DB42∕T 1786.1-2021 生猪疫病防控技术 第1部分：伪狂犬病监测评估技术规程(湖北省).pdf

ICS 65.020.30 CCS B 41 DB 42 湖北省地方标准 DB42/T 1786.12021 生猪疫病防控技术 第 1 部分： 伪狂犬病监测评估技术规程 Prevention and control technology of Swine diseasesPart 1: Code of practice for the monitoring and evaluating of porcine pseudorabies 2021 - 12 - 23 发布 2022 - 02 - 23 实施 湖北省市场监督管理局 发 布 DB42/T 1786.12021 I 目次 前言 . III 引言 . V 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 样品处理与检测方法 . 2 样品的采集与处理 . 2 检测方法 . 2 5 疫苗免疫监测与评估 . 2 免疫抗体监测与评估 . 2 群体抗体水平监测与评估 . 2 6 免疫净化监测与评估 . 3 病原学监测 . 3 血清学监测 . 3 结果判定 . 3 7 非免疫净化效果监测与评估 . 3 检测项目 . 3 抽样方法 . 3 结果判定 . 4 附录 A（资料性） 免疫猪群体抗体水平监测抽样数量 . 5 附录 B（资料性） 本底调查抽样数量 . 6 附录 C（资料性） 免疫净化阶段抽样数量 . 7 附录 D（资料性） 非免疫净化阶段抽样数量 . 8 DB42/T 1786.12021 III 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。 本文件是DB42/T 1786生猪疫病防控技术的第1部分。DB42/T 1786已经发布了以下部分： 第1部分：伪狂犬病监测评估技术规程； 第2部分：传染病胸膜肺炎监测评估技术规程。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由湖北省农业科学院提出。 本文件由湖北省农业农村厅归口。 本文件起草单位：湖北省农业科学院畜牧兽医研究所，湖北省动物疫病预防控制中心，华中农业大学，武汉市动物疫病预防控制中心，武汉市江夏区金龙畜禽有限责任公司。 本文件主要起草人：田永祥、段正赢、梁 婉、宋念华、吴 斌、阮 征、李婷婷、周丹娜、彭 忠、樊 杰、金 鑫、万 云、黎 巧、王 军、刘李娟。 本文件实施应用中的疑问，可咨询湖北省农业农村厅，联系电话：[phone]，邮箱：；对本标准的有关修改意见或建议，请反馈至湖北省农业科学院畜牧兽医研究所，联系电话：[phone]，电子邮箱：。 DB42/T 1786.12021 V 引言 猪伪狂犬病和猪传染性胸膜肺炎每年给养猪业造成巨大的经济损失，严重制约我国养猪业健康发展。结合前期丰富的临床工作经验，通过本文件的制定，建立相关疫病检测、监测技术，有助于满足猪场对疫病检测、 监测工作的需求， 提升生猪疫病防控水平。 DB42/T 1786拟由以下部分构成， 具体如下： 第1部分：伪狂犬病监测评估技术规程。目的在于对采用的检测技术，监测群体的规模以及监测频次提出相应的规范要求。 第2部分：传染性胸膜肺炎监测评估技术规程。目的在于对猪传染性胸膜肺炎的检测、预防和治疗提出相应的规范要求。 本文件为系列文件，目的是针对猪伪狂犬病和猪传染性胸膜肺炎提出对应检测、监测技术要求。之后涉及不同病原的检测、监测规定，归为本文件的不同部分。 DB42/T 1786.12021 1 生猪疫病防控技术 第 1 部分： 伪狂犬病监测评估技术规程 1 范围 本文件规定了猪伪狂犬病监测评估技术过程中的样品处理与检测方法、 疫苗免疫监测与评估、 免疫净化监测与评估及非免疫净化效果监测与评估。 本文件适用于猪场伪狂犬病的监测评估。