CEACAM1调控T淋巴细胞对胶质瘤ppt课件.ppt

1CEACAM1调控T淋巴细胞对胶质瘤杀伤的实验研究 专 业：神经外科 研究生：庄国涛2立项依据1研究方案2研究基础3经费预算4参考文献53一、立项依据胶质瘤的现状l最常见的中枢神经系统恶性肿瘤；l手术联合放、化疗；l平均生存期仅为16-19个月，5年生存率低于5%；l需要寻找新的治疗方法。4一、立项依据“肿瘤免疫编辑”学说（CancerImmunoediting）l免疫系统在清除一些肿瘤细胞的同时，也对另一些肿瘤细胞的生物学特性（如肿瘤的抗原性）进行重塑，即“免疫编辑”。分为三个阶段：l1.“清除”：新生肿瘤、抗原性强。l2.“平衡”：抗原性减弱，不易识别、清除，带瘤生存。l3.“逃逸”：不表达MHC分子，分泌免疫抑制因子，最终导致免疫耐受，逃避免疫监视和杀伤。5一、立项依据肿瘤的免疫治疗l肿瘤免疫疗法是肿瘤治疗领域新的焦点：特异性高、毒副反应小、具有免疫记忆。l免疫检查点分子是指免疫系统中存在的一些共抑制性信号分子，抑制T细胞的增殖和激活。l肿瘤细胞利用免疫检查点分子逃避免疫杀伤。6一、立项依据免疫检查点分子l免针对疫检查点分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4（CTLA-4）以及程序性死亡蛋白-1（PD-1）的抑制剂已经在黑色素瘤、非小细胞肺癌、肾癌取得了不错的疗效，但是多数患者仍存在无效或难以耐受副作用等不足。l寻找疗效更好、特异性更高、副作用更小的免疫检查点分子是我们的目标。7一、立项依据胶质瘤的免疫微环境l小胶质细胞可以表达巨噬细胞相关的表面标志物，包括MHC抗原等，可在中枢神经系统中起免疫监视的作用。l病理条件下（如脑肿瘤、炎症）T细胞、NK细胞和巨噬细胞等免疫细胞可突破血脑屏障参与免疫反应；伴发炎症或凋亡高级别胶质瘤周围有大量免疫细胞浸润。l胶质瘤的发生和发展可能与其免疫反应的缺陷有关，由此针对胶质瘤免疫逃逸和肿瘤特异性T细胞功能恢复的治疗尤为重要。8一、立项依据CEACAM1l癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)是一种跨膜糖蛋白，属于癌胚抗原(CEA)家族及免疫超蛋白家族黏附分子。lCEACAM1参与细胞的生长、分化、凋亡及黏附；具有调控机体免疫，血管、淋巴管生成等生物学功能。l新近发现CEACAM1是免疫检查点分子。9一、立项依据CEACAM1lCEACAM1在肝癌、前列腺癌、乳腺癌、结肠癌、膀胱癌等多种恶性肿瘤中表达明显降低，发挥抑癌因子的作用；l然而，在黑色素瘤、胰腺癌、非小细胞肺癌中可促进肿瘤的侵袭和发展。l在胶质瘤中高表达，siRNA沉默CEACAM1可抑制胶质瘤细胞的侵袭与迁移。10一、立项依据CEACAM1lCEACAM1作为免疫检查点分子，可以与自身结合后激活，扮演免疫抑制子的角色。l最新研究还证实CEACAM1是另一种重要的免疫检查点分子Tim-3的配体【Huang，Nature;2015,517(7534):386-390】，CEACAM1与Tim-3的相互作用可以显著抑制T细胞的增殖与激活，使其“耗竭”，从而挥负性免疫调节的作用，最终导致肿瘤的发生和进展。11一、立项依据提出疑问？l胶质瘤的发生和发展可能与其利用免疫检查点分子的作用逃避免疫监视和免疫杀伤有关；l免疫检查点分子CEACAM1在胶质瘤中显著高表达；l那么，CEACAM1通过抑制T细胞的增殖和激活，发挥负性免疫调节功能是否是胶质瘤发生发展的重要原因？12一、立项依据 本课题将通过选取高表达CEACAM1的胶质瘤细胞系建立小鼠颅内胶质瘤模型，小动物活体成像系统检测成瘤情况；再通过体内阻断CEACAM1，观察对胶质瘤生长及机体免疫功能重建的影响；寻找CEACAM1特异性的生物学标志，挖掘其中潜在的机制，从而为胶质瘤的治疗寻找新的方法。1314二、研究方案研究阻断CEACAM1对胶质瘤增殖、抗肿瘤免疫反应及机体免疫功能重建的影响。1.研究目标15二、研究方案2.统计学分析l应用SPSS13.0统计软件处理数据，实验各组数据采用均数标准差（meanstandarddeviation）描述，两组间均数比较采用Studentst检验，多组间均数比较采用单因素方差分析（ANOVA），组间两两比较采用LSD-t检验，检验水准=0.05。16二、研究方案3.可行性分析l导师范益民教授具有丰富的科研和临床经验是本课题能够顺利完成的指导保障，多位师兄有丰富的理论基础和实验基础，可给予理论和实验指导；l实验设计构思是建立在以往工作基础，结合临床上面临的实际问题，同时采用目前较先进、成熟的分子生物学技术手段，结果可靠，方法可学可行；l前期预实验进展顺利，已初步掌握小鼠原位胶质瘤模型建立。17二、研究方案1明确各胶质瘤细胞系中CEACAM1的表达情况2明确体内阻断CEACAM1通路对胶质瘤发生发展的影响 4.预期研究成果3明确体内阻断CEACAM1对机体免疫功能重建的影响18二、研究方案5.创新之处l以免疫检查点分子为代表的肿瘤免疫治疗，凭借其高特异性和免疫记忆杀伤效应成为肿瘤治疗领域的新焦点。l目前国内外尚无关于免疫检查点分子CEACAM1与胶质瘤免疫治疗方面的研究。