测定时，半分钟内，在自然光下与标准色块比较，读出溶液所含的有效成分浓度值。,时间超过,1,分钟，颜色即逐渐消退。,56,化学,监测：,（,测氯浓度试纸,）,57,五、消毒剂的监测,化学,监测,戊二醛,浓度,测试纸,操作方法：,从小瓶中取出一条试纸，并旋紧瓶盖；,将指示色块完全浸没于戊二醛溶液，并及时取出；,用吸水纸吸取多余的液体；,横置于瓶盖上，注意不要将色块面朝下；,等候,3 8,分钟的颜色变化，判读结果。,（,低于,3,分钟，颜色变化不彻底结果不正确；,超过,8,分钟，颜色逐渐褪去，也使判读困难）,58,化学监测,:(,戊二醛）,59,化学,监测（,测戊二醛浓度试纸,）,60,五、消毒剂的监测,化学,监测,戊二醛,浓度试纸操作操作,结果判定：,指示色块变成均匀黄色时，说明溶液的有效浓度高于所测最低有效浓度。,指示色块全部或仍有部分白色，说明溶液的有效浓度低于最低有效浓度。,61,五、消毒剂的监测,生物,监测,检测方法：,A,、涂抹法：,用无菌吸管吸取消毒液,1.0ml,，加入,9.0ml,含有相应中和剂的采样管内混匀；,用无菌吸管吸取上述溶液,0.2ml,，滴于干燥普通琼脂平板，每份样品同时做,2,个平行样；,一平板置,20,培养,7,天，观察其霉菌生长情况，另一平板置,35,温箱培养,72,小时记数菌落数,同时按照卫生部,消毒技术规范,2002,年,11,月版,详见,204,页（按照,3.17.15,原则执行）检测致病菌（金葡、乙型溶血,性链球菌）。,消毒液染菌量,（,cfu/ml,）,=,每个平板上的菌落数,50,62,五、消毒剂的监测,生物,监测,检测方法：,B,、倾注法：,用无菌吸管吸取消毒液,1.0ml,，加入,9.0ml,含相应中和剂的无菌生理盐水采样管中混匀；,分别取,0.5ml,放入,2,只灭菌平皿内，加入已熔化的,45-48,的营养琼脂,15ml-18ml,，边倾注边摇匀，待琼脂凝固；,一平板置,20,培养,7,天，观察其霉菌生长情况；另一平板置,36,1,培养,72,小时，记数菌落数；,同时按照卫生部,消毒技术规范,2002,年,11,月版,详见,204,页（按照,3.17.15,原则执行）检测致病菌（金葡、乙型溶血,性链球菌）。,消毒液染菌量,（,cfu/ml,）,=,每个平板上的菌落数,20,63,五、消毒剂的监测,生物,监测,结果判断,：,消毒剂,：,每季度,监测,1,次,，其含菌量必须,100cfu/ml,，不得检出致病性,微生物；,灭菌剂,：,每月,监测,1,次,，不得检出任何致,病性微生物。,3,、,注意事项,：,采样后,1,小时内检测。,64,附：消毒剂配置换算方法：,百分比（,%,）与,mg/L,换算法,：,1%=10000 mg/L,计算需消毒剂原液的,ml,数,=,（欲配制消毒剂使用液,的,ml,数*欲配制浓度）,/,消毒剂原液浓度,18%,的过氧乙酸原液消毒剂,=180000 mg/L,65,消毒液更换小标签：,66,注意：,如果自己配制的消毒剂，一定要有配置时间、失效期、配置人员签名。,所有化学测试纸、卡，必须经过卫生部批准认可，并在有效期内使用。,67,五、消毒剂的监测,中和剂（中和被检消毒药液的残效作用）：,在微生物杀灭试验中，以消除试验微生物与消毒剂的混悬液中和微生物表面上残留的消毒剂，使其失去对微生物抑制和杀灭作用的试剂。,不同消毒剂用不同的相应中和剂，而且需要等当量，才可完全消除其作用。,68,六、内镜消毒灭菌效果监测,A,、,采样方法,监测采样,部位,：为内镜的,内腔面,。,监测采样,方法,：用无菌注射器抽取,10ml,含有相应中和剂的缓冲液，从待检内镜活检口注入，用,15ml,无菌试管从活检口收集，及时送检，,2,小时内检测。,69,六、内镜消毒灭菌效果监测,B,、,菌落计数,将送检液用旋涡器充分震荡；,取,0.5ml,，加入,2,只直径,9cm,无菌平皿；,每个平皿分别加入已溶化的,45,48,营养琼脂,15ml-18ml,，边倾注边摇匀，待琼脂凝固；,于,35,培养,48,小时后，记数菌落数；,结果判断,菌落数,/,镜,=2,个平皿菌落数平均值,20,70,六、内镜消毒灭菌效果监测,卫生部要求：,消毒后,的内镜应该,每季度,进行生物学监测并记录完整；,灭菌后,的内镜应该,每月,进行生物学监测并记录完整。,内镜,消毒、灭菌后,合格标准,：,消毒后,的内镜合格标准为：,细菌总数,20 cfu/,件，不能检出致病菌。