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中， 注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 18641 伪狂犬病诊断方法 GB/T 35911 伪狂犬病病毒荧光PCR检测方法 NY/T 678 猪伪狂犬病免疫酶试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 伪狂犬病 pseudorabies，PR 由伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus，PRV）感染引起的多种家畜和野生动物共患的急性、热性传染病，除猪以外的其他动物均呈致死性感染。感染猪以繁殖障碍、神经症状和呼吸道症状为主要特征。仔猪可见明显脑膜充血水肿、脑脊液明显增多，鼻粘膜和咽部广泛充血，肺水肿、出血和小叶性肺炎，肺表面有时可见白色坏死灶。母猪返情，公猪精液质量下降。成年猪眼观病变微弱。 疫苗免疫 vaccination 采用人工方法将疫苗接种至动物机体，使宿主自身的免疫系统产生对相关传染病的特异性免疫力。 伪狂犬病病毒 gB 抗体 PRV gB antibody 针对伪狂犬病毒 gB 糖蛋白产生的抗体。使用 gB-ELISA 检测血清中的 PRV gB 抗体，可用于疫苗免疫状况评估，也可用于非免疫群体血清学诊断和疫情监控。 伪狂犬病病毒 gE 抗体 PRV gE antibody 针对伪狂犬病毒 gE 糖蛋白产生的抗体。使用 gE-ELISA 检测血清中的 PRV gE 抗体，可用于监测和评估 PRV 感染状况。 净化 elimination DB42/T 1786.12021 2 以消灭和清除传染源为目的，在特定区域或场所对某种或某些重点疫病实施的有计划的消灭过程，以达到该范围内个体无感染状态和不发病状态。 4 样品处理与检测方法 样品的采集与处理 采用NY/T 678中的方法，采集、处理猪的扁桃体、脑组织（含三叉神经节）、血清、口鼻拭子等样品。 检测方法 4.2.1 病原检测 按照GB/T 35911中的方法执行。 4.2.2 抗体检测 按照GB/T 18641中的方法执行。 5 疫苗免疫监测与评估 免疫抗体监测与评估 5.1.1 检测项目 检测血清样品中的伪狂犬病病毒gE、gB抗体。 5.1.2 抽样方法 按照疫苗免疫猪数量的10%进行抽样，随机采集每次疫苗免疫后28天的血清样品。 5.1.3 结果判定 选择gE抗体阴性、gB抗体阳性的样品用于免疫抗体水平判定如下： a) 后备种猪：gB 抗体阳性检出率为 100%，则为免疫合格；gB 抗体阳性检出率100%，则免疫不合格； b) 生产种猪：gB 抗体阳性检出率90%，则为免疫合格；gB 抗体阳性检出率90%，则免疫不合格； c) 保育猪： gB 抗体阳性检出率80%， 则为免疫合格； gB 抗体阳性检出率80%， 则免疫不合格； d) 商品猪： gB 抗体阳性检出率70%， 则为免疫合格； gB 抗体阳性检出率70%， 则免疫不合格。 群体抗体水平监测与评估 5.2.1 检测项目 检测猪血清中的伪狂犬病病毒gE、gB抗体。 5.2.2 抽样方法 根据本标准附录A中规定的采样数量要求，随机采集不同猪群的血液，制备血清。监测频率为1次/半年。 DB42/T 1786.12021 3 5.2.3 结果判定 选择gE抗体阴性、gB抗体阳性的样品用于群体抗体水平判定如下： a) gB 抗体阳性检出率80%，则为免疫合格； b) gB 抗体阳性检出率介于 70%80%之间，则 1 个月后再次监测，根据监测结果确定是否需要加强免疫； c) gB 抗体阳性检出率70%，则需加强免疫。 6 免疫净化监测与评估 病原学监测 6.1.1 检测项目 检测疑似病例的病原。 6.1.2 抽样对象 对所有疑似病例进行采样检测。 血清学监测 6.2.1 检测项目 检测血清样品中的伪狂犬病病毒gE、gB抗体。 6.2.2 抽样方法 本底调查阶段：按本标准附录B中规定的抽样数量要求，随机采集不同猪群的血清样品。 免疫净化阶段：按本标准附录C中规定的抽样数量要求，随机采集不同猪群的血清样品。 净化维持阶段：按本标准附录D中规定的抽样数量要求，随机采集不同猪群的血清样品。 结果判定 当gB抗体阳性率80%时，对gE抗体水平进行判定如下： a) 若 gE 抗体为阴性，则该场不存在伪狂犬病病毒野毒感染，达到净化标准； b) 若 gE 抗体阳性检出率10%，则该场存在伪狂犬病病毒野毒感染，可检测淘汰阳性猪； c) 若 gE 抗体阳性检出率10%，则该场伪狂犬病病毒感染率较高，应加强免疫控制； d) 若病原检测结果为阳性，则该场存在伪狂犬病病毒感染和排毒，应对感染毒株进行鉴定。 