中熟桃品种黄妃杂交种胚培养的研究.pdf

落 叶 果 树():试 验 研 究 :./.中熟桃品种黄妃杂交种胚培养的研究周荣飞李桂祥张芳宫庆涛李淼张安宁(.喀什地区林果产业工作站新疆喀什 .山东省果树研究所山东泰安.泰安市岱岳区祝阳镇林业站山东泰安)摘 要:针对中熟桃品种黄妃存在大量种子败育影响育种效率和进程的问题春季以黄妃做母本黄金蜜 号为父本进行杂交 月初果实成熟后收集杂交种子研究了不同基本培养基中加入不同植物生长调节剂与浓度的培养基上接种种胚的培养效果 结果表明杂交种胚在基本培养基 上加入/./的培养基上具有最高的发芽率在同浓度 条件下 浓度越高种胚的发芽率越高幼苗苗高越高而发根数减少 浓度与根的发育成正相关 关键词:黄妃中熟桃杂交胚植物生长调节剂 中图分类号:.文献标识码:文章编号:()收稿日期:基金项目:山东省农业良种工程项目“优质高档桃突破性新品种选育”()通讯作者:李淼()男山东泰安人助理研究员从事桃分子育种研究 :.作者简介:周荣飞()男宁夏隆德人高级工程师从事研究果树栽培技术和生理性病虫害研究 :.(.):././.:第 期周荣飞等:中熟桃品种黄妃杂交种胚培养的研究 桃原产中国营养丰富风味鲜美是人们普遍喜爱的水果之一 随着社会的发展人们对商品桃的特性要求也不断多样化这需要不断地培养性状不同的优良品种 传统育种方法的效率低、工作量大、周期长 随着现代生物技术的发展现代育种结合胚培养、基因编辑等技术能大大加快育种的进程 中国桃育种工作者利用胚培养技术培育出了许多优良的早熟品种 中熟桃的种胚结构相对完整但也存在败育问题影响其发芽率 笔者以中熟桃品种黄妃为母本、黄金蜜 号为父本进行杂交获得杂交种胚研究不同培养基、生长调节剂对桃种胚培养发芽率与生长的影响以筛选一套适宜中熟桃种胚培养的技术为选育桃新品种奠定基础 试验材料杂交胚 年春季在山东省果树研究所金牛山示范基地选取长势良好 年生的早熟品种黄金蜜 号作为父本收集花粉选取长势良好 年生的中熟品种黄妃作为母本将铃铛花期的花去雄配置杂交组合黄妃 黄金蜜 号 月初果实成熟后收集杂交种子带回实验室进行种胚的培育 去除种子的种核取出种胚待用基本培养基:培养基购买于索莱宝公司改良的 培养基(种大量元素无机盐:、和 浓度均减半其他成分浓度不变)自行配制植物生长调节剂:苄基腺嘌呤()(/瓶)、吲哚丁酸()(/瓶)均购买于索莱宝公司 试验设计与方法.适宜基本培养基筛选所用的基本培养基 培养基和改良的 培养基均加入琼脂粉 /、蔗糖 /添加不同浓度的植物生长调节剂 调至.在此基础上设 种培养基组合处理:处理改良的基本培养基 /处理基本培养基 /处理改良的基本培养基 /./处理基本培养基 /./每个处理接种 个种胚.适宜浓度的植物生长调节剂筛选在 基本培养基上加入不同浓度的 和 设 个处理:处理 为对照/处理 /./处理 /./处理 /./处理 /./处理 /./每个处理接种 个种胚.试验方法种胚的消毒处理预消毒处理 用 次氯酸钠在烧杯中对杂交胚杀菌 倒掉次氯酸钠放入少量洗衣粉转入漏斗在水龙头上冲洗 以上 消毒处理 在超净工作台上用 酒精浸泡种胚 用无菌清水冲洗 次 次氯酸钠处理 无菌清水冲洗 次再次用 次氯酸钠处理 无菌清水冲洗 次 将种胚置于滤纸上吸干水分将吸干水分的种胚用无菌刀片剥掉种皮胚芽向下接种于组培试管的培养基中埋入/胚的部位将接种的种胚置于冰箱 环境(避光)满足需冷量 之后放入 组培温室培养 统计杂交胚的发芽率 结果与分析.不同基本培养基对种胚发芽的影响如表 调查在 组培温室培养 的杂交胚发现部分种子的子叶开始变成绿色胚根伸长胚芽萌发生长成完整的桃树幼苗 在不同基本培养基上种胚的发芽率有差异 在不添加植物生长调节剂的条件下种胚在改良 基本培养基上的发芽率为.