NY∕T 1980-2018 肥料和土壤调理剂 急性经口毒性试验及评价要求(农业).pdf

. -ICS 65.080 B 10 NY 中华人民共和国农业行业标准肥料和土壤调理剂NY/T 1980一2018代替NY1980-2010 急性经口毒性试验及评价要求Fertilizers and soil amendments一Determination and evaluation of acute oral toxicity 2018一03- 15发布2018-06-01实施中华人民共和国农业部发布NY/T 1980-2018 刚吕本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准代替NY1980- 2010 (肥料登记急性经口毒性试验及评价要求。与NY1980-2010相比，除编辑性修改外主要变化如下:一一修改标准名称为肥料和土壤调理剂急性经口毒性试验及评价要求)，英文为Fertilizers and soil amendments-Determination and evaluation of acute oral toxicity。一-修改标准范围为本标准规定了肥料和土壤调理剂急性经口毒性试验方法、技术要求、结果评价及毒性分级。本标准适用于中华人民共和国境内生产、销售的肥料和土壤调理剂。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位:中国农业科学院农业资源与农业区划研究所、中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所、中国农学会、中国植物营养与肥料学会、土壤肥料产业联盟。本标准主要起草人:刘红芳、王旭、李斌、孙葫锋、肖经纬、保万魁、侯晓娜、张星。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:一一-NY1980-2010。I NY/T 1980-2018 肥料和土壤调理剂急性经口毒性试验及评价要求范围本标准规定了肥料和土壤调理剂急性经口毒性试验方法、技术要求、结果评价及毒性分级。本标准适用于中华人民共和国境:马-幽幽幽层调理剂。2 规范性引用文件3 产、检定3.2 3.3 3. 4 急性经一次或剂量dose 所给受试物经口半数致死剂一次或24h内多受试物的质量(mg/kg体重评价。3.5 靶器官target 0咿n受试物引起机体出现显著毒性效应的器官。4 分级及评价要求4. 1 分级指标日期的版本适用于本文、教学、生量，以小鼠单位体重接受死剂量(LDso)进行分级急性经口毒性分为实际元毒、低毒、中等毒和高毒四级。指标应符合表1的要求。l NY/T 1980-2018 表1单位为毫克每千克体重毒性级别经口LDso实际元毒LDso5 000 低毒500LDso 5 000 中等毒50LDso500 高毒LDso50 4. 2 评价要求急性经口毒性评价分为符合和基本符合两级。毒性级别为实际元毒的，即小鼠急性经口半数致死剂量(LD50)不小于5000mg/kg体重的，为符合肥料和土壤调理剂急性毒性评价要求;毒性级别为低毒的，fW小鼠急性经口半数致死剂量(LD50)不小于500mg/kg体重的，为基本符合肥料和土壤调理剂急性毒性评价要求。5 试验方法5. 1 受试物肥料或土壤调理剂。5.2 小鼠的准备观察3d并确认健康后开始试验。5. 3 试样处理受试物加水配制成相应浓度的受试物榕液/混悬液，移人试剂瓶中备用。如果受试物不溶于水，用食用植物油配制。5. 4 剂量分组至少设4个剂量组，各剂量组之间要有适当的剂量间距，以便各组出现不同程度的毒性效应(死亡率)，求得剂量-效应曲线及LD50。5. 5 限量试验如果剂量达5000mg/kg体重，20只小鼠(雌雄各半)仍未见与受试物有关的死亡，则可以不设4个剂量组的完整试验。5. 6 灌胃量按20g体重灌0.4mL计算，用处理好的试样灌胃。5. 7 试验方法及观察时间小鼠给受试物前应隔夜禁食但不禁水，称重后，单次灌胃给予受试物，2h后进食。染毒后对小鼠的反应情况连续观察2h4 h，其后每天至少观察1次。记录中毒症状出现、消失和小鼠死亡的时间。如果在染毒4d后出现迟发性的毒效应，则应延长观察期3周4周。6 观察指标6. 1 中毒症状记录观察小鼠中毒体征的发生、发展过程以及中毒特点和毒作用的靶器官。观察的系统包括:a) 中枢神经系统和神经肌肉系统:体位异常、叫声异常、不安、呆滞、瘟孪、抽搞麻痹、运动失调、对外反应过敏或迟钝;b) 植物神经系统:瞌孔扩大或缩小、流涎或流泪;c) 呼吸系统:鼻孔流液、鼻翼扇动、呼吸深缓、呼吸过速、蜂腰;d) 泌尿生殖系统:会阴部污秽、有分泌物、阴道或乳房肿胀;2 NY/T 1980-2018 e) 皮肤和毛:皮肤充血、紫钳、被毛蓬松、污秽;f) 眼:眼球突出、结膜充血、角膜混浊;g) 消化系统:腹泻、厌食。