7 非免疫净化效果监测与评估 检测项目 检测血清样品中的gE和gB抗体及疑似病例的伪狂犬病病原。 抽样方法 按本标准附录D中规定的采样数量要求，随机采取不同猪群的血清样品。监测频率为1次/半年。随机采集母猪流产胎儿组织、产房中弱仔及疑似病例的组织样品。 DB42/T 1786.12021 4 结果判定 停止疫苗免疫24个月以上，无临床病例且gB、gE抗体均为阴性，可判定该场达到非免疫净化要求。 若不满足以上任何1项，可判定为未达到非免疫净化要求。 7, 3 DB42/T 1786.12021 5 A A 附录A （资料性） 免疫猪群体抗体水平监测抽样数量 表A.1 给出了免疫猪群体抗体水平监测抽样的数量。 表A.1 免疫猪群体抗体水平监测抽样数量 群 体 抽样数量（头） 公猪 群体数量50 头，全釆； 群体数量50 头，50%比例采样 后备种猪 30 妊娠中期母猪 30 妊娠后期母猪 30 哺乳母猪 30 保育猪（30 日龄40 日龄） 30 育肥前期（70 日龄80 日龄） 30 育肥中期（100 日龄110 日龄） 30 育肥后期（140 日龄150 日龄） 30 DB42/T 1786.12021 6 B B 附录B （资料性） 本底调查抽样数量 表B.1给出了本底调查阶段群体抽样的数量。 表B.1 本底调查抽样数量 群体数量（头） 本底调查阶段（头） 50 38 100 61 200 86 300 101 400 110 500 116 750 126 1000 131 2000 140 3500 144 5000 146 7500 148 10000 148 148 注： 本底调查阶段为最大限度了解养殖场各种疫病的流行状况，采用估计流行率策略，设定预期流行率为50%，检测方法置信区间为95%，可接受误差为8%。养殖场可根据实际情况，选取其中一种方法抽样：方法一，根据群体总数量计算出总样品量，按照公猪、后备种猪、妊娠中期母猪、妊娠后期母猪、哺乳母猪、保育猪（30日龄40日龄）、育肥前期（70日龄80日龄）、育肥中期（100日龄110日龄）、育肥后期（140日龄150日龄）在总群体中占比不同分配不同阶段的抽样数量，采取简单随机或系统随机方法采集样品；方法二，按照不同阶段猪群的群体数量，分别计算不同阶段的抽样数量，采取简单随机或系统随机方法采集样品。 DB42/T 1786.12021 7 C C 附录C （资料性） 免疫净化阶段抽样数量 表C.1给出了免疫净化检测阶段群体抽样的数量 表C.1 免疫净化阶段抽样数量 群体数量（头） 免疫净化监测阶段（头） 50 23 100 26 200 28 300 28 400 29 500 29 750 29 1000 29 2000 29 3500 29 5000 29 7500 30 10000 30 31 注1：净化进程监测阶段为定期监测动物疫病免疫水平和感染状态，采用证明无疫策略，设定预期流行率为10%，检测方法置信区间为95%，敏感性为98%。 注2：公猪全采，其他群体按照后备种猪、妊娠中期母猪、妊娠后期母猪、哺乳母猪、保育猪（30日龄40日龄）、育肥前期（70日龄80日龄）、育肥中期（100日龄110日龄）、育肥后期（140日龄150日龄）猪群的群体数量，分别计算不同阶段的抽样数量，采取简单随机或系统随机方法采集样品。 DB42/T 1786.12021 8 D D 附录D （资料性） 非免疫净化阶段抽样数量 表D.1 给出了非免疫净化阶段群体的抽样数量。 表D.1 非免疫净化阶段抽样数量 群体数量（头） 非免疫净化阶段（头） 50 44 100 64 200 80 300 86 400 89 500 92 750 95 1000 96 2000 98 3500 99 5000 100 7500 100 10000 100 101 注1：净化维持阶段为评估净化病种的无疫状态， 采用证明无疫策略， 设定预期流行率为3%， 检测方法置信区间为95%，敏感性为98%。 注2：公猪全采，其他群体按照后备种猪、妊娠中期母猪、妊娠后期母猪、哺乳母猪、保育猪（30日龄40日龄）、育肥前期（70日龄80日龄）、育肥中期（100日龄110日龄）、育肥后期（140日龄150日龄）猪群的群体数量，分别计算不同阶段的抽样数量，采取简单随机或系统随机方法采集样品。