l本实验选取高表达CEACAM1的胶质瘤细胞系建立小鼠原位胶质瘤模型，这样的体内实验能够尽量还原颅内的肿瘤及免疫微环境，并通过活体荧光显像动态监测小鼠颅内胶质瘤生长情况，使实验方法与结果更加科学、可靠。19三、研究基础l导师范益民教授多年来从事人脑胶质瘤的基础与临床研究，可予具体指导；l山西医科大学中心实验室拥有实验所需各种设备及技术，如流式细胞仪、激光共聚焦显微镜、Western-Blotting、活体荧光显像等设备及技术支持，可帮助指导实验完成；l前期预实验进展顺利，已初步掌握小鼠原位胶质瘤模型建立的方法。20三、研究基础2.研究计划及预测进展16.01-16.0515.12-16.0115.04-15.1214.10-15.04论文准备,发表,答辩资料汇总,数据处理与分析体内及体外相关实验文献检索、撰写综述、开题报告21四、经费预算合计 科研业务费实验材料费 仪器设备费 协作费 出版费2.100.101.50 0.20 0.10 0.20论文查阅,开题答辩试剂和测试分析费实验仪器设备使用实验室能源管理金额（万元）计算根据及理由支出科目22参考文献1.RosellR,deLasPenasR,BalanaC,etal.Translationalresearchinglioblastomamultiforme:molecularcriteriaforpatientselection.Futureoncology2008;4:219-228.2.FreemanGJ,CasasnovasJM,UmetsuDT,DeKruyffRH.TIMgenes:afamilyofcellsurfacephosphatidylserinereceptorsthatregulateinnateandadaptiveimmunity.Immunologicalreviews2010;235:172-189.3.GrulichAE,vanLeeuwenMT,FalsterMO,VajdicCM.IncidenceofcancersinpeoplewithHIV/AIDScomparedwithimmunosuppressedtransplantrecipients:ameta-analysis.Lancet2007;370:59-67.4.SchreiberRD,OldLJ,SmythMJ.Cancerimmunoediting:integratingimmunitysrolesincancersuppressionandpromotion.Science2011;331:1565-1570.5.HodiFS,ODaySJ,McDermottDF,etal.Improvedsurvivalwithipilimumabinpatientswithmetastaticmelanoma.TheNewEnglandjournalofmedicine2010;363:711-723.6.DongH,StromeSE,SalomaoDR,etal.Tumor-associatedB7-H1promotesT-cellapoptosis:apotentialmechanismofimmuneevasion.Naturemedicine2002;8:793-800.7.vanderFlierM,SharmaDB,EstevaoS,etal.IncreasedCD4(+)Tcellco-inhibitoryimmunereceptorCEACAM1inneonatalsepsisandsoluble-CEACAM1inmeningococcalsepsis:aroleinsepsis-associatedimmunesuppression?PloSone2013;8:e68294.8.GiomettoB,BozzaF,FaresinF,AlessioL,MingrinoS,TavolatoB.Immuneinfiltratesandcytokinesingliomas.Actaneurochirurgica1996;138:50-56.9.PachterJS,deVriesHE,FabryZ.Theblood-brainbarrieranditsroleinimmuneprivilegeinthecentralnervoussystem.Journalofneuropathologyandexperimentalneurology2003;62:593-604.10.TakeshitaY,RansohoffRM.Inflammatorycelltraffickingacrosstheblood-brainbarrier:chemokineregulationandinvitromodels.Immunologicalreviews2012;248:228-239.11.MotzGT,CoukosG.Decipheringandreversingtumorimmunesuppression.Immunity2013;39:61-73.12.IzumotoS,TsuboiA,OkaY,etal.PhaseIIclinicaltrialofWilmstumor1peptidevaccinationforpatientswithrecurrentglioblastomamultiforme.Journalofneurosurgery2008;108:963-971.23参考文献13.TsukadaM,WakaiT,MatsudaY,et,al.Lossofcarcinoembryonicantigen-relatedcelladhesionmolecule1expressionpredictsmetachronouspulmonarymetastasisandpoorsurvivalinpatientswithhepatoblastomaJ.JPediatrSurg;2009;44(8):1522-1528.14.BuschC,HanssenTA,WagenerC,et,al.Down-regulationofCEACAM1inhumanprostatecancer:correlationwithlossofcellpolarity,increasedproliferationrate,andGleasongrade3to4transitionJ.HumPathol;2002;33(3):290-298.15.WangJL,SunSZ,QuX,et,al.ClinicopathologicalsignificanceofCEACAM1geneexpressioninbreastcancerJ.ChinJPhysiol;2011;54(5):332-338.16.ArabzadehA,ChanC,NouvionAL,et,al.Host-relatedcarcinoembryonicantigencelladhesionmolecule1promotesmetastasisofcolorectalcancerJ.Oncogene;2013;32(7):849-860.17.TilkiD,SingerBB,ShariatSF,et,al.CEACAM1:anovelurinarymarkerforbladdercancerdetectionJ.EurUrol;2010;57(4):648-654.18.EbrahimnejadA，StreichertT，NollauP，etalCEACAM1en-hancesinvasionandmigrationofmelanocyticandmelanomacellsJ.AmJPathol;2004,165:1781-1787.19.SivanS,SuzanF,RonaO,et,al.SerumCEACAM1correlateswithdiseaseprogressionandsurvivalinmalignantmelanomapatientsJClinDevImmunol，2012,35(2):l-8.20.SerraS,AsaSL,BambergerAM,et,al.CEACAM1expressioninpancreaticendocrinetumorsJ.ApplImmunohistochemMolMorphol;2009,17(4):286-293.21.许钢柱,张鹏,李文.siRNA沉默CEACAM1基因对人胶质瘤SHG-44细胞生物学行为的作用J.山西医科大学学报;2014,45(10):920-924.22.KleinermanDI,TroncosoP,LinSH,et,al.Consistentexpressionofanepithelialcelladhesionmolecule(C-CAM)duringhumanprostatedevelopmentandlossofexpressioninprostatecancer:implicationasatumorsuppressorJ.CancerRes;1995;55(6):1215-1220.23.LiuW,WeiW,WinerD,et,al.CEACAM1impedesthyroidcancergrowthbutpromotesinvasiveness:aputativemechanismforearlymetastasesJ.Oncogene;2007;26(19):2747-2758.24.HorstAK,ItoWD,DabelsteinJ,et,al.Carcinoembryonicantigen-relatedcelladhesionmolecule1modulatesvascularremodelinginvitroandinvivoJ.JClinInvest;2006Jun;116(6):1596-1605.25.Oliveira-FerrerL,TilkiD,ZiegelerG,et,al.Dualroleofcarcinoembryonicantigen-relatedcelladhesionmolecule1inangiogenesisandinvasionofhumanurinarybladdercancerJ.CancerRes;2004,64(24):8932-8938.26.HuangYH,ZhuC,KondoY,et,al.CEACAM1regulatesTIM-3-mediatedtoleranceandexhaustionJ.Nature;2015,517(7534):386-39024