6. 2 体重记录小鼠灌胃前、试验结束时各称量一次体重。观察期间对濒死小鼠称量体重一次。6. 3 病理组织学检查应对濒死和试验结束时处死的小鼠做大体病理学观察，包括组织器官的颜色、大小、位置等状况。| 如果观察有可疑病变时，应做病理组织学检查。 7 半数致死剂量统计方法7. 1 霍恩氏法(Hommethod) (仲裁法)7. 1. 1 预试验通常采用10mg/kg体重或1000mg/kg体重的剂量，各剂量使用4只6只小鼠(雌雄各半)。根据24h内小鼠死亡情况，估计LDso的可能范围，以确定正式试验剂量。7. 1. 2 剂量组的选择按预试验所确定的致死剂量范围选择一组剂量系列，常用的剂量系列包括:1.0 1.0 2. 151 3. 161 X1 X1 4.651 10. 0 1 10. 0) 31.6) t=O，士1，士2，土37. 1.3 正式试验根据4个剂量组的小鼠死亡数，查表求得LDso及其95%可信限。霍恩氏法LDso计算用表见GB15193. 3。7.2 机率单位-对数图解法每剂量组使用不少于20只小鼠(雌雄各半)，但各组小鼠数不一定均等。此法不要求剂量组呈等比关系，但等比可使各点距离相等，利于作图。7.2. 1 半数致死剂量的计算先将剂量的对数值和相应死亡率用点画在图上，即用机率对数图纸直接把剂量和死亡率画在图上。画线时应使点散布在直线的上下，尽量使直线接近死亡率在15%85%的点，即机率单位46的点。直线上50%死亡率(机率单位为5)的相应剂量对数值，经反对数变换后即得LDso的剂量。7.2.2 半数致死剂量的可信限估计7. 2. 2. 1 LDso的标准差S按式(1)计算。X .-x, s = . z一.(1) YZ-Yl 式中:Xz一一机率单位为6时，相应X轴上的对数剂量;X1一一机率单位为4时，相应X轴上的对数剂量;Yz一一机率单位为6; Y1一一机率单位为407. 2. 2. 2 估计19LDso的标准误按式(2)计算。3 NY/T 1980-2018 S鸣。古式中:N一一为死亡率15%85%之间所用小鼠数。7.2.2.3 半数致死剂量对数值的95%可信限为IgLDso士1.96 Slg鸣。 。7.2.2.4 IgLDso经反对数变换后，可得到LDso的95%可信限剂量。7.3 寇氏法(Karbermethod) 采用10只小鼠(7.3. 1 预试验预试验中小鼠以下死亡)7.3.2 式中:Xk d 高剂量，小鼠不死亡(或10%最高、最低剂量的对数. (3) . (4) 率分别为1.O(全死)和O(全不死)时，lgLDso按式(5)计算。IgLDso = xk -d(艺p-0.5). (5) 式中:2:P-一各组小鼠死亡率之和。7. 3. 3. 2. 4 根据IgLDso，查其自然数，即为LDso。7.3.3.3 半数致死剂量的可信限估计7. 3. 3. 3. 1 IgLDso的标准误按式(6)计算。s,nTrl = d .12:P-2:p2 k鸣。=dj. (的4 -h NY/ T 1980-2018 式中:p2一一各组小鼠死亡率平方之和;n 一一小鼠数量。7.3.3.3.295%可信限(X)的LD50按式(7)计算。X = 19一1ClgLD50士1.96SgLDso ) (7) 8 检验规则8. 1 固体或散装产品采样按GB/T6679的规定执行。液体产品采样按GB/T6680的规定执行。8. 2 将所采样品置于洁净、干燥的容器中，迅速温匀。取固体样品600 g或液体样品600mL，分装于2个洁净、干燥容器中，密封并贴上标签，注明生产企业名称、产品名称、批号或生产日期、采样日期、采样人姓名。其中一部分用于产品质量分析，另一部分应保存至少2个月，以备复验。8. 3 样品经多次缩分后，取出约100 g或100mL，置于洁净、干燥容器中，用于测定。5 FONlo告HFZ 中华人民共和国农业行业标准肥料和土壤调理剂急性经口毒性试验及评价要求NY/ T 1980-2018 争导中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)(邮政编码100125网址.ccap. COn1. cn) 北京印刷一厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销* * * 印张O.75 字数15千字2018年5月北京第1次印刷头开本880rnrnX1230rnrn1/16 2018年5月第1版书号16109 4466 定价18.00元争e版权专有侵权必究举报电话[phone]