,灭菌后,的内镜合格标准为：无菌检测合格。,（灭菌后的内镜和附件应按照无菌物品要求进行储存）,71,六、内镜消毒灭菌效果监测,C,、,致病菌检测方法,将送检液用旋涡器充分震荡；,取,0.2ml,，分别接种直径,9cm,血平皿、中国蓝平皿和,SS,平皿，均匀涂布；,于,35,培养,48,小时后，观察有无致病菌生长。,72,七、血液净化系统消毒效果的监测,监测要求：,必须,每月,对入、出透析器的透析液进行监测。,当,疑有,透析液污染或有严重感染病例时，应该,增加采样点,，如原水口、软化水出口、反渗水出口、透析液配液口等，并及时进行监测。,当检查结果,超过规定标准,时，须再,复查,。,73,七、血液净化系统消毒效果的监测,采样时间：,每月,对入、出透析器的透析液进行,监测,。,判断结果标准值：,透析器入口液的细菌菌落总数必须,200cfu/ml,透析器出口液的细菌菌落总数必须,200cfu/ml,并且不得检出致病性微生物,原水口、软化水出口、反渗水出口的细菌菌落总,数必须,200cfu/ml,，并不得检出致病性微生物。,74,八、医院环境卫生学监测,医院环境卫生学监测内容包括：,A,、定期进行,空气,培养,B,、定期进行,物体表面,培养,C,、定期进行,工作人员手,培养,75,八、医院环境卫生学监测,医院环境分类：,类：层流手术室、层流洁净病房,类：普通手术室、产房、婴儿室、早产儿室、,普通保护性隔离室、供应室无菌区、烧伤病房、,重症监护病房,类：儿科病房、妇产科检查室、注射室、换药室、治,疗室、供应室清洁区、急诊室、检验科、各类普,通病房和房间,类：传染病科及病房,76,八、医院环境卫生学监测,卫生部,医院感染管理规范,规定：,医院应,每月,对手术室、重症监护（病房）,室,ICU,、产房、母婴室、新生儿病房、骨,髓移植病房、血液病房、血液透析室、供,应室无菌区、治疗室、换药室等重点部门,进行环境卫生学监测。,当有,医院感染流行时，怀疑医院环境卫生,学因素有关时，应该,及时,进行监测。,77,八、医院环境卫生学监测,A,、,空气,消毒效果监测方法,1,、采样,时间,：在消毒处理后、操作前进行采样。,2,、采样,方法,：,平板暴露,法；（或空气采样机）,1,）,布点方法：,室内面积,30m,2,，设内、中、外对角线,3,点，内、外点布点部位距墙壁,1M,处；室内面积,30m,2,，设,4,角及中央,5,点，,4,角的布点部位距墙壁,1M,处。,2,）,采样方法：,将普通营养琼脂肪平板（直径,9cm,）放在室内各采样点处，采样高度为距地面,1.5m,，采样时将平板打开，,扣放于,平板旁，暴露,5,分钟，盖好立即送检。,78,空气监测：（用直径,9cm,平皿）,79,空气监测：（平皿打开方式）,80,八、医院环境卫生学监测,3,、,检测方法：,经采样的平板直接放入,37,培养箱,中培养,48,小时,，观察最后结果,平板暴露法结果,计算公式,：,细菌总数（,cfu/m,3,）,=50000N/,（,A,T,）,式中：,A,为平板面积（,cm,2,）；,T,为平板暴露时间（,min,）；,N,为平均菌落数（,cfu,）。,81,4,、,判断结果：,类,区域：细菌总数,10 cfu/m,3,未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格,类,区域：细菌总数,200 cfu/m,3,未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格,类,区域：细菌总数,500 cfu/m,3,未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格,82,5,、,注意事项：,采样前，关好门、窗，在无人走动的,情况下，静止,10,分钟,进行采样,83,八、医院环境卫生学监测,B,、,物体表面,消毒效果监测方法,1,、,采样时间：,在消毒处理后进行采样。,2,、,采样方法：,用,5cm,5cm,的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积,100cm,2,，连续采样,4,个；,用浸有（或含有相应中和剂）无菌洗脱液的棉拭子,1,支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各,5,次，并随之转棉拭子；,剪去手接触部位后，将棉拭子投入,10ml,的无菌洗脱液试管中，立即送检。