BJS 201716 保健食品中9种水溶性维生素的测定.pdf
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1、 1 附件 4 保健食品中 9 种水溶性维生素的测定 BJS 201716 1 范围 本方法规定了保健食品中维生素 B1、维生素 B2、泛酸、维生素 B6、生物素、叶酸、维生素B12、烟酸、烟酰胺含量的液相色谱-串联质谱测定方法。 本方法适用于营养素补充剂类保健食品中维生素 B1、维生素 B2、泛酸、维生素 B6、生物素、叶酸、维生素 B12、烟酸、烟酰胺含量的测定。 2 原理 试样经水提取后,采用液相色谱-串联质谱仪检测,外标法定量。 3 试剂和材料 注:除非另有规定,本方法所用试剂均为分析纯,水为 GB/T 6682 规定的一级水。 3.1 试剂 3.1.1 甲醇:质谱级。 3.1.2 甲
2、酸:质谱级。 3.1.3 氨水:含量 26%。 3.1.4 冰醋酸。 3.1.5 浓盐酸。 3.1.6 氨水(1+5) :量取 100 mL 氨水(3.1.3)缓慢倒入 500 mL 水中,混匀。 3.1.7 盐酸(0.01 mol/L):吸取9 mL 浓盐酸(3.1.5),溶于1000 mL 水中。吸取该溶液50 mL,用水稀释并定容至500 mL。 3.1.8 0.1%甲酸水溶液:取甲酸 1 mL 用水稀释至 1 000 mL,用滤膜(3.4)过滤后备用。 3.1.9 0.1%甲酸甲醇溶液:取甲酸 1 mL 用甲醇稀释至 1000mL,用滤膜(3.4)过滤后备用。 3.2 标准品 维生素
3、B1(硫胺素盐酸盐) 、维生素 B2、泛酸(泛酸钙) 、维生素 B6(吡哆醇) 、生物素、叶酸、维生素 B12、烟酸、烟酰胺标准品的中文名称、英文名称、CAS 登录号、分子式、相对分子量见附录 A 表 A.1,纯度98%。 3.3 标准溶液配制 3.3.1 标准储备液(1 mg/mL) 3.3.1.1 维生素 B1标准储备液: 称取维生素 B1标准品 (3.2) 0.1 g (精确至 0.000 1 g) , 用 0.01 mol/L 2 盐酸(3.1.7)溶解并定容于 100 mL 棕色容量瓶中。 3.3.1.2 维生素 B2、生物素、叶酸标准储备液:分别称取生物素、叶酸标准品(3.2)0.
4、1 g(精确至0.000 1 g) ,加入 30 mL 氨水(3.1.6)溶解,甲酸调节 pH 值至 7.0 后,用水转移并定容至 100 mL棕色容量瓶中。 3.3.1.3 维生素 B6、维生素 B12、烟酸、烟酰胺、泛酸标准储备液:分别称取维生素 B6、维生素B12、烟酸、烟酰胺和泛酸标准品(3.2)0.1 g(精确至 0.000 1 g) ,用水溶解并定容至 100 mL 棕色容量瓶中。 3.3.2 空白基质溶液的配制 取空白试样按照试样制备方法(5.2)操作。 3.3.3 基质标准工作液 3.3.3.1 维生素 B1基质标准工作液:准确吸取维生素 B1标准储备液(3.3.1)适量,用空
5、白基质溶液(3.3.2)将其稀释成含量分别为 0.01 g/mL、0.05 g/mL、0.1 g/mL、0.5 g/mL、1 g/mL 的基质标准工作液。 3.3.3.2 8 种维生素基质混合标准工作液:准确吸取维生素 B2、泛酸、生物素、维生素 B6、叶酸、维生素 B12、烟酸、烟酰胺标准储备液(3.3.1)适量,用空白基质溶液将其稀释成含量分别为 0.01 g/mL、0.05 g/mL、0.1 g/mL、0.5 g/mL、1 g/mL 的基质混合标准工作液。 注:操作过程应在避光环境下进行。 3.4 微孔滤膜:0.22 m,有机相。 4 仪器和设备 4.1 高效液相色谱-串联质谱仪:配有电
6、喷雾离子源。 4.2 超声波清洗器。 4.3 分析天平:感量分别为 0.01 g 和 0.000 1 g。 5 分析步骤 5.1 试样制备 将 20 粒片剂或胶囊试样粉碎后混匀,液体试样混合均匀。 5.2 试样提取 准确称取混合均匀的试样 2g(精确至 0.01 g)于 50 mL 棕色容量瓶中,加入 40mL 水,超声10 min,冷却至室温,用水定容至刻度,摇匀,上清液经微孔滤膜(3.4)过滤,供液相色谱-串联质谱仪测定。 注:操作过程应在避光环境下进行。 5.3 仪器参考条件 5.3.1 色谱条件 3 a)色谱柱: HSS T3 柱,1.8 m,100 mm 2.1 mm(内径) ,或性
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