在 基本培养基上的为.高出.个百分点 在加入了相同浓度 /和/的条件下种胚在两种基本培养基上的发芽率均有提高分别达到和.仍是在 基本培养基具有更高的发芽率高出.个百分点 所以适宜桃杂交种胚培养的基本培养基是.培养基加入不同浓度植物生长调节剂对种胚发芽生长的影响如表 以 为基本培养基在加入不同浓度的 和 的培养基上接种杂交种胚也经 组培温室培养 后调查发现部分种子的子叶开始变成绿色胚根伸长胚芽萌发生长成完整的桃树幼苗 种胚的发芽率随着 和 的浓度的增大而提高 种胚的生长情况在同浓度 条件下 浓度越高种胚的发芽率越高幼苗苗高落 叶 果 树第 卷越高而发根数减少说明 对幼苗的株高具有积极的作用但却抑制根数量的增加 浓度升高根数呈现递增的趋势说明 能够影响种胚根的发育表 种胚在不同基本培养基中的发芽率处理号基本培养基 /胚萌发率/改良的 培养基.培养基.改良的 培养基.培养基.注:表中同种激素处理的不同培养基处理的数字旁的表示 .水平差异显著表 培养基中加入不同浓度植物生长调节剂的种培发芽率处理号 /胚萌发率/苗高/根数/条.注:表中同列数字旁的表示 .水平差异显著表示 .水平差异极显著 小结与讨论胚培养在克服胚的早期败育和胚挽救中发挥着重要的作用 胚培养的成功与否受到胚龄、基因型、培养基和培养环境等因素的影响 目前人们主要开展胚龄和培养基的研究 本研究涉及的材料是中熟桃的杂交胚其优势是具有相对完整的胚结构使本试验可以更加顺利的开展 培养基包括基本培养基和其中的生长调节物质本研究通过对比发现 培养基比改良的 培养基的效果好这与前人研究 更适用于桃、油桃的结果一致胚休眠是胚培过程中很关键的一步 桃、樱桃、李等核果类果树的种子若不经过低温休眠过程常导致胚活力不强萌芽力不高易形成畸形苗 本试验的材料先经过低温休眠处理为后续种胚的顺利萌发奠定基础 适宜的外源激素的种类及配比能有效提升种胚的发芽率和发育情况 本试验发现提升培养基中 和 的浓度种胚的发芽率相应提升同时幼苗高度和根数得到提高说明 和 可以作为中熟桃黄妃杂交胚培养的外源激素此外 对幼苗的株高有正相关性但与幼苗发育产生的根数没有明显的规律本试验建立的胚培体系能有效提高黄妃杂交种的发芽率提高育种效率有效辅助传统的育种手段为后续选育中熟桃提供高效方法参考文献:杜纪红 吴丹丹 苏明申 等.蟠桃胚培苗的移栽技术及影响因子研究.安徽农业科学 ():.王玉安.桃胚培养及种质创新研究.甘肃兰州:甘肃农业大学.胡紫璟 毛娟 赵长增 等.李广杏幼胚的离体培养.甘肃农业大学学报 ():.吕雪 王丽娟 李春苗 等.李杏远缘杂交胚抢救体系的建.中国果树():.赵玉洁.突尼斯软子石榴遗传转化体系建立及转化 基因的研究.河南郑州:河南农业大学.张娅君.枣成熟胚离体培养及农杆菌介导叶片与胚遗传转化研究.河南郑州:河南农业大学.蒋爱丽 李世诚 金佩芳 等.无核葡萄“喜乐”胚挽救培养研究与应.上海农业学报 ():.吴延军 徐昌杰 张上隆.油桃组织培养和遗传转化研究现状及展望.果树学报():.杜学梅 李登科.落叶果树生物技术育种研究进展.果树学报 ():.伊华林 邓秀新 付春华.胚抢救技术在果树上的应用.果树学报 ():.李玉晖 陈学森 杨红花.核果类果树远缘杂交试验初报.山东农业大学学报 ():.王玉柱 孙浩元 杨丽.核果类果树胚培养研究进展和育种成效.果树学报 ():.刘焕芳 段成国 陈学森 等.胚抢救技术在核果类果树育种上的应用.生物技术通报():.刘用生 殷桂琴 汪涛.、与活性炭对李胚萌发及幼苗生长的影响.植物生理学通讯 ():.