,门把手等不规则物体表面直接用棉拭子涂擦采样。,84,85,八、医院环境卫生学监测,B,、,物体表面,消毒效果监测方法,3,、,检测方法,：,1,）,细菌总数检测,：,将采样管在混匀器上振荡,20,秒或用力振打,80,次；,用无菌吸管吸取,1.0ml,待检样品接种于灭菌平皿，每一,样本接种,2,个平皿；,平皿内加入已熔化的,45-48,的营养琼脂,15ml-18ml,，,边倾注边摇匀，待琼脂凝固；,置,36,1,温箱培养,48,小时，计算菌落数。,86,八、医院环境卫生学监测,B,、,物体表面,消毒效果监测方法,2,）、,致病菌检测,：,原则,：,致病菌的检测依据污染情况进行相应指标的检测。,(,常规检测如：金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌）,87,八、医院环境卫生学监测,B,、,物体表面,消毒效果监测方法,4,、,结果判定,：,、,类,区域：物体表面细菌总数,5cfu/cm,2,；,类,区域：物体表面细菌总数,10cfu/cm,2,；,类,区域：物体表面细菌总数,15cfu/cm,2,；,并不得检出致病性微生物为消毒合格。,母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿及儿科病房的,物体表面不得检出沙门氏菌。,88,八、医院环境卫生学监测,C,、,工作人员手,消毒效果监测方法,1,、,采样时间,：,在消毒后立即采样。,2,、手,采样方法,：,被检人五指并拢，用浸有（或含有相应中和剂）无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦,2,次（一只手涂擦面积约,30cm,2,）,；,并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位；,将棉拭子投入,10ml,的（或含有相应中和剂）无菌洗脱液试管内，立即送检。,89,八、医院环境卫生学监测,C,、,工作人员手,消毒效果监测方法,3,、,检测,方法,：,1,）,细菌总数检测,：,将采样管在混匀器上振荡,20,秒或用力振打,80,次；,用无菌吸管吸取,1.0ml,待检样品接种于灭菌平皿，每一,样本接种,2,个平皿；,内加入已熔化的,45 48,的营养琼脂,15ml-18ml,，边,倾注边摇匀，待琼脂凝固；,置,36,1,温箱培养,48,小时，计算菌落数。,90,八、医院环境卫生学监测,C,、,工作人员手,消毒效果监测方法,3,、,检测方法,：,2,）,致病菌检测,：,原则,：,致病菌的检测依据污染情况进行相应指标的检测。,91,八、医院环境卫生学监测,C,、,工作人员手,消毒效果监测方法,4,、结果,判断：,、,类,区域：物体表面细菌总数,5cfu/cm,2,；并未检出,金葡菌、大肠、铜绿菌，为消毒合格。,类,区域：物体表面细菌总数,10cfu/cm,2,；并未检出,金葡菌、大肠，为消毒合格。,类,区域：物体表面细菌总数,15cfu/cm,2,；并未检出,金葡菌、大肠，为消毒合格。,母婴同室、婴儿室、新生儿及儿科病房的工作人员手,不得检出沙门菌、大肠杆菌、溶血性链球菌、金黄色,葡萄球菌，为消毒合格。,92,八、医院环境卫生学监测,D,、皮肤粘膜消毒效果监测方法,1,、,采样时间：,在消毒后立即采样。,2,、皮肤粘膜,采样方法：,用,5cm,5cm,的标准灭菌规格板，放在被检皮肤处；,用浸有（或含有相应中和剂）无菌洗脱液的棉拭子,1,支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各,5,次，并随之转棉拭子；,剪去手接触部位后，将棉拭子投入,10ml,（或含有相应中和剂）无菌洗脱液试管中，立即送检。,不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。,93,八、医院环境卫生学监测,D,、皮肤粘膜消毒效果监测方法,3,、检测,方法：,同工作人员手。,4,、判断,结果：,参照工作人员手的卫生学标准,5,、注意,事项：,皮肤粘膜采样处，若表面不足,5cm,5cm,可用相应面积的规,格板采样。,94,95,